本发明涉及化妆品领域，具体涉及一种4-丁基间苯二酚纳米脂质体的组成、制备和应用。
背景技术：
1、人体肤色差异主要受遗传基因的影响，这些基因决定了皮肤中黑色素的类型、数量和分布。黑色素是由表皮黑色素细胞产生的，这些细胞通过一系列复杂的生化反应，将酪氨酸转化为黑色素。这个过程主要由三个关键酶催化：酪氨酸酶、酪氨酸酶相关蛋白1和酪氨酸酶相关蛋白2。酪氨酸在酪氨酸酶催化作用下生成多巴，多巴在酪氨酸酶作用下进一步生成多巴醌，多巴醌自身环化后在trp-1和trp-2作用下生成黑色素。黑色素沿着黑色素细胞树突的伸展方向转移，逐步传递到周围的角质形成细胞内，进而引起肤色变化。
2、4-丁基间苯二酚是一种间苯二酚衍生物，通过竞争性争夺酪氨酸酶的活性部位，抑制酪氨酸酶的作用，同时可以抑制trp-1活性，减少体内黑色素的生成，实现美白淡斑的目的。4-丁基间苯二酚抑制酪氨酸酶活性比苯乙基间苯二酚强6倍多，比熊果苷强310倍，但4-丁基间苯二酚具有一定的刺激性，容易引起皮肤刺痛、发红、角质变薄等症状，并且透皮吸收差、易氧化、易变色、遇光热不稳定，这些限制了4-丁基间苯二酚的应用。
技术实现思路
1、本发明的目的在于提供一种4-丁基间苯二酚纳米脂质体的组成、制备和应用，以解决4-丁基间苯二酚易刺激皮肤，易氧化变色和不稳定等问题。
2、为解决上述技术问题，本发明具体提供下述技术方案：
3、本发明公开了一种纳米脂质体，包括：活性物、抗氧化剂、载体物和助剂；所述抗氧化剂包括3-邻-乙基抗坏血酸、抗坏血酸棕榈酸酯、香草酸酯衍生物和十六烷基柠檬酸中的至少一种。香草酸酯衍生物和十六烷基柠檬酸的使用能够防止纳米脂质体中的活性物和纳米脂质体本身受到氧化，从而提高稳定性和保护活性物，延长纳米脂质体的有效性，从而更好的作用于酪氨酸酶和黑色素，增强对酪氨酸酶和黑色素的抑制效果，同时延缓纳米脂质体本身的色度变化。
4、优选地，活性物为4-丁基间苯二酚。
5、优选地，载体物还包括磷脂、胆固醇和dspe-peg2000-lptath；磷脂为大豆卵磷脂、向日葵卵磷脂、氢化卵磷脂、磷脂酰胆碱和氢化磷脂酰胆碱中的至少一种；dspe-peg2000-lptath由dspe-peg2000-nhs与六肽-2共价键和得到。
6、优选地，助剂包括脂类助剂和水相助剂，脂类助剂为辛酸/癸酸甘油三酯，水相助剂为甘油和水。
7、优选地，活性物的使用量与抗氧化剂的使用量的质量比为1：0.1-0.5，与载体物的使用量的质量比为1：0.3-1.8，与助剂的使用量的质量比为1：4.5-16
8、本发明公开了一种纳米脂质体的制备方法，包括：
9、将活性物、抗氧化剂、载体物和脂类助剂混合得到a相，将水相助剂相互混合得到b相；然后将a相加入b相均质，再经过高压微射流处理得到纳米脂质体。
10、优选地，活性物为4-丁基间苯二酚，抗氧化剂为3-邻-乙基抗坏血酸、抗坏血酸棕榈酸酯、香草酸酯衍生物和十六烷基柠檬酸中的至少一种，活性物的使用量与抗氧化剂的使用量的质量比为1：0.1-0.5。
11、优选地，载体物包括磷脂、胆固醇和dspe-peg2000-lptath；磷脂为大豆卵磷脂、向日葵卵磷脂、氢化卵磷脂、磷脂酰胆碱和氢化磷脂酰胆碱中的至少一种；脂类助剂为辛酸/癸酸甘油三酯；水相助剂包括甘油和水。
12、优选地，活性物的使用量与磷脂的使用量的质量比为1：0.2-1.5。
13、优选地，活性物的使用量与胆固醇的使用量的质量比为1：0.05-0.15。
14、优选地，活性物的使用量与dspe-peg2000-lptath的使用量的质量比为1：0.05-0.15。
15、优选地，活性物的使用量与脂类助剂的使用量的质量比为1：1.5-2。
16、优选地，水相助剂包括甘油和水。
17、更优选地，活性物的使用量与甘油的使用量的质量比为1：1.2-3.5。
18、更优选地，甘油的使用量和水的使用量的质量比为1：1.5-3。
19、优选地，a相与b相均质的速度为2500-4000 r/min，均质时间为1.5-5 min，高压微射流的压力为18000-30000psi。
20、本发明公开了一种化妆品，包括上述纳米脂质体或上述方法制备得到的纳米脂质体。
21、本发明公开了一种纳米脂质体的制备方法，包括：
22、将活性物、抗氧化剂、载体物和脂类助剂混合得到a相，将水相助剂相互混合得到b相；然后将a相加入b相均质得到初乳，初乳经过高压微射流处理得到纳米脂质体。
23、优选地，在上述技术方案中，活性物为4-丁基间苯二酚，抗氧化剂为3-邻-乙基抗坏血酸、抗坏血酸棕榈酸酯、香草酸酯衍生物和十六烷基柠檬酸中的至少一种。
24、优选地，在上述技术方案中，活性物的使用量与抗氧化剂的使用量的质量比为1：0.1-0.5。
25、优选地，在上述技术方案中，载体物包括磷脂、胆固醇和dspe-peg2000-lptath。
26、更优选地，在上述技术方案中，磷脂为大豆卵磷脂、向日葵卵磷脂、氢化卵磷脂、磷脂酰胆碱和氢化磷脂酰胆碱中的至少一种。
27、优选地，在上述技术方案中，活性物的使用量与磷脂的使用量的质量比为1：0.2-1.5。
28、优选地，在上述技术方案中，活性物的使用量与胆固醇的使用量的质量比为1：0.05-0.15。
29、优选地，在上述技术方案中，脂类助剂为辛酸/癸酸甘油三酯，活性物的使用量与脂类助剂的使用量的质量比为1：1.5-2。
30、优选地，在上述技术方案中，活性物的使用量与dspe-peg2000-lptath的使用量的质量比为1：0.05-0.15。
31、优选地，在上述技术方案中，水相助剂包括甘油和水，
32、更优选地，活性物的使用量与甘油的使用量的质量比为1：1.2-3.5。
33、更优选地，甘油的使用量和水的使用量的质量比为1：1.5-3。
34、优选地，在上述技术方案中，a相与b相均质的速度为2500-4000 r/min，均质时间为1.5-5 min，高压微射流的压力为18000-30000psi。
35、优选地，在上述技术方案中，高压微射流处理次数为2-4次。
36、优选地，在上述技术方案中，初乳经过高压微射流处理后，在0.2-0.3 μm微孔下过滤。
37、本发明公开了dspe-peg2000-lptath的制备方法，具体为：
38、先将dspe-peg2000-nhs和六肽-2溶解在dmf和氯仿混合液中得到反应混合液，然后调节ph至7.5-8.5，在氩气保护下反应得到反应液，将反应液透析得到透析物，透析物冷冻干燥得到dspe-peg2000-lptath。
39、优选地，dspe-peg2000-nhs的使用量和六肽-2的使用量的质量比为1：0.12-0.17。
40、优选地，dmf和氯仿以1：0.8-1.2的体积比混合。
41、优选地，dspe-peg2000-nhs在dmf和氯仿混合液中的量为0.087g/ml。
42、优选地，ph调节所用溶剂为n-甲基吗啉。
43、优选地，反应温度为23-27℃，反应时间为20-28 h。
44、优选地，透析所用为3500 mw的透析袋。
45、优选地，透析时间为40-50h，每4-6 h换一次去离子水。
46、本发明公开了香草酸酯衍生物的制备方法，具体为：
47、将对甲氧基苄胺加入到马来酸酐乙腈混合溶液中反应得到粗产品。香草酸酯与二氯甲烷混合得到混合液，向混合液中加入粗产品、2-甲基-1,3-丙二醇、二环己基碳二亚胺和4-二甲基氨基吡啶反应得到香草酸酯衍生物。
48、优选地，对甲氧基苄胺的使用量与马来酸酐的使用量的质量比为1：0.8-1.2。
49、优选地，马来酸酐乙腈混合溶液中马来酸酐在乙腈中的量为0.08-0.13g/ml。
50、优选地，香草酸酯的使用量与粗产品的使用量的质量为1：0.7-1.5。
51、优选地，香草酸酯的使用量与2-甲基-1,3-丙二醇的使用量为1：0.4-0.9。
52、优选地，香草酸酯的使用量与二环己基碳二亚胺的使用量的质量为1：1-2。
53、优选地，香草酸酯的使用量与4-二甲基氨基吡啶的使用量的质量为1：0.02-0.1。
54、优选地，制备粗产品过程中，反应结束后，冷却至5-25℃析出固体，固体过滤烘干得到粗产品。
55、优选地，混合液与粗产品、二环己基碳二亚胺和4-二甲基氨基吡啶的反应温度为0-5℃，反应时间为5-8h，反应结束后过滤蒸干得到香草酸酯衍生物。
56、更优选地，在纳米脂质体的制备中，在使用抗氧化剂的基础上，还可以使用加入改性磷脂。其中抗氧化剂为香草酸酯衍生物和十六烷基柠檬酸；改性磷脂能促进活性物在作用过程中的释放和细胞摄取，进而提升纳米脂质体的作用效果，增强对酪氨酸酶和黑色素的抑制，同时还可以增强纳米脂质体的结构稳定性，从而降低色度增长率。
57、优选地，活性物的使用量与改性磷脂的使用量的质量比为1：0.2-1
58、本发明还公开了改性磷脂的制备方法，具体为：
59、以正己烷为溶剂，磷脂和共轭亚油酸乙酯在脂肪酶的作用下反应得到改性磷脂。
60、优选地，磷脂的使用量与共轭亚油酸乙酯的使用量的质量比为1：2.5-3.5。
61、优选地，磷脂的使用量与脂肪酶的使用量的质量比为1：0.15-0.25。
62、优选地，反应速度为180-220r/min，反应温度为50-57℃，反应时间为20-30h。
63、优选地，反应结束后，反应产物需离心分离反应溶液，离心速度为3500-5000r/min，离心时间为8-15min。
64、优选地，反应结束后，需蒸发除去正己烷，蒸发温度为48-55℃。
65、优选地，蒸发结束后，需加入冷丙酮洗涤2-6次分离不溶固形物，不溶固形物在45-55℃真空干燥后即得改性磷脂。
66、本发明与现有技术相比较具有如下有益效果：
67、本发明制备的4-丁基间苯二酚纳米脂质体包括活性物、抗氧化剂、载体物和助剂；活性物为4-丁基间苯二酚；载体物包括磷脂、胆固醇和dspe-peg2000-lptath，dspe-peg2000-lptath由dspe-peg2000-nhs与六肽-2共价键和得到；助剂为辛酸/癸酸甘油三酯、甘油和水；将活性物、抗氧化剂、载体物和助剂进行混合均质和高压微射流处理得到了4-丁基间苯二酚纳米脂质体。本发明制备的4-丁基间苯二酚纳米脂质体粒径和pdi小，包封率高且具有靶向性，另外对酪氨酸酶相对活性和黑色素的生成具有较好的抑制作用，且稳定性也较高。
1.一种纳米脂质体，包括：活性物、抗氧化剂、载体物和助剂；所述抗氧化剂为3-邻-乙基抗坏血酸、抗坏血酸棕榈酸酯、香草酸酯衍生物和十六烷基柠檬酸中的至少一种。
2.根据权利要求1所述的一种纳米脂质体，其特征在于：所述活性物为4-丁基间苯二酚。
3.根据权利要求1所述的一种纳米脂质体，其特征在于：所述载体物还包括磷脂、胆固醇和dspe-peg2000-lptath；磷脂为大豆卵磷脂、向日葵卵磷脂、氢化卵磷脂、磷脂酰胆碱和氢化磷脂酰胆碱中的至少一种；dspe-peg2000-lptath由dspe-peg2000-nhs与六肽-2共价键和得到。
4.根据权利要求1所述的一种纳米脂质体，其特征在于：所述助剂包括脂类助剂和水相助剂，脂类助剂为辛酸/癸酸甘油三酯，水相助剂为甘油和水。
5.根据权利要求1所述的一种纳米脂质体，其特征在于：所述活性物的使用量与抗氧化剂的使用量的质量比为1：0.1-0.5，与载体物的使用量的质量比为1：0.3-1.8，与助剂的使用量的质量比为1：4.5-16。
6.一种纳米脂质体的制备方法，包括：
7.根据权利要求6所述的一种纳米脂质体的制备方法，其特征在于：所述活性物为4-丁基间苯二酚，抗氧化剂为3-邻-乙基抗坏血酸、抗坏血酸棕榈酸酯、香草酸酯衍生物和十六烷基柠檬酸中的至少一种，活性物的使用量与抗氧化剂的使用量的质量比为1：0.1-0.5。
8.根据权利要求6所述的一种纳米脂质体的制备方法，其特征在于：所述载体物包括磷脂、胆固醇和dspe-peg2000-lptath，磷脂为大豆卵磷脂、向日葵卵磷脂、氢化卵磷脂、磷脂酰胆碱和氢化磷脂酰胆碱中的至少一种；脂类助剂为辛酸/癸酸甘油三酯；水相助剂包括甘油和水。
9. 根据权利要求6所述的一种纳米脂质体的制备方法，其特征在于：所述a相与b相均质的速度为2500-4000 r/min，均质时间为1.5-5 min，高压微射流的压力为18000-30000psi。
10.一种化妆品，包括权利要求1-5任一所述纳米脂质体或权利要求6-9任一所述方法制备得到的纳米脂质体。
