本发明涉及抗musk抗体或其抗原结合片段，其用于在人对象中治疗神经肌肉病症，例如als(amyotrophic lateral sclerosis)(肌萎缩侧索硬化)。在一个实施方案中，将该抗体或其抗原结合片段与抗胆碱能化合物组合。
背景技术：
1、als是成年发作的非细胞自主性神经肌肉/神经退行性病症，其导致上和下运动神经元(motor neuron，mn)的进行性丧失，导致2至5年内逐渐瘫痪和死亡。神经肌肉接头(neuromuscular junction，nmj)去神经是als的标志[1]，并且存在于als的数种疾病模型[2-6]中，甚至在mn死亡之前[1,3]。
2、目前批准的als治疗(利鲁唑(riluzole))通过将寿命延长约三个月仅使20％的als患者受益。利鲁唑对肌肉功能的作用非常有限。此外，als被认为是遗传异质性疾病，可能代表具有不同潜在病理状态的数个亚组。由于潜在的疾病机制不同，目前没有可用的治疗，患者定制的治疗也不可能帮助所有als患者。
3、因此，仍然需要用于als和其他类似als的疾病(“als样疾病”)的新的治疗。
技术实现思路
1.抗musk抗体或其抗原结合片段，其用于在人对象中治疗神经肌肉病症。
2.根据权利要求1所述应用的抗musk抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结合片段结合seq id no:129的musk卷曲(fz)样结构域序列。
3.根据权利要求1或2所述应用的抗musk抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含野生型人igg恒定fc区，所述野生型人igg恒定fc区与seq id no:266或seqid no:267包含至少80％序列同一性。
4.根据前述权利要求中任一项所述应用的抗musk抗体或其抗原结合片段，其为激动剂musk抗体并且/或者效应物功能已被降低或消除。
5.优选地根据前述权利要求中任一项所述应用的抗musk抗体或其抗原结合片段，其中效应物功能的降低或消除是通过将以下突变(均根据eu编号系统编号)的一个或更多个引入基于抗体的分子的恒定区seq id no:266或seq id no:267中获得的：n297a替换；n297q替换；l234a替换；l234d替换；l234e替换；l234g替换；l234h替换；l234f替换；l234k替换；l234q替换；l234r替换；l234s替换；l234t替换；l235a替换；l235d替换；l235e替换；l235f替换；l235g替换；l235v替换；l235h替换；l235i替换；l235k替换；l235r替换；l235s替换；l235t替换；l235q替换；l237a替换；s239d替换；e233p替换；l234v替换；c236缺失；g236e替换；g236r替换；g236k替换；g237a替换；p238a替换；f243l替换；d265a替换；s267e替换；h268a替换；r292p替换；y300l替换；k322a替换；k322q替换；a327q替换；l328f替换；l328r替换；p329a替换；p329g替换；a330l替换；a330s替换；p331s替换；i332e替换；p396l替换；或者在本申请的第四实施方案中前面描述的突变的组合的每一者，优选地所述突变是l234a或l235a，更优选地所述突变是l234a和l235a。
6.优选地根据前述权利要求中任一项所述应用的抗musk抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含野生型人igg恒定fc区seq id no:266或seq id no:267，并且其中将根据eu编号系统编号的l234a和l235a突变引入所述fc区。
7.根据前述权利要求中任一项所述应用的抗musk抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结合片段包含：
8.根据前述权利要求中任一项所述应用的抗musk抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结合片段包含重链可变结构域(vh)和轻链可变结构域(vl)：
9.根据前述权利要求中任一项所述应用的抗musk抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结合片段包含重链可变结构域(vh)和轻链可变结构域(vl)：
10.根据前述权利要求中任一项所述应用的抗musk抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结合片段包含：
11.抗musk抗体或其抗原结合片段，其用于在人对象中治疗神经肌肉病症，其中所述抗体或抗原结合片段包含如表3中所确定的重链可变结构域(vh)和轻链可变结构域(vl)以及/或者如表1或2中所确定的cdr。
12.抗musk抗体或其抗原结合片段，其优选地用于在人对象中治疗神经肌肉病症，其中所述抗体或抗原结合片段含有：
13.抗musk抗体或其抗原结合片段，其优选地用于根据权利要求12所述应用，其中所述抗体或抗原结合片段包含：
14.抗musk抗体或其抗原结合片段，其优选地用于根据权利要求12所述应用，其中所述抗体或抗原结合片段包含：
15.多核苷酸，其用于在人对象中治疗神经肌肉病症，所述多核苷酸包含编码权利要求1至14中任一项所述的抗体或其抗原结合片段或者其vh或vl或cdr的核苷酸序列。
16.表达载体，其用于在人对象中治疗神经肌肉病症，其包含权利要求15所述的多核苷酸，优选地与允许抗体或其抗原结合片段或者其vh或vl或cdr在宿主细胞或无细胞表达系统中表达的调节区可操作地连接。
17.宿主细胞或无细胞表达系统，其用于在人对象中治疗神经肌肉病症，其含有权利要求16所述的表达载体。
18.组合物，其用于在人对象中治疗神经肌肉病症，其包含如权利要求1至14中任一项所限定的抗体或其抗原结合片段、如权利要求15中所限定的多核苷酸、如权利要求中16所限定的表达载体或者如权利要求17中所限定的宿主细胞或无细胞表达系统。
19.根据权利要求18所述的组合物，其用于在人对象中治疗神经肌肉病症，其为包含至少一种可药用载体或赋形剂的药物组合物。
20.根据前述权利要求中任一项所述应用的抗musk抗体或其抗原结合片段、多核苷酸、表达载体、宿主细胞、无细胞表达系统或者组合物，其中所述抗体或抗原结合片段，多核苷酸、表达载体、宿主细胞、无细胞表达体系或者组合物与抗胆碱能化合物组合施用。
21.根据权利要求20所述应用的抗musk抗体或其抗原结合片段、多核苷酸、表达载体、宿主细胞、无细胞表达系统或者组合物，其中所述抗胆碱能化合物单独、顺序或同时施用。
22.根据权利要求20或21中任一项所述应用的抗musk抗体或其抗原结合片段、多核苷酸、表达载体、宿主细胞、无细胞表达系统或者组合物，其中所述抗胆碱能化合物是毒蕈碱受体拮抗剂，优选地是对毒蕈碱受体m1和/或毒蕈碱受体m3和/或毒蕈碱受体m5具有选择性的毒蕈碱受体拮抗剂。
23.根据权利要求22中任一项所述应用的抗musk抗体或其抗原结合片段、多核苷酸、表达载体、宿主细胞、无细胞表达系统或者组合物，其中所述毒蕈碱受体拮抗剂对毒蕈碱受体m3具有选择性，优选地其中所述抗胆碱能化合物是达非那新、异丙托溴铵、噻托溴铵或曲司氯铵。
24.根据前述权利要求中任一项所述应用的抗musk抗体或其抗原结合片段、多核苷酸、表达载体、宿主细胞、无细胞表达系统或者组合物，其中所述神经肌肉病症的特征在于神经肌肉传递受损和/或nmj(神经肌肉接头)处的去神经。
25.根据前述权利要求中任一项所述应用的抗musk抗体或其抗原结合片段、多核苷酸、表达载体、宿主细胞、无细胞表达系统或者组合物，其中所述神经肌肉病症的特征在于以下至少一种：
26.根据前述权利要求中任一项所述应用的抗musk抗体或其抗原结合片段、多核苷酸、表达载体、宿主细胞、无细胞表达系统或者组合物，其中所述神经肌肉病症选自以下：肌萎缩侧索硬化(als)、脊髓性肌萎缩(sma)、重症肌无力(mg)、先天性肌无力、兰伯特-伊顿肌无力综合征(lems)、莱姆病、脊髓灰质炎、脊髓灰质炎后、重金属中毒、肯尼迪综合征、成年发作的泰-萨克斯病、遗传性痉挛性截瘫、多灶性神经病、颈椎病、髓外肿瘤伴压迫性神经根病和脊髓病、包涵体肌炎、进行性延髓麻痹、进行性肌萎缩、运动神经元综合征和甲状腺毒性肌病。
27.根据权利要求1至14中任一项或当回引权利要求1至14中任一项时权利要求15至26中任一项所述应用的抗musk抗体或抗原结合片段，其中所述病症为als。
28.抗musk抗体或其抗原结合片段，其用于在人对象中治疗als，其中所述抗体或抗原结合片段施用于无症状人对象，优选地在疾病发作之前1、2、3、4、5或6个月内施用于无症状人对象。
29.根据权利要求28所述的抗musk抗体或其抗原结合片段，其中所述无症状人对象被诊断为易于发生神经肌肉病症或疾病。
30.根据权利要求28或29所述应用的抗musk抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结合片段结合seq id no:129的musk卷曲(fz)样结构域序列。
31.根据权利要求28至30所述应用的抗musk抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结合片段包含：
32.根据权利要求28至31中任一项所述应用的抗musk抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结合片段包含：
33.根据权利要求20至27中任一项所述应用的抗musk抗体或其抗原结合片段、多核苷酸、表达载体、宿主细胞、无细胞表达系统或者组合物，其中所述抗胆碱能化合物在疾病发作时施用或者在疾病发作之后1、2、3、4、5、6或7周内施用。
34.组合，其包含抗musk抗体或其抗原结合片段和抗胆碱能化合物，其优选地用于在人对象中治疗als。
35.根据权利要求34所述的组合，其中所述抗体或抗原结合片段施用于无症状人对象，优选地在疾病发作之前1、2、3、4、5或6个月内施用于无症状人对象，以及/或者其中所述抗胆碱能化合物在疾病发作时施用或在疾病发作之后1、2、3、4、5、6或7周内施用。
36.根据权利要求35所述的组合，其中用所述抗体治疗的无症状人对象已首先被诊断为易于发生神经肌肉病症或疾病。
37.根据权利要求34至36所述的组合，其中所述抗musk抗体或其抗原结合片段结合seqid no:129的musk卷曲(fz)样结构域序列。
38.根据权利要求34至37中任一项所述的组合，其中所述抗musk抗体或其抗原结合片段包含：
39.根据权利要求34至38中任一项所述的组合，其中所述抗体或抗原结合片段包含：
40.根据权利要求1至39中任一项所述应用的抗musk抗体或其抗原结合片段、组合、多核苷酸、表达载体、宿主细胞、无细胞表达系统或者组合物，其中在疾病发作时，将所述抗musk抗体或其抗原结合片段、组合、多核苷酸、表达载体、宿主细胞、无细胞表达系统或者组合物施用于无症状人对象，优选地在疾病发作之前1、2、3、4、5或6个月内将所述抗musk抗体或其抗原结合片段、组合、多核苷酸、表达载体、宿主细胞、无细胞表达系统或者组合物施用于无症状人对象。
41.根据权利要求40所述应用的抗musk抗体或其抗原结合片段、组合、多核苷酸、表达载体、宿主细胞、无细胞表达系统或者组合物，其中疾病发作包括至少一种选自以下的症状：肌肉颤搐、肌肉痉挛、痉挛、肌无力、口齿不清和/或鼻音、咀嚼困难或吞咽困难、吞咽困难、构音障碍和呼吸困难。
42.根据前述权利要求中任一项所述应用的抗musk抗体或其抗原结合片段、组合、多核苷酸、表达载体、宿主细胞、无细胞表达系统或者组合物，其中在以下中通过电生理学评估或药效学评估来分析神经肌肉病症：在血清、血浆和/或脑脊液(csf)中的神经丝(例如神经丝轻链(nfl))；或者nmj活检。
43.根据前述权利要求中任一项所述应用的抗musk抗体或其抗原结合片段、组合、多核苷酸、表达载体、宿主细胞、无细胞表达系统或者组合物，其中向所述人对象施用所述抗musk抗体或其抗原结合片段、所述组合、多核苷酸、表达载体，宿主细胞、无细胞表达系统或者组合物导致以下治疗作用的一种或更多种：
44.根据前述权利要求中任一项所述应用的抗musk抗体或其抗原结合片段、组合、多核苷酸、表达载体、宿主细胞、无细胞表达系统或者组合物，其中所述治疗导致所述病症的稳定。
45.根据前述权利要求中任一项所述应用的抗musk抗体或其抗原结合片段、组合、多核苷酸、表达载体、宿主细胞、无细胞表达系统或者组合物，其中相对于没有用所述抗musk抗体或其抗原结合片段、多核苷酸、表达载体、宿主细胞、无细胞表达系统或者组合物治疗的人对象，所述神经肌肉病症的治疗导致受治人对象通过电生理学评估或药效学评估中的改善；在血清、血浆和/或脑脊液(csf)中的神经丝(例如神经丝轻链(nfl))中的改善；或者在nmj活检中的改善。
