本发明涉及一种重组ⅰ型胶原蛋白pro.c1及其制备方法和应用,属于蛋白表达。
背景技术:
1、胶原蛋白是一种高级蛋白质,其分子由多种氨基酸组成,包括脯氨酸、甘氨酸等,其独特的生物活性构建在三股超螺旋的三维结构之上。作为人体内含量最为丰富、分布最为广泛的蛋白质,胶原蛋白在皮肤、骨骼和结缔组织中构建出坚韧的支撑结构,与维持皮肤的年轻状态、创伤愈合和细胞再生等关键过程密切相关。成年人皮肤主要富含i型胶原蛋白,而婴幼儿皮肤则以iii型胶原蛋白为主,这赋予皮肤细腻和弹性。然而,随着年龄的增长,人体合成iii型胶原蛋白的能力下降,胶原蛋白的流失加速,从而引发皮肤衰老的迹象。
2、衰老是生物体内自然发生而又无法避免的一个生理过程。衰老通常伴随着一种慢性、低度、全身性炎症,涉及到炎症网络激活和相关细胞因子的释放,包括关键的促炎介质如tnf-α、il-6以及il-1β等,这一过程是诱导衰老及衰老相关疾病的重要驱动力。衰老作为一种复杂的生理机制,目前存在自由基学说、损伤学说、遗传学说、免疫学说、端粒学说等。在1956年denham harman提出的衰老的自由基学说,认为衰老过程中的退行性变化是由于细胞正常代谢过程中产生自由基的有害作用造成的。这里所说的自由基主要就是氧自由基,例如超氧阴离子自由基、脂氧自由基、羟自由基、二氧化氮和一氧化氮自由基。而维持体内适当水平的抗氧化剂和自由基消除剂水平可以延长寿命和推迟衰老。
3、越来越多的研究显示胶原蛋白可能具有抗衰老、抗炎和促胶原再生的功效。然而,这需要对胶原蛋白的序列进行深入分析,获得适当的序列才能有效发挥相应的功效,导致目前还没有合适的胶原蛋白得到广泛应用。
技术实现思路
1、本发明的目的是提供一种重组ⅰ型胶原蛋白pro.c1。
2、本发明采用的技术方案:
3、一种重组ⅰ型胶原蛋白pro.c1,其氨基酸序列如seq id no.5所示。
4、前述的重组ⅰ型胶原蛋白pro.c1的编码基因。
5、优选的,其核苷酸序列如seq id no.6所示。
6、前述的重组ⅰ型胶原蛋白pro.c1的表达载体。
7、前述的重组ⅰ型胶原蛋白pro.c1的宿主菌。
8、前述的重组ⅰ型胶原蛋白pro.c1的制备方法,其步骤包括:
9、(1)构建前述的表达载体,将其转化到表达宿主菌中;
10、(2)培养表达宿主菌,诱导重组蛋白表达;
11、(3)纯化表达产物,得到前述的重组ⅰ型胶原蛋白pro.c1。
12、前述的重组ⅰ型胶原蛋白pro.c1在促进细胞体外增殖中的应用。
13、前述的重组ⅰ型胶原蛋白pro.c1在体外促进细胞贴壁中的应用。
14、前述的重组ⅰ型胶原蛋白pro.c1在体外促进细胞分泌elastin中的应用。
15、前述的重组ⅰ型胶原蛋白pro.c1在促进i型胶原蛋白体外合成中的应用。
16、本发明的有益效果:
17、本发明的重组ⅰ型胶原蛋白pro.c1可由原核生物发酵表达,无细胞毒性,生物活性高,具有促细胞增殖、促胶原蛋白再生、紧致支撑的功效,水溶性好,质量稳定,可广泛应用于护肤品、皮肤修复敷料、医学美容等领域。
1.一种重组ⅰ型胶原蛋白pro.c1,其特征在于其氨基酸序列如seq id no.5所示。
2.权利要求1所述的重组ⅰ型胶原蛋白pro.c1的编码基因。
3.根据权利要求2所述的编码基因,其特征在于其核苷酸序列如seq id no.6所示。
4.权利要求1所述的重组ⅰ型胶原蛋白pro.c1的表达载体。
5.权利要求1所述的重组ⅰ型胶原蛋白pro.c1的宿主菌。
6.权利要求1所述的重组ⅰ型胶原蛋白pro.c1的制备方法,其特征在于其步骤包括:
7.权利要求1所述的重组ⅰ型胶原蛋白pro.c1在促进细胞体外增殖中的应用。
8.权利要求1所述的重组ⅰ型胶原蛋白pro.c1在体外促进细胞贴壁中的应用。
9.权利要求1所述的重组ⅰ型胶原蛋白pro.c1在体外促进细胞分泌elastin中的应用。
10.权利要求1所述的重组ⅰ型胶原蛋白pro.c1在促进i型胶原蛋白体外合成中的应用。