一种海藻液及其海藻肥的制备方法与流程

1.本发明涉及一种海藻液及其海藻肥的制备方法。


背景技术：

2.目前海藻液采用酶提取海藻多糖，通常为了使提取最大化，通常采用纤维素酶和糖化酶联合依次分步提取，先有纤维素酶溶解海藻的细胞壁，对使细胞內溶物溶出，并针对β-1,4糖苷键进行水解；然后采用糖化酶进行针对α-1，4-和α-1，6-配糖键进行水解，以提高提取液中海藻多糖的含量，由于纤维素酶和糖化酶的酶活条件不同，且在糖化酶提取的是依托纤维素酶的酶解使海藻细胞內溶物溶出而进行的，如果将纤维素酶和糖化酶同时进行提取，随着提取时间的延长酶活大幅降低，要保证酶活就需要添加大量的酶，且还存在了提取不完全的问题，这就给企业造成了生产成本的提高，而分步依次提取，则存在了提取时间长，生产效率低的问题。如，我公司之前申请的发明专利，专利号为cn112538511a 一种海藻液的提取方法，即采用了分步依次进行纤维素酶提取和糖化酶提取的工艺，虽然相对提取较完全，但存在了提取时间长，生产效率低的问题。
3.目前尚未有既可以不增加酶的加入量，又可以提高海藻多糖的提取效率，且不影响海藻多糖的提取率。在改变提取方法的同时，制备出的海藻液不应该影响肥效。


技术实现要素：

4.本发明提供一种海藻液及其海藻肥的制备方法，解决技术问题是1）不增加酶的加入量，提高提取效率，且提取完全；2）在改变提取方法的同时，制备出的海藻液不应该影响肥效。
5.为了解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案：一种海藻液的制备方法，将海藻和混合酶加入到醋酸醋酸钠缓冲溶液中，经混合酶酶解后，过滤，所得滤液即为海藻液，所述混合酶至少包括糖化酶、纤维素酶和牛血清蛋白；所述海藻、醋酸醋酸钠缓冲溶液和混合酶的质量比是19～39:60～80:0.07～0.5；混合酶中糖化酶、纤维素酶和牛血清蛋白的质量比是1～2:1～2:5～15；所述醋酸醋酸钠缓冲溶液的ph是4.4～6.0；所述海藻是坛紫菜、海带、石花菜和马尾藻中的一种或几种。
6.所述混合酶酶解条件是温度37～50℃，时间6～36h。
7.经混合酶酶解后，还包括灭酶以及灭酶后加入蛋白酶，进行蛋白酶酶解；所述蛋白酶加入量和混合酶加入量的质量比是1:10～20；蛋白酶酶解条件是酶解温度为26～35℃，酶解时间为6～48h；所述灭酶条件是灭酶温度90～120℃，灭酶时间2～5min。
8.蛋白酶酶解后，还包括灭酶；所述灭酶灭酶条件是灭酶温度90～120℃，灭酶时间2～5min。
9.所述蛋白酶酶解还包括酶解前加入氢氧化钠、碳酸钠、碳酸钾或氢氧化钾中的一种，调ph至7.0。
10.所述蛋白酶酶解还包括酶解前向海藻液中通入氮气，至海藻液中氧气含量低于0.2mg/l。
11.所述蛋白酶酶解还包括酶解前向海藻液中通入氮气，至海藻液中氧气含量低于0.2mg/l。
12.海藻液制备海藻肥的制备方法，按照以下步骤进行,将海藻液干燥，即得海藻粉；所述干燥温度不高于85℃；将海藻液或海藻粉加入到肥料或肥料原料中，即得海藻肥；所述肥料是水溶肥、复合肥、复混肥、有机无机肥、生物有机肥、单质肥和有机肥中的一种；所述肥料原料是氯化钾、硫酸钾、尿素、磷酸一铵、磷酸二铵、硫酸铵、氯化铵、磷酸二氢钾、膨润土、硫酸锌、硝铵钙和硝酸钾中的一种或几种。
13.海藻液和肥料或肥料原料的质量比是3～30:70～99；海藻粉和肥料或肥料原料的质量比是1～10:90～99。
14.发明具有以下有益技术效果：1.本技术通过将海藻加入到醋酸醋酸钠缓冲溶液中，并且加入牛血清蛋白，可以提高海藻多糖的提取效率，且能够使海藻多糖提取完全。
15.2.本技术实验发现蛋白酶酶解前，将ph调至7，可以提高蛋白酶酶解液中游离氨基酸的含量。
16.3. 本技术在改变提取方法的同时，制备出的海藻液不影响肥效。
具体实施方式
17.下面结合具体实例进一步说明本发明。
18.实施例1一种海藻液的制备方法，将海藻加入到醋酸醋酸钠缓冲溶液中，经混合酶酶解后，灭酶，过滤，所得滤液即为海藻液，所述混合酶是糖化酶、纤维素酶和牛血清蛋白按照质量比1:1:15的组合物；所述醋酸醋酸钠缓冲溶液的ph是4.8；所述海藻、醋酸醋酸钠缓冲溶液和混合酶的质量比是30:68.1:1.7；所述海藻是坛紫菜。
19.所述混合酶酶解条件为40℃；酶解时间是30h。
20.所述灭酶灭酶条件是温度100℃，时间2min。
21.其中糖化酶的活力是50000u/g，纤维素酶的活力是100000u/g；上述酶采购于诺维信（中国）生物技术有限公司。
22.所述的海藻液制备海藻肥的制备方法，按照以下步骤进行：将海藻液加入到液体水溶肥中，即得液体海藻肥；海藻液和液体水溶肥的质量比是10:90；所述水溶肥是含腐殖酸水溶肥，由尿素、磷酸二氢钾、腐殖酸钾和水按照质量比30:10:5:65组成。
23.实施例2
一种海藻液的制备方法，将海藻加入到醋酸醋酸钠缓冲溶液中，经混合酶酶解后，灭酶，得糖化酶解液，向糖化酶解液中加入木瓜蛋白酶，酶解，灭酶，过滤，所得滤液即为海藻液，所述混合酶是糖化酶、纤维素酶和牛血清蛋白按照质量比1:1:15的组合物；所述醋酸醋酸钠缓冲溶液的ph是4.8；所述海藻、醋酸醋酸钠缓冲溶液和混合酶的质量比是30:68.1:1.7；所述海藻是坛紫菜。
24.所述混合酶酶解条件为40℃；酶解时间是30h。
25.所述蛋白酶加入量和混合酶加入量的质量比是1:17；蛋白酶酶解条件是酶解温度为32℃，酶解时间为24h；所述灭酶灭酶条件是温度100℃，时间2min。
26.其中糖化酶的活力是50000u/g，纤维素酶的活力是100000u/g，木瓜蛋白酶活力是 50000u/g，上述酶采购于诺维信（中国）生物技术有限公司。
27.所述的海藻液制备海藻肥的制备方法，按照以下步骤进行：将海藻液加入到液体水溶肥中，即得液体海藻肥；海藻液和液体水溶肥的质量比是10:90。
28.所述液体水溶肥是含腐殖酸液体水溶肥，由尿素、磷酸二氢钾、腐殖酸钾和水按照质量比30:10:5:65组成。
29.实施例3一种海藻液的制备方法，将海藻加入到醋酸醋酸钠缓冲溶液中，经混合酶酶解后，灭酶，得糖化酶解液，向糖化酶解液中加入5%的氢氧化钠水溶液，调ph至7.0，加入木瓜蛋白酶，酶解，灭酶，过滤，所得滤液即为海藻液，所述混合酶是糖化酶、纤维素酶和牛血清蛋白按照质量比1:1:15的组合物；所述醋酸醋酸钠缓冲溶液的ph是4.8；所述海藻、醋酸醋酸钠缓冲溶液和混合酶的质量比是30:68.1:1.7；所述海藻是坛紫菜。
30.所述混合酶酶解条件为40℃；酶解时间是30h。
31.所述蛋白酶加入量和混合酶加入量的质量比是1:17；蛋白酶酶解条件是酶解温度为32℃，酶解时间为24h；所述灭酶灭酶条件是温度100℃，时间2min。
32.其中糖化酶的活力是50000u/g，纤维素酶的活力是100000u/g，木瓜蛋白酶活力是 50000u/g，上述酶采购于诺维信（中国）生物技术有限公司。
33.所述的海藻液制备海藻肥的制备方法，按照以下步骤进行：将海藻液加入到液体水溶肥中，即得液体海藻肥；海藻液和液体水溶肥的质量比是10:90。
34.所述液体水溶肥是含腐殖酸液体水溶肥，由尿素、磷酸二氢钾、腐殖酸钾和水按照质量比30:10:5:65组成。
35.实施例4一种海藻液的制备方法，将海藻加入到醋酸醋酸钠缓冲溶液中，经混合酶酶解后，灭酶，过滤，所得滤液即为海藻液，所述混合酶是糖化酶、纤维素酶和牛血清蛋白按照质量
比1:1:12的组合物；所述醋酸醋酸钠缓冲溶液的ph是5.2；所述海藻、醋酸醋酸钠缓冲溶液和混合酶的质量比是25:73.5:1.5；所述海藻是海带。
36.所述混合酶酶解条件为47℃；酶解时间是32h。
37.所述灭酶灭酶条件是温度100℃，时间2min。
38.其中糖化酶的活力是50000u/g，纤维素酶的活力是100000u/g，上述酶采购于诺维信（中国）生物技术有限公司。
39.所述的海藻液制备海藻肥的制备方法，按照以下步骤进行：将海藻液在60℃条件下，干燥至水分为1.8%，得海藻粉；将海藻粉加入到水溶肥中，即得海藻肥；海藻粉和水溶肥的质量比是5:95；所述水溶肥是大量元素水溶肥，由尿素、磷酸二氢钾和硫酸钾按照质量比50:20:30组成。
40.实施例5一种海藻液的制备方法，将海藻加入到醋酸醋酸钠缓冲溶液中，经混合酶酶解后，灭酶，得糖化酶解液，向糖化酶解液中加入风味蛋白酶，酶解，灭酶，过滤，所得滤液即为海藻液，所述混合酶是糖化酶、纤维素酶和牛血清蛋白按照质量比1:1:12的组合物；所述醋酸醋酸钠缓冲溶液的ph是5.2；所述海藻、醋酸醋酸钠缓冲溶液和混合酶的质量比是25:73.5:1.5；所述海藻是海带。
41.所述混合酶酶解条件为47℃；酶解时间是32h。
42.所述蛋白酶加入量和混合酶加入量的质量比是1:6；蛋白酶酶解条件是酶解温度为32℃，酶解时间为24h；所述灭酶灭酶条件是温度100℃，时间2min。
43.其中糖化酶的活力是50000u/g，纤维素酶的活力是100000u/g，风味蛋白酶活力是 18400u/g，上述酶采购于诺维信（中国）生物技术有限公司。
44.所述的海藻液制备海藻肥的制备方法，按照以下步骤进行：将海藻液在60℃条件下，干燥至水分为1.8%，得海藻粉；将海藻粉加入到水溶肥中，即得海藻肥；海藻粉和水溶肥的质量比是5:95；所述水溶肥是大量元素水溶肥，由尿素、磷酸二氢钾和硫酸钾按照质量比50:20:30组成。
45.实施例6一种海藻液的制备方法，将海藻加入到醋酸醋酸钠缓冲溶液中，经混合酶酶解后，灭酶，得糖化酶解液，向糖化酶解液中加入碳酸钠调ph至7.0，加入风味蛋白酶，酶解，灭酶，过滤，所得滤液即为海藻液，所述混合酶是糖化酶、纤维素酶和牛血清蛋白按照质量比1:1:12的组合物；所述醋酸醋酸钠缓冲溶液的ph是5.2；所述海藻、醋酸醋酸钠缓冲溶液和混合酶的质量比是25:73.5:1.5；所述海藻是海带。
46.所述混合酶酶解条件为47℃；酶解时间是32h。
47.所述蛋白酶加入量和混合酶加入量的质量比是1:6；蛋白酶酶解条件是酶解温度为32℃，酶解时间为24h。
48.所述灭酶灭酶条件是温度100℃，时间2min。
49.其中糖化酶的活力是50000u/g，纤维素酶的活力是100000u/g，风味蛋白酶活力是 18400u/g，上述酶采购于诺维信（中国）生物技术有限公司。
50.所述的海藻液制备海藻肥的制备方法，按照以下步骤进行：将海藻液在60℃条件下，干燥至水分为1.8%，得海藻粉；将海藻粉加入到水溶肥中，即得海藻肥；海藻粉和水溶肥的质量比是5:95；所述水溶肥是大量元素水溶肥，由尿素、磷酸二氢钾和硫酸钾按照质量比50:20:30组成。
51.实施例7一种海藻液的制备方法，将海藻加入到醋酸醋酸钠缓冲溶液中，经混合酶酶解后，灭酶，过滤，所得滤液即为海藻液，所述混合酶是糖化酶、纤维素酶和牛血清蛋白按照质量比1:2:15的组合物；所述醋酸醋酸钠缓冲溶液的ph是5.4；所述海藻、醋酸醋酸钠缓冲溶液和混合酶的质量比是28:70:2；所述海藻是海带。
52.所述混合酶酶解条件为46℃；酶解时间是34h。
53.所述灭酶灭酶条件是温度100℃，时间2min。
54.其中糖化酶的活力是50000u/g，纤维素酶的活力是100000u/g，上述酶采购于诺维信（中国）生物技术有限公司。
55.所述的海藻液制备海藻肥的制备方法，按照以下步骤进行：将海藻液在60℃条件下，干燥至水分为1.8%，得海藻粉；将2份海藻粉、300份尿素、200份磷酸一铵、300份硫酸钾和200份膨润土通过计量皮带输送到造粒滚筒中，进行造粒，即得海藻肥。
56.实施例8一种海藻液的制备方法，将海藻加入到醋酸醋酸钠缓冲溶液中，经混合酶酶解后，灭酶，得糖化酶解液，向糖化酶解液中加入复合蛋白酶，酶解，灭酶，过滤，所得滤液即为海藻液，所述混合酶是糖化酶、纤维素酶和牛血清蛋白按照质量比1:2:15的组合物；所述醋酸醋酸钠缓冲溶液的ph是5.4；所述海藻、醋酸醋酸钠缓冲溶液和混合酶的质量比是28:70:2；所述海藻是海带。
57.所述混合酶酶解条件为46℃；酶解时间是34h。
58.所述蛋白酶加入量和混合酶加入量的质量比是1:14；蛋白酶酶解条件是酶解温度为32℃，酶解时间为28h。
59.所述灭酶灭酶条件是温度100℃，时间2min。
60.其中糖化酶的活力是50000u/g，纤维素酶的活力是100000u/g，复合蛋白酶活力是 93400u/g，上述酶采购于诺维信（中国）生物技术有限公司。
61.所述的海藻液制备海藻肥的制备方法，按照以下步骤进行：将海藻液在60℃条件下，干燥至水分为1.8%，得海藻粉；
将2份海藻粉、300份尿素、200份磷酸一铵、300份硫酸钾和200份膨润土通过计量皮带输送到造粒滚筒中，进行造粒，即得海藻肥。
62.实施例9一种海藻液的制备方法，将海藻加入到醋酸醋酸钠缓冲溶液中，经混合酶酶解后，灭酶，得糖化酶解液，向糖化酶解液中加入6%的氢氧化钠水溶液调ph至7.0，加入复合蛋白酶，酶解，灭酶，过滤，所得滤液即为海藻液，所述混合酶是糖化酶、纤维素酶和牛血清蛋白按照质量比1:2:15的组合物；所述醋酸醋酸钠缓冲溶液的ph是5.2；所述海藻、醋酸醋酸钠缓冲溶液和混合酶的质量比是28:70:2；所述海藻是海带。
63.所述混合酶酶解条件为46℃；酶解时间是34h。
64.所述蛋白酶加入量和混合酶加入量的质量比是1:14；蛋白酶酶解条件是酶解温度为32℃，酶解时间为28h所述灭酶灭酶条件是温度100℃，时间2min。
65.其中糖化酶的活力是50000u/g，纤维素酶的活力是100000u/g，复合蛋白酶活力是 93400u/g，上述酶采购于诺维信（中国）生物技术有限公司。
66.所述的海藻液制备海藻肥的制备方法，按照以下步骤进行：将海藻液在60℃条件下，干燥至水分为1.8%，得海藻粉；将2份海藻粉、300份尿素、200份磷酸一铵、300份硫酸钾和200份膨润土通过计量皮带输送到造粒滚筒中，进行造粒，即得海藻肥。
67.下面结合实验数据进一步说明本发明的有益效果：供试材料1.1试验地点：由晟丰（烟台）农业科技有限公司委外检测。
68.1.2实验检测：海藻多糖含量（%）。
69.1.3供试材料：对比1（按照专利号cn112661543a 实施例1制备的糖化酶解液）、对比2（除将醋酸醋酸钠缓冲溶液换成水外，其它均与实施例2相同，制备的糖化酶解液）、对比3（除未加入牛血清蛋白外，其它均与实施例2相同，制备的糖化酶解液）、对比4（除将醋酸醋酸钠缓冲溶液换成水，并且不加入牛血清蛋白，酶解依次进行纤维素酶解和糖化酶酶解外，其它均与实施例5相同，其中纤维素酶解条件为ph6 .0，酶解温度为30℃条件，酶解时间10h，糖化酶酶解条件为ph4 .2，酶解温度为60℃，酶解时间22h，每次酶解后都进行灭酶，灭酶条件为温度100℃，时间3min）、对比5（除将醋酸醋酸钠缓冲溶液换成水外，其它均与实施例5相同，制备的糖化酶解液）、对比6（除未加入牛血清蛋白外，其它均与实施例5相同，制备的糖化酶解液）、实施例2制备的糖化酶解液和实施例5制备的糖化酶解液。
70.1.4实验实施：海藻多糖检测采用硫酸-苯酚法。
71.本技术除各处理不同外，其它实施均一致。
72.2结果与分析海藻多糖含量含量见表1表1 对比1对比2对比3对比4对比5对比6实施例2实施例5海藻多糖（%）13.812.310.17.26.45.113.77.7
注：表1中对比1、对比2、对比3
…
分别对应对比1制备的糖化酶解液、对比2制备的糖化酶解液、对比3制备的糖化酶解液
…
；其中坛紫菜含总糖为47.2%；海带含总糖为31.1%。
73.由表1中对比1（提取时间36h）可以看出，采用纤维素酶和糖化酶依次提取，提取36h相对提取较完全；由对比2、对比3和实施例2的数值比较可以看出，醋酸醋酸钠缓冲溶液和牛血清蛋白联合提取，在相同的时间的，本技术实施例2的提取更完全；由对比1和实施例2的数据比较可以看出，本技术实施例2比对比1节约时间6h，提取率基本不变，可见本技术可以提高提取效率。
74.由表1中和对比4（提取时间32h）可以看出，采用纤维素酶和糖化酶依次提取，提取32h存在提取不完全的问题；由对比5、对比6和实施例5的数值比较可以看出，醋酸醋酸钠缓冲溶液和牛血清蛋白联合提取，在相同的时间，本技术实施例5的提取更完全；由对比4和实施例5的数据比较可以看出，本技术实施例5和对比4在提取时间相同的前提下，本技术提取更完全。
75.综上所述，本技术通过加入醋酸醋酸钠缓冲溶液以及牛血清蛋白，可以显著提高提取效率。
76.实验二1.1试验地点：由晟丰（烟台）农业科技有限公司委外检测。
77.1.2实验检测：游离氨基酸总含量（%）。
78.1.3供试材料：实施例2、实施例3、实施例5和实施例6制备的海藻液。
79.1.4检测方法：游离氨基酸含量检测按照gb/t 30987-2014 植物中游离氨基酸的测定 进行检测。
80.本技术除各处理不同外，其它实施均一致。
81.2结果与分析游离氨基酸总含量见表2表2 实施例2实施例3实施例4实施例5游离氨基酸总含量（%）
ꢀꢀ
4.8 6.5 0.41.5由实施例2和实施例3以及实施例4和实施例5的数据可以看出，通过调整糖化酶解液的ph，可以提高游离氨基酸的总含量。这个可能是牛血清蛋白中的羧酸基团与游离氨基酸的氨基进行了重组，从而影响到了游离氨基酸的提取。
82.实验三 1材料与方法：1.1试验地点：栖霞市苏家店镇苏家店村，树龄10年，相邻地块的三亩苹果园，苹果品种为烟富3，每亩栽种苹果树60棵，取其中长势差不多的160棵。
83.1.2实验检测：检测苹果l、a、b、c、h值；果品等级（d≥80mm %），取平均值，检测时间2021年10月24日，此时为苹果摘袋后的第12天。
84.1.3供试材料：对比7（除未加入海藻液外，其它均与实施例2相同）、对比8（除海藻液添加的是cn112538511a实施例1制备的海藻液外，其它均与实施例2相同）、对比9（除未加入海藻液外，其它均与实施例5相同）、对比10（除海藻液添加的是cn112538511a实施例3制备的海藻液外，其它均与实施例5相同）、实施例2、实施例3、实施例5和实施例6制备的水溶
肥。
85.1.4实验方法：将160棵果树以相邻的20棵为一组，分为8组，分别对应对比7（除未加入海藻液外，其它均与实施例2相同）、对比8（除海藻液添加的是按照cn112538511a实施例1制备的海藻液外，其它均与实施例2相同）、对比9（除未加入海藻液外，其它均与实施例5相同）、对比10（除海藻液添加的是cn112538511a实施例3制备的海藻液外，其它均与实施例5相同）、实施例2、实施例3、实施例5和实施例6制备的水溶肥；水溶肥使用为采用微喷，其中，对比7（除未加入海藻液外，其它均与实施例2相同）、对比8（除海藻液添加的是cn112538511a实施例1制备的海藻液外，其它均与实施例2相同）、实施例2和实施例3采用水稀释，稀释倍数为500倍；对比9（除未加入海藻液外，其它均与实施例5相同）、对比10（除海藻液添加的是cn112538511a实施例3制备的海藻液外，其它均与实施例5相同）、实施例5和实施例6采用水稀释，稀释倍数为1000倍；其中，对比7（除未加入海藻液外，其它均与实施例2相同）、对比8（除海藻液添加的是cn112538511a实施例1制备的海藻液外，其它均与实施例2相同）、实施例2和实施例3，每次每个处理使用肥料为10kg；对比9（除未加入海藻液外，其它均与实施例5相同）、对比10（除海藻液添加的是cn112538511a实施例3制备的海藻液外，其它均与实施例5相同）、实施例5和实施例6，每次每个处理使用肥料为5kg。实验实施日期为2021年3月31日至2021年9月15日，实验期间每个处理各处理9次。
86.1.5检测方法：着色采用色差分析仪，在cielab模型中，l代表色彩明暗度，明度与数值成正比，a代表红绿色，b代表黄蓝色，c表示彩度（色彩饱和程度或纯粹度），h表示色调角；采用硬度计进行硬度检测；每个处理随机采摘100个苹果进行测试（要求取样苹果发育正常且无鸟啄），果品等级=某一直径的苹果质量/参与计算的苹果的总质量*100%，其中着色统计直径为（d）75mm～80mm的果；果品等级统计直径（d）大于80mm的果。
87.本实验除实验处理不同外，其它操作均一致。
88.2结果与分析苹果的颜色和果品等级（d≥80mm %）见表3表3
由表2和表3中实施例2和实施例3以及实施例5和实施例6数据可以看出，在蛋白酶酶解前，糖化酶解液ph的调整，既影响了游离氨基酸的提取，又影响到了使用制备的海藻液制备肥料的效果，通过调节ph的实施例3和实施例6具有较好的效果。
89.由对比8和实施例3以及对比10和实施例6的数据可以看出，本技术改变了海藻液的提取方法，但是并未影响其使用效果。

技术特征：
1.一种海藻液的制备方法，将海藻和混合酶加入到醋酸醋酸钠缓冲溶液中，经混合酶酶解后，过滤，所得滤液即为海藻液，其特征在于，所述混合酶至少包括糖化酶、纤维素酶和牛血清蛋白；所述海藻、醋酸醋酸钠缓冲溶液和混合酶的质量比是19～39:60～80:0.07～0.5；混合酶中糖化酶、纤维素酶和牛血清蛋白的质量比是1～2:1～2:5～15；所述醋酸醋酸钠缓冲溶液的ph是4.4～6.0；所述海藻是坛紫菜、海带、石花菜和马尾藻中的一种或几种；所述混合酶酶解条件为温度37～50℃，时间6～36h。2.如权利要求1所述的海藻液的制备方法，其特征在于，经混合酶酶解后，还包括灭酶以及灭酶后加入蛋白酶，进行蛋白酶酶解；所述蛋白酶加入量和混合酶加入量的质量比是1:10～20；蛋白酶酶解条件是酶解温度为26～35℃，酶解时间为6～48h；所述灭酶条件是灭酶温度90～120℃，灭酶时间2～5min。3.如权利要求2所述的海藻液的制备方法，其特征在于，蛋白酶酶解后，还包括灭酶；所述灭酶灭酶条件是灭酶温度90～120℃，灭酶时间2～5min。4.如权利要求2或3所述的海藻液的制备方法，其特征在于，所述蛋白酶酶解还包括酶解前加入氢氧化钠、碳酸钠、碳酸钾或氢氧化钾中的一种，调ph至7.0。5.如权利要求2或3所述的海藻液的制备方法，其特征在于，所述蛋白酶酶解还包括酶解前向海藻液中通入氮气，至海藻液中氧气含量低于0.2mg/l。6.如权利要求4所述的海藻液的制备方法，其特征在于，所述蛋白酶酶解还包括酶解前向海藻液中通入氮气，至海藻液中氧气含量低于0.2mg/l。7.如权利要求1至6任意一项所述的海藻液制备海藻肥的制备方法，其特征在于，按照以下步骤进行：将海藻液干燥，即得海藻粉；所述干燥温度不高于85℃；将海藻液或海藻粉加入到肥料或肥料原料中，即得海藻肥；所述肥料是水溶肥、复合肥、复混肥、有机无机肥、生物有机肥、单质肥和有机肥中的一种；所述肥料原料是氯化钾、硫酸钾、尿素、磷酸一铵、磷酸二铵、硫酸铵、氯化铵、磷酸二氢钾、膨润土、硫酸锌、硝铵钙和硝酸钾中的一种或几种。8.如权利要求7所述的海藻液制备海藻肥的制备方法，其特征在于，海藻液和肥料或肥料原料的质量比是3～30:70～99；海藻粉和肥料或肥料原料的质量比是1～10:90～99。

技术总结
本发明涉及一种海藻液及其海藻肥的制备方法，海藻提取液制备方法为，将海藻加入到醋酸醋酸钠缓冲溶液中，经混合酶酶解后，过滤，所得滤液即为海藻液，其特征在于，所述混合酶至少包括糖化酶、纤维素酶和牛血清蛋白；所述海藻、醋酸醋酸钠缓冲溶液和混合酶的质量比是19～39:60～80:0.01～0.5；混合酶中糖化酶、纤维素酶和牛血清蛋白的质量比是1～2:1～2:5～15；所述醋酸醋酸钠缓冲溶液的pH是4.4～6.0。本申请可以解决糖化酶和纤维素酶酶解海藻制备海藻多糖由于酶解条件不同，为了保证酶活需要分步提取，提取效率慢的问题。提取效率慢的问题。


技术研发人员：董博 姚振领 张芮
受保护的技术使用者：晟丰（烟台）农业科技有限公司
技术研发日：2022.03.08
技术公布日：2022/5/25