一种含有重组人源海绵结构蛋白的组合物的制作方法

1.本发明涉及生物科技技术领域，具体为一种含有重组人源海绵结构蛋白的组合物。


背景技术：

2.重组人源海绵胶原蛋白是基于人体皮肤ⅲ型胶原蛋白的原始基因序列，优化选择其中水溶性强、生物活性高的部分进行密码子优化和拼接重组，得到了全新的重组人源ⅲ型胶原蛋白序列，利用生物发酵技术实现可规模化生产，通过实验证实此胶原蛋白表达量大，水溶性好，生物活性高，其性能优于人天然胶原蛋白，在生物医用材料、美容化妆品、食品保健等领域有着广大的应用前景，在临床使用时，医用大部分止血材料都具有一定的局限性，如止血时间较长、人体容易过敏和对伤口再生无帮助等。
3.如公开号cn101890179a提供了一种水溶性止血材料，主要成分为氧化再生纤维素醚，止血效果显著，但存在强度不足的问题，且体内难以降解，吸收后可能沉积在人体其它器官中。
4.如公开号cn104558675a提供了一种具有止血作用的微纤维胶原海绵，止血效果良好，然而其仅采用物理热交联难以保障产品的结构和质量可控，同时存在免疫原性和动物病毒风险。
5.如公开号cn103432620a提供了一种防粘连止血膜，主要成分为右旋糖酐，交联后采用静电纺丝技术制备，生产工艺相对复杂，成本较高，且未对其作为临床产品需严格要求的生物相容性指标进行评价。
6.为此提出一种含有重组人源海绵结构蛋白的组合物，来解决此问题。


技术实现要素：

7.本发明的目的在于提供一种含有重组人源海绵结构蛋白的组合物，解决了目前医用止血材料止血时间较长、人体容易过敏和对伤口再生无帮助的问题。
8.为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种含有重组人源海绵结构蛋白的组合物，原料配比如下：重组人源胶原蛋白5-15份、乙酸水溶液10-30份、壳聚糖5-15份、原花青素5-10份、磷酸盐缓冲液20-30份、活性成分保护剂2-3份、保湿剂2-5份和抗菌剂2-3份。
9.一种含有重组人源海绵结构蛋白的组合物，包括以下步骤：步骤1：原料准备：首先准备重组人源胶原蛋白、乙酸水溶液、壳聚糖、原花青素、磷酸盐缓冲液、活性成分保护剂、保湿剂和抗菌剂，然后根据配比需要的量使用称量装置对重组人源胶原蛋白、乙酸水溶液、壳聚糖、原花青素、磷酸盐缓冲液、活性成分保护剂、保湿剂和抗菌剂进行定量；步骤2：原料存储：原料定量称重完成后，将称重后的重组人源胶原蛋白、乙酸水溶液、壳聚糖、原花青素、磷酸盐缓冲液、活性成分保护剂、保湿剂和抗菌剂各倒入相应的存储
器皿中，放置等待下一工序；步骤3：原料混合：首先将重组人源胶原蛋白，溶解于ph为7的磷酸盐缓冲溶液中，配制成重组人源胶原蛋白溶液，将壳聚糖溶于乙酸水溶液中，配制成壳聚糖溶液，另外，将原花青素溶于含无水乙醇的ph=7的磷酸盐缓冲液中，配制成原花青素溶液；步骤4：混合溶液搅拌：将重组人源胶原蛋白溶液、壳聚糖溶液和原花青素溶液存储的器皿放置在数显恒温磁力搅拌器上，器皿放置后根据需要设置数显恒温磁力搅拌器的转数，转数设置后开启数显恒温磁力搅拌器进行均匀搅拌；步骤5：组合物加入：将壳聚糖溶液滴入重组人源胶原蛋白溶液，混合搅拌，将活性成分保护剂、保湿剂和抗菌剂加入，继续搅拌，搅拌完毕后，进行冻干处理，形成初级生物海绵，然后，将初级生物海绵与原花青素溶液进行交联2小时，再次置于真空冷冻干燥机中冷冻干燥，获得含有重组人源海绵结构蛋白的组合物。
10.优选的，所述在步骤1中，原料称重定量过程中要保持称重定量装置底部平整，避免称重定量装置倾斜导致称重定量过程精度出现偏差，并且称重定量前对称重定量装置顶部进行清理，避免称重定量装置顶部存在杂质影响称重定量的精度。
11.优选的，所述在步骤2中，原料倒入存储器皿前，使用漏斗与存储器皿对接，原料通过漏斗进入器皿内，原料倾倒过程中，保证原料不会出现滴漏，而存储器皿采用透明玻璃瓶，方便对原料搅拌情况进行观察。
12.优选的，所述在步骤3中，根据重组人源胶原蛋白溶液、壳聚糖溶液和原花青素溶液的重力和份量，调节数显恒温磁力搅拌器相应的转数，数显恒温磁力搅拌器的转数随着重量和份量增加而增加，数显恒温磁力搅拌器搅拌过程中保证液体均匀的转动，并以水平面中间有旋涡为宜。
13.优选的，所述在步骤3中，原料混合时，其磷酸盐缓冲溶液、乙酸水溶液和磷酸盐缓冲液应保持在30～45℃的温度，以方便重组人源胶原蛋白、壳聚糖和原花青素进行充分溶解。
14.优选的，所述在步骤5中，对混合液体持续搅拌，使重组人源胶原蛋白与壳聚糖的质量比例为0.5:1，继续搅拌180分钟，搅拌完毕后，使用外部设备对其进行除泡即可。
15.优选的，所述在步骤5中，二次冷冻干燥时，先将加入活性成分保护剂、保湿剂和抗菌剂的壳聚糖溶液与重组人源胶原蛋白溶液形成的混合液与原花青素溶液交联后的液体，注入模具成型，设定真空冷冻干燥机的冷冻温度，采取-50～30
°
c的梯度干燥，将其置于真空冷冻干燥机冷冻干燥便可。
16.优选的，所述在步骤5中，可以根据需要需求，选择单加入活性成分保护剂、保湿剂或者抗菌剂，也可选择组合加入，以达到效果不同，降低生产的成本。
17.优选的，所述在步骤5中，将含有不同原料的重组人源海绵结构蛋白的组合物装入相应的存储瓶后，在存储瓶贴上相应的编号、名称及日期等，然后进行密封，存储瓶密封后需要放置于阴凉和干燥处进行保存。
18.与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明专利通过重组人源胶原蛋白、乙酸水溶液、壳聚糖、原花青素、磷酸盐缓冲液，使它们完全溶解混合到一起，可以使其形成具备重组人源胶原蛋白的海绵，并且在加工过程中，加入活性成分保护剂、保湿剂和抗菌剂，形成组合物，利用活性成分保护剂、保湿剂
和抗菌剂，形成组合物的特性使重组人源胶原蛋白海绵，具备活性、保湿和抗菌等功能，并且配合重组人源胶原蛋白海绵的使用，可以使该组合物具备杀菌、保湿、保持重组人源胶原蛋白的活性，有效的解决了临床止血材料止血时间较长、人体容易过敏和对伤口再生无帮助的问题。
具体实施方式
19.下面将通过实施例的方式对本发明作更详细的描述，这些实施例仅是举例说明性的而没有任何对本发明范围的限制。
20.本发明提供一种技术方案：一种含有重组人源海绵结构蛋白的组合物，原料配比如下：重组人源胶原蛋白5-15份、乙酸水溶液10-30份、壳聚糖5-15份、原花青素5-10份、磷酸盐缓冲液20-30份、活性成分保护剂2-3份、保湿剂2-5份和抗菌剂2-3份。
21.一种含有重组人源海绵结构蛋白的组合物，包括以下步骤：步骤1：原料准备：首先准备重组人源胶原蛋白、乙酸水溶液、壳聚糖、原花青素、磷酸盐缓冲液、活性成分保护剂、保湿剂和抗菌剂，然后根据配比需要的量使用称量装置对重组人源胶原蛋白、乙酸水溶液、壳聚糖、原花青素、磷酸盐缓冲液、活性成分保护剂、保湿剂和抗菌剂进行定量；步骤2：原料存储：原料定量称重完成后，将称重后的重组人源胶原蛋白、乙酸水溶液、壳聚糖、原花青素、磷酸盐缓冲液、活性成分保护剂、保湿剂和抗菌剂各倒入相应的存储器皿中，放置等待下一工序；步骤3：原料混合：首先将重组人源胶原蛋白，溶解于ph为7的磷酸盐缓冲溶液中，配制成重组人源胶原蛋白溶液，将壳聚糖溶于乙酸水溶液中，配制成壳聚糖溶液，另外，将原花青素溶于含无水乙醇的ph=7的磷酸盐缓冲液中，配制成原花青素溶液；步骤4：混合溶液搅拌：将重组人源胶原蛋白溶液、壳聚糖溶液和原花青素溶液存储的器皿放置在数显恒温磁力搅拌器上，器皿放置后根据需要设置数显恒温磁力搅拌器的转数，转数设置后开启数显恒温磁力搅拌器进行均匀搅拌；步骤5：组合物加入：将壳聚糖溶液滴入重组人源胶原蛋白溶液，混合搅拌，将活性成分保护剂、保湿剂和抗菌剂加入，继续搅拌，搅拌完毕后，进行冻干处理，形成初级生物海绵，然后，将初级生物海绵与原花青素溶液进行交联2小时，再次置于真空冷冻干燥机中冷冻干燥，获得含有重组人源海绵结构蛋白的组合物。
22.实施例一：首先进行原料准备工序，重组人源胶原蛋白、乙酸水溶液、壳聚糖、原花青素、磷酸盐缓冲液、活性成分保护剂、保湿剂和抗菌剂，然后根据配比需要的量使用称量装置对重组人源胶原蛋白、乙酸水溶液、壳聚糖、原花青素、磷酸盐缓冲液、活性成分保护剂、保湿剂和抗菌剂进行定量，原料定量称重完成后，将称重后的重组人源胶原蛋白、乙酸水溶液、壳聚糖、原花青素、磷酸盐缓冲液、活性成分保护剂、保湿剂和抗菌剂各倒入相应的存储器皿中，放置等待下一工序，首先将重组人源胶原蛋白，溶解于ph为7的磷酸盐缓冲溶液中，配制成重组人源胶原蛋白溶液，将壳聚糖溶于乙酸水溶液中，配制成壳聚糖溶液，另外，将原花青素溶于含无水乙醇的ph=7的磷酸盐缓冲液中，配制成原花青素溶液，将重组人源胶原蛋白
溶液、壳聚糖溶液和原花青素溶液存储的器皿放置在数显恒温磁力搅拌器上，器皿放置后根据需要设置数显恒温磁力搅拌器的转数，转数设置后开启数显恒温磁力搅拌器进行均匀搅拌，将壳聚糖溶液滴入重组人源胶原蛋白溶液，混合搅拌，将活性成分保护剂、保湿剂和抗菌剂加入，继续搅拌，搅拌完毕后，进行冻干处理，形成初级生物海绵，然后，将初级生物海绵与原花青素溶液进行交联2小时，再次置于真空冷冻干燥机中冷冻干燥，获得含有重组人源海绵结构蛋白的组合物。
23.实施例二：在实施例一中，再加上下述工序：在步骤1中，原料称重定量过程中要保持称重定量装置底部平整，避免称重定量装置倾斜导致称重定量过程精度出现偏差，并且称重定量前对称重定量装置顶部进行清理，避免称重定量装置顶部存在杂质影响称重定量的精度。
24.首先进行原料准备工序，首先准备重组人源胶原蛋白、乙酸水溶液、壳聚糖、原花青素、磷酸盐缓冲液、活性成分保护剂、保湿剂和抗菌剂，然后根据配比需要的量使用称量装置对重组人源胶原蛋白、乙酸水溶液、壳聚糖、原花青素、磷酸盐缓冲液、活性成分保护剂、保湿剂和抗菌剂进行定量原料称重定量过程中要保持称重定量装置底部平整，避免称重定量装置倾斜导致称重定量过程精度出现偏差，并且称重定量前对称重定量装置顶部进行清理，避免称重定量装置顶部存在杂质影响称重定量的精度，然后进行原料存放工序，原料定量称重完成后，将称重后的重组人源胶原蛋白、乙酸水溶液、壳聚糖、原花青素、磷酸盐缓冲液、活性成分保护剂、保湿剂和抗菌剂各倒入相应的存储器皿中，放置等待下一工序，之后进行原料混合工序，首先将重组人源胶原蛋白，溶解于ph为7的磷酸盐缓冲溶液中，配制成重组人源胶原蛋白溶液，将壳聚糖溶于乙酸水溶液中，配制成壳聚糖溶液，另外，将原花青素溶于含无水乙醇的ph=7的磷酸盐缓冲液中，配制成原花青素溶液，再然后进行混合溶液搅拌工序，将重组人源胶原蛋白溶液、壳聚糖溶液和原花青素溶液存储的器皿放置在数显恒温磁力搅拌器上，器皿放置后根据需要设置数显恒温磁力搅拌器的转数，转数设置后开启数显恒温磁力搅拌器进行均匀搅拌，最后进行组合物加入工序，将壳聚糖溶液滴入重组人源胶原蛋白溶液，混合搅拌，将活性成分保护剂、保湿剂和抗菌剂加入，继续搅拌，搅拌完毕后，进行冻干处理，形成初级生物海绵，然后，将初级生物海绵与原花青素溶液进行交联2小时，再次置于真空冷冻干燥机中冷冻干燥，获得含有重组人源海绵结构蛋白的组合物。
25.实施例三：在实施例二中，再加上下述工序：在步骤2中，原料倒入存储器皿前，使用漏斗与存储器皿对接，原料通过漏斗进入器皿内，原料倾倒过程中，保证原料不会出现滴漏，而存储器皿采用透明玻璃瓶，方便对原料搅拌情况进行观察。
26.首先进行原料准备工序，首先准备重组人源胶原蛋白、乙酸水溶液、壳聚糖、原花青素、磷酸盐缓冲液、活性成分保护剂、保湿剂和抗菌剂，然后根据配比需要的量使用称量装置对重组人源胶原蛋白、乙酸水溶液、壳聚糖、原花青素、磷酸盐缓冲液、活性成分保护剂、保湿剂和抗菌剂进行定量，原料称重定量过程中要保持称重定量装置底部平整，避免称重定量装置倾斜导致称重定量过程精度出现偏差，并且称重定量前对称重定量装置顶部进
行清理，避免称重定量装置顶部存在杂质影响称重定量的精度，然后进行原料存放工序，原料定量称重完成后，将称重后的重组人源胶原蛋白、乙酸水溶液、壳聚糖、原花青素、磷酸盐缓冲液、活性成分保护剂、保湿剂和抗菌剂各倒入相应的存储器皿中，放置等待下一工序，原料倒入存储器皿前，使用漏斗与存储器皿对接，原料通过漏斗进入器皿内，原料倾倒过程中，保证原料不会出现滴漏，而存储器皿采用透明玻璃瓶，方便对原料搅拌情况进行观察，之后进行原料混合工序，首先将重组人源胶原蛋白，溶解于ph为7的磷酸盐缓冲溶液中，配制成重组人源胶原蛋白溶液，将壳聚糖溶于乙酸水溶液中，配制成壳聚糖溶液，另外，将原花青素溶于含无水乙醇的ph=7的磷酸盐缓冲液中，配制成原花青素溶液，再然后进行混合溶液搅拌工序，将重组人源胶原蛋白溶液、壳聚糖溶液和原花青素溶液存储的器皿放置在数显恒温磁力搅拌器上，器皿放置后根据需要设置数显恒温磁力搅拌器的转数，转数设置后开启数显恒温磁力搅拌器进行均匀搅拌，最后进行组合物加入工序，将壳聚糖溶液滴入重组人源胶原蛋白溶液，混合搅拌，将活性成分保护剂、保湿剂和抗菌剂加入，继续搅拌，搅拌完毕后，进行冻干处理，形成初级生物海绵，然后，将初级生物海绵与原花青素溶液进行交联2小时，再次置于真空冷冻干燥机中冷冻干燥，获得含有重组人源海绵结构蛋白的组合物。
27.实施例四：在实施例三中，再加上下述工序：在步骤3中，根据重组人源胶原蛋白溶液、壳聚糖溶液和原花青素溶液的重力和份量，调节数显恒温磁力搅拌器相应的转数，数显恒温磁力搅拌器的转数随着重量和份量增加而增加，数显恒温磁力搅拌器搅拌过程中保证液体均匀的转动，并以水平面中间有旋涡为宜，原料混合时，其磷酸盐缓冲溶液、乙酸水溶液和磷酸盐缓冲液应保持在30～45℃的温度，以方便重组人源胶原蛋白、壳聚糖和原花青素进行充分溶解。
28.首先进行原料准备工序，首先准备重组人源胶原蛋白、乙酸水溶液、壳聚糖、原花青素、磷酸盐缓冲液、活性成分保护剂、保湿剂和抗菌剂，然后根据配比需要的量使用称量装置对重组人源胶原蛋白、乙酸水溶液、壳聚糖、原花青素、磷酸盐缓冲液、活性成分保护剂、保湿剂和抗菌剂进行定量，原料称重定量过程中要保持称重定量装置底部平整，避免称重定量装置倾斜导致称重定量过程精度出现偏差，并且称重定量前对称重定量装置顶部进行清理，避免称重定量装置顶部存在杂质影响称重定量的精度，然后进行原料存放工序，原料定量称重完成后，将称重后的重组人源胶原蛋白、乙酸水溶液、壳聚糖、原花青素、磷酸盐缓冲液、活性成分保护剂、保湿剂和抗菌剂各倒入相应的存储器皿中，放置等待下一工序，原料倒入存储器皿前，使用漏斗与存储器皿对接，原料通过漏斗进入器皿内，原料倾倒过程中，保证原料不会出现滴漏，而存储器皿采用透明玻璃瓶，方便对原料搅拌情况进行观察，之后进行原料混合工序，首先将重组人源胶原蛋白，溶解于ph为7的磷酸盐缓冲溶液中，配制成重组人源胶原蛋白溶液，将壳聚糖溶于乙酸水溶液中，配制成壳聚糖溶液，另外，将原花青素溶于含无水乙醇的ph=7的磷酸盐缓冲液中，配制成原花青素溶液，根据重组人源胶原蛋白溶液、壳聚糖溶液和原花青素溶液的重力和份量，调节数显恒温磁力搅拌器相应的转数，数显恒温磁力搅拌器的转数随着重量和份量增加而增加，数显恒温磁力搅拌器搅拌过程中保证液体均匀的转动，并以水平面中间有旋涡为宜，原料混合时，其磷酸盐缓冲溶液、乙酸水溶液和磷酸盐缓冲液应保持在30～45℃的温度，以方便重组人源胶原蛋白、壳聚
糖和原花青素进行充分溶解，再然后进行混合溶液搅拌工序，将重组人源胶原蛋白溶液、壳聚糖溶液和原花青素溶液存储的器皿放置在数显恒温磁力搅拌器上，器皿放置后根据需要设置数显恒温磁力搅拌器的转数，转数设置后开启数显恒温磁力搅拌器进行均匀搅拌，最后进行组合物加入工序，将壳聚糖溶液滴入重组人源胶原蛋白溶液，混合搅拌，将活性成分保护剂、保湿剂和抗菌剂加入，继续搅拌，搅拌完毕后，进行冻干处理，形成初级生物海绵，然后，将初级生物海绵与原花青素溶液进行交联2小时，再次置于真空冷冻干燥机中冷冻干燥，获得含有重组人源海绵结构蛋白的组合物。
29.实施例五：在实施例四中，再加上下述工序：在步骤5中，对混合液体持续搅拌，使重组人源胶原蛋白与壳聚糖的质量比例为0.5:1，继续搅拌180分钟，搅拌完毕后，使用外部设备对其进行除泡即可，二次冷冻干燥时，先将加入活性成分保护剂、保湿剂和抗菌剂的壳聚糖溶液与重组人源胶原蛋白溶液形成的混合液与原花青素溶液交联后的液体，注入模具成型，设定真空冷冻干燥机的冷冻温度，采取－50～30
°
c的梯度干燥，将其置于真空冷冻干燥机冷冻干燥便可。
30.首先进行原料准备工序，首先准备重组人源胶原蛋白、乙酸水溶液、壳聚糖、原花青素、磷酸盐缓冲液、活性成分保护剂、保湿剂和抗菌剂，然后根据配比需要的量使用称量装置对重组人源胶原蛋白、乙酸水溶液、壳聚糖、原花青素、磷酸盐缓冲液、活性成分保护剂、保湿剂和抗菌剂进行定量，原料称重定量过程中要保持称重定量装置底部平整，避免称重定量装置倾斜导致称重定量过程精度出现偏差，并且称重定量前对称重定量装置顶部进行清理，避免称重定量装置顶部存在杂质影响称重定量的精度，然后进行原料存放工序，原料定量称重完成后，将称重后的重组人源胶原蛋白、乙酸水溶液、壳聚糖、原花青素、磷酸盐缓冲液、活性成分保护剂、保湿剂和抗菌剂各倒入相应的存储器皿中，放置等待下一工序，原料倒入存储器皿前，使用漏斗与存储器皿对接，原料通过漏斗进入器皿内，原料倾倒过程中，保证原料不会出现滴漏，而存储器皿采用透明玻璃瓶，方便对原料搅拌情况进行观察，之后进行原料混合工序，首先将重组人源胶原蛋白，溶解于ph为7的磷酸盐缓冲溶液中，配制成重组人源胶原蛋白溶液，将壳聚糖溶于乙酸水溶液中，配制成壳聚糖溶液，另外，将原花青素溶于含无水乙醇的ph=7的磷酸盐缓冲液中，配制成原花青素溶液，最后进行组合物加入工序，混合溶液搅拌：将重组人源胶原蛋白溶液、壳聚糖溶液和原花青素溶液存储的器皿放置在数显恒温磁力搅拌器上，器皿放置后根据需要设置数显恒温磁力搅拌器的转数，转数设置后开启数显恒温磁力搅拌器进行均匀搅拌，将壳聚糖溶液滴入重组人源胶原蛋白溶液，混合搅拌，将活性成分保护剂、保湿剂和抗菌剂加入，继续搅拌，搅拌完毕后，进行冻干处理，形成初级生物海绵，然后，将初级生物海绵与原花青素溶液进行交联2小时，再次置于真空冷冻干燥机中冷冻干燥，获得含有重组人源海绵结构蛋白的组合物，对混合液体持续搅拌，使重组人源胶原蛋白与壳聚糖的质量比例为0.5:1，继续搅拌180分钟，搅拌完毕后，使用外部设备对其进行除泡即可，二次冷冻干燥时，先将加入活性成分保护剂、保湿剂和抗菌剂的壳聚糖溶液与重组人源胶原蛋白溶液形成的混合液与原花青素溶液交联后的液体，注入模具成型，设定真空冷冻干燥机的冷冻温度，采取-50～30
°
c的梯度干燥，将其置于真空冷冻干燥机冷冻干燥便可，可以根据需要需求，选择单加入活性成分保护剂、保湿剂或者抗菌剂，也可选择组合加入，以达到效果不同，降低生产的成本，将含有不同原料的重
组人源海绵结构蛋白的组合物装入相应的存储瓶后，在存储瓶贴上相应的编号、名称及日期等，然后进行密封，存储瓶密封后需要放置于阴凉和干燥处进行保存。
31.实验步骤一、实验对比：1、配制含有重组人源海绵结构蛋白的组合物。
32.2、重组人源海绵结构蛋白的组合物分别与含有重组人源结构蛋白的海绵进行对比，验证，查看组合物效果。
33.二、验证方法：1、分别用重组人源海绵结构蛋白的组合物，不同的时间段为0h、2h、5h、8h、1t、2t、3t、5t、10t、12t、15t、21t和28t，使用不同伤者止血，多人测试，综合评分，选取效果最佳的组合物。
34.2、未加组合物的重组人源结构蛋白海绵与加入组合物的重组人源结构蛋白海绵，在不同伤者使用时，观看加入组合物的重组人源结构蛋白海绵和未加入重组人源结构蛋白海绵对患者的治疗效果，时限选1t。

技术特征：
1.一种含有重组人源海绵结构蛋白的组合物，其特征在于：原料配比如下：重组人源胶原蛋白5-15份、乙酸水溶液10-30份、壳聚糖5-15份、原花青素5-10份、磷酸盐缓冲液20-30份、活性成分保护剂2-3份、保湿剂2-5份和抗菌剂2-3份。2.一种含有重组人源海绵结构蛋白的组合物，其特征在于：包括以下步骤：步骤1：原料准备：首先准备重组人源胶原蛋白、乙酸水溶液、壳聚糖、原花青素、磷酸盐缓冲液、活性成分保护剂、保湿剂和抗菌剂，然后根据配比需要的量使用称量装置对重组人源胶原蛋白、乙酸水溶液、壳聚糖、原花青素、磷酸盐缓冲液、活性成分保护剂、保湿剂和抗菌剂进行定量；步骤2：原料存储：原料定量称重完成后，将称重后的重组人源胶原蛋白、乙酸水溶液、壳聚糖、原花青素、磷酸盐缓冲液、活性成分保护剂、保湿剂和抗菌剂各倒入相应的存储器皿中，放置等待下一工序；步骤3：原料混合：首先将重组人源胶原蛋白，溶解于ph为7的磷酸盐缓冲溶液中，配制成重组人源胶原蛋白溶液，将壳聚糖溶于乙酸水溶液中，配制成壳聚糖溶液，另外，将原花青素溶于含无水乙醇的ph=7的磷酸盐缓冲液中，配制成原花青素溶液；步骤4：混合溶液搅拌：将重组人源胶原蛋白溶液、壳聚糖溶液和原花青素溶液存储的器皿放置在数显恒温磁力搅拌器上，器皿放置后根据需要设置数显恒温磁力搅拌器的转数，转数设置后开启数显恒温磁力搅拌器进行均匀搅拌；步骤5：组合物加入：将壳聚糖溶液滴入重组人源胶原蛋白溶液，混合搅拌，将活性成分保护剂、保湿剂和抗菌剂加入，继续搅拌，搅拌完毕后，进行冻干处理，形成初级生物海绵，然后，将初级生物海绵与原花青素溶液进行交联2小时，再次置于真空冷冻干燥机中冷冻干燥，获得含有重组人源海绵结构蛋白的组合物。3.根据权利要求2所述的一种含有重组人源海绵结构蛋白的组合物制造工艺，其特征在于：所述在步骤1中，原料称重定量过程中要保持称重定量装置底部平整，避免称重定量装置倾斜导致称重定量过程精度出现偏差，并且称重定量前对称重定量装置顶部进行清理，避免称重定量装置顶部存在杂质影响称重定量的精度。4.根据权利要求2所述的一种含有重组人源海绵结构蛋白的组合物制造工艺，其特征在于：所述在步骤2中，原料倒入存储器皿前，使用漏斗与存储器皿对接，原料通过漏斗进入器皿内，原料倾倒过程中，保证原料不会出现滴漏，而存储器皿采用透明玻璃瓶，方便对原料搅拌情况进行观察。5.根据权利要求2所述的一种含有重组人源海绵结构蛋白的组合物制造工艺，其特征在于：所述在步骤3中，根据重组人源胶原蛋白溶液、壳聚糖溶液和原花青素溶液的重力和份量，调节数显恒温磁力搅拌器相应的转数，数显恒温磁力搅拌器的转数随着重量和份量增加而增加，数显恒温磁力搅拌器搅拌过程中保证液体均匀的转动，并以水平面中间有旋涡为宜。6.根据权利要求2所述的一种含有重组人源海绵结构蛋白的组合物制造工艺，其特征在于：所述在步骤3中，原料混合时，其磷酸盐缓冲溶液、乙酸水溶液和磷酸盐缓冲液应保持在30～45℃的温度，以方便重组人源胶原蛋白、壳聚糖和原花青素进行充分溶解。7.根据权利要求2所述的一种含有重组人源海绵结构蛋白的组合物制造工艺，其特征在于：所述在步骤5中，对混合液体持续搅拌，使重组人源胶原蛋白与壳聚糖的质量比例为
0.5:1，继续搅拌180分钟，搅拌完毕后，使用外部设备对其进行除泡即可。8.根据权利要求2所述的一种含有重组人源海绵结构蛋白的组合物制造工艺，其特征在于：所述在步骤5中，二次冷冻干燥时，先将加入活性成分保护剂、保湿剂和抗菌剂的壳聚糖溶液与重组人源胶原蛋白溶液形成的混合液与原花青素溶液交联后的液体，注入模具成型，设定真空冷冻干燥机的冷冻温度，采取－50～30
°
c的梯度干燥，将其置于真空冷冻干燥机冷冻干燥便可。9.根据权利要求2所述的一种含有重组人源海绵结构蛋白的组合物制造工艺，其特征在于：所述在步骤5中，可以根据需要需求，选择单加入活性成分保护剂、保湿剂或者抗菌剂，也可选择组合加入，以达到效果不同，降低生产的成本。10.根据权利要求2所述的一种含有重组人源海绵结构蛋白的组合物制造工艺，其特征在于：所述在步骤5中，将含有不同原料的重组人源海绵结构蛋白的组合物装入相应的存储瓶后，在存储瓶贴上相应的编号、名称及日期等，然后进行密封，存储瓶密封后需要放置于阴凉和干燥处进行保存。

技术总结
本发明公开了一种含有重组人源海绵结构蛋白的组合物，原料配比如下：重组人源胶原蛋白5-15份；本发明专利通过重组人源胶原蛋白、乙酸水溶液、壳聚糖、原花青素、磷酸盐缓冲液，使它们完全溶解混合到一起，可以使其形成具备重组人源胶原蛋白的海绵，并且在加工过程中，加入活性成分保护剂、保湿剂和抗菌剂，形成组合物，利用活性成分保护剂、保湿剂和抗菌剂，形成组合物的特性使重组人源胶原蛋白海绵，保湿和抗菌等功能，并且配合重组人源胶原蛋白海绵的使用，可以使该组合物具备杀菌、保湿、保持重组人源胶原蛋白的活性，有效的解决了临床止血材料止血时间较长、人体容易过敏和对伤口再生无帮助等的问题。无帮助等的问题。


技术研发人员：张棋 程树军 欧泥波
受保护的技术使用者：广州科龄医药科技有限公司
技术研发日：2022.03.07
技术公布日：2022/5/25