本发明属于医药，具体涉及一种雷帕霉素及其前药衍生物与地塞米松棕榈酸酯纳米制剂及其制备方法与应用。
背景技术：
1、雷帕霉素(rapamycin，rapa)是一种大环内酯类免疫抑制剂和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mtor)抑制剂，具有疗效好，低毒，无肾毒性的特性，临床上常作为维持移植器官免疫能力的药物，以减缓器官移植手术后的免疫排斥反应。早期的研究表明雷帕霉素可阻断t淋巴细胞及其他细胞由g1期至s期的进程，从而阻断t淋巴细胞和b淋巴细胞的钙依赖性和非钙依赖性的信号传导通路，实现免疫抑制。
2、最近的研究表明雷帕霉素还具有其他功用，一个方面雷帕霉素可通过阻断mtor信号通路改变细胞生长、分裂和存活等过程，从而发挥抗肿瘤作用，可用于实体瘤及血液系统恶性肿瘤的治疗。一个方面，雷帕霉素可以影响平滑肌细胞的增生和迁移以及内皮细胞的生存从而抑制内皮细胞迁移和新血管形成，可用于治疗视网膜疾病、淋巴畸形、血管相关等疾病。一个方面，雷帕霉素也可诱导抗原提呈细胞(apcs)向耐受型转变，选增加调节性t细胞(tregs)的数量，也可用于诱导免疫耐受。
3、地塞米松棕榈酸酯(dexamethasone palmitate，dxp)是地塞米松(dexamethasone)的一种前药，具有和地塞米松相似的药理作用。地塞米松是一种临床应用广泛的糖皮质激素类药物，其抗炎、抗过敏和抗毒能力较强，而水钠潴留和促进排钾的能力较弱，可用于抗炎、抗毒、抗过敏、抗风湿、免疫抑制等多个领域，因此适应症较多，包括但不限于过敏性疾病、休克、呼吸系统疾病、术后疼痛、术后恶心呕吐、炎症性疾病、中毒性疾病。
4、对于自身免疫性疾病、移植组织的排斥反应及超敏反应等疾病，传统的治疗性疗法，如蛋白质或酶替代疗法等虽然可治疗，但可能因体内出现预料之外的免疫应答而使疗效减弱或消失，即使通过免疫抑制剂或一些调节物来减少这些免疫应答的发生，但也可能会产生一些其他的副作用，如感染，代谢紊乱等。
5、近年来，人们为了克服传统治疗方法的弊端，选择通过诱导机体对期望的抗原产生耐受，降低机体对其的免疫应答，保留非相关抗原的免疫应答，以期降低非选择性免疫抑制带来的副作用。纳米药物因其易被apcs或其它免疫细胞摄取，在递送相关治疗性药物、抗原及佐剂等方面有着良好的前景，但目前有关纳米制剂在此领域的应用的研究还较少。
技术实现思路
1、鉴于此，本发明的目的是提供一种雷帕霉素及其前药衍生物与地塞米松棕榈酸酯纳米制剂及其制备方法和其在针对治疗剂的免疫应答、抗肿瘤、预防或治疗移植物排斥、自身免疫性疾病、变态反应(例如食物变态反应)、过敏性疾病、外周动脉疾病、冠状动脉疾病、先天性厚甲症、阿尔兹海默症、结节性硬化症、视网膜疾病、呼吸系统疾病、血管内皮疾病、淋巴畸形、术后疼痛、术后恶心呕吐、休克、中毒性疾病、炎症性疾病、血液系统疾病及雷帕霉素与地塞米松的其他适应症中的一种或多种应用。
2、为实现上述目的，本发明的技术方案为：
3、一个方面，本发明提供一种雷帕霉素或其前药衍生物与地塞米松棕榈酸酯自组装纳米粒，纳米粒中包含雷帕霉素与地塞米松棕榈酸酯或雷帕霉素前药与地塞米松棕榈酸酯，通过分子间作用力共组装成纳米颗粒，雷帕霉素或雷帕霉素前药与地塞米松棕榈酸酯的质量比为1:(0.1～50)。
4、进一步地，雷帕霉素或雷帕霉素前药与地塞米松棕榈酸酯的质量比为1:(0.1～5)。
5、进一步地，所述的纳米粒中包含稳定剂，稳定剂为具有表面活性的两亲性结构，包括吐温系列化合物、泊洛沙姆系列化合物、司盘系列化合物、二硬质酰基磷脂酰乙醇胺、二硬质酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇、二硬质酰基磷脂酰乙醇胺-甲氧基聚乙二醇等dspe功能化磷脂。
6、进一步地，所述的稳定剂为dspe、dspe-peg、dspe-mpeg、dspe-ss-peg、dspe-ss-mpeg中的一种或二种以上，peg的分子量为200-20000。
7、进一步地，所述的稳定剂与雷帕霉素或雷帕霉素前药的质量比为1:10～5:1。
8、进一步地，所述的雷帕霉素前药的结构式如下式所示：
9、
10、其中，a为
11、r1、r2、r3分别可相同或不同的选自烃链、烷酸、脂类化合物；l为连接臂。
12、进一步地，l为-c(o)ch2ch2-，-c(o)ch2ch2ch2ch2-；
13、r1为饱和或不饱和的c10-22烃链、胆固醇及其衍生物；
14、r2为饱和的c1-22烃链；
15、r3为饱和的c2-22烷酸。
16、进一步地，所述的雷帕霉素前药的结构式选自：
17、
18、或
19、
20、进一步地，所述纳米粒的粒径范围在50～800nm。
21、一个方面，本发明提供上述的雷帕霉素或其前药衍生物与地塞米松棕榈酸酯自组装纳米粒的制备方法，包括以下步骤：
22、(1)将雷帕霉素或其前药衍生物与地塞米松棕榈酸酯溶解于有机溶剂，或者将雷帕霉素或其前药衍生物、地塞米松棕榈酸酯与稳定剂溶解于有机溶剂，混匀；
23、(2)将所得的混合溶液滴加到水中，搅拌条件下使其形成均匀的自组装纳米粒，除去有机溶剂，得到雷帕霉素或其前药衍生物与地塞米松棕榈酸酯自组装纳米粒。
24、进一步地，所述有机溶剂为甲醇、乙醇、丙酮、dmso、四氢呋喃中的一种或两种以上的组合。
25、进一步地，所述的有机溶剂优选为甲醇或乙醇。
26、进一步地，所述除去有机溶剂的方法包括旋蒸和挥发。
27、一个方面，本发明提供一种纳米制剂，所述的纳米制剂由上述的雷帕霉素或其前药衍生物与地塞米松棕榈酸酯自组装纳米粒和辅料组成。
28、进一步地，纳米制剂中雷帕霉素或其前药衍生物与辅料的质量比为1:(0.1～5)。
29、进一步地，所述纳米制剂包括注射剂、脂质体、微球、微囊、微针、纳米盘、胶束、水凝胶、纳米粒、乳剂、微乳或纳米乳。
30、进一步地，所述辅料为渗透压调节剂、ph调节剂、冻干保护剂中一种或两种以上的组合。
31、进一步地，所述的冻干保护剂包括葡萄糖、海藻糖、蔗糖、乳糖、甘露醇、山梨醇、甘油或氯化钠。
32、进一步地，所述的渗透压调节剂包括葡萄糖、海藻糖、蔗糖、乳糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、甘油、氯化钠。
33、进一步地，所述的ph调节剂包括盐酸、氢氧化钠、枸橼酸及其盐、磷酸及其盐、醋酸及其盐、乳酸及其盐、硼酸及其盐、氨基酸。
34、一个方面，本发明提供雷帕霉素或其前药衍生物与地塞米松棕榈酸酯自组装纳米粒、上述的纳米制剂在制备预防或治疗移植物排斥、自身免疫性疾病、变态反应(例如食物变态反应)、针对治疗剂的免疫应答的药物中的应用。
35、进一步地，所述自身免疫性疾病状态包括急性坏死性且出血性白质脑炎；阿狄森氏病；银屑性关节炎；阿尔兹海默症；类风湿性关节炎；自身免疫性再生障碍性贫血；自身免疫性垂体炎；自身免疫性胃炎；1型自体免疫多内分泌综合征；大疱性类天疱疮；乳糜泻；柯萨奇心肌炎；杜林疱疹样皮炎；糖尿病(1型)；获得性大疱性表皮松解症；巨细胞心肌炎；肺出血肾炎综合征；格雷夫斯病；桥本氏甲状腺炎；混合性结缔组织病；多发性硬化症；重症肌无力；视神经脊髓炎；pernicious angemis；寻常性天疱疮和变体；垂体自身免疫性疾病；卵巢早衰；风湿性心脏病；系统性硬化症；干燥综合征；原发性胆汁性肝硬化；多发性肌炎；原发性硬化性胆管炎；系统性红斑狼疮；系统性硬化症；溃疡性结肠炎；未分化结缔组织病；葡萄膜炎；白癜风；韦氏肉芽肿病；银屑病；风湿性心脏病；斑秃；普秃；强直性脊柱炎；青少年关节炎；特应性皮炎；自身免疫性再生障碍性贫血。
36、与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
37、本发明的雷帕霉素或其前药衍生物与地塞米松棕榈酸酯制剂的纳米制剂制备工艺简单，稳定性好，可用以治疗或预防移植物排斥、自身免疫性疾病、食物变态反应、针对治疗剂的免疫应答且药效良好，可产生协同作用以增强疗效或减轻副作用，优于单独用药。
1.一种雷帕霉素或其前药衍生物与地塞米松棕榈酸酯自组装纳米粒，其特征在于，所述的纳米粒中包含雷帕霉素与地塞米松棕榈酸酯或雷帕霉素前药与地塞米松棕榈酸酯，通过分子间作用力共组装成纳米颗粒，雷帕霉素或雷帕霉素前药与地塞米松棕榈酸酯的质量比为1:(0.1～50)。
2.根据权利要求1所述的纳米粒，其特征在于，纳米粒中包含稳定剂，稳定剂为具有表面活性的两亲性结构，包括吐温系列化合物、泊洛沙姆系列化合物、司盘系列化合物、二硬质酰基磷脂酰乙醇胺、二硬质酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇、二硬质酰基磷脂酰乙醇胺-甲氧基聚乙二醇，所述的稳定剂与雷帕霉素或雷帕霉素前药的质量比为1:10～5:1。
3.根据权利要求2所述的纳米粒，其特征在于，所述的稳定剂为dspe、dspe-peg、dspe-mpeg、dspe-ss-peg、dspe-ss-mpeg中的一种或二种以上，peg的分子量为200-20000。
4.根据权利要求1所述的纳米粒，其特征在于，所述的雷帕霉素前药的结构式如下式所示：
5.根据权利要求1所述的纳米粒，其特征在于，所述纳米粒的粒径范围在50～800nm。
6.权利要求1-5任一项所述的雷帕霉素或其前药衍生物与地塞米松棕榈酸酯自组装纳米粒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述有机溶剂为甲醇、乙醇、丙酮、dmso、四氢呋喃中的一种或两种以上的组合。
8.一种纳米制剂，其特征在于，所述的纳米制剂由权利要求1-5任一项所述的雷帕霉素或其前药衍生物与地塞米松棕榈酸酯自组装纳米粒和辅料组成。
9.根据权利要求8所述的纳米制剂，其特征在于，所述辅料为渗透压调节剂、ph调节剂、冻干保护剂中一种或两种以上的组合。
10.权利要求1-5任一项所述雷帕霉素或其前药衍生物与地塞米松棕榈酸酯自组装纳米粒、权利要求8或9所述的纳米制剂在制备预防或治疗移植物排斥、自身免疫性疾病、变态反应、针对治疗剂的免疫应答的药物中的应用。
