1-苯基-苯并吡咯里西啶-3-酮衍生物及制备方法和应用

1.本发明属于化合物及其合成与应用技术领域，具体涉及1-苯基-苯并吡咯里西啶-3-酮衍生物及其制备方法和应用。


背景技术：

2.抑郁症是一类心境障碍的精神疾病，由外在环境和心理素质导致的持久性的情绪低落。目前，临床应用中已有多种药物可供抗抑郁症使用，如阿米替平、氟西汀、帕罗西汀、舍曲林、西酞普兰等，这些药物虽然都能够在不同程度上用于治疗或缓解各种抑郁症病人的痛苦，但其存在不同程度的副作用，从而限制了它们的长期使用。从新结构、新机制出发寻找疗效好、副作用低的新型抗抑郁化合物迫在眉睫。已有研究结果表明增强神经可塑性是抗抑郁药物发挥作用的重要治疗途径。通过调控谷氨酸nmda(n-甲基-d-天冬氨酸)受体，可激活钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶ii(camkii)通路和ampa(α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸)受体，增强神经突触可塑性和环磷腺苷酸反应元件结合蛋白磷酸化，可产生快速抗抑郁的效果。作用于谷氨酸nmda受体上的谷氨酸结合位点、甘氨酸结合位点以及离子通道位点而对nmda受体具有拮抗作用的化合物具有快速抗抑郁作用。由此可见，通过调控nmda受体，激活ampa受体，增强神经可塑性，是快速长效抗抑郁作用途径。


技术实现要素：

3.本发明的目的在于提供一种1-苯基-苯并吡咯里西啶-3-酮衍生物及制备方法，以及在制备治疗神经退行性疾病、尤其是抑郁症的药物中的应用，有望提供一种新的抗抑郁药物。
4.为达到上述目的，本发明采用以下技术方案：
5.1-苯基-苯并吡咯里西啶-3-酮衍生物，其结构式如通式i所示：
[0006][0007]
其中r1、r2选自氢、甲氧基、氟、羟基、苄氧基，r1与r2相同或不同；r1位于苯环邻、间、对位中任意一个或两个，r2位于7或8位；包括形成的各种立体异构体。
[0008]
前述1-苯基-苯并吡咯里西啶-3-酮衍生物，所述通式i中，r1选自氢、甲氧基、苄氧基、羟基，r2选自氢、氟、苄氧基，r1位于苯环邻、间、对位中任意一个或两个，r2位于7或8位。
[0009]
前述1-苯基-苯并吡咯里西啶-3-酮衍生物优选为下述11a-11e、11g-11o、11s-11t、12a-12b、12d-12f和12h：
[0010][0011]
前述1-苯基-苯并吡咯里西啶-3-酮衍生物进一步优选为11a、11b、11d、11e、11g、11i、11l、11m、12d、12f。
[0012]
以上所述1-苯基-苯并吡咯里西啶-3-酮衍生物的制备方法，步骤如下：通式ii所示化合物用dmf溶解，加入磷酸钾、碘化亚铜、环己二胺120℃下搅拌反应7h，得到1-苯基-苯并吡咯里西啶-3-酮衍生物i；反应路线如下：
[0013][0014]
前述1-苯基-苯并吡咯里西啶-3-酮衍生物的制备方法，更具体的步骤如下：通式ii所示化合物用dmf溶解，室温搅拌条件下加入磷酸钾、碘化亚铜、环己二胺，加入完毕后120℃搅拌反应7h，反应结束所得反应液加水分散，乙酸乙酯萃取2次，有机层减压浓缩后分离纯化，得到1-苯基-苯并吡咯里西啶-3-酮衍生物i。
[0015]
前述1-苯基-苯并吡咯里西啶-3-酮衍生物的制备方法中，通式ii所示化合物、dmf、磷酸钾、碘化亚铜、环己二胺比例为0.2mmol：4ml：0.16mmol：0.16mmol：0.4mmol。
[0016]
以上所述1-苯基-苯并吡咯里西啶-3-酮衍生物在制备治疗神经退行性疾病药物中的应用。
[0017]
以上所述1-苯基-苯并吡咯里西啶-3-酮衍生物在制备治疗抑郁症药物中的应用。
[0018]
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
[0019]
本发明首次公开了1-苯基-苯并吡咯里西啶-3-酮衍生物及其制备方法和在制备
治疗神经退行性疾病、特别是抗抑郁药物中的应用。通过对nmda诱导的pc12细胞损伤保护活性筛选及其对细胞内ca
2
的影响试验，证明其可用于神经退行性相关疾病的治疗；通过对1-苯基-苯并吡咯里西啶-3-酮衍生物11a体外小鼠抗抑郁活性研究发现其具有抗抑郁作用，提示1-苯基-苯并吡咯里西啶-3-酮衍生物可用于抗抑郁药物的制备，有望提供一种新的抗抑郁药物。
附图说明
[0020]
图1为1-苯基-苯并吡咯里西啶-3-酮衍生物对2mm nmda诱导的pc12细胞损伤保护活性；
[0021]
图2为不同浓度高活性分子11m对2mm nmda诱导的pc12细胞损伤保护活性；
[0022]
图3为15μm 11m对nmda诱导的pc12细胞内ca
2
的影响；
[0023]
图4为小鼠体内抗抑郁活性筛选方案11a悬尾实验结果；
[0024]
图5为小鼠体内抗抑郁活性筛选方案11a旷场实验结果。
具体实施方式
[0025]
本发明所用通式ii化合物可根据cn1191218a中的方法制备。
[0026]
实施例1：1-苯基-苯并吡咯里西啶-3-酮衍生物的制备方法如下：
[0027]
在烧瓶中加入通式ii化合物0.2mmol，4ml dmf溶解通式ii化合物，室温搅拌条件下加入磷酸钾0.2mmol、碘化亚铜0.16mmol、环己二胺0.16mmol，加入完毕后120℃搅拌反应7h。反应结束后所得反应液加水分散，乙酸乙酯萃取2次，有机层减压浓缩后分离纯化得到1-苯基-苯并吡咯里西啶-3-酮衍生物i。
[0028]
实施例2：1-苯基-苯并吡咯里西啶-3-酮衍生物的制备方法如下：
[0029]
在容器中加入通式ii化合物0.1mmol，加入dmf 2ml溶解通式ii化合物，室温搅拌条件下加入磷酸钾0.1mmol、碘化亚铜0.08mmol、环己二胺0.08mmol，加入完毕后120℃搅拌反应7h。反应结束后所得反应液加水分散，乙酸乙酯萃取2次，有机层减压浓缩后分离纯化得到1-苯基-苯并吡咯里西啶-3-酮衍生物i。
[0030]
上述实施例1-2中：当r1为氢、r2为氢时，所得产物为11a(反式)；
[0031]
r1为对甲氧基(p-och3)，r2为氢时，所得产物为11b(反式)；
[0032]
r1为间甲氧基(m-och3)，r2为氢，所得产物为11c(反式)；
[0033]
r1为邻甲氧基(o-och3)，r2为氢，所得产物为11d(反式)；
[0034]
r1为间二甲氧基(m，m-(och3)2)，r2为氢，所得产物为11e(反式)；
[0035]
r1为对苄氧基(p-obn)，r2为氢，所得产物为11g(反式)；
[0036]
r1为对羟基(p-oh)，r2为氢，所得产物为11h(反式)；
[0037]
r1为间甲氧基对苄氧基(m-och3，p-obn)，r2为氢，所得产物为11i(反式)；
[0038]
r1为间甲氧基对羟基(m-och3，p-oh)，r2为氢，所得产物为11j(反式)；
[0039]
r1为间二甲氧基(m，m-(och3)2)，r2为8-氟(8-f)，所得产物为11k(反式)；
[0040]
r1为对苄氧基(p-obn)，r2为7-苄氧基(7-obn)，所得产物为11l(反式)；
[0041]
r1为对苄氧基(p-obn)，r2为8-氟(8-f)，所得产物为11m(反式)；
[0042]
r1为对羟基(p-oh)，r2为8-氟(8-f)，所得产物为11n(反式)；
[0043]
r1为间氟对甲氧基(m-f，p-och3)，r2为7-苄氧基(7-obn)，所得产物为11o(反式)；
[0044]
r1为对氟(p-f)，r2为8-氟(8-f)，所得产物为11s(反式)；
[0045]
r1为邻氟(o-f)，r2为8-氟(8-f)，所得产物为11t(反式)；
[0046]
r1为邻甲氧基(o-och3)，r2为氢，所得产物为12a(顺式)；
[0047]
r1为间二甲氧基(m，m-(och3)2)，r2为氢，所得产物为12b(顺式)；
[0048]
r1为对苄氧基(p-obn)，r2为氢，所得产物为12d(顺式)；
[0049]
r1为间甲氧基对羟基(m-och3，p-oh)，r2为氢，所得产物为12e(顺式)；
[0050]
r1为对苄氧基(p-obn)，r2为8-氟(8-f)，所得产物为12f(顺式)；
[0051]
r1为邻氟(o-f)，r2为8-氟(8-f)，所得产物为12h(顺式)。
[0052]
为了进一步确认本发明制备方法的合理性以及合成的化合物结构的准确性，采用核磁共振对实施例1-2制得的1-苯基-苯并吡咯里西啶-3-酮衍生物11a-11e、11g-11o、11s-11t、12a-12b、12d-12f和12h进行核磁共振(1h nmr和
13
c nmr)检测，结果如下：
[0053]
11a的核磁共振(1h nmr和13c nmr)检测数据为：1h nmr(600mhz，cdcl3)δ7.67(d，j＝7.8hz，1h)，7.43(t，j＝7.5hz，2h)，7.35(t，j＝9.0hz，3h)，7.27(dd，j＝13.8，6.1hz，1h)，7.22(d，j＝7.4hz，1h)，7.08(t，j＝7.5hz，1h)，4.70(q，j＝9.2hz，1h)，3.59(dd，j＝20.3，9.2hz，1h)，3.24(dd，j＝15.7，8.6hz，1h)，3.14-3.07(m，2h)，2.96(dd，j＝16.2，7.7hz，1h).13c nmr(101mhz，cdcl3)δ170.29，139.23，138.96，133.66，128.98，127.85，127.50，127.01，125.34，124.25，114.88，68.50，49.54，43.25，34.90.
[0054]
11b的核磁共振(1h nmr和13c nmr)检测数据为：1h nmr(400mhz，cdcl3)δ7.63(d，j＝7.8hz，1h)，7.25-7.17(m，4h)，7.04(td，j＝7.5，0.9hz，1h)，6.96-6.90(m，2h)，4.64(dd，j＝18.2，9.5hz，1h)，3.83(s，3h)，3.58-3.48(m，1h)，3.21(dd，j＝15.8，8.6hz，1h)，3.12-3.00(m，2h)，2.92(dd，j＝16.2，7.8hz，1h).13c nmr(101mhz，cdcl3)δ170.41，158.88，139.21，133.68，130.85，128.00，127.81，125.33，124.19，114.84，114.30，68.71，55.32，48.93，43.45，34.78.
[0055]
11c的核磁共振(1h nmr和13c nmr)检测数据为：1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ7.42(d，j＝7.6hz，1h)，7.30-7.18(m，3h)，7.01(ddd，j＝21.4，10.7，4.3hz，3h)，6.86-6.83(m，1h)，4.67(d，j＝9.0hz，1h)，3.76(s，3h)，3.70-3.61(m，1h)，3.11(ddd，j＝21.7，16.1，10.6hz，3h)，2.75(dd，j＝15.9，7.6hz，1h).13c nmr(1mhz，dms0-d6)δ170.44，159.53，141.17，139.20，134.37，129.72，127.33，125.69，123.83，119.54，113.75，113.11，112.43，67.59，55.06，48.52，42.45，33.71.
[0056]
11d的核磁共振(1h nmr和13c nmr)检测数据为：1h nmr(400mhz，cdcl3)δ7.64(d，j＝7.8hz，1h)，7.33-7.16(m，4h)，7.06-6.92(m，3h)，4.81(dd，j＝18.4，9.5hz，1h)，3.86(s，3h)，3.85-3.79(m，1h)，3.26-3.02(m，3h)，2.88(dd，j＝16.3，7.8hz，1h).13c nmr(101mhz，cdcl3)δ171.08，157.70，139.32，134.13，128.52，127.78，127.64，126.78，125.26，124.07，120.72，114.84，110.74，67.14，55.19，44.66，41.84，34.96.
[0057]
11e的核磁共振(1h nmr和13c nmr)检测数据为：1h nmr(400mhz，cdcl3)δ7.62(d，j＝7.8hz，1h)，7.27-7.17(m，2h)，7.05(dt，j＝7.5，3.7hz，1h)，6.45(d，j＝2.2hz，2h)，6.41(t，j＝2.2hz，1h)，4.67(q，j＝9.5hz，1h)，3.82(s，6h)，3.56-3.46(m，1h)，3.23(dd，j＝15.8，8.6hz，1h)，3.12-3.02(m，2h)，2.92(dd，j＝16.3，7.8hz，1h).13c nmr(101mhz，
cdcl3)δ170.17，161.17，141.28，139.13，133.64，127.81，125.32，124.23，114.82，105.30，98.64，68.26，55.34，49.61，43.14，34.88.
[0058]
11g的核磁共振(1h nmr和13c nmr)检测数据为：1h nmr(500mhz，cdcl3)δ7.63(d，j＝7.9hz，1h)，7.45(d，j＝7.1hz，2h)，7.40(t，j＝7.4hz，2h)，7.37-7.29(m，2h)，7.23(d，j＝7.8hz，1h)，7.19(d，j＝7.5hz，1h)，7.05(t，j＝7.5hz，1h)，6.94-6.89(m，3h)，5.09(s，2h)，4.67(dd，j＝18.2，9.5hz，1h)，3.60-3.52(m，1h)，3.21(dd，j＝15.8，8.7hz，1h)，3.07(dd，j＝16.2，12.1hz，2h)，2.94(dd，j＝16.2，7.8hz，1h).13c nmr(126mhz，cdcl3)δ170.27，159.16，140.57，139.16，136.67，133.68，130.06，128.67，128.12，127.85，127.51，125.35，124.26，119.51，114.87，114.24，113.14，70.07，68.36，49.46，43.11，29.69.
[0059]
11h的核磁共振(1h nmr和13c nmr)检测数据为：1h nmr(600mhz，cd3od cdcl3)δ7.56(d，j＝7.7hz，1h)，7.25-7.19(m，3h)，7.07(td，j＝7.5，0.8hz，1h)，6.82-6.75(m，3h)，4.70(dd，j＝18.2，9.6hz，1h)，3.60-3.53(m，1h)，3.24(dd，j＝15.7，8.5hz，1h)，3.09(ddd，j＝16.1，11.0，5.5hz，2h)，2.91(dd，j＝16.3，7.7hz，1h).13c nmr(151mhz，cd3od cdcl3)δ171.08，157.39，140.17，138.64，134.18，129.98，127.67，125.51，124.68，118.11，114.69，114.37，113.83，68.82，49.24，43.15，34.59.
[0060]
11i的核磁共振(1h nmr和13c nmr)检测数据为：1h nmr(500mhz，cdcl3)δ7.63(d，j＝7.8hz，1h)，7.45(d，j＝7.5hz，2h)，7.38(t，j＝7.4hz，2h)，7.31(t，j＝7.3hz，1h)，7.24(t，j＝7.7hz，1h)，7.19(d，j＝7.5hz，1h)，7.05(td，j＝7.5，1.0hz，1h)，6.89(d，j＝8.2hz，1h)，6.83(d，j＝1.9hz，1h)，6.78(dd，j＝8.2，1.7hz，1h)，5.17(s，2h)，4.65(dd，j＝18.2，9.5hz，1h)，3.93(s，3h)，3.50(dt，j＝12.0，8.5hz，1h)，3.21(dd，j＝15.7，8.5hz，1h)，3.10-3.01(m，2h)，2.92(dd，j＝16.2，7.8hz，1h).13c nmr(126mhz，cdcl3)δ170.30，149.90，147.54，139.20，136.99，133.65，131.97，128.57，127.88，127.83，127.20，125.33，124.23，119.01，114.85，114.20，110.78，71.05，68.63，56.12，49.27，43.47，34.84.
[0061]
11j的核磁共振(1h nmr和13c nmr)检测数据为：1h nmr(400mhz，cdcl3)δ7.63(d，j＝7.8hz，1h)，7.21(dd，j＝14.6，7.5hz，2h)，7.05(t，j＝7.4hz，1h)，6.93(d，j＝8.1hz，1h)，6.83-6.77(m，2h)，5.72(s，1h)，4.65(q，j＝9.4hz，1h)，3.93(s，3h)，3.50(dt，j＝11.9，8.8hz，1h)，3.21(dd，j＝15.8，8.6hz，1h)，3.11-3.00(m，2h)，2.92(dd，j＝16.3，7.9hz，1h).13c nmr(101mhz，cdcl3)δ170.36，146.79，144.98，139.14，133.66，130.70，127.80，125.32，124.24，119.69，114.84，114.71，109.38，68.75，55.94，49.37，43.57，34.78.
[0062]
11k的核磁共振(1h nmr和13c nmr)检测数据为：1h nmr(600mhz，cdcl3)δ7.41(d，j＝7.8hz，1h)，7.22(td，j＝8.1，5.6hz，1h)，6.77(t，j＝8.5hz，1h)，6.44(d，j＝2.1hz，2h)，6.41(t，j＝2.2hz，1h)，4.72(q，j＝9.4hz，1h)，3.82(s，6h)，3.56-3.48(m，1h)，3.31(dd，j＝16.0，8.7hz，1h)，3.11-3.01(m，2h)，2.93(dd，j＝16.3，7.7hz，1h).13c nmr(151mhz，cdcl3)δ170.48，161.28，159.10(246.13)，141.35(9.06)，140.89，129.91(7.55)，119.52(21.14)，111.40(19.63)，110.76(3.02)，105.30，98.80，68.68，55.42，49.69，43.16，31.27.
[0063]
11l的核磁共振(1h nmr和13c nmr)检测数据为：1h nmr(600mhz，cdcl3)δ7.56-7.53(m，1h)，7.48-7.39(m，8h)，7.38-7.31(m，3h)，6.96-6.91(m，3h)，6.88-6.84(m，2h)，
5.11(s，2h)，5.06(s，2h)，4.67(dd，j＝18.1，9.5hz，1h)，3.60-3.53(m，1h)，3.18(dd，j＝15.8，8.5hz，1h)，3.07(dt，j＝15.8，11.2hz，2h)，2.94(dd，j＝16.2，7.8hz，1h).13c nmr(151mhz，cdcl3)δ169.76，159.19，156.04，140.70，136.93，136.71，135.40，133.13，130.08，128.70，128.62，128.15，128.02，127.54，127.48，119.54，115.30，114.25，113.36，113.17，112.99，70.54，70.10，68.80，49.36，43.02，35.24.
[0064]
11m的核磁共振(1h nmr和13c nmr)检测数据为：1h nmr(400mhz，cdcl3)δ7.42(dt，j＝14.6，7.2hz，5h)，7.37-7.29(m，2h)，7.25-7.18(m，1h)，6.96-6.88(m，3h)，6.78(d，j＝8.4hz，1h)，5.10(s，2h)，4.70(d，j＝8.9hz，1h)，3.62-3.52(m，1h)，3.26(d，j＝8.7hz，1h)，3.13-2.98(m，2h)，2.94(dd，j＝16.3，7.8hz，1h).13c nmr(101mhz，cdcl3)δ170.46，159.09(197.96)，158.11，141.37(6.06)，140.14，136.69，130.14，129.87(7.07)，128.67，128.13，127.48，119.49(17.17)，119.40，114.22，113.39，111.34(17.17)，110.74(3.03)，70.12，68.71，49.47，43.04，31.22.
[0065]
11n的核磁共振(1h nmr和13c nmr)检测数据为：1h nmr(600mhz，cd3od cdcl3)δ7.33(d，j＝7.8hz，1h)，7.24-7.17(m，2h)，6.82-6.73(m，4h)，4.75(dd，j＝18.4，9.4hz，1h)，3.62-3.55(m，1h)，3.31(dd，j＝27.9，11.9hz，1h)，3.07(ddd，j＝25.6，16.2，10.9hz，2h)，2.90(dd，j＝16.4，7.7hz，1h).13c nmr(151mhz，cd3od cdcl3)δ175.33，163.05(246.13)，161.37，144.88(9.06)，143.78，133.91，133.64(7.55)，123.94(21.14)，121.98，118.35，117.70，115.45(19.63)，114.49(3.02)，73.06，53.18，47.03，34.66.
[0066]
11o的核磁共振(1h nmr和13c nmr)检测数据为：1h nmr(400mhz，cdcl3)δ7.54-7.50(m，1h)，7.44-7.30(m，5h)，7.06-6.93(m，3h)，6.87-6.82(m，2h)，5.03(s，2h)，4.60(dd，j＝18.0，9.5hz，1h)，3.90(s，3h)，3.54-3.45(m，1h)，3.17(dd，j＝15.9，8.4hz，1h)，3.07-2.95(m，2h)，2.89(dd，j＝16.2，7.9hz，1h).13c nmr(101mhz，cdcl3)δ169.43，156.01，15152.40(46.46)，146.86(10.1)，136.84，135.19，133.01，131.88(6.06)，128.54，127.95，127.40，122.64(4.04)，115.25，114.75(19.19)，113.73，113.71，113.37，112.93，70.49，68.86，56.32，48.52，43.10，35.04.
[0067]
11s的核磁共振(1h nmr和13c nmr)检测数据为：1h nmr(500mhz，cdcl3)δ7.03(dd，j＝17.0，7.7hz，3h)，6.93-6.85(m，3h)，6.44(t，j＝8.2hz，1h)，4.46(q，j＝8.8hz，1h)，3.45-3.37(m，1h)，3.14(dd，j＝15.2，8.3hz，1h)，2.94-2.86(m，2h)，2.81(dd，j＝15.5，7.4hz，1h).13c nmr(126mhz，cdcl3)δ170.11，159.07(254)，141.27(8.75)，136.96，133.53，129.95(7.5)，129.23，128.33，119.32(21.25)，111.43(20)，110.75(2.5)，68.75，48.93，43.16，31.14.
[0068]
11t的核磁共振(1h nmr和13c nmr)检测数据为：1h nmr(500mhz，cdcl3)δ7.42(d，j＝7.8hz，1h)，7.36-7.29(m，2h)，7.25-7.17(m，2h)，7.15-7.10(m，1h)，6.77(t，j＝8.6hz，1h)，4.80(q，j＝9.2hz，1h)，3.81(ddd，j＝12.3，9.5，7.9hz，1h)，3.28(dd，j＝16.2，8.7hz，1h)，3.19(dd，j＝16.3，12.3hz，1h)，3.06(dd，j＝16.0，9.5hz，1h)，2.94(dd，j＝16.3，7.7hz，1h).13c nmr(126mhz，cdcl3)δ170.31，161.09(267.12)，158.13(267.12)，141.28(7.56)，129.80(7.56)，129.30(8.82)，128.28(3.78)，125.25(13.86)，124.63(3.78)，119.55(21.42)，116.07(22.68)，111.38(20.16)，110.73，110.71，67.81，43.57，41.91(1.26)，31.14.
[0069]
12a的核磁共振(1h nmr和13c nmr)检测数据为：1h nmr(500mhz，cdcl3)δ7.63(d，j＝7.8hz，1h)，7.25-7.15(m，2h)，7.09(dd，j＝7.5，1.5hz，1h)，7.01(d，j＝7.4hz，1h)，6.94(td，j＝7.5，1.0hz，1h)，6.88(ddd，j＝14.8，10.6，4.6hz，2h)，5.09(ddd，j＝10.2，9.2，7.1hz，1h)，4.12(t，j＝7.7hz，1h)，3.68(s，3h)，3.32(dd，j＝16.9，8.5hz，1h)，2.81-2.73(m，2h)，2.37(dd，j＝16.0，10.3hz，1h).13c nmr(1mhz，cdcl3)δ172.17，157.01，139.03，134.54，128.40，128.17，127.36，125.07，123.80，121.07，114.51，110.15，66.08，55.03，42.21，37.23，30.60.
[0070]
12b的核磁共振(1h nmr和13c nmr)检测数据为：1h nmr(400mhz，cdcl3)δ7.65(d，j＝7.8hz，1h)，7.19(t，j＝7.6hz，1h)，7.04(d，j＝7.3hz，1h)，6.97(t，j＝7.4hz，1h)，6.32(t，j＝2.2hz，1h)，6.21(d，j＝2.2hz，2h)，5.06(td，j＝9.6，6.5hz，1h)，3.69(t，j＝7.1hz，1h)，3.64(s，6h)，3.34(dd，j＝16.8，7.7hz，1h)，2.85-2.72(m，2h)，2.54(dd，j＝16.1，9.9hz，1h).13c nmr(101mhz，cdcl3)δ171.47，161.08，142.63，138.88，134.24，127.52，125.29，124.07，114.44，105.52，99.04，66.39，55.16，43.53，30.27，29.67.
[0071]
12d的核磁共振(1h nmr和13c nmr)检测数据为：1h nmr(500mhz，cdcl3)δ7.66(d，j＝7.9hz，1h)，7.38-7.28(m，5h)，7.20(q，j＝7.8hz，2h)，7.03(d，j＝7.4hz，1h)，6.97(t，j＝7.4hz，1h)，6.85(dd，j＝8.3，1.8hz，1h)，6.69(d，j＝7.7hz，2h)，5.07(td，j＝9.7，6.6hz，1h)，4.94(dd，j＝29.1，11.7hz，2h)，3.73(t，j＝7.1hz，1h)，3.36(dd，j＝16.9，7.8hz，1h)，2.82-2.69(m，2h)，2.46(dd，j＝16.0，10.1hz，1h).13c nmr(126mhz，cdcl3)δ171.14，159.00，141.86，138.72，136.62，134.32，130.10，128.49，127.93，127.55，127.49，125.28，124.07，120.07，114.49，114.38，113.67，69.82，66.54，43.63，43.07，30.25.
[0072]
12e的核磁共振(1h nmr和13c nmr)检测数据为：1h nmr(500mhz，cdcl3)δ7.67(s，1h)，7.19(t，j＝7.7hz，1h)，7.03(s，1h)，6.96(t，j＝7.6hz，1h)，6.82(s，1h)，6.58(dd，j＝8.3，2.0hz，1h)，6.47(d，j＝2.0hz，1h)，5.54(s，1h)，5.02(td，j＝9.7，6.4hz，1h)，3.67-3.62(m，1h)，3.60(s，3h)，3.29(dd，j＝17.0，7.8hz，1h)，2.76-2.61(m，2h)，2.42(dd，j＝16.3，9.8hz，1h).13c nmr(126mhz，cdcl3)δ171.87，146.80，144.77，138.98，134.20，132.25，127.52，125.31，124.09，120.72，114.63，114.41，109.41，66.67，55.71，43.97，43.33，30.16.
[0073]
12f的核磁共振(1h nmr和13c nmr)检测数据为：1h nmr(400mhz，cdcl3)δ7.44(d，j＝7.8hz，1h)，7.40-7.27(m，5h)，7.20(dd，j＝13.9，6.3hz，2h)，6.86(dd，j＝8.3，1.6hz，1h)，6.72-6.65(m，3h)，5.10(d，j＝6.5hz，1h)，4.96(q，j＝11.7hz，2h)，3.75(t，j＝7.1hz，1h)，3.36(dd，j＝16.9，7.8hz，1h)，2.87-2.73(m，2h)，2.40(dd，j＝16.3，10.0hz，1h).13c nmr(101mhz，cdcl3)δ171.32，159.11，159.04(197.96)，141.46，140.95，136.59，130.27，129.57(6.06)，128.55，128.00，127.51，120.19，120.11(17.17)，114.46，113.86，111.24(16.16)，110.39(2.02)，69.89，66.93，43.66，43.10，26.73.
[0074]
12h的核磁共振(1h nmr和13c nmr)检测数据为：1h nmr(600mhz，cdcl3)δ7.42(dd，j＝8.0，3.3hz，1h)，7.28-7.24(m，1h)，7.17(td，j＝8.1，5.6hz，1h)，7.13-7.05(m，3h)，6.68(t，j＝8.6hz，1h)，5.19-5.13(m，1h)，4.17(t，j＝7.3hz，1h)，3.39(dd，j＝17.0，8.0hz，1h)，2.96(dd，j＝16.3，9.2hz，1h)，2.81(d，j＝17.0hz，1h)，2.37(dd，j＝16.1，10.2hz，1h).13c nmr(151mhz，cdcl3)δ170.91，160.39(246.13)，159.05(246.13)，140.73
(9.06)，129.69(7.55)，129.28(7.55)，128.13(4.53)，126.49(13.59)，125.13(3.02)，119.91(21.14)，115.50(21.14)，111.34(21.14)，110.37(3.02)，66.49，42.39，35.47(3.02)，26.83.
[0075]
1-苯基-苯并吡咯里西啶-3-酮衍生物11a-11e、11g-11o、11s-11t、12a-12b、12d-12f和12h的结构式按编号对应如下：
[0076][0077]
实验例：
[0078]
一、1-苯基-苯并吡咯里西啶-3-酮衍生物对nmda诱导的pc12细胞损伤保护活性筛选方案：
[0079]
取对数生长期的细胞以4
×
103个/孔的密度接种于96孔板中，每孔200μl，于5％co2培养箱中孵育96h后，分为空白对照组、模型组、阳性对照组、损伤加药处理组，每组5个复孔。对照组和模型组只加dmem培养基，阳性对照组加入20μm的mk-801，损伤加药处理组加入浓度为20μm的1-苯基-苯并吡咯里西啶-3-酮衍生物，各组放培养箱继续培养24h。24h后，模型组、阳性对照组及损伤加药处理组加入2mm nmda，放培养箱继续培养6h。6h后，加入mtt孵育4h，mtt法检测细胞存活率。利用酶标仪在490nm处测定各组细胞吸光值。计算公式为：细胞活率＝处理组od值/空白对照组od值
×
100％。
[0080]
损伤保护结果：如图1所示，1-苯基-苯并吡咯里西啶-3-酮衍生物11a、11b、11d、11e、11g、11i、11l、11m、12d、12f对细胞具有明显损伤保护活性，特别是11m保护活性明显，表明其可用于神经退行性相关疾病药物的制备。
[0081]
二、高活性分子11m对nmda诱导的pc12细胞损伤保护浓度依赖筛选方案：
[0082]
取对数生长期的细胞以4
×
103个/孔的密度接种于96孔板中，每孔200μl，于5％co2培养箱中孵育96h后，分为空白对照组、模型组、损伤加药处理组，每组5个复孔。对照组和模型组只加dmem培养基，损伤加药处理组加入不同浓度(2.5-20μm)的11m，各组放培养箱继续培养24h。24h后，模型组及损伤加药处理组加入2mm nmda，放培养箱继续培养6h。6h后，加入
mtt孵育4h，mtt法检测细胞存活率。利用酶标仪在490nm处测定各组细胞吸光值。计算公式为：细胞活率＝处理组od值/空白对照组od值
×
100％。
[0083]
11m浓度依赖实验结果：如图2所示，11m保护活性在2.5-15μm浓度范围内呈量效关系，浓度为5μm时具有显著保护效果，浓度为15μm时保护活性达到最佳。
[0084]
三、高活性分子11m对nmda诱导的pc12细胞内ca
2
浓度的影响筛选方案：
[0085]
取对数生长期的细胞以2
×
104个/孔的密度接种于6孔板中，每孔5ml，于5％co2培养箱中孵育96h后，分为空白对照组、模型组、阳性对照组及损伤加药处理组。对照组和模型组只加dmem培养基，阳性对照组加入15μm的mk-801，损伤加药处理组加入15μm的11m，各组放培养箱继续培养24h。24h后，模型组、阳性对照组及损伤加药处理组加入2mm nmda，放培养箱继续培养6h。6h后，细胞内钙离子浓度根据calcium colorimetric assay kit方法测定。
[0086]
11m对nmda诱导的pc12细胞内ca
2
浓度的影响结果：如图3所示，nmda诱导后导致ca
2
内流损伤细胞，细胞内ca
2
浓度升高，mk-801及11m处理后能够抑制nmda所致的ca
2
内流，细胞内钙离子浓度降低。此结果表明，该类化合物具有nmda受体拮抗活性。
[0087]
四、1-苯基-苯并吡咯里西啶-3-酮衍生物11a小鼠体内抗抑郁活性筛选方案：
[0088]
1、模型与制备
[0089]
所有小鼠自由饮水与进食，在光暗周期为12h的安静环境适应性饲养一周后，采用willner p方法改良为慢性轻度不可预见应激动物模型(cums)，结合孤养进行实验。接受应激处理的小鼠在21天内随机接受不同刺激，每日1种，同种刺激不能连续出现。应激的应激操作方法如下：倾斜鼠笼(45
°
，24h)，禁水、禁食(24h)，冰水游泳(4℃，5min)，夹尾(1min)，热应激(45℃，5min)，闪光刺激(频率3次/分)，潮湿垫料(24h)，昼夜颠倒(24h)。
[0090]
2、分组及给药
[0091]
实验前2天每只鼠进行1h糖水偏爱度实验，根据糖水偏爱度的结果选取无显著差异的小鼠分别称取体重。实验前1天进行开场实验，剔除中央活动总路程结果差异较大的小鼠，将40只小鼠随机分为空白对照组、模型组、阿米替林组(15mg/kg)、11a(5mg/kg)给药组，每组10只，正常组和模型组灌胃等体积蒸馏水，其他组连续给药21d。除空白对照组外，其余各组每只小鼠均孤养。
[0092]
3、行为学实验
[0093]
3.1旷场实验(open field test，oft)
[0094]
旷场箱是由4个长、宽、高均为40cm的方形盒子组成，可同时进行4只实验动物的测试，每个箱子底部通过软件设置被划分为中央区域(50％敞箱底面积)和外周区域(50％敞箱底面积)。实验过程中保持环境的相对安静，每次实验开始时用75％乙醇擦拭实验箱消除干扰气味，待乙醇完全挥干后，将小鼠头朝上、身贴箱壁从固定的一角放入，使其自主活动4min并记录后3min的总路程(mm)。
[0095]
3.2尾部悬吊试验(tail suspension test，tst)
[0096]
当小鼠的尾巴被吊起而使整个身躯悬于半空中时，随即电脑操作计时4min摄像并记录后3min小鼠的静止时间。
[0097]
4、试验结果
[0098]
图4、图5分别为小鼠悬尾、旷场实验结果，在悬尾和旷场实验中11a给药组与模型
组比较悬尾不动时间极显著性缩短，且优于阿米替林给药组，旷场总路程显著增加，表明11a体内抗抑郁效果显著。
[0099]
五、统计学处理
[0100]
用spss17.0统计软件处理数据，计量资料以
±
sd表示。采用单因素方差分析(one-way anova)考察组间差异的显著性，
＊
p＜0.05，
**
p＜0.01，
***
p＜0.001。
[0101]
六、结论：
[0102]
nmda诱导的pc12细胞损伤保护及对细胞内ca
2
浓度影响实验证明：1-苯基-苯并吡咯里西啶-3-酮衍生物11a、11b、11d、11e、11g、11i、11l、11m、12d、12f对细胞具有明显损伤保护活性，特别是11m保护活性极其明显，高活性分子11m能够有效抑制ca
2
内流，体外小鼠抗抑郁活性研究发现11a具有明显抗抑郁作用。表明其可用于神经退行性相关疾病药物的制备，特别是用于制备治疗抑郁症的药物。