一种李子采后防控褐腐病的方法

1.本发明属于果蔬采后保鲜技术领域，尤其涉及一种李子采后防控褐腐病的方法。


背景技术：

2.新鲜水果采后腐烂是一个全球性问题，由真菌侵染引起的侵染性病害是主要原因之一。褐腐病，又名菌核病、果腐病、实腐病等，是采后核果果实重要的侵染性病害。对果实褐腐病病菌种类的研究显示，目前来自国内外的褐腐病病原菌分为以下4种：果生链核盘菌、核果链核盘菌、美澳型核果褐腐病菌和串珠霉。病原菌通常从伤口侵入，以伤口为中心在果面形成浅褐色软腐状小斑，随后迅速向四周扩展，最后可扩及全果，在果面生出同心圆排列的白色或褐色线球状颗粒，即病菌的分生孢子层，这是褐腐病的典型症状。目前关于采后果实褐腐病的研究主要集中在桃、樱桃、苹果、李等果实上。
3.李子是我国传统水果之一，其色泽艳丽，风味鲜美、香气浓郁、营养丰富，深受消费者喜爱，具有极高的经济价值。然而，李子成熟于夏季高温季节，果实皮薄汁多、水分含量高，每年约25％～30％果实因极易软化腐烂而损失，严重影响了李果实的贮藏保鲜、运输销售和消费，其中，褐腐病的发生时造成李子果实腐烂的主要原因之一。
4.当前对李果实采后果实处理主要包括物理、化学和生物方法，如物理方法常采用低温贮藏和气调贮藏，然而，低温贮藏易产生冷害，气调贮藏则需要较高的设备成本；化学杀菌剂能够明显抑制李果实褐腐病的发生，但长期使用化学杀菌剂易使病菌产生抗药性，且造成果实残留大量化学药剂；利用拮抗菌进行生物防治也具有良好效果，但需要掌握严格的培养环境，需要专业人员接种。因此，当前需要一种成本低、绿色环保、操作简便，易于广大李树果农应用的李果实采后处理方法，降低李果实采后褐腐病的发生率。


技术实现要素：

5.有鉴于此，本发明的目的在于提供一种李子采后防控褐腐病的方法，通过热处理与天然杀菌剂相结合，能够明显延长李果实贮藏时间，降低褐腐病发生率。
6.为了实现上述发明目的，本发明提供了以下技术方案：
7.一种李子采后防控褐腐病的方法，将李果实浸入50-55℃热水中热处理2-3min；所述热水中含有金银花叶水提液和艾叶水提液。
8.优选的是，所述热处理温度为52-53℃。
9.优选的是，所述热处理时间为2.5min。
10.优选的是，所述的热水中金银花叶水提液和艾叶水提液的浓度为5-10％；更优选的是所述的热水中金银花叶水提液和艾叶水提液的浓度为8％。
11.优选的是，所述金银花叶水提液和艾叶水提液，制备方法包括以下步骤：
12.按质量比1-2:1-2称取金银花叶和艾叶，8-12倍体积水煎煮20-30min，过滤浓缩至浓度100％；所述浓度100％指：每100g金银花叶和艾叶水提滤液浓缩至100ml。
13.更优选的是，所述金银花叶和艾叶质量比为1:1。
14.更优选的是，所述煎煮后过滤，重复煎煮滤渣2-3次，混合滤液进行浓缩。
15.优选的是，还包括所述李果实采前喷施所述金银花叶水提液和艾叶水提液。
16.优选的是，还包括所述热处理完成后，进行低温贮藏；更优选的是，将李果实晾干，置于0-1℃、相对湿度90-95％低温环境贮藏。
17.相对于现有技术，本发明具有如下有益效果：
18.本发明提供了一种李子采后防控褐腐病的方法，通过热处理，能够抑制李果实褐腐病菌的萌发及生长，还能通过热激蛋白起作用，降低果实的腐烂率；通过金银花叶和艾叶水提液中的抑菌成分，抑制褐腐病菌生长，进一步降低采后李果实的褐腐病发生率。
19.此外，本发明采用热处理和生物来源药剂处理，无化学残留，安全性高，简便有效；艾草适应性强，在我国大面积种植，金银花叶属于加工金银花的副产品，两种天然杀菌剂原料来源广泛，降低了应用成本。
具体实施方式
20.本发明提供了一种李子采后防控褐腐病的方法，包括以下步骤：将李果实浸入50-55℃热水中热处理2-3min；所述热水中含有金银花叶水提液和艾叶水提液。本发明通过热处理与天然杀菌剂相结合处理李果实，能够明显抑制褐腐病菌的生长，降低褐腐病的发生率。
21.热处理是利用热力杀死或钝化李果实上的病原菌，同时果实采后某些代谢过程，以达到保鲜的效果。热处理温度低，对病原菌的灭杀力度不够，保鲜效果不明显；热处理温度过高，会对果实造成烫伤，影响品质，并对保鲜造成负面影响。本发明优选热处理温度为52-53℃；进一步优选热处理温度为53℃。优选热处理时间为2.5min。
22.本发明优选热水中金银花叶水提液和艾叶水提液的浓度为5-10％；进一步优选金银花叶水提液和艾叶水提液的浓度为8％。金银花叶和艾叶中所含有的抑菌成分，能够明显抑制李果实褐腐病菌的生长，继而避免采后褐腐病的发生。
23.本发明优选所述金银花叶水提液和艾叶水提液，制备方法包括以下步骤：按质量比1-2:1-2称取金银花叶和艾叶，8-12倍体积水煎煮20-30min，过滤浓缩至浓度100％；所述浓度100％指：每100g金银花叶和艾叶水提滤液浓缩至100ml。作为一种可实施方式，在煎煮前，清除金银花叶、艾叶中带有的杂质。本发明进一步优选金银花叶和艾叶质量比为1:1；更进一步优选10倍体积水煎煮25min。
24.进一步优选煎煮后过滤，重复煎煮滤渣2-3次，混合滤液进行浓缩；更优选过滤煎煮3次，过滤筛网为10-25目。
25.本发明优选在李果实采收前，提前喷施喷施上述金银花叶水提液和艾叶水提液；进一步优选金银花叶水提液和艾叶水提液的浓度为5-10％；更优选金银花叶水提液和艾叶水提液的浓度为8％。作为可实施方式，所述喷施时溶剂为自来水、或无菌水。进一步优选喷施量以李树叶面及果实表面有水滴但不成股流下。在李果实采前喷施杀菌溶液，可提前杀灭一部分在果园期间侵染携带的的褐腐病病原菌，利于李果实后续处理及贮藏。
26.本发明热处理和天然杀菌剂处理李果实，能够降低采后李果实褐腐病的发明，但如若要进行长期保鲜，仍需低温贮藏或气调贮藏。本发明优选热处理完成后，进行低温贮藏，进一步优选将李果实晾干(使李果实留有天然杀菌成分)，置于0-1℃、相对湿度90-95％
低温环境贮藏。
27.下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
28.实施例1
29.一种李子采后防控褐腐病的方法，包括以下步骤：
30.1)采集李果实前，以无菌水为溶剂，配制质量浓度8％的金银花叶和艾叶水提物溶液，利用喷雾器向李树喷施，至叶面及果实表面有水滴但不成股流下；
31.2)利用自来水或蒸馏水冲洗采摘的李果实，去除表面杂质；
32.3)选择干净、无杂质的金银花叶和艾叶，按质量比1:1混合，10倍体积水煎煮25min，20目网筛过滤得滤渣，滤渣再次加水至10倍体积煎煮25min，重复3次，将滤液混合；文火浓缩至浓度100％(每100g金银花叶和艾叶混合物浓缩成100ml水提液)；
33.4)在金银花叶和艾叶水煎煮液中加水稀释，至金银花叶和艾叶水提物浓度为8％；
34.5)控制步骤3)水提液温度为53℃，将采后的李果实浸泡2.5min；
35.6)浸泡完成后，捞出李果实，置于阴凉处晾干(切记勿擦干)；
36.7)将晾干李果实置于0-1℃、相对湿度90-95％的冷库中低温贮藏。
37.实施例2
38.一种李子采后防控褐腐病的方法，包括以下步骤：
39.1)利用自来水或蒸馏水冲洗采摘的李果实，去除表面杂质；
40.2)选择干净、无杂质的金银花叶和艾叶，按质量比2:1混合，8倍体积水煎煮30min，过滤的滤渣，再次加水至8倍体积煎煮30min，重复2次，将滤液混合；文火浓缩至浓度100％(每100g金银花叶和艾叶混合物浓缩成100ml水提液)；
41.3)在金银花叶和艾叶水煎煮液中加水稀释，至金银花叶和艾叶水提物浓度为5％；
42.4)控制步骤3)水提液温度为50℃，将采后的李果实浸泡3min；
43.5)浸泡完成后，捞出李果实，置于阴凉处晾干(切记勿擦干)；
44.6)将晾干李果实置于0-1℃、相对湿度90-95％的冷库中低温贮藏。
45.实施例3
46.一种李子采后防控褐腐病的方法，包括以下步骤：
47.1)采集李果实前，以无菌水为溶剂，配制质量浓度10％的金银花叶和艾叶水提物溶液，利用喷雾器向李树喷施，至叶面及果实表面有水滴但不成股流下；
48.2)利用自来水或蒸馏水冲洗采摘的李果实，去除表面杂质；
49.3)选择干净、无杂质的金银花叶和艾叶，按质量比1:2混合，12倍体积水煎煮20min，过滤的滤渣，再次加水至12倍体积煎煮20min，重复3次，将滤液混合；文火浓缩至浓度100％(每100g金银花叶和艾叶混合物浓缩成100ml水提液)；
50.4)在金银花叶和艾叶水煎煮液中加水稀释，至金银花叶和艾叶水提物浓度为10％；
51.5)控制步骤3)水提液温度为55℃，将采后的李果实浸泡2min；
52.6)浸泡完成后，捞出李果实，置于阴凉处晾干(切记勿擦干)；
53.7)将晾干李果实置于0-1℃、相对湿度90-95％的冷库中低温贮藏。
54.对比例1
55.与实施例1相同，区别在于仅进行热处理。
56.对比例2
57.与实施例1相同，区别在于仅利用金银花叶水提物和艾叶水提物浸泡。
58.实施例4
59.不同处理对李果实褐腐病发生率的影响
60.供试李果实采收于贵州省贵阳市果园，采后剔除病果、伤果、畸形果，挑选饱满，无病虫害，大小均一，成熟度一致的成熟新鲜李果实，用质量份数1.5％次氯酸钠溶液浸泡2min，用自来水冲洗3次，在室温条件下晾干备用。
61.褐腐病病原菌为果生链核盘菌(moniliniafructicola)，分离自典型发病李果实。取上述病原菌，于26℃在马铃薯葡萄糖琼脂培养基(pda)上培养6d，在无菌环境下，用无菌水配制成孢子悬浮液(1
×
105个孢子/ml)。
62.用打孔器将李果实打孔，每个果实刺两个孔(果实腰部)，接10μl的1
×
105个孢子/ml褐腐病孢子悬浮液，然后将接种褐腐病孢子悬浮液的李果实分别进行实施例1、对比例1、对比例2和空白对照(不做任何处理，仅置于0-1℃、相对湿度90-95％的冷库中低温贮藏)处理，60d后统计发病率。每组处理15个果实，3次重复。
63.发病率＝果实发病孔数/果实总孔数
×
100％
64.结果如下：
65.表1不同处理对李果实褐腐病发生率的影响
66.处理组实施例1对比例1对比例2空白对照发病率/％8.89
±
0.7840.00
±
0.4357.78
±
0.5791.11
±
0.69防治效果/％90.24
±
0.9256.09
±
0.6936.58
±
0.86——
67.根据表1可以看出，仅通过低温贮藏，接种褐腐病菌的李果实在保存60d后基本大部分已经发病，热处理和天然杀菌剂处理能够较好的起到延长贮藏时间的效果，明显降低了李果实褐腐病的发病率。热处理和天然杀菌剂联合对李果实进行处理，其对褐腐病菌的抑制效果明显优于热处理或天然杀菌剂单独处理，防治效果达到90％以上。
68.实施例5
69.不同药材提取物对李果实褐腐病菌抑制的影响
70.褐腐病病原菌的来源及培养同实施例4。
71.配制天然杀菌剂：金银花叶水提液杀菌剂、艾叶水提液杀菌剂和金银花叶与艾叶1:1配比水提物杀菌剂。
72.杀菌剂制备方法如下：取100g干净、无杂质的中药材料，加入10倍体积水煎煮25min，过滤得滤渣，重复加水、煎煮、过滤3次，混合滤液，文火煎煮浓缩至水提液100ml，冷却备用。
73.将杀菌剂水提液稀释10倍，即稀释成每毫升含生药0.1g的母液，吸取一定量融化的培养基移至培养皿中，使母液与培养基混合均匀，把褐腐病病原菌菌块接种到已凝固的培养基中心，置于25℃人工培养箱中培养。以无菌水作为对照，每个处理重复3次，3d后测量菌落直径，计算抑制率。
74.抑制率＝(对照菌落直径-处理菌落直径)/对照菌落直径
×
100％
75.结果如下：
76.表2不同药材提取物对李果实褐腐病菌体外抑制的影响
77.处理金 艾金艾ck抑制率％94.04
±
1.0870.06
±
1.1267.41
±
1.29——
78.根据表2可以看出，由于金银花叶和艾叶中存在抑菌成分，能够对果生链核盘菌进行有效抑制，金银花叶和艾叶联合应用，其对果生链核盘菌的抑制效果优于单种天然杀菌剂。金银花叶、艾叶来源广泛，含有的天然杀菌剂对李果实无负面影响，易冲洗，方便人们食用。
79.以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。