本发明属于植物提取，具体涉及一种连翘多糖的提取工艺。
背景技术：
1、连翘是一种常见的中药材，属于木犀科连翘属的植物，连翘具有较高的药用价值，其干燥的枝叶及花朵常被用于中医临床，以治疗感冒、发热、咽喉肿痛、黄疸型肝炎等症状。在传统中医理论中，连翘性寒、味苦，具有清热解毒、消肿散结的功效，连翘的原产地为中国，但由于其具有较强的适应性，现已在世界范围内广泛栽培，在中国的许多地区，连翘不仅是一种重要的药用资源，也成为了春天的一道风景线，每年春季，连翘花开，满山金黄，吸引着众多游客前来赏花，带动了当地的旅游业发展，近年来，随着和中医药产业的发展，连翘的种植得到了大规模推广，连翘多糖是连翘中的一个重要活性成分，具有多种生物活性，如抗病毒、抗肿瘤、免疫调节等。因此，连翘多糖的提取工艺研究受到了广泛关注。
2、现有技术中在对连翘进行多糖提取时，提取工艺较为简单，而且对其提取影响因素并不清楚，从而使得多糖的提取率较低，因此我们提供一种连翘多糖提取工艺，以解决上述提出的问题。
技术实现思路
1、本发明的目的在于提供一种连翘多糖的提取工艺，旨在解决现有技术中的在对连翘进行多糖提取时，提取工艺较为简单，而且对其提取影响因素并不清楚，从而使得多糖的提取率较低，的问题。
2、为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
3、一种连翘多糖的提取工艺，包括如下步骤：
4、s1、首先将300克连翘放入中药破壁机中进行粉碎，并对粉碎后的连翘通过进行筛选，筛选后得到连翘粉末，然后进行分装，待用；
5、s2、称取10mg的葡萄糖标准品，并将其溶解于水中，定容至50ml，制备出浓度为0.2mg/ml的葡萄糖标准溶液，接着，依次移取0、0.02、0.04、0.06、0.08、0.10和0.12ml的葡萄糖标准溶液至试管中，每个试管用蒸馏水补至1.0ml，同时以蒸馏水作为空白对照组，然后，分别向每个试管加入0.5ml的6％苯酚和2.5ml的浓硫酸，静置20min，之后置于沸水浴中加热15min。从沸水浴中取出后静置1h，使用酶标仪在490nm波长处测量吸光度，以葡萄糖浓度为横坐标x，吸光度值为纵坐标y，利用所得数据点绘制多糖标准曲线，并进行线性回归分析，得出回归方程和系数，用于评估，待用；
6、s3、进行多糖得率的计算，使用移液枪准确吸取0.5ml的粗多糖提取液，然后加入蒸馏水将其稀释30倍，并混匀，得到混合液体，再用移液枪吸取0.5ml的稀释后的混合液体，利用s2中获得线性方程计算多糖含量，以测量的吸光度值来计算连翘多糖浓度；
7、s4、提取连翘中多糖，并对提取的多糖进行对比以及实验测定。
8、作为本发明一种优选的方案，所述步骤s1中对粉碎后的连翘筛选通过五十目进行筛选。
9、作为本发明一种优选的方案，所述步骤s1中连翘粉末分装后置于避光干燥条件下存储。
10、作为本发明一种优选的方案，所述步骤s2中回归方程为
11、y＝6.5225x+0.0005，确定系数：r2＝0.9992。
12、作为本发明一种优选的方案，所述步骤s3中多糖浓度计算公式为：
13、
14、其中：
15、c——连翘多糖浓度(mg/ml)；
16、f——稀释倍数；
17、v——多糖提取液总体积(ml)；
18、m——提取原料质量(mg)。
19、作为本发明一种优选的方案，所述步骤s4中提取连翘中多糖的方式包括水提法、超声辅助提取法、闪式提取法、超声辅助结合闪式提取法、木瓜蛋白酶提取法、果胶酶提取法、木瓜蛋白酶结合超声辅助提取法、木瓜蛋白酶结合闪式提取法、果胶酶结合超声辅助提取法以及果胶酶结合闪式提取法。
20、作为本发明一种优选的方案，还包括连翘多糖提取液的脱蛋白，所述脱蛋白包括如下步骤：
21、ⅰ：首先称取5g三氯乙酸，放置于蒸馏水中完全溶解，然后定容至50ml，得到体积分数为10％的三氯乙酸溶液；
22、ⅱ：然后使用蒸馏水配制出20mg/ml浓度的粗多糖溶液，并从中取20ml放入容器中，按1:1的体积比滴加10％三氯乙酸溶液，并震荡10min后得到混合液，将混合液在4℃条件下静置4h，以促进蛋白质的沉淀，将静置后的溶液在5000r/min下离心15min，使用真空抽滤法去除蛋白质沉淀，保留上清液；
23、ⅲ：最后，测定处理前后样品中的多糖与蛋白质含量，计算多糖的保留率和蛋白质的脱除率。
24、作为本发明一种优选的方案，所述蛋白质脱除率计算公式如下：
25、
26、其中：l——蛋白质脱除率；
27、m1——初始蛋白质含量；
28、m2——除蛋白后蛋白质含量。
29、作为本发明一种优选的方案，还包括连翘多糖抗氧化活性实验、连翘多糖保湿活性实验、连翘多糖抗炎活性实验以及连翘多糖美白活性。
30、作为本发明一种优选的方案，所述连翘多糖抗氧化活性实验包括dpph自由基清除率对比、abts自由基清除率以及总还原力对比；所述连翘多糖保湿活性实验包括保湿实验和吸湿实验。
31、与现有技术相比，本发明的有益效果是：
32、本发明多种对比多种提取方式，得到连翘多糖最优的提取工艺，同时探索了不同因素对于连翘多糖的提取率影响，例如超声功率、超声时间、超声温度、料液比等因素，在实验中得到每种影响因素对于多糖提取时，采用的数值都是能够提高连翘多糖提取率的效果，而且本发明还对提取的多糖进行实验测定，得出提取出来的多糖具有抗氧化性、还原性、吸湿性等功能作用。
1.一种连翘多糖的提取工艺，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种连翘多糖的提取工艺，其特征在于，所述步骤s1中对粉碎后的连翘筛选通过五十目进行筛选。
3.根据权利要求2所述的一种连翘多糖的提取工艺，其特征在于，所述步骤s1中连翘粉末分装后置于避光干燥条件下存储。
4.根据权利要求3所述的一种连翘多糖的提取工艺，其特征在于，所述步骤s2中回归方程为y＝6.5225x+0.0005，确定系数：r2＝0.9992。
5.根据权利要求4所述的一种连翘多糖的提取工艺，其特征在于，所述步骤s3中多糖浓度计算公式为：
6.根据权利要求5所述的一种连翘多糖的提取工艺，其特征在于，所述步骤s4中提取连翘中多糖的方式包括水提法、超声辅助提取法、闪式提取法、超声辅助结合闪式提取法、木瓜蛋白酶提取法、果胶酶提取法、木瓜蛋白酶结合超声辅助提取法、木瓜蛋白酶结合闪式提取法、果胶酶结合超声辅助提取法以及果胶酶结合闪式提取法。
7.根据权利要求6所述的一种连翘多糖的提取工艺，其特征在于，还包括连翘多糖提取液的脱蛋白，所述脱蛋白包括如下步骤：
8.根据权利要求7所述的一种连翘多糖的提取工艺，其特征在于，所述蛋白质脱除率计算公式如下：
9.根据权利要求8所述的一种连翘多糖的提取工艺，其特征在于，还包括连翘多糖抗氧化活性实验、连翘多糖保湿活性实验、连翘多糖抗炎活性实验以及连翘多糖美白活性。
10.根据权利要求9所述的一种连翘多糖的提取工艺，其特征在于，所述连翘多糖抗氧化活性实验包括dpph自由基清除率对比、abts自由基清除率以及总还原力对比；所述连翘多糖保湿活性实验包括保湿实验和吸湿实验。
