本发明涉及微生物学和基因工程,尤其涉及能代谢硫代葡萄糖苷的联合嗜酸乳杆菌。
背景技术:
1、硫代葡萄糖苷是一类含硫次生代谢产物,存在于如茎瘤芥、白菜、花椰菜、芥菜等十字花科蔬菜当中,是这类蔬菜中一类特征性化学成分。新鲜茎瘤芥中的硫代葡萄糖苷使得其在直接食用时具有苦味,因此茎瘤芥更常见的是通过盐腌发酵制成加工产物“榨菜”。榨菜具有独特的辛辣风味,这是由于在腌制过程中,苦味前体物质硫代葡萄糖苷gsls在蔬菜内源性黑芥子酶和微生物发酵的共同作用下水解成异硫氰酸酯类(itcs)和腈类(nits)。这两类产物不仅作为榨菜的风味成分,更作为有抗癌、抗炎症等活性成分提高了榨菜的食用价值,因此挖掘能够降解硫代葡萄糖苷的菌株对于提高榨菜风味和营养价值具有实际意义
2、榨菜的腌制经历传统的“三腌三榨”,其包括3个阶段。第1阶段“一腌一榨”:向青菜头中加入5%的盐,此腌制过程主要是去除青菜头中过多的水分,同时也可以抑制不耐盐杂菌的生长。第2阶段“二腌二榨”:继续向腌制液中补充盐分至浓度为6-8%,该过程是榨菜风味形成的主要阶段,第2次腌制结束后,同样去除多余的水分。第3阶段:补充盐分至10%以上,第3次腌制期约为1-6个月,主要是使榨菜风味进一步完善,同时高盐抑制微生物生长,使榨菜可以长时间贮存,以备后续生产。
3、我们于2023年3月份在4个农户和3个工厂中采集了榨菜腌制第3阶段的卤液。采集的卤液分离出23株菌。并从中提取分离得到一菌株(保藏编号为cctcc m 2024907,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏地址是武汉大学),命名为y8,经过分析研究该菌株可有效代谢硫代葡萄糖苷,并进一步研究得到其16s rrna基因序列是代谢硫代葡萄糖苷的表达基因。
4、为此,我们提出了本发明的能代谢硫代葡萄糖苷的联合嗜酸乳杆菌及其基因的应用,用于降解硫代葡萄糖苷,提高榨菜风味和营养价值。
技术实现思路
1、本发明的目的是提供能代谢硫代葡萄糖苷的联合嗜酸乳杆菌及其基因的应用。
2、为了实现上述目的,本发明采用了如下技术方案:
3、一株嗜酸乳杆菌y8,所述嗜酸乳杆菌y8的保藏编号为cctcc m 2024907。
4、进一步的,所述嗜酸乳杆菌y8的16s rrna序列如seq id no:1所示。
5、所述的嗜酸乳杆菌y8或其菌剂在降解硫代葡萄糖苷上的应用。
6、所述的嗜酸乳杆菌y8或其菌剂在榨菜、泡菜、酵素制备上的应用。
7、所述的嗜酸乳杆菌y8或其菌剂的以下任一应用:
8、1)生产烯丙基腈;
9、2)生产异硫氰酸烯丙酯;
10、3)生产烯丙基硫氰酸盐;
11、4)生产苯乙基异硫氰酸酯;
12、5)生产3-苯基丙腈。
13、进一步的,所述嗜酸乳杆菌y8与2-丙烯基硫苷代谢产生烯丙基腈、异硫氰酸烯丙酯、烯丙基硫氰酸盐。
14、进一步的,所述嗜酸乳杆菌y8与2-苯乙基硫苷代谢产生苯乙基异硫氰酸酯、3-苯基丙腈。
15、bgla基因在降解硫代葡萄糖苷上的应用,所述bgla基因的核苷酸序列如seq idno.2所示或者具有如seq id no.2所示的核苷酸序列经一个或多个核苷酸的替换、缺失或插入得到的具有相同功能的核苷酸序列。
16、bglf基因在降解硫代葡萄糖苷上的应用,所述bglf基因的核苷酸序列如seq idno.3所示或者具有如seq id no.3所示的核苷酸序列经一个或多个核苷酸的替换、缺失或插入得到的具有相同功能的核苷酸序列。
17、本发明至少具备以下有益效果:
18、本发明通过研究发现的嗜酸乳杆菌y8,可以有效降解硫代葡萄糖苷,能有效为榨菜盐腌发酵提供技术指导,对于提高榨菜风味和营养价值具有实际意义,而且通过分析发现其主要作用基因和降解产物,对于生产烯丙基腈、生产异硫氰酸烯丙酯、生产烯丙基硫氰酸盐、生产苯乙基异硫氰酸酯、生产3-苯基丙腈等页提供了一种全新的方法和技术指导。
1.一株嗜酸乳杆菌y8,其特征在于,所述嗜酸乳杆菌y8的保藏编号为cctcc m2024907。
2.根据权利要求1所述的嗜酸乳杆菌y8,其特征在于,所述嗜酸乳杆菌y8的16s rrna序列如seq id no:1所示。
3.权利要求1所述的嗜酸乳杆菌y8或其菌剂在降解硫代葡萄糖苷上的应用。
4.权利要求1所述的嗜酸乳杆菌y8或其菌剂在榨菜、泡菜、酵素制备上的应用。
5.权利要求1所述的嗜酸乳杆菌y8或其菌剂的以下任一应用:
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述嗜酸乳杆菌y8与2-丙烯基硫苷代谢产生烯丙基腈、异硫氰酸烯丙酯、烯丙基硫氰酸盐。
7.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述嗜酸乳杆菌y8与2-苯乙基硫苷代谢产生苯乙基异硫氰酸酯、3-苯基丙腈。
8.bgla基因在降解硫代葡萄糖苷上的应用,其特征在于,所述bgla基因的核苷酸序列如seq id no.2所示或者具有如seq id no.2所示的核苷酸序列经一个或多个核苷酸的替换、缺失或插入得到的具有相同功能的核苷酸序列。
9.bglf基因在降解硫代葡萄糖苷上的应用,其特征在于,所述bglf基因的核苷酸序列如seq id no.3所示或者具有如seq id no.3所示的核苷酸序列经一个或多个核苷酸的替换、缺失或插入得到的具有相同功能的核苷酸序列。