本发明涉及食品加工，具体涉及一种rg-i型橙肉水溶性果胶及其制备方法。
背景技术：
1、果胶是一类广泛存在于植物初生细胞壁和胞间层的酸性杂多糖，在食品、医药等领域常用做增稠剂、凝胶剂、乳化剂和稳定剂。果胶分子主链主要由α-1,4-糖苷键连接的d-半乳糖醛酸(d-gala)单元组成，其侧链主要由阿拉伯糖(ara)、鼠李糖(rha)和半乳糖(gal)组成。植物中的果胶主要包含连续的线性结构域(同型聚半乳糖醛酸，hg)和分支结构域(鼠李半乳糖醛酸聚糖i区，rg-i和鼠李半乳糖醛酸聚糖ⅱ区，rg-ⅱ)。其中hg区又被称为“光滑区”，是α-1,4-糖苷键连接的半乳糖醛酸线性均聚物。rg-i区被称为“毛发区”，因其中性糖侧链在c-4或c-2、c-3位置与rha相连，导致rg-i区具有高度支化特征。rg-ⅱ区是果胶中结构最复杂、分支性最强的结构域，但在整个果胶分子中占比最低。
2、果胶的分子结构与其来源和提取方式密切相关，商业柑橘果胶主要是由hg区组成，因提取过程的高温、强酸会破坏果胶分子的rg-i区。然而，近年来研究发现rg-i型果胶具有无糖凝胶特性和重要的生物学功能，使得许多研究逐渐将目光转移到rg-i型果胶上来；富含rg-i结构域的果胶具有重要生物活性，例如降低癌症风险、调节肠道菌群和慢性代谢综合征等。近年来，越来越多的研究发现果胶的rg-i侧链区域，不仅不会“阻碍”果胶的凝胶能力，其还具有很强的亲水特性，能与水形成氢键，促进其与水的结合能力，使其具有良好的水溶性。此外，rg-i区侧链之间相互连接能稳定凝胶网络结构，使其表现出良好的凝胶特性。
3、目前已经有学者从多种植物中提取得到rg-i型果胶，如柑橘、红火龙果皮、海棠果、南瓜、苹果幼果等。但目前大部分学者主要通过碱提或酶提法制备富含rg-i结构域的果胶，通过碱提法或酶法制备rg-i型果胶存在以下几个缺陷：(1)剧烈的碱液会显著改变果胶的分子结构，碱性条件下，果胶的hg区会大量水解，此外，浓碱还可能导致阿拉伯聚糖侧链发生水解，最终造成rg-i型果胶产量较低；(2)通过碱提制备的果胶可能面临溶解性差的风险，从而降低其商业价值；(3)值得注意的是，采用碱提法制备rg-i型果胶会产生大量碱性废液，废液的处理会增加工厂的生产成本；(4)酶法提取虽然处理条件温和、绿色环保，但酶价格昂贵，也会增加生产成本。
技术实现思路
1、本发明的目的在于至少解决现有技术中存在的技术问题之一，为了解决现有技术存在的rg-i型果胶产量较低、溶解性差且生产成本高的技术问题，提供一种rg-i型橙肉水溶性果胶及其制备方法，以橙子为原料，首先制备乙醇不溶物，再从乙醇不溶物中提取水溶性果胶，所得果胶中rg-i结构域摩尔比例达到56.73％。
2、本发明的技术解决方案如下：
3、本发明的第一方面提供一种rg-i型橙肉水溶性果胶的制备方法，包括以下步骤：
4、(1)将赣南脐橙去皮，果肉压榨、粗滤、加热灭酶得到橙汁；
5、(2)将步骤(1)得到的橙汁与95％乙醇混合，然后置于低温下醇沉，最后离心收集沉淀物；
6、(3)将步骤(2)中得到的沉淀物用80％乙醇洗涤，直到上清液无色透明为止，离心得到乙醇不溶物；
7、(4)将步骤(3)中得到的乙醇不溶物加入超纯水中，搅拌，离心取上清液；
8、(5)将步骤(4)中得到的上清液用透析袋透析，冻干，得到冻干粉末；
9、(6)将步骤(5)中得到的冻干粉末溶解于超纯水中，加入95％乙醇，进行醇沉，静置，离心，得到沉淀；
10、(7)将步骤(6)中得到的沉淀挥干乙醇后加入超纯水复溶，搅拌，冻干，得到橙肉rg-i型水溶性果胶。
11、本发明的一些具体实施方式，步骤(2)中，将橙汁与95％乙醇按照1:3.5～4.5的体积进行混合，置于0～4℃下醇沉。优选地，将橙汁与95％乙醇按照1:3.7～4.3的体积进行混合，置于2～4℃下醇沉；更优选地，将橙汁与95％乙醇按照1:4的体积进行混合，置于4℃下醇沉。
12、本发明的一些具体实施方式，步骤(4)中，将乙醇不溶物按照质量比1：50-90加入超纯水中，搅拌12-24h后，5000～7000rpm离心10～20min。优选地，将乙醇不溶物按照质量比1：70-90加入超纯水中，搅拌16-24h后，5500～6500rpm离心12～18min。更优选地，将乙醇不溶物按照质量比1：80-90加入超纯水中，搅拌20-24h后，5700～6300rpm离心14～16min。
13、本发明的一些具体实施方式，步骤(5)中，将上清液用截留量为7000～9000da的透析袋透析24-72h。优选地，将上清液用截留量为7500～8500da的透析袋透析48-72h。更优选地，将上清液用截留量为7700～8700da的透析袋透析60-72h。
14、本发明的一些具体实施方式，步骤(5)中，冻干粉末与95％乙醇的料液比为1g:2.5～3.5ml的，进行醇沉，静置14～20h后，7000～9000rpm离心12～18min。优选地，冻干粉末与95％乙醇的料液比为1g:2.8～3.2ml的，进行醇沉，静置15～18h后，7500～8500rpm离心14～16min。更优选地，冻干粉末与95％乙醇的料液比为1g:3ml的，进行醇沉，静置16h后，8000rpm离心15min。
15、本发明的一些具体实施方式，步骤(6)中，将得到的沉淀置于通风橱挥干乙醇后加入超纯水复溶，室温搅拌20～28h后，装入冻干盘中冻干；优选为搅拌22～26h，更优选为24h。
16、本发明的第二方面提供一种采用上述的方法制备的rg-i型橙肉水溶性果胶，rg-i区的摩尔比为52～57％，rha/gala比率为0.04～0.05，ara为25～28％，gal为25～30％，gala为19～23％，gala/(fuc+rha+glca+ara+gal+xyl)为0.3～0.4，mw为1200～1700kda。
17、本发明至少具有以下有益效果之一：
18、1、本发明在中性条件下，通过制备乙醇不溶物得到橙肉细胞壁多糖，再采用超纯水在室温条件下提取水溶性果胶，从而降低提取成本和能耗，在不改变橙肉细胞壁中果胶的天然结构的情况下，获得富含rg-i型结构域的水溶性果胶；
19、2、本发明提取的水溶性果胶，rg-i区的摩尔比最高为56.73％，rg-i区的侧链最大长度为63.67，具有较多的中性糖侧链。
20、3、本发明采用先制备乙醇不溶物再提取水溶性果胶，通过料液比、醇沉时间、透析时间等参数来调控水溶性果胶的生产。
1.一种rg-i型橙肉水溶性果胶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种rg-i型橙肉水溶性果胶的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，将橙汁与95％乙醇按照1:3.5～4.5的体积进行混合，置于0～4℃下醇沉。
3.根据权利要求1所述的一种rg-i型橙肉水溶性果胶的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，将橙汁与95％乙醇按照1:4的体积进行混合，置于4℃下醇沉。
4.根据权利要求1所述的一种rg-i型橙肉水溶性果胶的制备方法，其特征在于，步骤(4)中，将乙醇不溶物按照质量比1：50-90加入超纯水中，搅拌12-24h后，5000～7000rpm离心10～20min。
5.根据权利要求1所述的一种rg-i型橙肉水溶性果胶的制备方法，其特征在于，步骤(4)中，将乙醇不溶物按照质量比1：70-90加入超纯水中，搅拌16-24h后，5500～6500rpm离心12～18min。
6.根据权利要求1所述的一种rg-i型橙肉水溶性果胶的制备方法，其特征在于，步骤(5)中，将上清液用截留量为7000～9000da的透析袋透析24-72h。
7.根据权利要求1所述的一种rg-i型橙肉水溶性果胶的制备方法，其特征在于，步骤(5)中，将上清液用截留量为7500～8500da的透析袋透析48-72h。
8.根据权利要求1所述的一种rg-i型橙肉水溶性果胶的制备方法，其特征在于，步骤(5)中，冻干粉末与95％乙醇的料液比为1g:2.5～3.5ml的，进行醇沉，静置14～20h后，7000～9000rpm离心12～18min。
9.根据权利要求1所述的一种rg-i型橙肉水溶性果胶的制备方法，其特征在于，步骤(5)中，冻干粉末与95％乙醇的料液比为1g:2.8～3.2ml的，进行醇沉，静置15～18h后，7500～8500rpm离心14～16min。
10.一种采用权利要求1～9任一所述的方法制备的rg-i型橙肉水溶性果胶，其特征在于，rg-i区的摩尔比为52～57％，rha/gala比率为0.04～0.05，ara为25～28％，gal为25～30％，gala为19～23％，gala/(fuc+rha+glca+ara+gal+xyl)为0.3～0.4，mw为1200～1700kda。
