葡萄牙四倍体和香港牡蛎杂交种苗繁育技术的制作方法

1.本发明涉及牡蛎繁育技术领域，具体涉及葡萄牙四倍体和香港牡蛎杂交种苗繁育技术。


背景技术：

2.葡萄牙牡蛎，又称福建牡蛎，属软体动物门、瓣鳃纲、珍珠贝目、牡蛎科、巨蛎属，是华南地区的一种重要的养殖贝类。葡萄牙牡蛎不仅肉鲜味美、营养丰富，而且具有独特的保健功能和药用价值，是一种营养价值很高的海产珍品。香港牡蛎为我国南方的土著种，主要分布于我国广东和广西。
3.专利申请号为cn201410509937.1的“一种采用卵生型手段繁育幼生型牡蛎的方法”的专利已存在，但是所提供的方法，繁育的牡蛎生长速度较慢，进而影响了对于牡蛎繁育的速度，同时，也会制约牡蛎繁育的规模，无法满足使用者对于牡蛎繁育的需求。
4.综上所述，研发葡萄牙四倍体和香港牡蛎杂交种苗繁育技术，仍是牡蛎繁育技术领域中急需解决的关键问题。


技术实现要素：

5.针对现有技术所存在的上述缺点，本发明在于提供葡萄牙四倍体和香港牡蛎杂交种苗繁育技术，本发明将葡萄牙牡蛎四倍体作为父本，香港牡蛎作为母本，通过杂交获得杂交受精卵，将杂交受精卵经过葡萄糖酸钙盐溶液进行第一次诱导，然后将第一次诱导后的杂交受精卵，移至氯化钙盐溶液中，进行第二次的诱导，经过两次诱导后，在按照常规繁育方法进行繁育，所繁育的杂交牡蛎，在幼虫期具有较好的生长速度，进而加快对杂交牡蛎繁育速度，适用于进行大规模的繁育，具有广泛的应用前景，值得推广。
6.为实现上述目的，本发明提供了如下技术方案：
7.葡萄牙四倍体和香港牡蛎杂交种苗繁育技术，所述的方法是将葡萄牙牡蛎四倍体与香港牡蛎杂交育种，再将育种获得的杂交受精卵在第一梯度液中培育，然后将在第一梯度液中培育的杂交受精卵移至第二梯度液中培育，待杂交幼虫出现眼点后，在海水中培育成型。
8.进一步的，所述的杂交育种是将葡萄牙牡蛎四倍体繁殖父本与香港牡蛎繁殖母本通过人工杂交进行育种。
9.更进一步的，所述的葡萄牙牡蛎四倍体为两年以上的纯种个体，其大小为8-10cm。
10.此外，所述的香港牡蛎为一年的纯种个体，其大小为6-8cm。
11.其中，所述的第一梯度液为葡萄糖酸钙盐溶液，其盐度为12-14，温度为23-25℃。
12.进一步的，杂交受精卵在第一梯度液中的培育时间为8-12min。
13.其中，所述的第二梯度液为氯化钙盐溶液，其盐度为10-12。
14.进一步的，杂交受精卵在第二梯度液中的培育时间为12-15min，温度为23-25℃。
15.进一步的，所述的人工杂交是将葡萄牙牡蛎四倍体的精子与香港牡蛎的卵子按照
20:1的比例混合受精，由人工挑选出受精成功的受精卵。
16.进一步的，所述的培育成型是将出现眼点的杂交幼虫按照常用培育方式育成牡蛎成体。
17.有益效果
18.采用本发明提供的技术方案，与已知的公有技术相比，具有如下有益效果：
19.本发明将葡萄牙牡蛎四倍体作为父本，香港牡蛎作为母本，通过杂交获得杂交受精卵，将杂交受精卵经过葡萄糖酸钙盐溶液进行第一次诱导，然后将第一次诱导后的杂交受精卵，移至氯化钙盐溶液中，进行第二次的诱导，经过两次诱导后，在按照常规繁育方法进行繁育，所繁育的杂交牡蛎，在幼虫期具有较好的生长速度，进而加快对杂交牡蛎繁育速度，适用于进行大规模的繁育。
附图说明
20.图1为本发明中实施例4杂交牡蛎在第2天壳长的统计柱状图；
21.图2为本发明中实施例4杂交牡蛎在第8天壳长的统计柱状图；
22.图3为本发明中实施例4杂交牡蛎在第12天壳长的统计柱状图。
具体实施方式
23.为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
24.下面结合实施例对本发明作进一步的描述。
25.实施例1：繁育本发明的葡萄牙四倍体和香港牡蛎杂交牡蛎
26.(1)取两年以上的纯种葡萄牙牡蛎四倍体，并从中选出大小为8-10cm的个体，同时，取一年的纯种香港牡蛎，并从中选出大小为6-8cm的个体，将挑选出的葡萄牙牡蛎四倍体和葡萄牙牡蛎进行室内同步促熟培育；
27.(2)取葡萄牙牡蛎四倍体父本的精子，以及葡萄牙牡蛎母本的卵子，在显微镜下挑选出具有活力的精子和卵子，再将卵子在海水中浸泡催熟30min；
28.(3)采用人工杂交的方式，将步骤(2)中的精子和卵子按照20:1的比例混合受精，在显微镜下挑选出受精成功的杂交受精卵；
29.(4)在杂交受精卵第一极体出现40-50％时，将杂交受精卵在进行第一次诱导，即将受精卵在葡萄糖酸钙盐溶液中培育8-12min，其中，葡萄糖酸钙盐溶液待测盐度为12-14，温度为23-25℃；
30.(5)将步骤(4)中经过第一次诱导的杂交受精卵，进行第二次诱导，即将经过第一次诱导的杂交受精卵，移至氯化钙盐溶液中培育12-15min，其中，氯化钙盐溶液的盐度为10-12，温度为23-25℃；
31.(6)将步骤(5)中经过第二次诱导的杂交受精卵，在正常海水中孵化，卵化后收集d形幼虫，待幼虫出现眼点后，按常规牡蛎人工育苗操作培育成杂交牡蛎体群附壳苗，进行海上吊绳养殖至成体。
32.实施例2：两次诱导对杂交牡蛎繁育的影响
33.采用实施例1的方法，繁育杂交牡蛎，作为实验组；同时，去除实施例1中的步骤(4)和(5)，即不进行二次诱导，按照实施例1的方法，繁育杂交牡蛎，作为对比组1；去除实施例1中的步骤(4)，即不进行第一次诱导，按照实施例1的方法，繁育杂交牡蛎，作为对比组2；去除实施例1中的步骤(5)，即不进行第二次诱导，按照实施例1的方法，繁育杂交牡蛎，作为对比组3，并将各组中杂交牡蛎的幼虫期壳长的数据记录于表1。
34.表1各组杂交牡蛎幼虫期的壳长记录表
[0035][0036]
由表1中的相关数据可知，在不进行两次诱导、进行第一次诱导以及进行第二次诱导，繁育的杂交牡蛎牡蛎，在幼虫期壳长的增长不明显，但在经过两次诱导后，繁育的杂交牡蛎牡蛎，在幼虫期壳长的增长明显，由此，本发明通过两次诱导，能够使得繁育的杂交牡蛎牡蛎，够加快对于杂交牡蛎牡蛎繁育的速度。
[0037]
实施例3：不同盐液对杂交牡蛎繁育的影响
[0038]
采用实施例1中的方法，繁育杂交牡蛎，作为实验组；将第一次诱导中的葡萄糖酸钙盐溶液分别采用氯化钾、氯化钠替代，其他条件不变，按照实施例1的方法，繁育杂交牡蛎，作为对比组1和对比例2；将第二次诱导中的氯化钙盐溶液分别采用磷酸二氢钙、海水替代，其他条件不变，按照实施例1的方法，繁育杂交牡蛎，作为对比组3和对比例4，并将各组中杂交牡蛎的幼虫期壳长的数据记录于表2。
[0039]
表2各组杂交牡蛎幼虫期的壳长记录表
[0040][0041]
由表2中的相关数据可知，本发明第一次诱导所用的葡萄糖酸钙盐溶液和第二次
诱导所用的氯化钙盐溶液，对比第一次诱导用氯化钾或氯化钠，以及第二次诱导用磷酸二氢钙或海水，本发明第一次诱导所用的葡萄糖酸钙盐溶液和第二次诱导所用的氯化钙盐溶液，能够有效的加快对于杂交牡蛎牡蛎繁育的速度。
[0042]
实施例4：本发明的繁育方法与现有技术方法的对比
[0043]
采用实施例1中的方法，繁育杂交牡蛎，作为实验组；并采用专利申请号为cn201410509937.1的方法，繁育杂交牡蛎，作为对比组，分别在第2、8以及12天，将各组中杂交牡蛎的幼虫期壳长的数据记录于表3，并进行数据柱状图统计，见图1-3。
[0044]
表3各组杂交牡蛎幼虫期的壳长记录表
[0045][0046]
由图1-3以及表3中的相关数据可知，相比于传统的繁育方法，本发明的方法，能够有效的加快对于杂交牡蛎繁育的速度，进而能够降低繁育成本，适用于进行大规模的繁育。
[0047]
本发明将葡萄牙牡蛎四倍体作为父本，香港牡蛎作为母本，通过杂交获得杂交受精卵，将杂交受精卵经过葡萄糖酸钙盐溶液进行第一次诱导，然后将第一次诱导后的杂交受精卵，移至氯化钙盐溶液中，进行第二次的诱导，经过两次诱导后，在按照常规繁育方法进行繁育，所繁育的杂交牡蛎，在幼虫期具有较好的生长速度，进而加快对杂交牡蛎繁育速度，适用于进行大规模的繁育。
[0048]
以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不会使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。

技术特征：
1.葡萄牙四倍体和香港牡蛎杂交种苗繁育技术，其特征在于，所述的方法是将葡萄牙牡蛎四倍体与香港牡蛎杂交育种，再将育种获得的杂交受精卵在第一梯度液中培育，然后将在第一梯度液中培育的杂交受精卵移至第二梯度液中培育，待杂交幼虫出现眼点后，在海水中培育成型。2.根据权利要求1所述的葡萄牙牡蛎四倍体和香港牡蛎杂交种苗繁育技术，其特征在于，所述的杂交育种是将葡萄牙牡蛎四倍体繁殖父本与香港牡蛎繁殖母本通过人工杂交进行育种。3.根据权利要求1所述的葡萄牙四倍体和香港牡蛎杂交种苗繁育技术，其特征在于，所述的葡萄牙牡蛎四倍体为两年以上的纯种个体，其大小为8-10cm。4.根据权利要求1所述的葡萄牙四倍体和香港牡蛎杂交种苗繁育技术，其特征在于，所述的香港牡蛎为一年的纯种个体，其大小为6-8cm。5.根据权利要求1所述的葡萄牙四倍体和香港牡蛎杂交种苗繁育技术，其特征在于，所述的第一梯度液为葡萄糖酸钙盐溶液，其盐度为12-14，温度为23-25℃。6.根据权利要求1所述的葡萄牙四倍体和香港牡蛎杂交种苗繁育技术，其特征在于，杂交受精卵在第一梯度液中的培育时间为8-12min。7.根据权利要求1所述的葡萄牙四倍体和香港牡蛎杂交种苗繁育技术，其特征在于，所述的第二梯度液为氯化钙盐溶液，其盐度为10-12。8.根据权利要求1所述的葡萄牙四倍体和香港牡蛎杂交种苗繁育技术，其特征在于，杂交受精卵在第二梯度液中的培育时间为12-15min，温度为23-25℃。9.根据权利要求1所述的葡萄牙四倍体和香港牡蛎杂交种苗繁育技术，其特征在于，所述的人工杂交是将葡萄牙牡蛎四倍体的精子与香港牡蛎的卵子按照20:1的比例混合受精，由人工挑选出受精成功的受精卵。10.根据权利要求1所述的葡萄牙四倍体和香港牡蛎杂交种苗繁育技术，其特征在于，所述的培育成型是将出现眼点的杂交幼虫按照常用培育方式育成牡蛎成体。

技术总结
本发明涉及牡蛎繁育技术领域，具体涉及葡萄牙四倍体和香港牡蛎杂交种苗繁育技术，所述的方法是将葡萄牙牡蛎四倍体与香港牡蛎杂交育种，再将育种获得的杂交受精卵在第一梯度液中培育，然后将在第一梯度液中培育的杂交受精卵移至第二梯度液中培育，待杂交幼虫出现眼点后，在海水中培育成型；本发明将葡萄牙牡蛎四倍体作为父本，香港牡蛎作为母本，杂交获得杂交受精卵，将杂交受精卵经过葡萄糖酸钙盐溶液和氯化钙盐溶液两次诱导，再按照常规繁育方法进行繁育，所繁育的杂交牡蛎，在幼虫期具有较好的生长速度，进而加快对杂交牡蛎繁育速度，适用于进行大规模的繁育。适用于进行大规模的繁育。适用于进行大规模的繁育。


技术研发人员：吴国广 吴章继
受保护的技术使用者：广鸿源（广东）水产有限公司
技术研发日：2022.04.05
技术公布日：2022/5/25