大豆蛋白GmFVE在植物耐盐性调控中的应用

大豆蛋白gmfve在植物耐盐性调控中的应用
技术领域
1.本发明涉及生物技术领域，尤其涉及大豆蛋白gmfve在植物耐盐性调控中的应用。


背景技术：

2.环境中物理、化学因素的变化，例如干旱、盐碱、冷害、冻害、水涝等胁迫因素是造成农作物严重减产的原因之一。美国在1939年至1978年的40年间，保险业对作物减产的赔付统计数据表明，由于盐害及干旱引起减产的赔付比例约占40.8％，高于涝(16.4％)、低温(13.8％)、冰雹(11.3％)和风(7.0％)，更是远高于虫灾(4.5％)、病害(2.7％)和其他因素。因此，培育耐盐/旱性作物是种植业的主要目标之一。提高作物的耐盐/旱性，除了利用传统的育种方法，目前分子遗传育种已经成为科技工作者所关注的领域之一。
3.fve/msi4具有wd40重复结构域，与哺乳动物中的rbap蛋白(retinoblastoma-associated protein)同源性很高，是组蛋白去乙酰化酶(hdac)复合体的组分之一,参与转录抑制。拟南芥中，fve/msi4通过使开花关键基因flc维持较低的组蛋白h3ac水平，抑制flc的表达调控植物开花。大豆中此蛋白的功能研究相对较少。目前尚未见有关其与耐盐性相关的报道。


技术实现要素：

4.本发明的目的是提供大豆蛋白gmfve在植物耐盐性调控中的应用。
5.本发明提供了gmfve蛋白在调控植物耐盐性中的应用。具体的，所述调控为负调控。即，降低gmfve蛋白的含量和/或活性，植物的耐盐性增高。即，增高gmfve蛋白的含量和/或活性，植物的耐盐性降低。
6.本发明还保护与gmfve蛋白相关的生物材料在调控植物耐盐性中的应用；
7.与gmfve蛋白相关的生物材料，为下述(d1)至(d12)中的任一种：
8.(d1)编码gmfve蛋白的核酸分子；
9.(d2)含有(d1)所述核酸分子的表达盒；
10.(d3)含有(d1)所述核酸分子的重组载体；
11.(d4)含有(d2)所述表达盒的重组载体；
12.(d5)含有(d1)所述核酸分子的重组微生物；
13.(d6)含有(d2)所述表达盒的重组微生物；
14.(d7)含有(d3)所述重组载体的重组微生物；
15.(d8)含有(d4)所述重组载体的重组微生物；
16.(d9)含有(d1)所述核酸分子的转基因植物细胞系；
17.(d10)含有(d2)所述表达盒的转基因植物细胞系；
18.(d11)含有(d3)所述重组载体的转基因植物细胞系；
19.(d12)含有(d4)所述重组载体的转基因植物细胞系。
20.具体的，所述调控为负调控。即，抑制编码gmfve蛋白的核酸分子的表达，植物的耐
盐性增高。即，促进编码gmfve蛋白的核酸分子的表达，植物的耐盐性降低。
21.本发明还保护抑制gmfve蛋白的物质在植物育种的应用，所述育种的目标为培育对盐胁迫的耐逆性提高的植物。
22.本发明还保护抑制编码gmfve蛋白的核酸分子表达的物质的应用，所述应用为培育对盐胁迫的耐逆性提高的转基因植物。所述抑制编码gmfve蛋白的核酸分子表达的物质可为基于rnai技术抑制编码gmfve蛋白的核酸分子表达的物质。所述抑制编码gmfve蛋白的核酸分子表达的物质可为特异dna分子或具有所述特异dna分子的重组质粒。所述特异dna分子中，具有dna分子甲和dna分子乙。dna分子甲如序列表的序列3所示,dna分子乙与dna分子甲反向互补。所述重组质粒具体可为如下：在pzh01载体的sac i和kpn i酶切位点之间插入了dna分子甲，并且在sal i和xba i酶切位点之间插入了dna分子乙。所述应用的具体方法如下：将抑制编码gmfve蛋白的核酸分子表达的物质通过发根农杆菌导入目的植物中，得到具有毛状根的嵌合体植物；所述嵌合体植物对盐胁迫的耐逆性提高。
23.本发明还保护一种制备对盐胁迫的耐逆性提高的转基因植物的方法，包括如下步骤：在受体植物中导入抑制编码gmfve蛋白的核酸分子表达的物质，得到对盐胁迫的耐逆性提高的转基因植物。所述抑制编码gmfve蛋白的核酸分子表达的物质可为基于rnai技术抑制编码gmfve蛋白的核酸分子表达的物质。所述抑制编码gmfve蛋白的核酸分子表达的物质可为特异dna分子或具有所述特异dna分子的重组质粒。所述特异dna分子中，具有dna分子甲和dna分子乙。dna分子甲如序列表的序列3所示,dna分子乙与dna分子甲反向互补。所述重组质粒具体可为如下：在pzh01载体的sac i和kpn i酶切位点之间插入了dna分子甲，并且在sal i和xba i酶切位点之间插入了dna分子乙。所述方法中，抑制编码gmfve蛋白的核酸分子表达的物质通过发根农杆菌导入受体植物，得到对盐胁迫的耐逆性提高的具有毛状根的嵌合体植物。
24.本发明还保护一种植物育种方法，包括如下步骤：降低目的植物中gmfve蛋白的含量和/或活性，从而使目的植物对盐胁迫的耐逆性提高。
25.对盐胁迫的耐逆性提高体现为如下(f1)或(f2)：
26.(f1)在盐胁迫环境中存活率提高；
27.(f2)在盐胁迫环境中细胞膜损伤减轻。
28.以上任一所述重组载体中，在其转录起始核苷酸前可加上任何一种增强型、组成型、组织特异型或诱导型启动子，如花椰菜花叶病毒(camv)35s启动子、泛生素基因ubiquitin启动子(pubi)等，它们可单独使用或与其它的植物启动子结合使用；以上任一所述重组载体中，还可使用增强子，包括翻译增强子或转录增强子，这些增强子区域可以是atg起始密码子或邻接区域起始密码子等，但必需与编码序列的阅读框相同，以保证整个序列的正确翻译。所述翻译控制信号和起始密码子的来源是广泛的，可以是天然的，也可以是合成的。翻译起始区域可以来自转录起始区域或结构基因。为了便于对转基因植物细胞或植物进行鉴定及筛选，可对所用载体进行加工，如加入可在植物中表达的编码可产生颜色变化的酶或发光化合物的基因(gus基因、萤光素酶基因等)、具有抗性的抗生素标记物(庆大霉素标记物、卡那霉素标记物等)或是抗化学试剂标记基因(如抗除莠剂基因)等。从转基因植物的安全性考虑，可不加任何选择性标记基因，直接以逆境筛选转化植株。
29.以上任一所述重组质粒中，在其转录起始核苷酸前可加上任何一种增强型、组成
型、组织特异型或诱导型启动子，如花椰菜花叶病毒(camv)35s启动子、泛生素基因ubiquitin启动子(pubi)等，它们可单独使用或与其它的植物启动子结合使用；以上任一所述重组质粒中，还可使用增强子，包括翻译增强子或转录增强子。所述翻译控制信号和起始密码子的来源是广泛的，可以是天然的，也可以是合成的。翻译起始区域可以来自转录起始区域或结构基因。为了便于对转基因植物细胞或植物进行鉴定及筛选，可对所用载体进行加工，如加入可在植物中表达的编码可产生颜色变化的酶或发光化合物的基因(gus基因、萤光素酶基因等)、具有抗性的抗生素标记物(庆大霉素标记物、卡那霉素标记物等)或是抗化学试剂标记基因(如抗除莠剂基因)等。从转基因植物的安全性考虑，可不加任何选择性标记基因，直接以逆境筛选转化植株。
30.所述重组载体或所述重组质粒可通过使用ti质粒、ri质粒、植物病毒载体、直接dna转化、微注射、电导、农杆菌介导等常规生物学方法转化植物细胞或组织，并将转化的植物细胞或组织培育成植株。
31.以上任一所述发根农杆菌具体可为发根农杆菌k599。
32.以上所述gmfve蛋白，获自大豆属大豆(glycine max(l.)merrill)，为如下(a)或(b)或(c)：
33.(a)序列表的序列1所示的蛋白质；
34.(b)来源于大豆且与序列表的序列1所示的蛋白质具有98％以上同一性且具有相同功能的蛋白质；
35.(c)将序列表的序列1所示的蛋白质经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有相同功能的蛋白质。
36.以上任一所述编码gmfve蛋白的核酸分子为如下(e1)、(e2)或(e3)：
37.(e1)编码区如序列表的序列2所示的dna分子；
38.(e2)与(e1)具有75％或75％以上同一性且编码所述gmfve蛋白的dna分子；
39.(e3)在严格条件下与(e1)或(e2)杂交且编码所述gmfve蛋白的dna分子。
40.以上任一所述植物为单子叶植物或双子叶植物。所述单子叶植物可以为水稻、小麦或玉米等。所述双子叶植物可以为大豆、烟草或棉花等。所述双子叶植物具体为大豆，所述大豆具体为科丰1号。
41.本发明将降低gmfve活性的gmfve-rnai转入受体大豆的毛状根中，得到转基因毛状根及其嵌合体植株，该转基因大豆嵌合体与转空载体大豆嵌合体相比，其耐盐性有显著提高，说明gmfve蛋白负调控植物耐盐性。本发明对培育植物高耐盐品种具有重要的理论和现实意义。
附图说明
42.图1为pzh01载体的结构示意图。
43.图2为转gmfve-rnai大豆毛状根的分子鉴定。
44.图3为转gmfve-rnai大豆毛状根及嵌合体的耐盐表型。
45.图4为转gmfve-rnai毛状根嵌合体在高盐胁迫下的叶相对电导率。
46.图5为转gmfve-rnai毛状根嵌合体在高盐胁迫下的存活率。
具体实施方式
47.下面结合具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐明本发明，而不是为了限制本发明的范围。以下提供的实施例可作为本技术领域普通技术人员进行进一步改进的指南，并不以任何方式构成对本发明的限制。
48.下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
49.如无特殊说明，以下实施例中的定量试验，均设置三次重复实验，结果取平均值。
50.下述实施例中所用引物均由三博生物公司合成。
51.下述实施例中的大豆科丰1号(glycine max l.merr.kefeng 1)，记载于如下文献：w.k.zhang,y.j.wang,g.z.luo,j.s.zhang,c.y.he,x.l.wu,j.y.gai,s.y.chen,qtl mapping of ten agronomic traits on the soybean(glycine max l.merr.)genetic map and their association with est markers,theor.appl.genet,2004,108:1131-1139；公众可以从中国科学院遗传与发育生物学研究所获得。
52.pzh01载体，stratagene公司，记载于如下文献：han xiao,et al.functional analysis of the rice ap3 homologue osmads16 by rna interference,plant molecular biology,2003,52,957-966。pzh01载体结构的示意图见图1。
53.发根农杆菌k599记载于如下文献：attila kereszt,et al.,agrobacterium rhizogenes-mediaded transformation of soybean to study of root biology,nature protocols,2007,2(4),549-552。
54.实施例1、大豆蛋白gmfve蛋白及其编码基因(gmfve基因)的发现
55.发明人研究发现，大豆转录因子gmnfya调控植物盐胁迫应答。gmnfya在大豆jack中过表达，显著提高转基因大豆的耐盐性。发明人利用大豆毛状根体系，分别得到过表达gfp和nfya-gfp的转基因毛状根。经过ip-ms分析得到与nfya-gfp特异互作的蛋白。从中筛选相关的蛋白，并通过酵母双杂交实验进行验证。结果发现gmnfya可以与glyma.09g063100编码蛋白直接互作。bifc和luc互补实验表明上述两个蛋白在体内也发生互作。glyma.09g063100编码fve/msi4蛋白，具有wd40重复结构域，推测其可能参与大豆耐盐调控。
56.提取大豆科丰1号幼苗的总rna，反转录得到cdna。以cdna为模板，采用gmfve-up和gmfve-dp组成的引物对进行pcr扩增，回收pcr扩增产物并测序，如序列表的序列2所示。序列表的序列2所示的dna分子编码序列表的序列1所示的蛋白质。将序列表的序列1所示的蛋白质命名为gmfve蛋白，由513个氨基酸残基组成。将编码gmfve蛋白的基因命名为gmfve基因。
57.gmfve-up：5
’-
atggagactcctcctccccaacaag-3’；
58.gmfve-dp：5
’-
tcatttttcagtctttgaagcacac-3’。
59.实施例2、pzh01-gmfve-rnai植物载体的构建
60.1、提取大豆科丰1号幼苗的总rna，反转录得到cdna。
61.2、以步骤1得到的cdna为模板，采用fve-rnai-f和fve-rnai-r组成的引物对进行pcr扩增，回收pcr扩增产物。
62.fve-rnai-f：5
’-
tgctctaga gagctcacgactggctcgccaaccac-3’；
63.fve-rnai-r：5
’-
acgc gtcgac ggtaccactgttttgtcctttcctcctg-3’。
64.3、取步骤2得到的pcr扩增产物，采用限制性内切酶sac i和kpn i进行双酶切，回收酶切产物。
65.4、取pzh01载体，采用限制性内切酶sac i和kpn i进行双酶切，回收载体骨架。
66.5、将步骤3得到的酶切产物和步骤4得到的载体骨架连接，得到重组质粒。
67.6、取步骤2得到的pcr扩增产物，采用限制性内切酶xba i和sal i进行双酶切，回收酶切产物。
68.7、取步骤5得到的重组质粒，采用限制性内切酶sal i和xba i进行双酶切，回收载体骨架。
69.8、将步骤6得到的酶切产物和步骤7得到的载体骨架连接，得到重组质粒。
70.9、取步骤8得到的重组质粒，进行测序验证。测序结果表明：重组质粒中，在pzh01载体的sac i和kpn i酶切位点之间插入了dna分子甲，并且在sal i和xba i酶切位点之间插入了dna分子乙；dna分子甲如序列表的序列3所示,dna分子乙与dna分子甲反向互补。将该重组质粒命名为pzh01-gmfve-rnai植物载体。
71.实施例3、嵌合体植株的获得
72.发根农杆菌侵染法根据attila kereszt等方法(attila kereszt,et al.,agrobacterium rhizogenes-mediaded transformation of soybean to study of root biology,nature protocols,2007,2(4),549-552)略加改进，可参考wang,fang；chen,hao-wei；li,qing-tian；wei,wei；li,wei；zhang,wan-ke；ma,biao；bi,ying-dong；lai,yong-cai；liu,xin-lei；man,wei-qun；zhang,jin-song；chen,shou-yi,gmwrky27 interacts with gmmyb174 to reduce expression of gmnac29 for stress tolerance in soybean plants,2015,the plant journal,83,224
–
236,或授权专利，陈受宜等，植物耐逆性相关转录因子gmwrky78及其编码基因与应用，授权号：zl2011 1 0053083.7,授权日2013.10.09。
73.1、重组农杆菌的获得
74.将pzh01-gmfve-rnai植物载体通过电击法导入发根农杆菌k599，得到重组农杆菌，命名为重组农杆菌k599/pzh01-gmfve-rnai。重组农杆菌k599/pzh01-gmfve-rnai接种至含有50mg/l潮霉素的液体lb培养基中培养至体系od600nm值为1.0以上。
75.将pzh01载体通过电击法导入发根农杆菌k599，得到重组农杆菌，命名为重组农杆菌k599/pzh01。重组农杆菌k599/pzh01接种至含有50mg/l潮霉素的液体lb培养基中培养至体系od600nm值为1.0以上。
76.2、转基因嵌合体植株的制备
77.大豆科丰1号种子播种于蛭石中，培养至长出2片真叶。用注射器将步骤1制备的重组农杆菌k599/pzh01-gmfve-rnai菌液接种至植株茎基部(每株植株接种约50微升)，采用“光照16小时/黑暗8小时，温度25℃，湿度50％”的条件培养2周，此时植株已长出毛状根，共获得100株具有毛状根的植株，命名为转基因嵌合体植株。
78.3、转空载体嵌合体植株的制备
79.大豆科丰1号种子播种于蛭石中，培养至长出2片真叶。用注射器将步骤1制备的重组农杆菌k599/pzh01菌液接种至植株茎基部(每株植株接种约50微升)，采用“光照16小时/
黑暗8小时，温度25℃，湿度50％”的条件培养2周，此时植株已长出毛状根，共获得98个具有毛状根的植株，命名为转空载体嵌合体植株。
80.4、毛状根中gmfve基因的水平
81.供试样本：转基因嵌合体植株的毛状根或转空载体嵌合体植株的毛状根。
82.提取供试样本的总rna，将其反转录为cdna。以cdna为模板，采用fve-qpcr-f和fve-qpcr-r组成的引物对进行定量pcr，以检测gmfve基因的相对表达水平。采用大豆gmtubulin基因为内标，用于检测内标的引物对由primer-tf和primer-tr组成。
83.fve-qpcr-f：5
’-
ggaagggtttgaaggaaggtagg-3’；
84.fve-qpcr-r：5
’-
tcgtagaggacaggaacaaggga-3’。
85.primer-tf：5
’-
aacctcctcctcatcgtact-3’；
86.primer-tr：5
’-
gacagcatcagccatgttca-3’。
87.结果见图2。转空载体嵌合体植株的毛状根中gmfve基因的水平作为1，转基因嵌合体植株的毛状根中gmfve基因的相对表达水平仅为0.38。
88.实施例4、植株耐盐性鉴定
89.供试植株：实施例3制备的转基因嵌合体植株或转空载体嵌合体植株，均为接种菌液12天后的植株。
90.一、分组处理
91.将供试植株分成2组，每组15株植株。第一组(盐胁迫组)：采用100mm nacl水溶液水培供试植株(植株根浸没至nacl水溶液中)。第二组(对照组)：用水代替100mm nacl水溶液，其他同第一组。
92.处理3天后拍照，照片见图3。对照组：转基因嵌合体植株和转空载体嵌合体植株表型无明显差异。盐胁迫组：转空载体嵌合体植株的叶片(特别是下部叶)已经枯萎或开始萎蔫，转基因嵌合体植株的叶片基本没有观察到萎蔫。
93.二、步骤一处理3天后，检测相对离子渗透率。
94.当植物组织受到逆境胁迫伤害时，细胞膜功能受损或结构破坏，透性增大，从而使细胞内各种水溶性物质包括电解质外渗。将植物组织浸入无离子水中，水的电导会因电解质的外渗而变大。伤害越重，细胞膜破坏越严重，外渗就越厉害，而水的电导率就越大。所以可以用电导仪测定外渗液电导率的变化情况，间接反映出植物组织受到的伤害程度。因此电导率的检测可计算相对离子渗透率，相对离子渗透率表示植物细胞膜受损伤的程度。
95.检测方法：剪取植株叶片，放置到干净的螺口玻璃瓶中，用去离子水漂洗3遍；然后加80ml去离子水将叶片完全浸泡，抽真空45min；然后室温静置30min；然后用电导仪(ddc-308a型，上海博取仪器有限公司)测定电导率e1；然后将叶片煮沸15min，待温度降到室温后，混匀，用电导仪测定电导率e2。
96.相对离子渗透率el(％)＝e1/e2
×
100。
97.结果见图4。对照组：转基因嵌合体植株和转空载体嵌合体植株的叶片的相对离子渗透率分别为8％和10％，无明显差异。盐胁迫组：转基因嵌合体植株的叶片的相对离子渗透率为40％，转空载体嵌合体植株的叶片的相对离子渗透率为68％，转基因嵌合体植株细胞膜所受的损伤远显著小于转空载体嵌合体植株。
98.三、步骤一处理7天后，统计存活率。
99.盐胁迫组的存活率结果见图5。转基因嵌合体植株的存活率为71％，转空载体嵌合体植株的存活率为32％，转基因嵌合体植株的存活率显著高于转空载体嵌合体植株。
100.以上结果均表明，抑制gmfve基因的表达可以显著提高植株的耐盐性。
101.以上对本发明进行了详述。对于本领域技术人员来说，在不脱离本发明的宗旨和范围，以及无需进行不必要的实验情况下，可在等同参数、浓度和条件下，在较宽范围内实施本发明。虽然本发明给出了特殊的实施例，应该理解为，可以对本发明作进一步的改进。总之，按本发明的原理，本技术欲包括任何变更、用途或对本发明的改进，包括脱离了本技术中已公开范围，而用本领域已知的常规技术进行的改变。按以下附带的权利要求的范围，可以进行一些基本特征的应用。

技术特征：
1.抑制gmfve蛋白的物质在植物育种中的应用，所述育种的目标为培育对盐胁迫的耐逆性提高的植物；所述gmfve蛋白为如下(a)或(b)或(c)：(a)序列表的序列1所示的蛋白质；(b)来源于大豆且与序列表的序列1所示的蛋白质具有98％以上同一性且具有相同功能的蛋白质；(c)将序列表的序列1所示的蛋白质经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有相同功能的蛋白质。2.抑制编码gmfve蛋白的核酸分子表达的物质的应用，所述应用为培育对盐胁迫的耐逆性提高的转基因植物；所述gmfve蛋白为如下(a)或(b)或(c)：(a)序列表的序列1所示的蛋白质；(b)来源于大豆且与序列表的序列1所示的蛋白质具有98％以上同一性且具有相同功能的蛋白质；(c)将序列表的序列1所示的蛋白质经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有相同功能的蛋白质。3.一种制备对盐胁迫的耐逆性提高的转基因植物的方法，包括如下步骤：在受体植物中导入抑制编码gmfve蛋白的核酸分子表达的物质，得到对盐胁迫的耐逆性提高的转基因植物；所述gmfve蛋白为如下(a)或(b)或(c)：(a)序列表的序列1所示的蛋白质；(b)来源于大豆且与序列表的序列1所示的蛋白质具有98％以上同一性且具有相同功能的蛋白质；(c)将序列表的序列1所示的蛋白质经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有相同功能的蛋白质。4.如权利要求2所述的应用或如权利要求3所述的方法，其特征在于：编码gmfve蛋白的核酸分子为如下(e1)、(e2)或(e3)：(e1)编码区如序列表的序列2所示的dna分子；(e2)与(e1)具有75％或75％以上同一性且编码所述gmfve蛋白的dna分子；(e3)在严格条件下与(e1)或(e2)杂交且编码所述gmfve蛋白的dna分子。5.一种植物育种方法，包括如下步骤：降低目的植物中gmfve蛋白的含量和/或活性，从而使目的植物对盐胁迫的耐逆性提高；所述gmfve蛋白为如下(a)或(b)或(c)：(a)序列表的序列1所示的蛋白质；(b)来源于大豆且与序列表的序列1所示的蛋白质具有98％以上同一性且具有相同功能的蛋白质；(c)将序列表的序列1所示的蛋白质经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有相同功能的蛋白质。6.gmfve蛋白在调控植物耐盐性中的应用；
所述gmfve蛋白为如下(a)或(b)或(c)：(a)序列表的序列1所示的蛋白质；(b)来源于大豆且与序列表的序列1所示的蛋白质具有98％以上同一性且具有相同功能的蛋白质；(c)将序列表的序列1所示的蛋白质经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有相同功能的蛋白质。7.与权利要求6中所述的gmfve蛋白相关的生物材料在调控植物耐盐性中的应用；所述生物材料为下述(d1)至(d12)中的任一种：(d1)编码gmfve蛋白的核酸分子；(d2)含有(d1)所述核酸分子的表达盒；(d3)含有(d1)所述核酸分子的重组载体；(d4)含有(d2)所述表达盒的重组载体；(d5)含有(d1)所述核酸分子的重组微生物；(d6)含有(d2)所述表达盒的重组微生物；(d7)含有(d3)所述重组载体的重组微生物；(d8)含有(d4)所述重组载体的重组微生物；(d9)含有(d1)所述核酸分子的转基因植物细胞系；(d10)含有(d2)所述表达盒的转基因植物细胞系；(d11)含有(d3)所述重组载体的转基因植物细胞系；(d12)含有(d4)所述重组载体的转基因植物细胞系。8.如权利要求7所述的应用，其特征在于：编码gmfve蛋白的核酸分子为如下(e1)、(e2)或(e3)：(e1)编码区如序列表的序列2所示的dna分子；(e2)与(e1)具有75％或75％以上同一性且编码所述gmfve蛋白的dna分子；(e3)在严格条件下与(e1)或(e2)杂交且编码所述gmfve蛋白的dna分子。9.如权利要求7或8所述的应用，其特征在于：所述调控为负调控。10.如权利要求1至9中任一所述的应用或方法，其特征在于：所述植物为单子叶植物或双子叶植物。

技术总结
本发明公开了大豆蛋白GmFVE在植物耐盐性调控中的应用。本发明提供了GmFVE蛋白在调控植物耐盐性中的应用。具体的，所述调控为负调控。即，降低GmFVE蛋白的含量和/或活性，植物的耐盐性增高。本发明还保护一种制备对盐胁迫的耐逆性提高的转基因植物的方法，包括如下步骤：在受体植物中导入抑制编码GmFVE蛋白的核酸分子表达的物质，得到对盐胁迫的耐逆性提高的转基因植物。本发明对培育植物高耐盐品种具有重要的理论和现实意义。有重要的理论和现实意义。


技术研发人员：张劲松 陈受宜 卢龙 张万科 韦伟 陶建军 林晴 阴翠翠
受保护的技术使用者：中国科学院遗传与发育生物学研究所
技术研发日：2020.11.04
技术公布日：2022/5/25