多肽聚合物或多肽模拟物在养殖业中的应用

1.本发明涉及多肽聚合物或多肽模拟物作为养殖业抗菌剂在水产和畜牧等养殖业中用于动物的疾病预防及治疗领域。


背景技术：

2.为了提升水产、畜牧和兽医等行业的经济效益，美国fda在1950年正式批准抗生素在饲料中的使用，之后抗生素的使用变得越来越广泛。但是很多种抗生素降解缓慢，在饲料中添加抗生素或者直接在生长环境中加入抗生素等措施使得大量不可降解的抗生素残留在环境和被养殖生物体内，甚至在最终养殖产品中残留(如猪肉中抗生素残留)，导致微生物耐药性压力和刺激耐药微生物的产生，引发了环境中细菌耐药性产生等更多的安全问题。几十年来，抗生素在人类、动物和农业上的滥用已经造成了医疗紧急状况和巨大的经济影响。世界各国为应对耐药性问题相继推出了多项政策。早在2006年1月，欧盟便宣布全面禁止在饲料中添加抗生素，随后美国、日本等国家也陆续出台了相关政策。而我国作为水产和畜禽养殖大国，同时也是兽用抗生素生产和使用大国，为了控制抗生素滥用而造成的细菌耐药性问题，从2016年制定《遏制细菌耐药国家行动计划(2016-2020年)》开始，一直在减少抗生素在养殖业中使用的种类。目前，农业部已经计划在2020年实现饲料端的“全面禁抗”，养殖端实行“减抗”和“限抗”。
3.但是，由于现代化高密度养殖对抗菌需求的严重依赖，亟需研制可替代传统抗生素的抗菌剂。面对“全面禁抗”政策的出台，养殖业中用于动物疾病预防和治疗的抗生素替代物的研究已经势在必行，并需要抗菌剂满足以下需求：1)具有有效抗菌活性，最好是广谱抗菌和对耐药菌仍然有效；2)不易产生耐药性，减少环境中微生物耐药性的产生；3)生物相容性好，对养殖对象没有显著影响和危害。
4.目前研究的替代方案中，中草药含有一定的抑菌成分，作为饲料添加剂能够减少动物体内细菌的定殖，调节肠道菌群，但是中草药的药效成分复杂，原料较难获得，而且抗菌活性较低，在用药安全及使用效果方面仍有待考量。微生态制剂是一种由对宿主有益的正常微生物经过特殊工艺制成的生物制剂，在动物体内可以维护微生态平衡并调节免疫作用，从而提升养殖业动物免疫力，减少微生物感染，但生产工艺复杂，质量不均一。宿主防御肽具有广谱抗菌活性和不易产生抗药性的优点，是很有潜力的新型抗菌药物研究对象，但是其制备步骤繁琐，且成本高昂，在养殖业中的应用受到巨大限制。目前，世界范围内还没有完全满足上述需求的抗菌剂用于养殖业。
5.因此，本领域内亟需开发一类具有高效抗菌活性和良好的生物相容性，且制备工艺简单、成本低的抗生素替代物用于养殖业。


技术实现要素：

6.本发明的目的是提供一种抗生素替代物用于养殖业。
7.本发明提供一种多肽聚合物或多肽模拟物的应用，用作养殖业抗菌剂，用于杀死
或抑制致病菌的生长；或者用于制备治疗养殖业中动物细菌感染的药物。
8.本发明的多肽聚合物或多肽模拟物使用过程中不易使微生物产生耐药性。在持续刺激细菌长达24天的过程中，没有发现多肽聚合物或多肽模拟物对细菌的最低抑菌浓度的增长，不易造成细菌的耐药性。
9.在另一优选例中，所述养殖业为水产养殖、家禽养殖、畜牧养殖或驯兽养殖。
10.在另一优选例中，所述水产养殖为鱼类养殖。
11.在另一优选例中，所述鱼类选自：斑马鱼、罗非鱼、大鳞鲆、青鱼、草鱼、鲢鱼、鳙鱼、虹鳟、鲶鱼、鲤鱼、鲫鱼、鲈鱼、鲥鱼、黄鱼、鳊鱼、鳜鱼、鲑鱼、鳗鱼、鳝鱼和石斑鱼。
12.在另一优选例中，所述多肽聚合物或多肽模拟物在养殖水体中的含量不超过50mg/l时，对成年斑马鱼的生命活动没有影响。
13.在另一优选例中，所述多肽聚合物或多肽模拟物在养殖水体中使用浓度在5-50mg/l时可以减少斑马鱼受微生物感染的风险，提升存活率。
14.在另一优选例中，在斑马鱼遭受全身系统性细菌感染后，在斑马鱼体内注射5-50mg/kg所述多肽聚合物或多肽模拟物可以杀死体内的细菌，提升斑马鱼的存活率。
15.在另一优选例中，所述致病菌为金黄色葡萄球菌、猪链球菌、星状诺卡氏菌、无乳链球菌、大肠杆菌、鳗弧菌、溶藻弧菌、副溶血弧菌、哈氏弧菌、霍乱弧菌、溶血性曼氏杆菌、鸡白痢沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、猪霍乱沙门氏菌、河流弧菌、嗜水气单胞菌、迟钝爱德华氏菌、荧光假单胞菌和鸭沙门氏菌中的一种或两种以上的组合。
16.在另一优选例中，所述致病菌为金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、鳗弧菌、副溶血弧菌、溶藻弧菌、霍乱弧菌、哈氏弧菌、鼠伤寒沙门氏菌、鸡白痢沙门氏菌、溶血性曼氏杆菌、猪霍乱沙门氏菌和猪链球菌中的一种或两种以上的组合。
17.在另一优选例中，所述多肽聚合物或多肽模拟物为选自下组的一种或两种以上的均聚物、二元共聚物或多元共聚物：α-氨基酸、β-氨基酸、γ-氨基酸、噁唑啉。
18.在另一优选例中，所述多肽聚合物或多肽模拟物为噁唑啉聚合物、α-氨基酸聚合物、α/β-氨基酸聚合物、γ-氨基酸聚合物或β-氨基酸聚合物。
19.在另一优选例中，所述多肽聚合物为α-氨基酸聚合物、α/β-氨基酸聚合物、γ-氨基酸聚合物或β-氨基酸聚合物。
20.在另一优选例中，所述多肽模拟物为噁唑啉聚合物。
21.在另一优选例中，所述二元共聚物为无规共聚物或嵌段共聚物。
22.在另一优选例中，所述多肽聚合物或多肽模拟物为一元均聚物，则其重复单元的侧链均带正电荷基团。
23.在另一优选例中，原料可为天然氨基酸或非天然氨基酸。
24.在另一优选例中，α-氨基酸聚合物和α/β-氨基酸聚合物可以在自然环境和生物体内酶的存在下降解成没有抗菌活性的氨基酸和短肽。
25.所述的抗菌聚合物中的α-氨基酸聚合物和α/β-氨基酸聚合物在胰蛋白酶、糜蛋白酶、蛋白酶xxiii等蛋白酶存在的自然环境和生物体内均可以发生降解，且降解后的产物不再具有抗菌活性，可以避免耐药性的产生。
26.在另一优选例中，所述多肽聚合物或多肽模拟物为以下a、a’、b、b’、c、c’、c”、d、d’、e、e’、f、f’和g结构组成的均聚物、二元共聚物或多元共聚物，重复单元总数为5-5000的
正整数：
[0027][0028]
其中，r在出现处各自独立为0、1、2、3、4或5；r'在出现处各自独立为1、2或3；r”在出现处各自独立为0、1、2或3；
[0029]
式中的r1、r2、r3、r4、r5和r6在出现处分别各自独立地选自以下基团：氢、c1-c6烷基、c1-c6卤代烷基、c1-c6烷基羟基、c1-c6烷氧基、c1-c6烷基磺酰基、c1-c6烷基胍基、c1-c6烷基酯基、硫代c1-c6烷基酯基、c2-c6烯基、c2-c6炔基、c3-c12环烷基、c6-c12芳基、5-12元杂芳基、5-12元杂环基、c1-c6烷基-c6-c12芳基、氨基和
[0030]
p1为保护基，在出现处各自独立选自以下基团：叔丁氧羰基(boc)、苄氧羰基(cbz)、芴甲氧羰基(fmoc)、邻苯二甲酰基(pht)、乙酰基(ac)、三氟乙酰基(tfa)、苄基(bn)、三苯基甲基(tr)；
[0031]
p2在出现处各自独立选自以下基团：氢、取代或未取代的c1-c6烷基、取代或未取代的c6-c12芳基、取代或未取代的5-12元杂芳基、取代或未取代的5-12元杂环基；
[0032]
x在出现处各自独立选自以下基团：无、氢、氨基、胍基、羟基、羧基、酰氨基、巯基、甲硫基、烯基、炔基、酯基(-coo-)、c6-c12芳基或5-12元杂环基；
[0033]
l在出现处各自独立选自：-chr'
1-、-co-、-coo-、-s(＝o)2-；q为0-6的整数；
[0034]
r'1在出现处各自独立地选自取代或未取代的下组基团：氢、氨基、c1-c15烷基、c1-c15烷基氨基、c1-c15烷基羟基、c1-c15烷基醛基、c1-c15烷基酯基、硫代c1-c15烷基酯基、c6-c15芳基、c2-c15烯基、c2-c15炔基、-rc-coo-rc”、-rc-co-rc”、-rc-o-rc
”-
、-rc-s-rc”、5-15元杂芳基、5-12元杂环基；
[0035]
x选自以下基团：无、氢、氨基、胍基、羟基、羧基、酰氨基、巯基、甲硫基、烯基、炔基、酯基、芳基或5-12元杂环基；
[0036]
ra和rb在出现处各自独立地选自取代或未取代的下组基团：不存在、氢、c1-c15烷基、c1-c15烷基氨基、c1-c15烷基羟基、c1-c15烷基醛基、c1-c15烷基磺酰基、c2-c15烯基、
c2-c15炔基、-rc-coo-rc”、-rc-co-rc”、-rc-o-rc
”-
、-rc-s-rc”、c3-c12环烷基、c4-c12环烯基、5-12元杂环基、c6-c12芳基、5-12元杂芳基；
[0037]
rc在出现处分别各自独立地选自取代或未取代的下组基团：无、c1-c15亚烷基、c2-c15亚烯基、c2-c15亚炔基、c3-c12亚环烷基、c4-c12亚环烯基、3-12元亚杂环基、c6-c12亚芳基、5-12元亚杂芳基；
[0038]
rc”在出现处分别各自独立地选自取代或未取代的下组基团：c1-c15烷基、c1-c15烷基氨基、c2-c15烯基、c2-c15炔基、c3-c12环烷基、c4-c12环烯基、3-12元杂环基、c6-c12芳基、5-12元杂芳基；
[0039]
上述各取代独立地指被选自以下一个或多个取代基取代：卤素、羟基、氨基、苯基、c1-c6烷基、c1-c6卤代烷基、c1-c6烷氧基、c1-c6卤代烷氧基、c3-c8环烷基、c6-c12芳基、5-12元杂芳基或3-12元杂环基。
[0040]
在另一优选例中，a、a’、b、b’、c、c’、c”、d、d’、e、e’、f、f’和g结构所示出氨基酸是l构型、d构型、或者d构型l构型两者的混合。
[0041]
在另一优选例中，重复单元总数为为5-100较佳为5-50。
[0042]
在另一优选例中，r1、r2、r3、r4、r5和r6在出现处分别各自独立地选自以下基团：氢、c1-c4烷基、c1-c4卤代烷基、c1-c4烷基羟基、c1-c4烷氧基、c1-c4烷基磺酰基、c1-c4烷基胍基、c1-c4烷基酯基、硫代c1-c4烷基酯基、c2-c4烯基、c2-c4炔基、c3-c6环烷基、苯基、萘基、5-6元杂芳基、5-6元杂环基、c1-c4烷基-c6芳基、氨基和
[0043]
在另一优选例中，x在出现处各自独立选自以下基团：无、氢、氨基、胍基、羟基、羧基、酰氨基、巯基、甲硫基、烯基、炔基、酯基(-coo-)、苯基或5-6元杂环基。
[0044]
在另一优选例中，l在出现处各自独立选自：-ch
2-、-co-、-coo-。
[0045]
在另一优选例中，q为0、1、2、3、4或5。当q为0时，(l)q不存在。
[0046]
在另一优选例中，ra和rb在出现处各自独立地选自取代或未取代的下组基团：不存在、氢、c1-c6烷基、c1-c6烷基氨基、c1-c6烷基羟基、c1-c6烷基醛基、c1-c6烷基磺酰基、c2-c6烯基、c2-c6炔基、-rc-coo-rc”、-rc-co-rc”、-rc-o-rc
”-
、-rc-s-rc”、c3-c6环烷基、c4-c6环烯基、5-6元杂环基、苯基、5-6元杂芳基。
[0047]
在另一优选例中，多肽聚合物或多肽模拟物的盐为盐酸盐、溴酸盐、三氟乙酸盐、磷酸盐、锂盐、钠盐、钾盐。
[0048]
本发明多肽聚合物或多肽模拟物还包括多肽聚合物或多肽模拟物衍生物，所述衍生物是指聚合物侧链的氨基变成其他官能团比如胍基等，或侧链含有的氨基通过化学反应而连接其他分子，比如药物分子、荧光小分子、保护基等；聚合物的末端进行化学修饰，比如连接荧光分子，或者药物分子。
[0049]
对于结构e侧链结构可以接在不同位置，且侧链取代可在β，γ氨
基酸的2号位，或者3号位，对于结构c亦然。
[0050]
在另一优选例中，所述多肽聚合物或多肽模拟物的盐为盐酸盐、溴酸盐、三氟乙酸盐、磷酸盐、锂盐、钠盐、钾盐。
[0051]
本发明中，所述多肽聚合物或多肽模拟物为二元或多元共聚物时，重复单单元选自下组中的两个或两个以上，且其中一类重复单元的侧链带正电荷基团，
[0052][0053]
各取代基的定义如前所述。
[0054]
在另一优选例中，所述多肽聚合物或多肽模拟物选自：
[0055]
[0056][0057]
式中，n为多肽聚合物或多肽模拟物的重复单元总数，x和y分别为各个组分的比例。n为5-5000的正整数；a为0-100的正整数。0％＜x≤100％,0％≤y≤100％，且x+y＝100％；
[0058]rz
在出现处分别各自独立地选自以下基团：卤素、羧基、活性酯基团、酰氯、环氧烷、巯基-sh、c2-c15烯烃基团、c2-c15炔基、叠氮、马来酰亚胺、邻二硫吡啶基(opss)、环糊精、金刚烷中的任意一种；
[0059]rs
在出现处分别各自独立地为氢或r
t
在出现处分别各自独立地选自下组基团:c1-c15烷基、c2-c15烯基、c2-c15炔基、c3-c12环烷基、c4-c12环烯基、3-12元杂环基、c6-c12芳基、5-12元杂芳基、c1-c15烷基酯基；
[0060]rw
在出现处分别各自独立地为或或其中为连接处；r”'在出现处各自独立为1、2或3；r7、r8、r9、r
10
、r
11
、r
12
、r
13
和r
14
在出现处分别各自独立地选自以下基团：氢、c1-c6烷基、c1-c6卤代烷基、c1-c6烷基羟基、c1-c6烷氧基、c1-c6烷基磺酰基、c1-c6烷基胍基、c1-c6烷基酯基、硫代c1-c6烷基酯基、c2-c6烯基、c2-c6炔基、c3-c12环烷基、c6-c12芳基、5-12元杂芳基、5-12元杂环基、c1-c6烷基-c6-c12芳基、氨基和
[0061]
q1为保护基，在出现处各自独立选自以下基团：叔丁氧羰基(boc)、苄氧羰基(cbz)、芴甲氧羰基(fmoc)、邻苯二甲酰基(pht)、乙酰基(ac)、三氟乙酰基(tfa)、苄基(bn)、三苯基甲基(tr)；
[0062]
q2在出现处各自独立选自以下基团：氢、取代或未取代的c1-c6烷基、取代或未取代的c6-c12芳基、取代或未取代的5-12元杂芳基、取代或未取代的5-12元杂环基；
[0063]
上述各取代独立地指被选自以下一个或多个取代基取代：卤素、羟基、氨基、苯基、c1-c6烷基、c1-c6卤代烷基、c1-c6烷氧基、c1-c6卤代烷氧基、c3-c8环烷基、c6-c12芳基、5-12元杂芳基或3-12元杂环基。
[0064]
x和y的计算方式为相对应组分的重复单元数除以多肽聚合物或多肽模拟物重复单元总数。
[0065]
在另一优选例中，以上结构单元中氨基酸是l构型、d-构型、或者d构型和l构型的混合。
[0066]
在另一优选例中，上述结构阴离子选自：cl-、br-、cf3coo-、h2po
4-、hpo
42-、po
43-。
[0067]
在另一优选例中，上述聚合物结构中的两重复单元的排列形式为无规、交替或者嵌段形式，较佳地，为无规形式。
[0068]
在另一优选例中，n为5-100较佳为5-50。
[0069]
在另一优选例中，x：y为0.01：0.99至0.99:0.01，较佳为0.05:0.95至0.95:0.05，甚至1:9至9:1。
[0070]
在另一优选例中，所述多肽聚合物或多肽模拟物选自：
[0071]
[0072][0073]
式中，n为5-5000的正整数；a为0-100的正整数；
[0074]
0％＜x≤100％,0％≤y≤100％，且x+y＝100％；
[0075]rz
在出现处分别各自独立地选自以下基团：卤素、羧基、活性酯基团、酰氯、环氧烷、巯基、c2-c15烯烃基团、c2-c15炔基、叠氮、马来酰亚胺、邻二硫吡啶基(opss)、环糊精、金刚烷。
[0076]
在另一优选例中，以上结构单元中氨基酸是l构型、d-构型、或者d构型和l构型的混合。
[0077]
在另一优选例中，上述结构的阴离子选自：cl-、br-、cf3coo-、h2po
4-、hpo
42-、po
43-。
[0078]
在另一优选例中，n为5-100较佳为5-50。
[0079]
在另一优选例中，x：y为0.01：0.99至0.99:0.01，较佳为0.05:0.95至0.95:0.05，甚至1:9至9:1。
[0080]
所述的多肽聚合物或多肽模拟物具有良好的生物相容性，对人类血红细胞、鼠血红细胞等没有明显的溶血活性；对哺乳动物细胞如小鼠胚胎成纤维细胞、非洲猴肾细胞、人脐静脉内皮细胞、犬肾细胞和动脉平滑肌细细胞等没有明显细胞毒性。
[0081]
多肽聚合物或多肽模拟物对人血红细胞、鼠血红细胞没有明显溶血活性；
[0082]
多肽聚合物或多肽模拟物对小鼠胚胎成纤维细胞、非洲猴肾细胞、人脐静脉内皮细胞、犬肾细胞、动脉平滑肌细胞等哺乳动物细胞没有明显细胞毒性。
[0083]
本发明的多肽聚合物或多肽模拟物可以作为一类养殖业中抗生素的替代物使用，广泛应用于被养殖动物的疾病预防和治疗领域。
[0084]
养殖业中抗生素的大量使用容易促使微生物产生耐药性，而目前报道的许多养殖业抗生素替代物大部分受限于自身抗菌活性不足和生产工艺要求过高无法量产等因素。
[0085]
本发明的主要优点在于：
[0086]
1、本发明使用的多肽聚合物或多肽模拟物依托于现有的聚合方法，可以克服严格除水等苛刻的聚合条件，在敞口条件下完成大量聚合，具备实现工业化量产的潜力。
[0087]
2、多肽聚合物或多肽模拟物自身不易促使微生物产生耐药性和交叉耐药性，并且其中的α-氨基酸聚合物和α/β-氨基酸聚合物均可以在自然环境和生物体内酶的存在下发生降解，进一步减少耐药性发生的可能。同时也降低了在水产品和肉类中的残留，保证食品安全，保障人畜健康。
[0088]
3、多肽聚合物或多肽模拟物对于水产和畜牧等养殖业中的致病菌具有高效的抗
菌活性和良好的生物相容性，可以提升细菌感染后的斑马鱼的存活率，发挥其预防和治愈养殖业动物疾病的作用，能在养殖业内替代抗生素的使用。
附图说明
[0089]
图1为α-氨基酸聚合物的耐药性测试结果图，其中a为α-氨基酸聚合物和诺氟沙星对金黄色葡萄球菌的耐药性测试结果；b为α-氨基酸聚合物和氨苄西林对大肠杆菌的耐药性测试结果。
[0090]
图2为α-氨基酸聚合物的降解性能表征结果图，其中a为α-氨基酸聚合物在蛋白酶xxiii的作用下不同时间点的核磁图谱；b为α-氨基酸聚合物在不同时间点的降解产物的最低抑菌浓度图。
[0091]
图3为α-氨基酸聚合物对成年斑马鱼的急性毒性测试结果图。
[0092]
图4为α-氨基酸聚合物对斑马鱼体内感染的治疗测试结果图。
具体实施方式
[0093]
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件(如sambrook等人，分子克隆：实验室手册(new york:cold spring harbor laboratory press，1989)中所述的条件)或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则百分比和份数是重量百分比和重量份数。
[0094]
除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明方法中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。
[0095]
α-氨基酸聚合物的制备
[0096]
实施例1：六甲基二硅基胺基锂盐(lihmds)引发n-ε-叔丁氧羰基-l-赖氨酸-n-羧基环内酸酐和l-谷氨酸-5-苄酯-n-羧基环内酸酐制备无规α-氨基酸共聚物
[0097][0098]
在氮气保护的手套箱内，称取n-ε-叔丁氧羰基-l-赖氨酸-n-羧基环内酸酐和l-谷氨酸-5-苄酯-n-羧基环内酸酐,用干燥的四氢呋喃作为溶剂。取1.8ml n-ε-叔丁氧羰基-l-赖氨酸-n-羧基环内酸酐(0.2m)和0.2ml l-谷氨酸-5-苄酯-n-羧基环内酸酐(0.2m)混合后加磁子进行搅拌。称取引发剂六甲基二硅基胺基锂盐配置成溶液(0.5m)，取160μl迅速加入引发剂后在室温反应5分钟，从手套箱内取出并加1滴苯甲酸淬灭。在每个反应液中加入石油醚(45ml)，待白色絮状沉淀析出后进行离心收集，再用四氢呋喃(1ml)溶解，并用石油醚沉淀。如此重复三次后，得到侧链氨基带保护基团的聚合物，由凝胶渗透色谱(gpc)鉴定该
聚合物的分子量mn＝4400,分子量分布pdi＝1.21。在带保护的聚合物中加入三氟乙酸(2ml)后震荡2小时脱去保护基团，吹去大部分三氟乙酸(cf3cooh)后，加冰甲基叔丁基醚(50ml)析出白色沉淀后离心收集，再用甲醇(1ml)溶解，并用冰乙醚(50ml)沉淀，如此重复三次后，用油泵抽干剩余溶剂，再分别用超纯水(5ml)溶解样品，最后冻干获得脱保护后的无规α-氨基酸共聚物(产率81％)。
[0099]
实施例2：六甲基二硅基胺基锂盐引发n-ε-叔丁氧羰基-l-赖氨酸-n-羧基环内酸酐和o-叔丁基-l-丝氨酸-n-羧基环内酸酐制备无规α-氨基酸共聚物
[0100][0101]
实验方法同实施例1，不同之处为将1.8ml n-ε-叔丁氧羰基-l-赖氨酸-n-羧基环内酸酐(0.2m)和0.2ml l-谷氨酸-5-苄酯-n-羧基环内酸酐(0.2m)换为1.6ml n-ε-叔丁氧羰基-l-赖氨酸-n-羧基环内酸酐(0.2m)和0.4ml o-叔丁基-l-丝氨酸-n-羧基环内酸酐(0.2m),5分钟内反应结束。由凝胶渗透色谱(gpc)鉴定侧链氨基带保护基团的聚合物的分子量mn＝4200,分子量分布pdi＝1.14。最终脱保护后获得无规α-氨基酸共聚物(产率78％)。
[0102]
实施例3：六甲基二硅基胺基锂盐引发n-ε-叔丁氧羰基-l-赖氨酸-n-羧基环内酸酐和l-谷氨酸-5-苄酯-n-羧基环内酸酐制备嵌段α-氨基酸共聚物
[0103][0104]
实验方法同实施例1，不同之处为0.1ml的lihmds溶液(0.4m)加入1ml的n-ε-叔丁氧羰基-l-赖氨酸-n-羧基环内酸酐(0.2m)中至单体反应完全后，再加入1ml第二个嵌段单体l-谷氨酸-5-苄酯-n-羧基环内酸酐(0.2m)，10分钟内反应结束。由凝胶渗透色谱(gpc)鉴定侧链氨基带保护基团的聚合物的分子量mn＝4400,分子量分布pdi＝1.24。最终脱保护后获得嵌段α-氨基酸共聚物(产率75.5％)
[0105]
实施例4：敞口条件下，六甲基二硅基胺基锂盐引发n-ε-叔丁氧羰基-l-赖氨酸-n-羧基环内酸酐制备α-氨基酸均聚物
[0106][0107]
实验方法同实施例1，不同之处为整个聚合操作全部在敞口条件下进行，反应单体只加入20ml n-ε-叔丁氧羰基-l-赖氨酸-n-羧基环内酸酐(0.2m)和1ml引发剂六甲基二硅
基胺基锂盐(0.8m)，5分钟内反应结束。由凝胶渗透色谱(gpc)鉴定侧链氨基带保护基团的聚合物的分子量mn＝4600,分子量分布pdi＝1.22。最终脱保护后获得α-氨基酸均聚物(产率68％)。
[0108]
β-氨基酸聚合物的制备
[0109]
实施例5：对叔丁基苯甲酰氯和六甲基二硅基胺基锂盐共引发β-内酰胺单体mm和β-内酰胺单体ch制备无规β-氨基酸共聚物
[0110][0111]
在氮气保护的手套箱内，称取β-内酰胺单体mm和β-内酰胺单体ch，用干燥的四氢呋喃作为溶剂，将1.2ml mm(0.2m)和0.8ml ch(0.2m)在反应瓶中混合后加磁子进行搅拌。分别配置对叔丁基苯甲酰氯(0.2m)和六甲基二硅基胺基锂盐(0.5m)作为共引发剂,各取100ul迅速加入反应瓶中。室温反应4小时后，从手套箱内取出并加1滴甲醇淬灭。在每个反应液中加入石油醚(45ml)，待白色絮状沉淀析出后进行离心收集，再用四氢呋喃(1ml)溶解，并用石油醚沉淀。如此重复三次后，得到侧链氨基带保护基团的聚合物。由凝胶渗透色谱(gpc)鉴定该聚合物的分子量mn＝3800,分子量分布pdi＝1.21。在带保护的聚合物中加入三氟乙酸(2ml)后震荡2小时脱去保护基团，吹去大部分三氟乙酸后，加冰甲基叔丁基醚(50ml)析出白色沉淀后离心收集，再用甲醇(1ml)溶解，并用冰乙醚(50ml)沉淀，如此重复三次后，用油泵抽干剩余溶剂，再分别用超纯水(5ml)溶解样品，最后冻干获得脱保护后的无规β-氨基酸共聚物，由核磁共振氢谱(1h nmr)表征可知聚合度(dp)为20，产率为80％。
[0112]
实施例6：对叔丁基苯甲酰氯和六甲基二硅基胺基锂盐共引发β-内酰胺单体mm和β-内酰胺单体co制备无规β-氨基酸共聚物
[0113][0114]
实验方法同实施例5，不同之处为将1.2ml mm(0.2m)和0.8ml ch(0.2m)换为1.2ml mm(0.2m)和0.8ml co(0.2m)。由凝胶渗透色谱(gpc)鉴定侧链带保护基团的聚合物的分子量mn＝3900,分子量分布pdi＝1.19。最终脱保护后获得无规β-氨基酸共聚物(产率79％,由1h nmr表征可知dp＝20)。
[0115]
实施例7：2-(三苯甲基硫代)乙酸-n-琥珀酰亚胺酯和六甲基二硅基胺基锂盐共引发n-叔丁氧羰基-β-内酰胺-dl-赖氨酸和β-内酰胺单体hg制备无规β-氨基酸共聚物
[0116][0117]
实验方法同实施例5，不同之处为将100μl的对叔丁基苯甲酰氯(0.2m)换为100μl的2-(三苯甲基硫代)乙酸-n-琥珀酰亚胺酯(0.2m)，将1.2ml mm(0.2m)和0.8ml ch(0.2m)换为1.4ml的n-氯甲酸苄酯-β-内酰胺-l-赖氨酸(0.2m)和0.6ml的β-内酰胺单体hg(0.2m)，并用干燥的n,n-二甲基甲酰胺作为溶剂。由凝胶渗透色谱(gpc)鉴定侧链带保护基团的聚合物的分子量mn＝3800,分子量分布pdi＝1.18。最终脱保护后获得无规β-氨基酸共聚物(产率82％)。
[0118]
α/β-氨基酸聚合物的制备
[0119]
实施例8：对叔丁基苄胺引发n-ε-叔丁氧羰基-l-赖氨酸-n-羧基环内酸酐和dl-β-甘氨酸n-羧基硫代羰基环内酸酐(β
3-hg nta)制备无规α/β-氨基酸共聚物
[0120][0121]
在氮气保护的手套箱内，称取n-ε-叔丁氧羰基-l-赖氨酸-n-羧基环内酸酐和dl-β-甘氨酸n-羧基硫代羰基环内酸酐，用干燥的n,n-二甲基甲酰胺作为溶剂，将1.2ml的n-ε-叔丁氧羰基-l-赖氨酸-n-羧基环内酸酐(0.2m)和0.8ml的dl-β-甘氨酸n-羧基硫代羰基环内酸酐(0.2m)在反应瓶中混合后加磁子进行搅拌。称取引发剂对叔丁基苄胺并配置成溶液(0.2m)，取100μl迅速加入反应瓶中，该反应在手套箱中室温搅拌反应3天，反应液从手套箱内取出，加入冷石油醚(45ml)，待白色絮状沉淀析出后进行离心收集，再用四氢呋喃(1ml)溶解，并用冷石油醚沉淀，如此重复三次后得到侧链氨基带保护基团的聚合物。由凝胶渗透色谱(gpc)鉴定侧链带保护基团的聚合物的分子量mn＝3300,分子量分布pdi＝1.14。之后在聚合物中加入三氟乙酸(2ml)后震荡2小时脱去保护基团，吹去大部分三氟乙酸后，加冰甲基叔丁基醚(50ml)析出白色沉淀后离心收集，再用甲醇(1ml)溶解，并用冰乙醚(50ml)沉淀，如此重复三次后，用油泵抽干剩余溶剂，再分别用超纯水(5ml)溶解样品，最后冻干获得脱保护后的无规α/β-氨基酸共聚物(产率72.5％，由1h nmr表征可知dp＝20)
[0122]
实施例9：对叔丁基苄胺引发n-ε-叔丁氧羰基-l-赖氨酸-n-羧基环内酸酐和β
2,3-环己基n-羧基硫代羰基环内酸酐(β
2,3-ch nta)制备无规α/β-氨基酸共聚物
[0123][0124]
实验方法同实施例8，不同之处为将1ml的n-ε-叔丁氧羰基-l-赖氨酸-n-羧基环内酸酐(0.2m)和1ml的dl-β-甘氨酸n-羧基硫代羰基环内酸酐(0.2m)换为0.8ml的n-ε-叔丁氧羰基-l-赖氨酸-n-羧基环内酸酐(0.2m)和1.2ml的β
2,3-环己基n-羧基硫代羰基环内酸酐(0.2m)，并用干燥的四氢呋喃作为溶剂。4天后反应结束。由凝胶渗透色谱(gpc)鉴定侧链带保护基团的聚合物的分子量mn＝3300,分子量分布pdi＝1.14。最终脱保护后获得无规α/β-氨基酸共聚物(产率75％，由1h nmr表征可知dp＝20)
[0125]
噁唑啉聚合物的制备
[0126]
实施例10：三氟甲基磺酸甲酯引发n-ε-叔丁氧羰基-2-(氨基甲基)噁唑啉和2-(叔丁基)噁唑啉制备噁唑啉共聚物
[0127][0128]
在氮气保护的手套箱内，称取n-ε-叔丁氧羰基-2-(氨基甲基)噁唑啉和2-(叔丁基)噁唑啉，用干燥的n,n-二甲基乙酰胺作为溶剂。将1.2ml的n-ε-叔丁氧羰基-2-(氨基甲基)噁唑啉(0.2m)和0.8ml的2-(叔丁基)噁唑啉(0.2m)在反应瓶中混合后加磁子进行搅拌。称取引发剂三氟甲基磺酸甲酯配置成溶液(0.2m)，取0.1ml迅速加入反应瓶中，该反应在120℃搅拌反应6小时，冷却至室温后加入冷石油醚(45ml),待白色絮状沉淀析出后进行离心收集，再用四氢呋喃(1ml)溶解，并用冷石油醚沉淀，如此重复三次后得到侧链氨基带保护基团的聚合物。由凝胶渗透色谱(gpc)鉴定该聚合物的分子量mn＝3400,分子量分布pdi＝1.23。之后在聚合物中加入三氟乙酸(2ml)后震荡2小时脱去保护基团，吹去大部分三氟乙酸后，加冰甲基叔丁基醚(50ml)析出白色沉淀后离心收集，再用甲醇(1ml)溶解，并用冰乙醚(50ml)沉淀，如此重复三次后，用油泵抽干剩余溶剂，再分别用超纯水(5ml)溶解样品，最后冻干获得脱保护后的噁唑啉共聚物(产率75％，由1h nmr表征可知dp＝19)
[0129]
实施例11：三氟甲基磺酸甲酯引发n-ε-叔丁氧羰基-2-(氨基甲基)噁唑啉和2-(对叔丁基苄基)噁唑啉制备噁唑啉共聚物
[0130][0131]
实验方法同实施例10，不同之处在于将1.2ml的n-ε-叔丁氧羰基-2-(氨基甲基)噁唑啉(0.2m)和0.8ml的2-(叔丁基)噁唑啉(0.2m)换为1ml的2-(对叔丁基苄基)噁唑啉(0.2m)和1ml的2-(对叔丁基苄基)噁唑啉(0.2m)。由凝胶渗透色谱(gpc)鉴定侧链氨基带保护基团的聚合物的分子量mn＝4200,分子量分布pdi＝1.22。最终脱保护后获得噁唑啉共聚
物(产率77.5％，由1h nmr表征可知dp＝20)
[0132]
实施例12：多肽聚合物或多肽模拟物的抗菌活性测试
[0133]
选用的抗菌剂为实施例1-4的α-氨基酸聚合物、实施例5-7的β-氨基酸聚合物、实施例8-9的α/β-氨基酸聚合物、实施例10-11的噁唑啉聚合物和用于养殖业的商用抗生素甲砜霉素进行抗菌活性测试。选用的菌株包括金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、鳗弧菌、副溶血弧菌、溶藻弧菌、霍乱弧菌、哈氏弧菌、鼠伤寒沙门氏菌、鸡白痢沙门氏菌、溶血性曼氏杆菌、猪霍乱沙门氏菌和猪链球菌。这些菌株都来自美国模式菌种保藏中心(atcc)、中国工业微生物菌种保藏管理中心(cicc)、中国普通微生物菌种保藏管理中心(cgmcc)和中国兽医微生物菌种保藏管理中心(cvcc)。抗菌活性以最低抑菌浓度(mic)展示，主要采用以下的测试方法。首先用各个细菌合适的培养基在适宜相应菌株生长温度的摇床中培养10小时，待细菌长至成熟期，转移至离心机上以4000rpm的转速离心5分钟，倒掉上清液，底部的细菌用少量测试用培养基分散，在酶标仪上测定od值，根据od值稀释菌液至2
×
105cfu/ml待用。在96孔板第一行加入10μl待测的浓度为4mg/ml的聚合物，再加90μl培养基混匀后，取50μl从b行到h行逐级稀释，然后每个孔中加入50μl菌液，以培养基为阴性对照，菌液为阳性对照。之后放入适宜相应菌株生长温度的培养箱中培养9小时后，将96孔板放在酶标仪上用600nm波长读数。最后按照公式细菌生长率％＝(od
聚合物-od
空白
)/(od
对照-od
空白
)
×
100％进行计算，抗菌活性测试中每个样品均有两个重复样，并进行三次重复实验。所得的mic如表1，α-氨基酸聚合物、β-氨基酸聚合物、α/β-氨基酸聚合物和噁唑啉聚合物对养殖中的致病菌均展现了高效的抗菌活性，对于部分菌株的mic甚至优于商用抗生素。
[0134]
表1α-氨基酸聚合物的抗菌活性(mic，μg/ml)
[0135][0136][0137]
表2β-氨基酸聚合物的抗菌活性(mic，μg/ml)
[0138][0139][0140]
表3α/β-氨基酸聚合物的抗菌活性(mic，μg/ml)
[0141][0142][0143]
表4噁唑啉聚合物的抗菌活性(mic，μg/ml)
[0144][0145]
实施例13：多肽聚合物或多肽模拟物的耐药性测试
[0146]
选用实施例2中的α-氨基酸聚合物和商用抗生素刺激革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌(图1中a)和革兰氏阴性菌大肠杆菌(图1中b)进行了耐药性测试。抗菌剂刺激细菌的耐药性增长情况主要采用以下的测试方法。取0.2μl细菌成熟期的菌液至1ml的培养基中，加入抗菌剂并控制刺激浓度在1/2mic值，之后在37℃摇床中培养24小时，如此重复四天后测试细菌的最低抑菌浓度(mic),确定新的mic值后，继续按照以上操作方法进行测试。以四天为一个周期进行重复，在抗菌剂一共刺激24天后，测试最后的mic值，确定细菌的耐药性增长情况。测试发现用聚合物连续刺激两种细菌24天后，其mic均没有明显增长，而受到抗生素诺氟沙星和氨苄西林连续刺激后的细菌的mic却出现了几十倍甚至几百倍的增长。证明多肽聚合物或多肽模拟物的使用不易促使微生物产生耐药性。
[0147]
实施例14：α-氨基酸聚合物的降解测试
[0148]
多肽聚合物或多肽模拟物在酶的存在下发生降解，将减少其在生物体内和自然环境中的残留。选用土壤中大量存在的米曲霉菌产生的蛋白酶xxiii对实施例2中的α-氨基酸聚合物进行降解测试(图2中a)。聚合物的降解主要采用以下的测试方法。将聚合物用磷酸缓冲盐溶液(pbs)溶解，获得最终浓度为4mg/ml。在聚合物的pbs溶液中加入蛋白酶混合，最终蛋白酶浓度为160μg/ml。再将混合液转移至水浴中加热(温度为酶的最适温度)。按不同时间点取出反应液，并在100℃水浴中加热10分钟使蛋白酶灭活。最后将反应液在冻干机上冻干后用核磁表征。降解后的最低抑菌浓度(mic)测试如实施例8。测试发现蛋白酶xxiii可以在6小时内将实施例2中的α-氨基酸聚合物降解完全，且比较降解前后的氨基酸聚合物对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的mic(图2中b)可以发现，α-氨基酸聚合物在降解前具有高效的抗菌活性，而发生降解后聚合物的抗菌活性消失。该结果表明α-氨基酸聚合物可以在酶的存在下发生降解，减少残留量从而避免持续性刺激细菌，进一步降低了耐药性产生的可能。
[0149]
实施例15：多肽聚合物或多肽模拟物对血红细胞的溶血活性测试
[0150]
多肽聚合物或多肽模拟物若作为注射剂使用则会进入动物的血液循环，因此需要验证其对血红细胞的溶血活性。选用实施例1-5，测试其对血红细胞的溶血活性。溶血活性以百分之五十溶血率(hc
50
)展示，主要采用以下的测试方法。由志愿者提供的新鲜人血放于4℃保存待用。测试时取用足量人血，加入适量三乙醇胺缓冲盐水溶液(tbs)稀释后，在离心机上以4000rpm的转速离心3分钟,倒出上清液后，再加入tbs摇匀底部的血红细胞，继续离心，如此重复3次后，加入tbs将血红细胞稀释至5％待用。在96孔板的第一行加入10μl待测的α-氨基酸聚合物溶液，再加入90μl的tbs混匀后，取50μl从b行到h行逐级稀释，以0.1％的聚乙二醇辛基苯基醚为阳性对照，tbs为阴性对照。之后每个孔都加入50μl用tbs稀释好的血红细胞，放在37℃培养1小时。将96孔板转移至离心机中以3700rpm转速离心5分钟，从每个孔中吸取80μl至另一块全新的96孔板，在酶标仪上用405nm的波长进行读数。最后按照公式溶血率％＝(od
聚合物-od
空白
)/(od
对照-od
空白
)
×
100％计算，溶血活性测试中每个样品均有两个重复样，并进行三次重复实验。实验结果如表5，所测试的实施例1-5的hc
50
值都大于2000μg/ml，证明其对血红细胞没有明显的溶血活性，即使进入养殖业动物的体内循环也不会引起血红细胞溶血等现象。
[0151]
表5氨基酸聚合物的溶血活性(hc
50
,μg/ml)
[0152]
样品实施例1实施例2实施例3实施例4实施例5hc
50
》2000》2000》2000》2000》2000
[0153]
实施例16：多肽聚合物或多肽模拟物对哺乳动物细胞的细胞毒性测试
[0154]
多肽聚合物或多肽模拟物在使用过程中会与养殖业动物有直接接触，细胞毒性是验证其安全性的一项重要依据。选用实施例2，实施例4和实施例5，测试其对小鼠成纤维细胞的细胞毒性。细胞毒性以百分之五十细胞存活率(ic
50
)展示，主要采用以下的测试方法。先用胰蛋白酶消化单层细胞，待细胞脱落后收集，在离心机中以1200rpm的转速离心4分钟使细胞沉积，倒掉上清液后用培养基重悬计数。将细胞稀释到105cells/ml,以每个孔100μl转移到96孔板中，之后将96孔板放置于37℃，5％co2浓度的培养箱中培养过夜。第二天在新的96孔板第一行中加入待测的α-氨基酸聚合物并进行逐级稀释后待用，吸走原先预配养的96孔板中的培养基，将稀释好的聚合物溶液转移至原先的孔板中，在37℃，5％co2浓度的培养箱中培养。24小时后，吸走孔板中的培养基，加入100μl噻唑蓝(mtt)染料(0.5mg/ml)后放入培养箱中培养4小时进行染色，之后吸走mtt染料，加入150μl的二甲基亚砜，将96孔板放在摇床上15分钟混合均匀后再放入酶标仪中在570nm下读数。最后按照公式细胞存活率％＝(od
聚合物-od
空白
)/(od
对照-od
空白
)
×
100％计算，细胞毒性测试中每个样品均有三个重复样，并进行三次重复实验。最终获得的ic
50
值如表6所示，表明所测实施例对哺乳动物细胞没有明显的细胞毒性。
[0155]
表6氨基酸聚合物的细胞毒性(ic
50
,μg/ml)
[0156]
样品实施例2实施例4实施例6ic
50
17550200
[0157]
实施例17：多肽聚合物或多肽模拟物对成年斑马鱼的毒性测试
[0158]
多肽聚合物或多肽模拟物在使用过程中不可避免的会溶解在养殖水体中。为了验证养殖水体中的多肽聚合物或多肽模拟物不会对鱼类的生命活动造成影响。选用实施例2测试其对成年斑马鱼的急性毒性测试。主要采用以下的测试方法。聚合物对成年斑马鱼的
急性毒性试验是根据oecd标准规程进行。我们选择了健康的成年斑马鱼(长2.5
±
0.5厘米，体重0.2
±
0.1克)。在实验前，将斑马鱼在实验室中驯养1周。再随机分为实验组和对照组。实验组中聚合物溶液稀释成不同浓度梯度。每组含2l浸泡溶液和10条鱼。并且每24小时更新一次浸泡溶液。整个浸泡过程保持在28℃和14小时:10小时的光照/黑暗周期的培养环境中。在24、48、72和96小时记录斑马鱼存活的数量。判断死亡的标准是没有可见的呼吸或触摸尾巴时没有动弹。实施例2对成年斑马鱼的急性毒性的结果如图3所示，发现在聚合物浓度为50mg/l以下时，成年斑马鱼可以全部存活，并计算所得半数致死浓度(lc
50
)为98.14mg/ml。表明本发明的多肽聚合物或多肽模拟物在养殖水体中的浓度低于50mg/l以下时，在使用过程中对动物的生命活动没有显著影响。
[0159]
实施例18：多肽聚合物或多肽模拟物对细菌感染的斑马鱼的治疗效果
[0160]
选用实施例2测试其对细菌感染后的斑马鱼的治疗效果。主要采用以下测试方法。首先将鳗弧菌用2216e培养基在30℃的摇床中培养至生长期后稀释至4
×
108cfu/ml待用。将斑马鱼随机分成细菌感染并注射磷酸盐缓冲液组，细菌感染并注射10mg/kg的聚合物组，细菌感染并注射20mg/kg的聚合物组和仅注射磷酸盐缓冲液组共四组，其中每组有三个重复组，每个重复组内有10条斑马鱼。感染过程中先将10μl的菌液通过腹腔注射进斑马鱼体内，随后再注射聚合物溶液。之后的一周内每隔12小时记录斑马鱼的存活情况。结果如图4所示，细菌感染后仅注射磷酸盐缓冲液组中的斑马鱼出现了大量死亡，并出现鳗弧菌感染后的出血性败血症。而在细菌感染后及时用α-氨基酸聚合物治疗的两组存活率有了明显提升，在20mg/kg组中的存活率提升到90％，且没有出现弧菌感染的相关症状。这证明本发明的多肽聚合物或多肽模拟物对于鱼类受细菌感染后出现的相关疾病有很好的治疗效果。
[0161]
在本发明提及的所有文献都在本技术中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本技术所附权利要求书所限定的范围。

技术特征：
c6卤代烷基、c1-c6烷基羟基、c1-c6烷氧基、c1-c6烷基磺酰基、c1-c6烷基胍基、c1-c6烷基酯基、硫代c1-c6烷基酯基、c2-c6烯基、c2-c6炔基、c3-c12环烷基、c6-c12芳基、5-12元杂芳基、5-12元杂环基、c1-c6烷基-c6-c12芳基、氨基和p1为保护基，在出现处各自独立选自以下基团：叔丁氧羰基(boc)、苄氧羰基(cbz)、芴甲氧羰基(fmoc)、邻苯二甲酰基(pht)、乙酰基(ac)、三氟乙酰基(tfa)、苄基(bn)、三苯基甲基(tr)；p2在出现处各自独立选自以下基团：氢、取代或未取代的c1-c6烷基、取代或未取代的c6-c12芳基、取代或未取代的5-12元杂芳基、取代或未取代的5-12元杂环基；x在出现处各自独立选自以下基团：无、氢、氨基、胍基、羟基、羧基、酰氨基、巯基、甲硫基、烯基、炔基、酯基(-coo-)、c6-c12芳基或5-12元杂环基；l在出现处各自独立选自：-chr'
1-、-co-、-coo-、-s(＝o)
2-；q为0-6的整数；r'1在出现处各自独立地选自取代或未取代的下组基团：氢、氨基、c1-c15烷基、c1-c15烷基氨基、c1-c15烷基羟基、c1-c15烷基醛基、c1-c15烷基酯基、硫代c1-c15烷基酯基、c6-c15芳基、c2-c15烯基、c2-c15炔基、-rc-coo-rc”、-rc-co-rc”、-rc-o-rc
”-
、-rc-s-rc”、5-15元杂芳基、5-12元杂环基；ra和rb在出现处各自独立地选自取代或未取代的下组基团：不存在、氢、c1-c15烷基、c1-c15烷基氨基、c1-c15烷基羟基、c1-c15烷基醛基、c1-c15烷基磺酰基、c2-c15烯基、c2-c15炔基、-rc-coo-rc”、-rc-co-rc”、-rc-o-rc
”-
、-rc-s-rc”、c3-c12环烷基、c4-c12环烯基、5-12元杂环基、c6-c12芳基、5-12元杂芳基；rc在出现处分别各自独立地选自取代或未取代的下组基团：无、c1-c15亚烷基、c2-c15亚烯基、c2-c15亚炔基、c3-c12亚环烷基、c4-c12亚环烯基、3-12元亚杂环基、c6-c12亚芳基、5-12元亚杂芳基；rc”在出现处分别各自独立地选自取代或未取代的下组基团：c1-c15烷基、c1-c15烷基氨基、c2-c15烯基、c2-c15炔基、c3-c12环烷基、c4-c12环烯基、3-12元杂环基、c6-c12芳基、5-12元杂芳基；上述各取代独立地指被选自以下一个或多个取代基取代：卤素、羟基、氨基、苯基、c1-c6烷基、c1-c6卤代烷基、c1-c6烷氧基、c1-c6卤代烷氧基、c3-c8环烷基、c6-c12芳基、5-12元杂芳基或3-12元杂环基。9.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述多肽聚合物或多肽模拟物选自：
式中，n为5-5000的正整数；a为0-100的正整数；0％＜x≤100％,0％≤y≤100％，且x+y＝100％；r
z
在出现处分别各自独立地选自以下基团：卤素、羧基、活性酯基团、酰氯、环氧烷、巯基、c2-c15烯烃基团、c2-c15炔基、叠氮、马来酰亚胺、邻二硫吡啶基(opss)、环糊精、金刚烷；r
s
在出现处分别各自独立地为氢或r
t
在出现处分别各自独立地选自下组基团:
c1-c15烷基、c2-c15烯基、c2-c15炔基、c3-c12环烷基、c4-c12环烯基、3-12元杂环基、c6-c12芳基、5-12元杂芳基、c1-c15烷基酯基；r
w
在出现处分别各自独立地为其中为连接处；r”'在出现处各自独立为1、2或3；r7、r8、r9、r
10
、r
11
、r
12
、r
13
和r
14
在出现处分别各自独立地选自以下基团：氢、c1-c6烷基、c1-c6卤代烷基、c1-c6烷基羟基、c1-c6烷氧基、c1-c6烷基磺酰基、c1-c6烷基胍基、c1-c6烷基酯基、硫代c1-c6烷基酯基、c2-c6烯基、c2-c6炔基、c3-c12环烷基、c6-c12芳基、5-12元杂芳基、5-12元杂环基、c1-c6烷基-c6-c12芳基、氨基和q1为保护基，在出现处各自独立选自以下基团：叔丁氧羰基(boc)、苄氧羰基(cbz)、芴甲氧羰基(fmoc)、邻苯二甲酰基(pht)、乙酰基(ac)、三氟乙酰基(tfa)、苄基(bn)、三苯基甲基(tr)；q2在出现处各自独立选自以下基团：氢、取代或未取代的c1-c6烷基、取代或未取代的c6-c12芳基、取代或未取代的5-12元杂芳基、取代或未取代的5-12元杂环基；上述各取代独立地指被选自以下一个或多个取代基取代：卤素、羟基、氨基、苯基、c1-c6烷基、c1-c6卤代烷基、c1-c6烷氧基、c1-c6卤代烷氧基、c3-c8环烷基、c6-c12芳基、5-12元杂芳基或3-12元杂环基。10.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述多肽聚合物或多肽模拟物选自：
式中，n为5-5000的正整数；a为0-100的正整数；0％＜x≤100％,0％≤y≤100％，且x+y＝100％；r
z
在出现处分别各自独立地选自以下基团：卤素、羧基、活性酯基团、酰氯、环氧烷、巯
基、c2-c15烯烃基团、c2-c15炔基、叠氮、马来酰亚胺、邻二硫吡啶基(opss)、环糊精、金刚烷。

技术总结
本发明公开了多肽聚合物或多肽模拟物在养殖业中的应用，该多肽聚合物或多肽模拟物在养殖业中用作抗菌剂，作为抗生素替代物用于动物的疾病预防和治疗。本发明中的多肽聚合物或多肽模拟物对养殖业中的致病菌具有高效的抗菌活性和良好的生物相容性，自身不易诱导细菌产生耐药和交叉耐药，还能降低养殖业中动物受微生物感染的风险，起到疾病预防和治疗的效果。果。


技术研发人员：刘润辉 马鹏程
受保护的技术使用者：华东理工大学
技术研发日：2020.11.23
技术公布日：2022/5/25