一类新型中介二苯基萘并卟吩衍生物及其在医药领域的应用的制作方法

1.本发明涉及光敏药物与光动力疗法领域，具体涉及一类稳定性好、制备工艺简便、亲水性好、不易聚集、光动力效果优良、光毒副作用小、可进行个性化治疗的新型中介二苯基萘并卟吩衍生物及其应用。


背景技术：

2.光动力疗法(pdt)是继传统的外科手术、化疗和放疗后一个正在蓬勃发展、对肿瘤的诊断和治疗极具前景的新手段。其原理是光敏剂静脉注入人体后，可在病灶(如恶性肿瘤)内选择性地聚集或潴留，待达到光敏剂的治疗浓度后，使用特定波长的光照射病灶部位，光敏剂受激发产生活性氧(如单线态氧)杀伤肿瘤或其他病理性组织。
3.光敏剂、特定波长的光和氧分子是光动力治疗不可或缺的三个要素。其中，光敏剂作为光动力治疗三个要素的核心，在整个pdt中起着主导作用。目前市场上使用的大部分都是卟吩类四吡咯光敏剂。卟吩类光敏剂主要包括血红素衍生物(也称血卟啉衍生物)和四苯基卟吩衍生物。卟吩姆钠(光敏素ⅱ)作为血红素衍生物，是最早应用于临床的光动力药物，具备显著的治疗效果，但该药物是由多个异构体组成的混合物，制备过程中各成分的含量难以控制，有些成分在皮肤中滞留时间长，耐受性差(国外医药-合成药、生化药、制剂分册,1998,19,32-34；世界临床药物,2018,39,285-288)，限制了其临床应用。2000年被美国fda批准用于临床治疗肿瘤和视网膜黄斑变性等疾病的光敏药物维替泊芬(verteporfin)也属于血红素衍生物，其最大吸收波长能达到689nm，穿透组织的能力是卟吩姆钠的两倍，能迅速的从体内清除，但其合成过程复杂，存在多个异构体，分离纯化困难且总收率低(中国新药杂志,2005,14,785-788；aust.j.chem.,2008,61,741-754)，极大的限制其临床应用。此外，2001年上市的光敏剂替莫泊芬(temoporfin)用于治疗食道癌，属于四苯基卟吩类衍生物，但存在酚羟基易被氧化、稳定性差、在水中溶解度较差、价格昂贵等缺点(chem.soc.rev.,1995,24,19-33)，其临床应用也受到限制。2018年光敏药物帕利泊芬被批准用于治疗前列腺癌，但其分子结构中含有重金属钯，毒性较大。因此，发现高效新型光敏剂依然是全世界科学家面临的巨大挑战，具有重要的科学意义与临床应用价值。
4.中介二苯基萘并卟吩是一类结构新颖的卟吩类化合物，相比传统的卟吩类化合物，其拥有更加优秀的光学性质，更有潜力发展成为光动力药物。
5.6.目前仅个别学者开展了中介二苯基萘并卟吩的合成方法研究。cheprakov课题组于2009年首次报道合成了5,15-二[(3,5-二叔丁基)苯基]萘并卟吩(化合物1)(macroheterocycles，2009,2,198-205)，化合物的溶解度很差，以至于无法进行核磁共振碳谱的测试。
[0007]
萘并卟吩比传统的卟吩类化合物(如血卟啉类化合物、中介四苯基卟吩类化合物)更易出现自聚集或自组装现象，从而造成化合物溶解度大幅下降，难溶于各种溶剂，只有通过周边基团的结构修饰，显著改善其溶解度才能发挥其光学性能与成药性能，从而用于临床光动力治疗。
[0008]
为发现结构新颖、光学性能和成药性好的光敏新药，我们设计合成了新型中介二苯基萘并卟吩类化合物(系列i)，这些化合物溶解度显著改善；药理活性研究表明，这些化合物的光动力活性显著高于对照化合物1及阳性对照药海姆泊芬。研究表明，本团队设计合成的新光敏化合物光动力药理活性高、皮肤光毒副作用小，且具有结构稳定、制备工艺简单易行、亲水性好、不易聚集等优点；此外，新化合物在450-800nm处有多个吸收峰，可根据肿瘤等病灶的实际体积大小与所在位置选择波长合适的激光光源，实现个性化光动力诊疗，从而可发展为肿瘤、视网膜黄斑变性、光化性角化病、鲜红斑痣、尖锐湿疣等疾病的光动力治疗药物。


技术实现要素：

[0009]
为克服现有光敏药物中存在的组成复杂、结构不稳定、制备困难、成本较高、易聚集、水溶性差、皮肤光毒副作用强、难以开展个性化治疗等缺陷，本发明在中介二苯基萘并卟吩化合物的苯基引入极性基团作为亲水基团，提高化合物亲水性、抑制化合物的聚集。在付出大量创造性劳动后合成了一系列中介二苯基萘并卟吩及其氨基酸缩合衍生物，完成本发明。
[0010]
本发明涉及一类具有光动力活性高、皮肤光毒副作用小、性质稳定、亲水性好、不易聚集、易于配成注射剂、可进行个性化治疗等优点的中介二苯基萘并卟吩类化合物及其应用。
[0011]
本发明概述如下：
[0012]
一类稳定性好、亲水性好、不易聚集、可进行个性化治疗的新型中介二苯基萘并卟吩衍生物，其特征在于：所述光敏剂为5,15-二苯基萘并卟吩衍生物(i)：
[0013][0014]
其中：
[0015]
a和y相同或不同且独立地为ch2、c＝o、c、n或o；r1和r2相同或不同且至少有一个含有极性基团(如：羧基、羟基、醚或氨基)，另一个可独立地为氢、烷基、烷基羧酸、烷基醇、含n杂或o杂的烷基、含n杂或o杂的烷基醇、含n杂或o杂的烷基羧酸、含羰基的烷基或烷基醇或烷基羧酸、含酰胺键的烷基或烷基醇或烷基羧酸，或同时含有羰基和酰胺键的烷基羧酸。
[0016]
根据权利要求1的式(i)，r1和r2相同或不同且至少有一个含有极性基团(如：羧基、羟基、醚或氨基)，其中：
[0017]
非极性基团为-h,-(ch2)mch3,-(ch2)mch(ch3)2,-(ch2)mc(ch3)3,-(ch2)mn[(ch2)nch3]2,-(ch2)mo(ch2)nch3,-(ch2)mo(ch2)nch(ch3)2,-(ch2)mo(ch2)nc(ch3)3,-(ch2)m(och2ch2)qch3,-(ch2)mco(ch2)nch3,-(ch2)mco(ch2)nch(ch3)2,-(ch2)mco(ch2)nc(ch3)3,-(ch2)mconh(ch2)
p
ch3,-(ch2)mconh(ch2)
p
ch(ch3)2或-(ch2)mconh(ch2)
p
c(ch3)3,m＝0-7,n＝0
–
7,p＝1-7,q＝1-5；
[0018]
极性基团为-(ch2)mcooh,-(ch2)mch(ch3)cooh,-(ch2)moh,-(ch2)mch(ch3)oh,-(ch2)m(och2ch2)qoch3,-(ch2)mc6h4oh,-(ch2)mn[(ch2)ncooh]2,-(ch2)mn[(ch2)
p
oh]2,-(ch2)mo(ch2)ncooh,-(ch2)mo(ch2)
p
oh,-(ch2)m(och2ch2)qoh,-(ch2)mco(ch2)ncooh,-(ch2)mco(ch2)noh或氨基酸衍生物,m＝1-7,n＝1-7,p＝2-7,q＝1-5。
[0019]
根据权利要求2中提及的氨基酸衍生物，该氨基酸衍生物为：-(ch2)mconh(ch2)ncooh,-(ch2)mconhch(ch3)cooh,-(ch2)mconh(ch2)nco(ch2)
p
cooh,-(ch2)mconhch[ch(ch3)2]cooh,-(ch2)mconhch[ch2ch(ch3)2]cooh,-(ch2)mconhch[ch(ch3)ch2ch3]cooh,-(ch2)mconhch(ch2c6h5)cooh,-(ch2)mcon[(ch2)ncooh]2,-(ch2)mconhch(cooh)ch2cooh,m＝1-7,n＝1-7,p＝1-4。
[0020]
根据权利要求1所述的一类新型中介二苯基萘并卟吩化合物及其氨基酸缩合物(i)，其特征在于该类化合物中包括如下化合物：
[0021]
5,15-二[3,5-二(羧甲氧基)苯基]萘并卟吩(i1)；
[0022]
5,15-二[3,5-二(羧丙氧基)苯基]萘并卟吩(i2)；
[0023]
5,15-二[3,5-二(羧丁氧基)苯基]萘并卟吩(i3)；
[0024]
5,15-二[3,5-二(羧戊氧基)苯基]萘并卟吩(i4)；
[0025]
5,15-二[3,5-二(羧己氧基)苯基]萘并卟吩(i5)；
[0026]
5,15-二[3,5-二(2-羟乙氧基)苯基]萘并卟吩(i6)；
[0027]
5,15-二[3,5-二(2-(2-羟乙氧基)乙氧基)苯基]萘并卟吩(i7)；
[0028]
5,15-二[3,5-二(2-(2-(2-羟乙氧基)乙氧基)乙氧基)苯基]萘并卟吩(i8)；
[0029]
5,15-二[3,5-二(2-(2-(2-(2-羟乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)苯基]萘并卟吩(i9)；
[0030]
5,15-二[3,5-二(2-甲氧乙氧基)苯基]萘并卟吩(i
10
)；
[0031]
5,15-二[3,5-二(2-(2-甲氧乙氧基)乙氧基)苯基]萘并卟吩(i
11
)；
[0032]
5,15-二[3,5-二(2-(2-(2-甲氧乙氧基)乙氧基)乙氧基)苯基]萘并卟吩(i
12
)；
[0033]
5,15-二[3,5-二(2-(2-(2-(2-甲氧乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)苯基]萘并卟吩(i
13
)；
[0034]
5,15-二[3,5-二(甲氧基)-4-羧甲氧基苯基]萘并卟吩(i
14
)；
[0035]
5,15-二[3,5-二(甲氧基)-4-羧丙氧基苯基]萘并卟吩(i
15
)；
[0036]
5,15-二[3,5-二(甲氧基)-4-羧丁氧基苯基]萘并卟吩(i
16
)；
[0037]
5,15-二[3,5-二(甲氧基)-4-羧戊氧基苯基]萘并卟吩(i
17
)；
[0038]
5,15-二[3,5-二(乙氧基)-4-羧甲氧基苯基]萘并卟吩(i
18
)；
[0039]
5,15-二[3,5-二(乙氧基)-4-羧丙氧基苯基]萘并卟吩(i
19
)；
[0040]
5,15,-二[3,5-二(乙氧基)-4-羧丁氧基苯基]萘并卟吩(i
20
)；
[0041]
5,15-二[3,5-二(乙氧基)-4-羧戊氧基苯基]萘并卟吩(i
21
)；
[0042]
5,15-二[3,5-二(丙氧基)-4-羧甲氧基苯基]萘并卟吩(i
22
)；
[0043]
5,15-二[3,5-二(丙氧基)-4-羧丙氧基苯基]萘并卟吩(i
23
)；
[0044]
5,15-二[3,5-二(丙氧基)-4-羧丁氧基苯基]萘并卟吩(i
24
)；
[0045]
5,15-二[3,5-二(丙氧基)-4-羧戊氧基苯基]萘并卟吩(i
25
)；
[0046]
5,15-二[3,5-二(叔丁基)-4-羧甲氧基苯基]萘并卟吩(i
26
)；
[0047]
5,15-二[3,5-二(叔丁基)-4-羧丙氧基苯基]萘并卟吩(i
27
)；
[0048]
5,15-二[3,5-二(叔丁基)-4-羧丁氧基苯基]萘并卟吩(i
28
)；
[0049]
5,15-二[3,5-二(叔丁基)-4-羧戊氧基苯基]萘并卟吩(i
29
)；
[0050]
5,15-二[3,5-二(甲氧基)-4-(2-羟乙氧基)苯基]萘并卟吩(i
30
)；
[0051]
5,15-二[3,5-二(甲氧基)-4-(2-(2-羟乙氧基)乙氧基)苯基]萘并卟吩(i
31
)；
[0052]
5,15-二[3,5-二(甲氧基)-4-(2-(2-(2-羟乙氧基)乙氧基)乙氧基)苯基]萘并卟吩(i
32
)；
[0053]
5,15-二[3,5-二(甲氧基)-4-(2-甲氧乙氧基)苯基]萘并卟吩(i
33
)；
[0054]
5,15-二[3,5-二(甲氧基)-4-(2-(2-甲氧乙氧基)乙氧基)苯基]萘并卟吩(i
34
)；
[0055]
5,15-二[3,5-二(甲氧基)-4-(2-(2-(2-甲氧乙氧基)乙氧基)乙氧基)苯基]萘并卟吩(i
35
)；
[0056]
5,15-二[4-((羧甲基)氨基甲酰基)苯基]萘并卟吩(i
36
)；
[0057]
5,15-二[4-((1-羧乙基)氨基甲酰基)苯基]萘并卟吩(i
37
)；
[0058]
5,15-二[4-((2-羧乙基)氨基甲酰基)苯基]萘并卟吩(i
38
)；
[0059]
5,15-二[4-((3-羧丙基)氨基甲酰基)苯基]萘并卟吩(i
39
)；
[0060]
5,15-二[4-((4-羧丁基)氨基甲酰基)苯基]萘并卟吩(i
40
)；
[0061]
5,15-二[4-((5-羧戊基)氨基甲酰基)苯基]萘并卟吩(i
41
)；
[0062]
5,15-二[4-(((二羧基)甲基)氨基甲酰基)苯基]萘并卟吩(i
42
)；
[0063]
5,15-二[4-((n-(1-羧基-2-苯基)乙基)氨基甲酰基)苯基]萘并卟吩(i
43
)；
[0064]
5,15-二[4-((n-(1,2-二羧基)乙基)氨基甲酰基)苯基]萘并卟吩(i
44
)；
[0065]
5,15-二[4-((n-(1,3-二羧基)丙基)氨基甲酰基)苯基]萘并卟吩(i
45
)；
[0066]
5,15-二[4-((n-(1-羧基2-羟基)乙基)氨基甲酰基)苯基]萘并卟吩(i
46
)；
[0067]
5,15-二[n,n-二(羧甲基)氨基甲酰基)苯基]萘并卟吩(i
47
)；
[0068]
5,15-二[n,n-二(2-羧乙基)氨基甲酰基)苯基]萘并卟吩(i
48
)；
[0069]
5,15-二[n,n-二(3-羧丙基)氨基甲酰基)苯基]萘并卟吩(i
49
)；
[0070]
5,15-二[n,n-二(4-羧丁基)氨基甲酰基)苯基]萘并卟吩(i
50
)；
[0071]
5,15-二[n,n-二(5-羧戊基)氨基甲酰基)苯基]萘并卟吩(i
51
)。
[0072]
本发明首次制备了所述的新的中介二苯基萘并卟吩衍生物(i)，具有新颖性。
[0073]
本发明所述的中介二苯基萘并卟吩衍生物(i)，具有光动力活性高、皮肤光毒副作用小、性质稳定、亲水性好、不易聚集、易于配成注射剂优点，此外还在多个波段对多种波长光有强吸收从而可开展肿瘤等疾病的个性化治疗等优点，克服了现有光敏化合物与光敏药物中存在的组成复杂、结构不稳定、制备困难、成本较高，易聚集、亲水性较差、皮肤光毒副作用大、难以开展个性化治疗等缺陷，具有实质性的进步，具有创造性。
[0074]
本发明所述的中介二苯基萘并卟吩衍生物(i)具有显著的光动力活性、皮肤光毒副作用小，可作为肿瘤、视网膜黄斑变性、光化性角化病、鲜红斑痣、尖锐湿疣等疾病的个性化光动力诊疗药物，具有实用性。
[0075]
具体制备方案：
[0076]
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明讲授的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本技术所附权利要求书所限定的范围。
[0077]
一般制备方法：
[0078][0079]
r3和r4为含酯基或乙酰基保护基的r1和r2衍生物。
[0080]
步骤(i)中，将化合物ⅱ与二[4,9-二氢-2h-苯并[f]异吲哚-1-基]甲烷溶于二氯甲烷，氮气保护下逐滴滴加催化量的三氟乙酸，室温搅拌反应，tlc监测原料消失产物生成，加入二氯二氰基苯醌和三乙胺，继续搅拌反应，tlc监测氧化完全。减压蒸除溶剂，所得残留物柱层析分离纯化得到墨绿色粉末(ⅲ)。
[0081]
步骤(
ⅱ
)中，将化合物(ⅲ)溶于四氢呋喃和甲醇混合溶液中，加入氢氧化钾水溶液，反应混合物在氮气气氛下回流搅拌。反应液冷却至室温，减压蒸除有机溶剂后，残留物用水稀释，用稀盐酸调节ph至5-6。减压过滤收集滤饼，对滤饼进行真空干燥得到墨绿色固体(i)。
[0082]
[实施例1]
[0083]
5,15-二[3,5-二(羧甲氧基)苯基]萘并卟吩(i1)
[0084][0085]ⅱ(0.31g,1.71mmol)和二(4,9-二氢-2h-苯并[f]异吲哚-1-基)甲烷(0.6g,1.71mmol)溶于二氯甲烷(150ml)，氮气保护下逐滴滴加三氟乙酸(39.0mg,0.34mmol)，室温搅拌反应1小时。加入ddq(0.582g,2.57mmol)，继续搅拌反应1小时，浓缩干后加入甲苯(30ml)和ddq(0.77g,3.42mmol)回流反应0.5h。减压蒸除溶剂，所得残留物柱层析分离(洗脱剂为二氯甲烷)纯化得到墨绿色粉末ⅲ(0.71g，64.8％)。1h nmr(600mhz,cdcl3)δ:10.82(s,2h),9.79(s,2h),8.78-8.11(m,8h),7.71(s,12h),7.46(d,j＝2.3hz,4h),4.81(s,8h),4.08(q,j＝7.3hz,8h),1.07(t,j＝7.1hz,12h).hrms(maldi-tof):(m/z)calced for c
80h62
n4o
12
1270.4359；found,1270.4410.
[0086]
萘并卟吩ⅲ(0.3g,0.023mmol)溶解于thf/meoh(20ml,v
thf
/v
meoh
＝1/1)，然后加入koh溶液(4mol/l,8ml)，反应混合物在氮气气氛下加热回流搅拌3小时，tlc监测反应完全，减压移除有机溶剂，加入水(30ml)，用稀盐酸溶液(2mol/l)调节ph至5-6。抽滤，收集滤饼，真空干燥滤饼得到墨绿色固体ⅰ1
(0.263g，96.2％)。
[0087]1h nmr(600mhz,pyridine-d5)δ:11.55(s,2h),10.53(s,4h),8.56(s,8h),8.23(s,2h),8.15(s,4h),7.79(s,4h),7.62(s,4h),5.35(s,8h),-0.11(s,2h).hrms(maldi-tof):(m/z)calced for c
72h46
n4o
12
1158.3107；found,1158.3150.
[0088]
[实施例2]
[0089]
5,15-二[3,5-二(羧丙氧基)苯基]萘并卟吩(i2)
[0090][0091]
参照化合物i1的合成方法制备了化合物i2。
[0092]1h nmr(600mhz,dmso-d6)δ:8.63(d,j＝7.9hz,8h),8.03(s,8h),7.89-7.77(m,8h),7.71-7.54(m,16h),4.45(t,j＝3.8hz,8h),3.64(t,j＝6.4hz,8h),2.10-1.99(m,8h),
1.87
–
1.76(m,8h).
13
c nmr(151mhz,dmso-d6)δ:161.34,141.58,137.25,132.64,132.41,130.86,129.55,128.05,123.90,116.62,112.75,68.75,61.16,55.44,29.69,26.13.hrms(maldi-tof):(m/z)calced for c
92h78
n4o81366.5814；found,1366.5791.
[0093]
[实施例3]
[0094]
5,15-二[3,5-二(2-羟乙氧基)苯基]萘并卟吩(i6)
[0095][0096]
参照化合物v1的合成方法制备了化合物i6。1h nmr(600mhz,dmso-d6)δ:9.23-7.62(d,j＝542.1hz,23h),7.55(d,j＝20.2hz,8h),4.30(t,j＝5.0hz,8h),3.84(t,j＝5.0hz,8h).
13
cnmr(151mhz,dmso-d6)δ:161.41,133.72,129.11,129.02,128.85,126.46,123.87,121.83,111.95,103.04,75.26,60.80.hrms(maldi-tof):(m/z)calced for c
72h54
n4o81102.3936；found,1102.3950.
[0097]
[实施例4]
[0098]
5,15-二[3,5-二(2-(2-羟乙氧基)乙氧基)苯基]萘并卟吩(i7)
[0099][0100]
参照化合物v1的合成方法制备了化合物i7。1h nmr(600mhz,dmso-d6)δ:8.48(s,12h),7.76(s,12h),7.52(d,j＝19.2hz,8h),4.42(t,j＝6.2hz,8h),3.87(t,j＝4.6hz,8h),3.52(s,16h).
13
c nmr(151mhz,dmso-d6)δ:161.43,133.79,129.16,129.15,128.88,126.50,124.00,122.03,112.15,103.04,73.17,69.59,68.62,60.85.hrms(maldi-tof):(m/z)calced for c
80h70
n4o
12
1278.4985；found,1278.5006.
[0101]
[实施例5]
[0102]
5,15-二[3,5-二(2-(2-甲氧乙氧基)乙氧基)苯基]萘并卟吩(i
11
)
[0103][0104]
参照化合物v1的合成方法制备了化合物i
11
。1h nmr(600mhz,cdcl3)δ:10.81(s,2h),9.80(s,4h),8.38(s,8h),7.78(s,12h),7.46(s,6h),7.26(s,overlap with cdcl3,2h)4.37(s,8h),3.94(s,8h),3.71(t,j＝4.4hz,8h),3.54(t,j＝4.4hz,8h),3.31(s,12h).
13
c nmr(151mhz,cdcl3)δ:161.38,140.32,139.71,139.48,133.55,133.19,130.88,130.03,129.85,129.01,128.01,127.45,126.51,123.24,113.69,112,98,104.34,89.69,71.69,70.41,69.56,67.96,58.76.hrms(maldi-tof):(m/z)calced for c
84h78
n4o
12
1334.5611；found,1334.5603.
[0105]
[实施例6]
[0106]
5,15-二[3,5-二(2-(2-(2-甲氧乙氧基)乙氧基)乙氧基)苯基]萘并卟吩(i
12
)
[0107][0108]
参照化合物v1的合成方法制备了化合物i
12
。
[0109]1h nmr(600mhz,cdcl3)δ:10.71(s,2h overlap with tfa),9.84(s,4h),8.63-8.48(m,4h),8.49-8.29(m,4h),8.23-8.05(m,4h),7.97-7.68(m,13h),7.38(s,2h),4.38(s,8h),3.98(s,8h),3.78(s,8h),3.68(s,8h),3.65(s,8h),3.59(s,9h),3.38(s,12h).
13
c nmr(151mhz,cdcl3)δ:161.31,140.43,140.18,139.65,133.58,133.21,130.87,130.10,129.80,129.01,128.09,127.52,126.54,123.33,113.84,112.92,104.25,89.51,71.50,70.52,70.16,69.80,69.55,67.73,58.52.hrms(maldi-tof):(m/z)calced for c
92h94
n4o
16
1510.6659；found,1510.6708.
[0110]
[实施例7]
[0111]
5,15-二[3,5-二(甲氧基)-4-羧丙氧基苯基]萘并卟吩(i
15
)
[0112][0113]
参照化合物i1的合成方法制备了化合物i
15
。
[0114]1h nmr(600mhz,cdcl3)δ:10.82(s,2h),9.81(s,4h),8.52(d,j＝8.2hz,4h),8.32(s,4h),8.08(d,j＝8.3hz,4h),7.86(t,j＝7.4hz,4h),7.82-7.75(m,8h),4.63(t,j＝5.8hz,4h),3.93(s,12h),3.09(t,j＝7.3hz,4h),2.53-2.41(m,4h)，1.47(s,4h).
13
c nmr(151mhz,cdcl3)δ:180.05,155.11,140.13,139.53,138.93,134.65,133.67,133.34,130.84,130.00,129.14,128.28,127.82,126.35,123.46,113.87,111.36,89.73,73.08,56.66,30.65,25.23.hrms(maldi-tof):(m/z)calced for c
76h58
n4o
10
1186.4147；found,1186.4199.
[0115]
[实施例8]
[0116]
5,15-二[3,5-二(甲氧基)-4-羧丁氧基苯基]萘并卟吩(i
16
)
[0117][0118]
参照化合物i1的合成方法制备了化合物i
16
。
[0119]1h nmr(600mhz,cdcl3)δ:10.83(s,2h),9.82(s,4h),8.53(d,j＝8.2hz,4h),8.33(s,4h),8.08(d,j＝8.2hz,4h),7.87(t,j＝7.2hz,4h),7.80(s,8h),4.60(d,j＝5.7hz,4h),3.93(s,12h),2.84
–
2.73(m,4h),2.28
–
2.19(m,8h),1.44(s,4h).
13
c nmr(151mhz,cdcl3)δ:180.67,155.28,140.33,139.70,139.26,134.75,133.84,133.51,130.98,130.16,129.30,128.45,127.96,126.56,123.63,111.36,56.84,33.84,29.61,21.64.hrms(maldi-tof):(m/z)calced for c
78h62
n4o
10
1214.4461；found,1214.4460.
[0120]
[实施例9]
[0121]
5,15-二[3,5-二(叔丁基)-4-羧丙氧基苯基]萘并卟吩(i
27
)
[0122][0123]
参照化合物i1的合成方法制备了化合物i
27
。
[0124]1h nmr(600mhz,cdcl3)δ:10.84(s,2h),9.81(s,4h),8.54(s,4h),8.42(s,4h),8.23(m,4h),7.89(d,j＝26.4hz,8h),7.77(s,4h),4.41(t,j＝7.1hz,4h),2.76(t,j＝7.3hz,4h),2.31(m,4h),2.15(m,4h),1.61(s,36h).
13
c nmr(151mhz,cdcl3)δ:176.02,151.27,139.86,139.35,138.72,136.37,134.63,133.24,130.94,130.00,129.54,129.07,128.49,127.12,124.94,114.91,112.36,90.12,72.95,57.86,35.52,30.65,29.87,25.23.hrms(maldi-tof):(m/z)calced for c
88h82
n4o61290.6170；found,1290.6229.
[0125]
[实施例10]
[0126]
5,15-二[3,5-二(甲氧基)-4-(2-(2-羟乙氧基)乙氧基)苯基]萘并卟吩(i
31
)
[0127][0128]
参照化合物v1的合成方法制备了化合物i
31
。
[0129]1h nmr(600mhz,cdcl3)δ:10.82(s,2h),9.82(s,4h),8.54(d,j＝8.3hz,4h),8.31(s,4h),8.09(d,j＝8.3hz,4h),7.87(t,j＝7.3hz,4h),7.80(d,j＝8.5hz,8h),4.77
–
4.72(m,4h),4.28
–
4.23(m,4h),4.09
–
4.05(m,4h),4.02
–
3.98(m,4h),3.94(s,12h).
13
c nmr(151mhz,cdcl3)δ:154.81,140.12,139.41,139.00,134.72,133.41,131.69,130.79,130.02,129.13,129.07,128.17,127.71,126.20,123.35,113.85,111.49,89.70.hrms(maldi-tof):(m/z)calced for c
76h62
n4o
10
1190.4460；found,1190.4464.
[0130]
[实施例11]
[0131]
5,15-二[3,5-二(甲氧基)-4-(2-(2-甲氧乙氧基)乙氧基)苯基]萘并卟吩(i
34
)
[0132][0133]
参照化合物v1的合成方法制备了化合物i
34
。
[0134]1h nmr(600mhz,cdcl3)δ:10.83(s,2h),9.81(s,4h),8.52(s,4h),8.32(s,4h),8.07(s,4h),7.77(s,12h),4.74(t,j＝4.9hz,4h),4.24(t,j＝4.9hz,4h),4.03
–
3.98(m,4h),3.93(s,12h),3.81
–
3.76(m,4h),3.50(s,6h).
13
c nmr(151mhz,cdcl3)δ:155.17,140.27,139.63,139.46,134.75,133.74,133.39,131.05,130.20,129.21,128.26,127.80,126.47,125.62,123.44,114.09,111.50,89.86,72.14,70.89,70.69,59.08,56.81.hrms(maldi-tof):(m/z)calced for c
78h66
n4o
10
1218.4773；found,1218.4738.
[0135]
[实施例12]
[0136]
5,15-二[4-((3-羧丙基)氨基甲酰基)苯基]萘并卟吩(i
39
)
[0137][0138]
参照化合物i1的合成方法制备了化合物i
39
。
[0139]1hnmr(600mhz,pyridine-d5)δ:10.77-10.54(m,2h),10.02(d,j＝4.9hz,4h),8.97-8.91(m,4h),8.52(d,j＝9.0hz,4h),8.18(d,j＝8.7hz,3h),7.99(s,4h),7.96(s,8h),7.78(t,j＝7.7hz,4h),7.65(d,j＝7.3hz,4h),4.29-4.04(m,4h),2.94(t,j＝7.9hz,4h),2.53(t,j＝7.6hz,4h),-1.11(s,2h).hrms(maldi-tof):(m/z)calced for c
74h52
n6o61120.3948；found,1120.39467.
[0140]
[实施例13]
[0141]
5,15-二[4-((n-(1,3-二羧基)丙基)氨基甲酰基)苯基]萘并卟吩(i
45
)
[0142][0143]
参照化合物i1的合成方法制备了化合物i
45
。1h nmr(600mhz,pyridine-d5)δ:10.20(d,j＝8.0hz,2h),10.10(s,2h),9.78(s,4h),8.72(s,4h),8.55(d,j＝8.2hz,4h),8.03(d,j＝8.2hz,4h),7.89(d,j＝4.5hz,4h),7.86(s,4h),7.84(s,2h),7.72(t,j＝7.3hz,4h),5.87(td,j＝8.7,5.2hz,2h),3.27(t,j＝7.4hz,4h),3.14(dt,j＝12.9,7.2hz,2h),2.94(dq,j＝14.1,7.6hz,2h),1.75(s,2h).
13
c nmr(151mhz,pyridine-d5)δ:175.79,175.35,168.19,144.41,140.47,138.79,136.70,136.22,134.13,132.86,132.54,132.10,130.14,128.99,126.52,126.27,123.60,122.94,120.26,113.25,91.00,54.07,32.00,28.18.hrms(maldi-tof):(m/z)calced for c
76h52
n6o
10
1208.3745；found,1208.3738.
[0144]
[实施例14]
[0145]
5,15-二[n,n-二(羧甲基)氨基甲酰基)苯基]萘并卟吩(i
47
)
[0146][0147]
参照化合物i1的合成方法制备了化合物i
47.
[0148]1h nmr(600mhz,cdcl3)δ:10.81(s,2h),9.80(s,4h),8.69(d,j＝7.6hz,4h),8.51(d,j＝8.1hz,4h),8.22(d,j＝7.5hz,4h),8.08(s,4h),7.98(d,j＝8.4hz,4h),7.86(s,4h),7.77(d,j＝8.8hz,4h),4.77(s,4h),4.70(s,5h).
13
c nmr(125mhz,cdcl3)δ:175.99,150.26,141.81,133.09,132.78,132.05,131.65,130.99,129.44,128.96,128.14,126.82,125.09,124.63,121.18,120.25,118.64,114.00,94.19,48.81,31.03,21.06.hrms(maldi-tof):(m/z)calced for c
74h48
n6o
10
1180.3432；found,1180.3461.
[0149]
[实施例15]
[0150]
5,15-二[n,n-二(3-羧丙基)氨基甲酰基)苯基]萘并卟吩(i
49
)
[0151][0152]
参照化合物i1的合成方法制备了化合物i
49
。
[0153]1h nmr(600mhz,cdcl3)δ:10.56(s,2h),9.77(s,2h),8.65-8.42(m,6h),8.13(d,j＝10.3hz,2h),8.07-7.78(m,15h),7.74(t,j＝7.4hz,3h),7.58(t,j＝8.0hz,2h),7.32(t,j＝7.2hz,2h),7.21(d,j＝7.3hz,2h),7.00(d,j＝8.0hz,2h),3.95(t,j＝6.5hz,8h),2.67(t,j＝6.1hz,8h),2.32-2.25(m,8h).hrms(maldi-tof):(m/z)calced for c
80h64
n6o81236.4786；found,1236.4771.
[0154]
[实施例16]
[0155]
紫外-可见光吸收光谱的测定
[0156]
避光条件下将代表性化合物i1溶解于二甲基亚砜(dmso)配制为待测液，取3ml待测液置于石英比色皿中，于紫外-可见光分光光度计下检测300-800nm的吸收光谱。实验结果表明化合物i1在417nm、445nm、475nm、655nm、713nm、730nm处有吸收峰，对应的摩尔吸光系数ε分别为8.84、10.35、20.31、2.47、18.07、11.70
×
104l
·
mol-1
·
cm-1
，相较于海姆泊芬，最大吸收波长红移了近100nm且吸收强度有所增强，表明新合成的中介二苯基萘并卟吩衍生物吸收峰所对应波长的光源能穿透更深层次的组织，有利于更好地发挥光动力治疗效果；并且新合成的化合物在450-800nm处有多个吸收峰，可根据肿瘤等病灶的实际体积大小与所在位置选择波长合适的激光光源进行光动力治疗，实现个性化治疗。
[0157]
[实施例17]
[0158]
mtt法测定光敏剂抗肿瘤增殖实验
[0159]
受试细胞：
[0160]
人食管癌细胞eca-109。
[0161]
光源：
[0162]
xd-730ab型激光器；sd2490型激光功率测量仪。
[0163]
受试化合物：
[0164]
5,15-二[3,5-二(羧甲氧基)苯基]萘并卟吩(i1)、5,15-二[3,5-二(羧丙氧基)苯基]萘并卟吩(i2)、5,15-二[3,5-二(2-羟乙氧基)苯基]萘并卟吩(i6)、5,15-二[3,5-二(2-(2-甲氧乙氧基)乙氧基)苯基]萘并卟吩(i
11
)、5,15-二[3,5-二(甲氧基)-4-羧丙氧基苯基]萘并卟吩(i
15
)、5,15-二[3,5-二(甲氧基)-4-羧丁氧基苯基]萘并卟吩(i
16
)、5,15-二[3,5-二(甲氧基)-4-(2-(2-甲氧乙氧基)乙氧基)苯基]萘并卟吩(i
34
)、5,15-二[4-((3-羧丙基)氨基甲酰基)苯基]萘并卟吩(i
39
)、5,15-二[4-((n-(1,3-二羧基)丙基)氨基甲酰基)苯基]萘并卟吩(i
45
)、5,15-二[n,n-二(羧甲基)氨基甲酰基)苯基]萘并卟吩(i
47
)、5,15-二[n,n-二(3-羧丙基)氨基甲酰基)苯基]萘并卟吩(i
49
)；及5,15-二[(3,5-二叔丁基)苯基]萘并卟
吩(对照化合物1)，海姆泊芬(对照药物)。
[0165]
光动力抗肿瘤细胞增殖作用实验：
[0166]
收集处于对数生长期的细胞，用完全培养基重悬成细胞悬液，接种于96孔板，每孔100μl，置于37℃5％co2培养箱培养，24小时后加入受试化合物；继续培养24小时后进行光照处理(波长730nm，光剂量8j/cm2)并加入培养基继续培养；24小时后进行mtt检测。检测前4小时每孔加入20μl 5mg/ml的mtt，4小时后去除培养液后每孔加入150μldmso，于酶标仪检测od
570
。实验重复三次。实验结果见表1，结果发现受试中介二苯基萘并卟吩类化合物对人食管癌细胞均有抗增殖作用，且光动力活性均显著优于对照化合物1及对照药物海姆泊芬。
[0167]
表1新化合物对eca-109人食管癌细胞增殖抑制作用
[0168][0169]
与对照药海姆泊芬相比，*p《0.05，**p《0.01，***p《0.001；
[0170]
与对照化合物1相比，
δ
p《0.05，
δδ
p《0.01，
δδδ
p《0.001。
[0171]
[实施例18]
[0172]
光敏剂对小鼠皮肤光毒性评价实验
[0173]
受试动物：昆明小鼠，5周龄(22
±
2g)。
[0174]
光源：230v
·
e27/es欧司朗模拟太阳光灯；yk-pdt-300型功率密度计。
[0175]
受试药物：
[0176]
5,15,-二[3,5-二(羧甲氧基)苯基]萘并卟吩(i1)、5,15,-二[3,5-二(羧丙氧基)苯基]萘并卟吩(i2)、5,15,-二[3,5-二(2-羟乙氧基)苯基]萘并卟吩(i6)、5,15,-二[3,5-二(甲氧基)-4-(2-(2-甲氧乙氧基)乙氧基)苯基]萘并卟吩(i
34
)、5,15-二[4-((3-羧丙基)氨基甲酰基)苯基]萘并卟吩(i
39
)、5,15-二[4-((n-(1,3-二羧基)丙基)氨基甲酰基)苯基]萘
并卟吩(i
45
)、5,15-二[n,n-二(羧甲基)氨基甲酰基)苯基]萘并卟吩(i
47
)、5,15-二[n,n-二(3-羧丙基)氨基甲酰基)苯基]萘并卟吩(i
49
)；及光敏素ii、海姆泊芬(对照药物)。
[0177]
小鼠模型皮肤光毒性评价实验：
[0178]
将小鼠随机分组，6只为一组，雌雄各半，实验前24小时将小鼠背部毛发剃除。使用5％水合氯醛经腹腔注射麻醉小鼠并将其俯卧固定，各组给予受试药物1次性尾部静脉，注射剂量为10mg/kg，给药后4小时接受置于光源下45cm处经模拟太阳光照射10分钟,光照强度为10mw/cm2。小鼠照光后严格避光，照射后观察并记录动物的生理情况。24小时后将小鼠颈椎脱臼法处死，用8毫米打孔器取背部皮肤，电子分析天平称重，计算背部皮指数，其中背部皮指数＝背部皮肤重量(mg)/体重(g)
×
100。受试药物组的背皮指数与对照组的背部皮指数差异越小表示皮肤光毒性越弱。实验结果见表2，结果发现经受试萘并卟啉化合物处理的小鼠背部皮指数均显著低于光敏素ii及海姆泊芬处理组，表明上述受试化合物均具有较低的光毒副作用。
[0179]
表2化合物对小鼠背部照光区背皮指数计算表
[0180][0181]
与空白对照相比，*p《0.05，**p《0.01，***p《0.001；
[0182]
与对照药物光敏素ii相比，
δ
p《0.05，
δδ
p《0.01，
δδδ
p《0.001；
[0183]
与对照药物海姆泊芬相比，
#
p《0.05，
##
p《0.01，
###
p《0.001。