本发明涉及食品检测,具体而言,涉及一种利用hplc同时检测多种药食同源性物质功能成分的方法。
背景技术:
1、药食同源物质是指被列入《按照传统既是食品又是中药材物质目录》的物质。因其功效丰富、来源广泛,被普遍应用于保健食品等领域。许多白酒企业将“药食同源”的中药材及其提取物作为主要生产原料用于研发露酒、保健酒等功能性白酒。
2、《中国药典》中以葛根素、芦丁、绿原酸、松果菊苷和毛蕊花糖苷、罗汉果甜苷v、人参皂苷r分别作为葛根、槐花、金银花、肉苁蓉、罗汉果、人参的重要功能成分和质量评价指标。其中葛根药食同源历史悠久,含有黄酮、皂苷和三萜等成分。葛根素是从葛根中提取的一种黄酮类化合物,具有提高心脏功能、降低炎症反应,保肝、改善心脑血管疾病的药理作用。槐花作为首批列入药食同源的物质,具有凉血止血、清肝泻火之功效。芦丁是其发挥作用的重要功能成分,具有抗炎、抑菌和降血脂的作用。金银花中富含多种药理成分,包括绿原酸、木樨素、挥发油等,其中绿原酸是金银花主要的抗菌抗炎、抗氧化的有效药理成分之一。肉苁蓉具有“沙漠人参”之称,有补肾壮阳、增强免疫力之功效。经批准的含有肉苁蓉的保健食品中主要活性成分包括松果菊苷、毛蕊花糖苷和粗多糖等。罗汉果具清热润肺、滑肠通便之功效,目前的研究主要集中于甜苷类活性成分。gb1886.77-2016《食品安全国家标准食品添加剂罗汉果甜苷》中以罗汉果甜苷v作为主要有效成分,以其含量作为质量控制指标。人参被誉为百草之王,具大补元气、复脉固脱、补脾益肺和生津养血之功效,皂苷是其发挥功效的主要活性成分之一。人参皂苷re作为人参中重要的功能成分,有研究发现其在神经炎症、免疫调节起突出作用。枳椇子是典型的解酒保肝中药材,含黄酮、生物碱、脂肪酸等有效成分。研究报道二氢杨梅素是枳椇子中主要的活性成分,具有降压、抗氧化、抗菌等功效。
3、高效液相色谱法(hplc)是目前应用最广泛的测定药食同源性物质功能成分的方法。对于葛根素、芦丁、绿原酸、松果菊苷和毛蕊花糖苷、罗汉果甜苷v、人参皂苷re及二氢杨梅素检测方法的研究已有报道,但多是针对单一成分测定的方法建立,适用范围窄、检测效率低。
技术实现思路
1、本发明的目的在于提供一种利用hplc同时检测多种药食同源性物质功能成分的方法,其能够实现对上述葛根素、芦丁、绿原酸、松果菊苷、毛蕊花糖苷、罗汉果甜苷v、人参皂苷re以及二氢杨梅素8种功能成分的同时测定,为中药材及其提取物质量控制和品质评价提供更为便捷的技术手段,具有通用性好、适用范围广、灵敏快速的特点。
2、本发明的实施例是这样实现的:
3、一种利用hplc同时检测多种药食同源性物质功能成分的方法,其包括:
4、将包含多种药食同源性物质功能成分的待测样品溶解后,利用hplc对待测样品进行分离,通过紫外检测器检测多种药食同源性物质功能成分在205~215nm处的出峰情况;
5、其中,药食同源性物质功能成分包括葛根素、芦丁、绿原酸、松果菊苷、毛蕊花糖苷、罗汉果甜苷v、人参皂苷re以及二氢杨梅素。
6、进一步地,在本发明其它较佳实施例中,hplc分离测试条件为:
7、色谱柱agilent eclipse xdb-c18,色谱柱尺寸为4.6×250mm,柱温25~35℃,流速0.5~0.8ml/min。
8、进一步地,在本发明其它较佳实施例中,hplc分离的流动相为乙腈和磷酸水溶液。
9、进一步地,在本发明其它较佳实施例中,磷酸水溶液的浓度为0.05wt%~0.2wt%。
10、进一步地,在本发明其它较佳实施例中,hplc分离采用梯度洗脱,梯度洗脱程序如下:
11、
12、进一步地,在本发明其它较佳实施例中,hplc分离各药食同源性物质功能成分的保留时间为:
13、葛根素19~20min,芦丁25~26min,绿原酸17~18min,松果菊苷21~22min,毛蕊花糖苷26~27min,罗汉果甜苷v31~32min,人参皂苷re 33~34min。
14、进一步地,在本发明其它较佳实施例中,将多种药食同源性物质功能成分的标准品分别配制成多个浓度的混合标准溶液,利用hplc对待测样品进行分离,通过紫外检测器检测205~215nm处的出峰情况;以质量浓度为横坐标x,峰面积为纵坐标y建立标准曲线(如下表)。
15、
16、进一步地,在本发明其它较佳实施例中,将待测样品中测得的各个药食同源性物质功能成分的峰面积代入到线性方程中,定量得到待测样品中各个药食同源性物质的质量浓度,各个药食同源性物质的检出限和定量如下:
17、
18、进一步地,在本发明其它较佳实施例中,待测样品用醇溶剂在超声辅助下进行溶解,溶解完成后用0.22μm微孔滤膜进行过滤,再进行hplc检测。
19、本发明实施例的有益效果是:
20、本发明实施例提供了一种利用hplc同时检测多种药食同源性物质功能成分的方法,其将多种药食同源性物质功能成分的待测样品溶解后,利用hplc对所述待测样品进行分离,通过紫外检测器检测多种所述药食同源性物质205~215nm处的出峰情况。通过分离条件的筛选,该方法可以实现对上述8种功能成分的同时测定,该方法具有高效率、高准确度、高灵敏度的特点,为中药材及其提取物质量控制和品质评价提供更为便捷的技术手段,具有较佳的实用价值。
1.一种利用hplc同时检测多种药食同源性物质功能成分的方法,其特征在于,包括:
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,hplc分离测试条件为:
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,hplc分离的流动相为乙腈和磷酸水溶液。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述磷酸水溶液的浓度为0.05wt%~0.2wt%。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,hplc分离采用梯度洗脱,梯度洗脱程序如下:
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,hplc分离各所述药食同源性物质功能成分的保留时间为:
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,将多种所述药食同源性物质功能成分的标准品分别配制成多个浓度的混合标准溶液,利用hplc对所述待测样品进行分离,通过紫外检测器检测205~215nm处的出峰情况;以质量浓度为横坐标x,峰面积为纵坐标y建立标准曲线;各个所述药食同源性物质的标准曲线如下:
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,将所述待测样品中测得的各个所述药食同源性物质功能成分的峰面积代入到线性方程中,定量得到所述待测样品中各个所述药食同源性物质的质量浓度,各个所述药食同源性物质的检出限和定量如下:
9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,所述待测样品用醇溶剂在超声辅助下进行溶解,溶解完成后用0.22μm微孔滤膜进行过滤,再进行hplc检测。