背景技术：
1、白细胞介素-2(il-2)是调节免疫系统活性的细胞因子。所述il-2响应于抗原性或促有丝分裂刺激，由如t细胞、天然杀伤(nk)细胞、树突状细胞和巨噬细胞等白细胞产生。il-2对于t细胞增殖、b细胞刺激以及与免疫和耐受性相关的其它活性是重要的。所述il-2是身体适应性免疫应答的一部分，并且区分外源抗原和宿主抗原。il-2通过与il-2受体结合来介导其效应，所述il-2受体进而激活下游信号传导事件。
2、人il-2是fda批准的用于治疗如转移性肾癌和黑素瘤等疾病的药物。由于与il-2疗法相关的严重毒性，有时限制在合格患者中使用il-2，并且实际上只有一小部分合格患者将接受疗法。与il-2疗法相关的毒性可以包含严重发热、恶心、呕吐、血管渗漏和严重低血糖。然而，尽管有这些毒性，但il-2通常对其批准的适应症有效。
3、对于患有适合于用il-2治疗的各种疾病和病状的患者，仍然存在对新颖基于il-2的药剂的未满足的需求，所述药剂表现出足以开发安全且有效的治疗剂的特性。
技术实现思路
1、本公开至少部分地提供了il-2药剂(例如，il-2变体、il-2融合蛋白、il-2复合物和il-2缀合物)，所述il-2药剂包括il-2中的一个或多个氨基酸改变(例如，取代)，并且包括本文所公开的结构或功能特性中的一个或多个。在一实施例中，还提供了编码il-2药剂的核酸分子、表达载体、宿主细胞、组合物(例如，药物组合物)、试剂盒、容器和用于制备il-2药剂的方法。本文所公开的il-2药剂可以用于(单独地或与其它药剂或治疗性方式组合)治疗、预防和/或诊断病症，如本文所公开的病症和病状。
2、一方面，本公开的特征在于一种用于治疗受试者(例如，人类受试者)的自身免疫性疾病的方法的il-2药剂(例如，本文所描述的il-2药剂)，其中所述il-2药剂以0.5μg/kg至300μg/kg的剂量施用。
3、在一实施例中，il-2药剂是il-2变体或包括il-2变体的il-2融合蛋白。在一实施例中，其中il-2变体包括：(i)氨基酸取代h16l或h16n和/或氨基酸取代i92s；以及(ii)氨基酸取代v69a、q74p和c125s，所述氨基酸取代对应于人il-2(seq id no:1031)。
4、在一实施例中，il-2药剂以0.5μg/kg至100μg/kg、1μg/kg至50μg/kg、2μg/kg至40μg/kg、3μg/kg至30μg/kg、4μg/kg至25μg/kg、5μg/kg至20μg/kg、10μg/kg至15μg/kg、1μg/kg至40μg/kg、1μg/kg至30μg/kg、1μg/kg至20μg/kg、1μg/kg至10μg/kg、1μg/kg至5μg/kg、5μg/kg至50μg/kg、10μg/kg至50μg/kg、20μg/kg至50μg/kg、30μg/kg至50μg/kg、40μg/kg至50μg/kg、0.5μg/kg至2μg/kg、3μg/kg至5μg/kg、6μg/kg至10μg/kg、12μg/kg至20μg/kg或25μg/kg至40μg/kg的剂量施用。在一实施例中，il-2药剂以1μg/kg、4μg/kg、8μg/kg、16μg/kg或32μg/kg的剂量施用。在一实施例中，il-2药剂以1μg/kg的剂量施用。在一实施例中，il-2药剂以4μg/kg的剂量施用。在一实施例中，il-2药剂以8μg/kg的剂量施用。在一实施例中，il-2药剂以16μg/kg的剂量施用。在一实施例中，il-2药剂以32μg/kg的剂量施用。在一实施例中，il-2药剂每周一次、每两周一次或每四周一次施用，例如持续至少八周。在一实施例中，il-2药剂每两周一次施用。在一实施例中，il-2药剂是皮下施用的。
5、在一实施例中，自身免疫性病症是全身性红斑狼疮(sle)、自身免疫性肝炎(aih)、局灶性节段性肾小球硬化(fsgs)(例如，免疫介导的局灶性节段性肾小球硬化(im-fsgs))或斑秃(aa)。在一实施例中，自身免疫性病症是全身性红斑狼疮(sle)。在一实施例中，自身免疫性病症是自身免疫性肝炎(aih)。在一实施例中，自身免疫性病症是局灶性节段性肾小球硬化(fsgs)(例如，免疫介导的局灶性节段性肾小球硬化(im-fsgs))。在一实施例中，自身免疫性病症是斑秃(aa)。
6、在一实施例中，其中il-2变体包括氨基酸取代h16l、v69a、q74p和c125s。在一实施例中，il-2变体进一步包括氨基酸取代t3a。在一实施例中，il-2变体包括seq id no:4、5、11、1000、1001或1002中的任何一个的氨基酸序列、与其至少95％相同或与其相差不超过1、2、3、4或5个氨基酸的氨基酸序列或其功能片段。在一实施例中，il-2变体包括seq id no:4、5、11、1000、1001或1002中的任何一个的氨基酸序列或其功能片段。
7、在一实施例中，il-2药剂包括包含il-2变体的il-2融合蛋白。在一实施例中，il-2融合蛋白进一步包括fc区。在一实施例中，fc区包括igg1同种异型m3的fc区，所述fc区包括根据eu编号的n297g取代。在一实施例中，fc区包括seq id no:1003的氨基酸序列、或与其至少95％相同或与其相差不超过1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个氨基酸的氨基酸序列或其功能片段。在一实施例中，fc区与il-2变体的c末端融合。
8、在一实施例中，il-2融合蛋白进一步包括接头。在一实施例中，接头包括(g4s)4(seq id no:48)。
9、在一实施例中，融合蛋白包括seq id no:1004、1005、1006、1007、1008或1009中的任何一个的氨基酸序列、与其至少95％相同或与其相差不超过1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个氨基酸的氨基酸序列或其功能片段。在一实施例中，融合蛋白形成二聚体。在一实施例中，融合蛋白包括seq id no:1004、1005、1006、1007、1008或1009中的任何一个的氨基酸序列或其功能片段。
10、另一方面，本公开的特征在于一种用于治疗自身免疫性疾病的方法，所述方法包括以0.5μg/kg至300μg/kg的剂量向有需要的受试者(例如，人类受试者)施用il-2药剂(例如，本文所描述的il-2药剂)，从而治疗自身免疫性疾病。
11、在一实施例中，il-2药剂是il-2变体或包括il-2变体的il-2融合蛋白。在一实施例中，其中il-2变体包括：(i)氨基酸取代h16l或h16n和/或氨基酸取代i92s；以及(ii)氨基酸取代v69a、q74p和c125s，所述氨基酸取代对应于人il-2(seq id no:1031)。
12、在一实施例中，il-2药剂以0.5μg/kg至100μg/kg、1μg/kg至50μg/kg、2μg/kg至40μg/kg、3μg/kg至30μg/kg、4μg/kg至25μg/kg、5μg/kg至20μg/kg、10μg/kg至15μg/kg、1μg/kg至40μg/kg、1μg/kg至30μg/kg、1μg/kg至20μg/kg、1μg/kg至10μg/kg、1μg/kg至5μg/kg、5μg/kg至50μg/kg、10μg/kg至50μg/kg、20μg/kg至50μg/kg、30μg/kg至50μg/kg、40μg/kg至50μg/kg、0.5μg/kg至2μg/kg、3μg/kg至5μg/kg、6μg/kg至10μg/kg、12μg/kg至20μg/kg或25μg/kg至40μg/kg的剂量施用。在一实施例中，il-2药剂以1μg/kg、4μg/kg、8μg/kg、16μg/kg或32μg/kg的剂量施用。在一实施例中，il-2药剂以1μg/kg的剂量施用。在一实施例中，il-2药剂以4μg/kg的剂量施用。在一实施例中，il-2药剂以8μg/kg的剂量施用。在一实施例中，il-2药剂以16μg/kg的剂量施用。在一实施例中，il-2药剂以32μg/kg的剂量施用。在一实施例中，il-2药剂每周一次、每两周一次或每四周一次施用，例如持续至少八周。在一实施例中，il-2药剂每两周一次施用。在一实施例中，il-2药剂是皮下施用的。
13、在一实施例中，自身免疫性病症是全身性红斑狼疮(sle)、自身免疫性肝炎(aih)、局灶性节段性肾小球硬化(fsgs)(例如，免疫介导的局灶性节段性肾小球硬化(im-fsgs))或斑秃(aa)。在一实施例中，自身免疫性病症是全身性红斑狼疮(sle)。在一实施例中，自身免疫性病症是自身免疫性肝炎(aih)。在一实施例中，自身免疫性病症是局灶性节段性肾小球硬化(fsgs)(例如，免疫介导的局灶性节段性肾小球硬化(im-fsgs))。在一实施例中，自身免疫性病症是斑秃(aa)。
14、在一实施例中，其中il-2变体包括氨基酸取代h16l、v69a、q74p和c125s。在一实施例中，il-2变体进一步包括氨基酸取代t3a。在一实施例中，il-2变体包括seq id no:4、5、11、1000、1001或1002中的任何一个的氨基酸序列、与其至少95％相同或与其相差不超过1、2、3、4或5个氨基酸的氨基酸序列或其功能片段。在一实施例中，il-2变体包括seq id no:4、5、11、1000、1001或1002中的任何一个的氨基酸序列或其功能片段。
15、在一实施例中，il-2药剂包括包含il-2变体的il-2融合蛋白。在一实施例中，il-2融合蛋白进一步包括fc区。在一实施例中，fc区包括igg1同种异型m3的fc区，所述fc区包括根据eu编号的n297g取代。在一实施例中，fc区包括seq id no:1003的氨基酸序列、或与其至少95％相同或与其相差不超过1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个氨基酸的氨基酸序列或其功能片段。在一实施例中，fc区与il-2变体的c末端融合。
16、在一实施例中，il-2融合蛋白进一步包括接头。在一实施例中，接头包括(g4s)4(seq id no:48)。
17、在一实施例中，融合蛋白包括seq id no:1004、1005、1006、1007、1008或1009中的任何一个的氨基酸序列、与其至少95％相同或与其相差不超过1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个氨基酸的氨基酸序列或其功能片段。在一实施例中，融合蛋白包括seq id no:1004、1005、1006、1007、1008或1009中的任何一个的氨基酸序列或其功能片段。在一实施例中，融合蛋白形成二聚体。
18、一方面，本公开的特征在于一种il-2药剂(例如，本文所描述的il-2药剂)的用途，其用于制备用于治疗受试者(例如，人类受试者)的自身免疫性疾病的药物，其中所述il-2药剂以0.5μg/kg至300μg/kg的剂量施用。
19、在一实施例中，il-2药剂是il-2变体或包括il-2变体的il-2融合蛋白。在一实施例中，其中il-2变体包括：(i)氨基酸取代h16l或h16n和/或氨基酸取代i92s；以及(ii)氨基酸取代v69a、q74p和c125s，所述氨基酸取代对应于人il-2(seq id no:1031)。
20、在一实施例中，il-2药剂以0.5μg/kg至100μg/kg、1μg/kg至50μg/kg、2μg/kg至40μg/kg、3μg/kg至30μg/kg、4μg/kg至25μg/kg、5μg/kg至20μg/kg、10μg/kg至15μg/kg、1μg/kg至40μg/kg、1μg/kg至30μg/kg、1μg/kg至20μg/kg、1μg/kg至10μg/kg、1μg/kg至5μg/kg、5μg/kg至50μg/kg、10μg/kg至50μg/kg、20μg/kg至50μg/kg、30μg/kg至50μg/kg、40μg/kg至50μg/kg、0.5μg/kg至2μg/kg、3μg/kg至5μg/kg、6μg/kg至10μg/kg、12μg/kg至20μg/kg或25μg/kg至40μg/kg的剂量施用。在一实施例中，il-2药剂以1μg/kg、4μg/kg、8μg/kg、16μg/kg或32μg/kg的剂量施用。在一实施例中，il-2药剂以1μg/kg的剂量施用。在一实施例中，il-2药剂以4μg/kg的剂量施用。在一实施例中，il-2药剂以8μg/kg的剂量施用。在一实施例中，il-2药剂以16μg/kg的剂量施用。在一实施例中，il-2药剂以32μg/kg的剂量施用。在一实施例中，il-2药剂每周一次、每两周一次或每四周一次施用，例如持续至少八周。在一实施例中，il-2药剂每两周一次施用。在一实施例中，il-2药剂是皮下施用的。
21、在一实施例中，自身免疫性病症是全身性红斑狼疮(sle)、自身免疫性肝炎(aih)、局灶性节段性肾小球硬化(fsgs)(例如，免疫介导的局灶性节段性肾小球硬化(im-fsgs))或斑秃(aa)。在一实施例中，自身免疫性病症是全身性红斑狼疮(sle)。在一实施例中，自身免疫性病症是自身免疫性肝炎(aih)。在一实施例中，自身免疫性病症是局灶性节段性肾小球硬化(fsgs)(例如，免疫介导的局灶性节段性肾小球硬化(im-fsgs))。在一实施例中，自身免疫性病症是斑秃(aa)。
22、在一实施例中，其中il-2变体包括氨基酸取代h16l、v69a、q74p和c125s。在一实施例中，il-2变体进一步包括氨基酸取代t3a。在一实施例中，il-2变体包括seq id no:4、5、11、1000、1001或1002中的任何一个的氨基酸序列、与其至少95％相同或与其相差不超过1、2、3、4或5个氨基酸的氨基酸序列或其功能片段。在一实施例中，il-2变体包括seq id no:4、5、11、1000、1001或1002中的任何一个的氨基酸序列或其功能片段。
23、在一实施例中，il-2药剂包括包含il-2变体的il-2融合蛋白。在一实施例中，il-2融合蛋白进一步包括fc区。在一实施例中，fc区包括igg1同种异型m3的fc区，所述fc区包括根据eu编号的n297g取代。在一实施例中，fc区包括seq id no:1003的氨基酸序列、或与其至少95％相同或与其相差不超过1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个氨基酸的氨基酸序列或其功能片段。在一实施例中，fc区与il-2变体的c末端融合。
24、在一实施例中，il-2融合蛋白进一步包括接头。在一实施例中，接头包括(g4s)4(seq id no:48)。
25、在一实施例中，融合蛋白包括seq id no:1004、1005、1006、1007、1008或1009中的任何一个的氨基酸序列、与其至少95％相同或与其相差不超过1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个氨基酸的氨基酸序列或其功能片段。在一实施例中，融合蛋白形成二聚体。在一实施例中，融合蛋白包括seq id no:1004、1005、1006、1007、1008或1009中的任何一个的氨基酸序列或其功能片段。
26、另外的实施例
27、本公开至少部分地基于以下发现：使蛋白质稳定、降低所述蛋白质对cd122(例如，cd122/cd132异二聚体)的亲和力和/或降低其对cd25的亲和力或对其亲和力具有不超过最小影响的il-2突变的组合可以用于通过il-2通路选择性增强调节性t细胞(treg)活性，因此实现治疗如自身免疫性疾病等病症和病状的有利治疗效果。包括此类突变的il-2药剂适于治疗由异常免疫应答引起的如自身免疫性疾病等病状。
28、因此，在一实施例中，il-2药剂具有以下特性a)-x)中的一种或多种：(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23种或全部)：
29、a)例如，相对于包括野生型il-2的il-2药剂或包括参考il-2变体的il-2药剂，在体外和/或体内以较高或增加的水平表达，例如，增加约1％、约2％、约3％、约4％、约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、约100％或更多，或者增加约0.5倍、约1倍、约1.5倍、约2倍、约2.5倍、约3倍、约3.5倍、约4倍、约4.5倍、约5倍、约5.5倍、约6倍、约6.5倍、约7倍、约7.5倍、约8倍、约8.5倍、约9倍、约9.5倍、约10倍或更多倍，例如，如通过蛋白质浓度的测定的；
30、b)例如，相对于包括野生型il-2的il-2药剂或包括参考il-2变体的il-2药剂，在体外和/或体内以较低或降低的水平聚集，例如，降低约1％、约2％、约3％、约4％、约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、约100％或更多，或者降低约0.5倍、约1倍、约1.5倍、约2倍、约2.5倍、约3倍、约3.5倍、约4倍、约4.5倍、约5倍、约5.5倍、约6倍、约6.5倍、约7倍、约7.5倍、约8倍、约8.5倍、约9倍、约9.5倍、约10倍或更多倍，例如，如通过熔解温度分析(例如，使用荧光测定法)、动态光散射和/或尺寸排阻色谱法测定的；
31、c)例如，相对于包括野生型il-2的il-2药剂或包括参考il-2变体的il-2药剂，在体外和/或体内稳定性增强或增加，例如，增加约1％、约2％、约3％、约4％、约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、约100％或更多，或者增加约0.5倍、约1倍、约1.5倍、约2倍、约2.5倍、约3倍、约3.5倍、约4倍、约4.5倍、约5倍、约5.5倍、约6倍、约6.5倍、约7倍、约7.5倍、约8倍、约8.5倍、约9倍、约9.5倍、约10倍或更多倍，例如，如通过酵母表面展示中的表达、哺乳动物细胞中的表达、色谱法、圆二色性或相关光谱技术和/或解链温度分析(例如，使用荧光测定法)测定的；
32、d)例如，相对于包括野生型il-2的il-2药剂或包括参考il-2变体的il-2药剂，在体外和/或体内半衰期增强或增加，例如，增加约1％、约2％、约3％、约4％、约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、约100％或更多或大于约0.5倍、约1倍、约1.5倍、约2倍、约2.5倍、约3倍、约3.5倍、约4倍、约4.5倍、约5倍、约5.5倍、约6倍、约6.5倍、约7倍、约7.5倍、约8倍、约8.5倍、约9倍、约9.5倍、约10倍或更多倍，例如，如通过elisa、流式细胞术和/或质谱法测定的；
33、e)例如，相对于包括野生型il-2的il-2药剂或包括参考il-2变体的il-2药剂，体内周转和/或清除速率或水平较低、下降或降低，例如，降低约1％、约2％、约3％、约4％、约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、约100％或更多，或者降低约0.5倍、约1倍、约1.5倍、约2倍、约2.5倍、约3倍、约3.5倍、约4倍、约4.5倍、约5倍、约5.5倍、约6倍、约6.5倍、约7倍、约7.5倍、约8倍、约8.5倍、约9倍、约9.5倍、约10倍或更多倍，例如，如通过elisa、流式细胞术和/或质谱法测定的；
34、f)例如，相对于包括野生型il-2的il-2药剂或包括参考il-2变体的il-2药剂，对cd25(例如，人cd25)的结合亲和力下降或降低或基本上不变，例如，降低约1％、约2％、约3％、约4％、约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、约100％或更多(例如，约1％至约20％、约2％至约15％或约5％至约10％)，或者降低或增加不超过约1％、约2％、约3％、约4％、约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％或约50％，或者降低约0.5倍、约1倍、约1.5倍、约2倍、约2.5倍、约3倍、约3.5倍、约4倍、约4.5倍、约5倍、约5.5倍、约6倍、约6.5倍、约7倍、约7.5倍、约8倍、约8.5倍、约9倍、约9.5倍、约10倍或更多倍，或者降低或增加不超过约0.5倍、约1倍、约1.5倍、约2倍、约2.5倍、约3倍、约3.5倍、约4倍、约4.5倍或约5倍，例如，如通过酵母表面展示、生物层干涉测量法(例如octet结合)和/或表面等离子体共振(例如biacore)测定的；
35、g)以低亲和力与cd25(例如人cd25)结合，例如以约5-500pm的解离常数(kd)，例如约5、约10、约15、约20、约25、约30、约35、约40、约45、约50、约55、约60、约65、约70、约75、约80、约85、约90、约95、约100、约105、约110、约115、约120、约125、约130、约135、约140、约145、约150、约200、约250、约300、约350、约400、约450或约500pm或例如约10pm至约490pm、约20pm至约480pm、约30pm至约470pm、约40pm至约460pm、约50pm至约450pm、约60pm至约440pm、约70pm至约430pm、约80pm至约420pm、约90pm至约410pm、约100pm至约400pm、约110pm至约390pm、约120pm至约380pm、约130pm至约370pm、约140pm至约360pm、约150pm至约350pm、约160pm至约340pm、约170pm至约330pm、约180pm至约320pm、约190pm至约310pm、约200pm至约300pm、约210pm至约290pm、约220pm至约280pm、约230pm至约270pm、约240pm至约260pm或例如约5pm至约450pm、约5pm至约400pm、约5pm至约350pm、约5pm至约300pm、约5pm至约250pm、约5pm至约200pm、约5pm至约150pm、约5pm至约100pm、约5pm至约50pm或例如约10pm至约500pm、约20pm至约500pm、约50pm至约500pm、约100pm至约500pm、约150pm至约500pm、约200pm至约500pm、约250pm至约500pm、约300pm至约500pm、约350pm至约500pm、约400pm至约500pm、约450pm至约500pm或例如大于约5、约10、约15、约20、约25、约30、约35、约40、约45、约50、约55、约60、约65、约70、约75、约80、约85、约90、约95、约100、约105、约110、约115、约120、约125、约130、约135、约140、约145、约150、约200、约250、约300、约350、约400、约450或约500pm，例如，如酵母表面展示测定的；
36、h)以低亲和力与cd25(例如人cd25)结合，例如以约0.1-10nm的解离常数(kd)，例如约0.1、约0.2、约0.3、约0.4、约0.5、约0.6、约0.7、约0.8、约0.9、约1、约1.5、约2、约2.5、约3、约3.5、约4、约4.5、约5、约6、约7、约8、约9或约10nm或例如约0.1至约9nm、约0.1至约8nm、约0.1至约7nm或约0.1至约6nm，例如约0.1至约5nm、约0.1至约4nm、约0.1至约3nm、约0.1至约2nm、约0.1至约1nm或约0.1至约0.5nm或例如约0.1至约10nm、约0.5至约10nm、约1至约10nm、约1.5至约10nm、约2至约10nm、约2.5至约10nm、约3至约10nm、约3.5至约10nm、约4至约10nm、约4.5至约10nm、约5至约10nm、约5.5至约10nm、约6至约10nm、约6.5至约10nm、约7至约10nm、约7.5至约10nm、约8至约10nm、约8.5至约10nm、约9至约10nm或约9.5至约10nm或例如约0.1至约9.5nm、约0.5至约9nm、约1至约8.5nm、约1.5至约8nm、约2至约7.5nm、约2.5至约7nm、约3至约6.5nm、约3.5至约6nm、约4至约5.5nm或约4.5至约5nm或例如大于约0.1、约0.2、约0.3、约0.4、约0.5、约0.6、约0.7、约0.8、约0.9、约1、约2、约3、约4、约5、约6、约7、约8、约9或约10nm，例如，如通过生物层干涉测量法(例如octet结合)和/或表面等离子体共振(例如biacore)测定的；
37、i)例如，相对于包括野生型il-2的il-2药剂或包括参考il-2变体的il-2药剂，对cd122/cd132异二聚体(例如人cd122/cd132异二聚体)的结合亲和力下降或降低，例如降低约1％、约2％、约3％、约4％、约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、约100％或更多(例如约1％至约50％、约2％至约40％、约3％至约30％、约4％至约20％或约5％至约10％、约1％至约40％、约1％至约30％、约1％至约20％、约1％至约10％、约40％至约50％、约30％至约50％、约20％至约50％、约10％至约50％、约10％至约20％、约20％至约30％、约30％至约40％、约10％至约30％或20％至约40％)，或者降低约0.5倍、约1倍、约1.5倍、约2倍、约2.5倍、约3倍、约3.5倍、约4倍、约4.5倍、约5倍、约5.5倍、约6倍、约6.5倍、约7倍、约7.5倍、约8倍、约8.5倍、约9倍、约9.5倍、约10倍或更多倍(例如约0.5倍至约5倍、约1倍至约4倍或约2倍至约3倍)，例如，如通过酵母表面展示、生物层干涉测量法(例如octet结合)和/或表面等离子体共振(例如biacore)测定的；
38、j)以低亲和力与cd122/cd132异二聚体(例如人cd122/cd132异二聚体)结合，例如以约0.2-20nm的解离常数(kd)，例如约0.2、约0.3、约0.4、约0.5、约0.6、约0.7、约0.8、约0.9、约1、约1.1、约1.2、约1.3、约1.4、约1.5、约2、约3、约4、约5、约6、约7、约8、约9、约10、约11、约12、约13、约14、约15、约16、约17、约18或约20nm或例如约0.2至约19nm、约0.2至约18nm、约0.2至约17nm或约0.2至约16nm，例如约0.2至约15nm、约0.1至约4nm、约0.1至约3nm、约0.1至约2nm、约0.1至约1nm或约0.1至约0.5nm或例如约0.1至约10nm、约0.5至约10nm、约1至约10nm、约1.5至约10nm、约2至约10nm、约2.5至约10nm、约3至约10nm、约3.5至约10nm、约4至约10nm、约4.5至约10nm、约5至约10nm、约5.5至约10nm、约6至约10nm、约6.5至约10nm、约7至约10nm、约7.5至约10nm、约8至约10nm、约8.5至约10nm、约9至约10nm或约9.5至约10nm或例如约0.1至约9.5nm、约0.5至约9nm、约1至约8.5nm、约1.5至约8nm、约2至约7.5nm、约2.5至约7nm、约3至约6.5nm、约3.5至约6nm、约4至约5.5nm或约4.5至约5nm或例如大于约0.2、约0.3、约0.4、约0.5、约0.6、约0.7、约0.8、约0.9、约1、约1.1、约1.2、约1.3、约1.4、约1.5、约2、约3、约4、约5、约6、约7、约8、约9、约10、约11、约12、约13、约14、约15、约16、约17、约18或约20nm，例如，如通过酵母表面展示测定的。
39、k)以低亲和力与cd122/cd132异二聚体(例如人cd122/cd132异二聚体)结合，例如以约0.2-300nm的解离常数(kd)，例如约0.2nm、约0.5nm、约1nm、约2nm、约5nm、约10nm、约15nm、约20nm、约25nm、约30nm、约40nm、约50nm、约60nm、约70nm、约80nm、约90nm、约100nm、约110nm、约120nm、约130nm、约140nm、约150nm、约160nm、约170nm、约180nm、约190nm、约200nm、约210nm、约220nm、约230nm、约240nm、约250nm、约260nm、约270nm、约280nm、约290nm或约300nm或例如约0.2至约280nm、约0.2至约260nm、约0.2至约240nm、约0.2至约220nm、约0.2至约200nm、约0.2至约180nm、约0.2至约160nm、约0.2至约140nm、约0.2至约120nm、约0.2至约100nm、约0.2至约80nm、约0.2至约60nm、约0.2至约40nm、约0.2至约20nm或例如约0.5至约300nm、约1至约300nm、约5至约300nm、约10至约300nm、约20至约300nm、约40至约300nm、约60至约300nm、约80至约300nm、约100至约300nm、约120至约300nm、约140至约300nm、约160至约300nm、约180至约300nm、约200至约300nm、约220至约300nm、约240至约300nm、约260至约300nm、约280至约300nm或例如约0.5至约280nm、约1至约260nm、约5至约240nm、约10至约220nm、约20至约200nm、约40至约180nm、约60至约160nm、约80至约140mm、约100至约120nm或例如大于约0.2、约0.5、约1、约2、约5、约10、约15、约20nm、约25nm、约30nm、约40nm、约50nm、约60nm、约70nm、约80nm、约90nm、约100nm、约110nm、约120nm、约130nm、约140nm、约150nm、约160nm、约170nm、约180nm、约190nm、约200nm、约210nm、约220nm、约230nm、约240nm、约250nm、约260nm、约270nm、约280nm、约290nm或大于约300nm，例如，如通过生物层干涉测量法(例如octet结合)和/或表面等离子体共振(例如biacore)测定的；
40、l)相对于包括野生型il-2的il-2药剂或包括参考il-2变体的il-2药剂，在体外和/或体内选择性激活t调节性细胞中的il-2信号传导，例如t辅助ec50/treg ec50比率大于约1、约2、约3、约4、约5、约6、约7、约8、约9、约10、约11、约12、约13、约14、约15、约16、约17、约18、约19、约20、约21、约22、约23、约24、约25、约26、约27、约28、约29、约30、约35、约40、约45、约50、约55、约60、约65、约70、约75、约80、约85、约90、约95、约100、约150、约200、约250、约300、约350、约400、约450、约500、约600、约700、约800、约900、约1000、约1500、约2000、约2500或约3000或更多，或例如大于1和约1至2、约2至3、约3至4、约4至5、大于1和约1至10、大于1和约1至20、大于1和约1至30、大于1和约1至40、大于1和约1至50、约2至10、约2至20、约2至30、约2至40、2至50、约5至10、约5至20、约5至30、约5至40、约5至50、约10至20、约10至30、约10至40、约10至50、约20至40、约20至50、约50至100、约100至200、约200至500、约500至1000、约1000至2000或约1000至3000，例如，如流式细胞术测定的；
41、m)相对于包括野生型il-2的il-2药剂或包括参考il-2变体的il-2药剂，在体外和/或体内选择性激活t调节性细胞中的il-2信号传导，例如nk细胞ec50/treg ec50比率大于约1、约2、约3、约4、约5、约6、约7、约8、约9、约10、约11、约12、约13、约14、约15、约16、约17、约18、约19、约20、约21、约22、约23、约24、约25、约26、约27、约28、约29、约30、约35、约40、约45、约50、约55、约60、约65、约70、约75、约80、约85、约90、约95、约100、约150、约200、约250、约300、约350、约400、约450、约500、约600、约700、约800、约900、约1000、约1500、约2000、约2500或约3000或更多，或例如大于1和约1至2、约2至3、约3至4、约4至5、大于1和约1至10、大于1和约1至20、大于1和约1至30、大于1和约1至40、大于1和约1至50、约2至10、约2至20、约2至30、约2至40、2至50、约5至10、约5至20、约5至30、约5至40、约5至50、约10至20、约10至30、约10至40、约10至50、约20至40、约20至50、约50至100、约100至200、约200至500、约500至1000、约1000至2000或约1000至3000，例如，如流式细胞术测定的；
42、n)(i)例如，相对于包括野生型il-2的il-2药剂或包括参考il-2变体的il-2药剂，用于诱导或促进t调节性细胞活性的效力和/或能力增强或增加，例如treg的ec50降低约1％、约2％、约3％、约4％、约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、约100％或更多，或者例如降低约0.5倍、约1倍、约1.5倍、约2倍、约2.5倍、约3倍、约3.5倍、约4倍、约4.5倍、约5倍、约5.5倍、约6倍、约6.5倍、约7倍、约7.5倍、约8倍、约8.5倍、约9倍、约9.5倍、约10倍或更多倍，例如，如流式细胞术、体外或体内t调节性细胞增殖或扩增测定和/或t细胞抑制测定测定的；
43、(ii)例如，相对于包括野生型il-2的il-2药剂或包括参考il-2变体的il-2药剂，用于诱导或促进t调节性细胞活性的效力和/或能力下降或降低，例如treg的ec50提高约1％、约2％、约3％、约4％、约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、约100％或更多，或者例如降低约0.5倍、约1倍、约1.5倍、约2倍、约2.5倍、约3倍、约3.5倍、约4倍、约4.5倍、约5倍、约5.5倍、约6倍、约6.5倍、约7倍、约7.5倍、约8倍、约8.5倍、约9倍、约9.5倍、约10倍、约50倍、约100倍、约200倍、约500倍、约1000倍、约2000倍、约5000倍、约10,000倍、约15,000倍、约20,000倍或更多倍，例如，如流式细胞术、体外或体内t调节性细胞增殖或扩增测定和/或t细胞抑制测定测定的；
44、o)体外、离体或体内调节(例如降低(例如抑制、阻断或中和)或增加(例如激活、启动或增强)t细胞(例如treg)的一种或多种生物活性；
45、p)示出与本文所描述的il-2药剂相同或类似的结合亲和力或特异性或两者；
46、q)示出与包括本文所描述的一个或多个(例如，2、3、4、5、6、7、8、9、10个或更多个)改变(例如，取代)的il-2药剂相同或类似的结合亲和力或特异性或两者；
47、r)示出与包括本文所描述的氨基酸序列的il-2药剂相同或类似的结合亲和力或特异性或两者；
48、s)示出与包括由本文所描述的核苷酸序列编码的氨基酸序列的il-2药剂相同或类似的结合亲和力或特异性或两者；
49、t)抑制例如竞争性地抑制第二il-2药剂与il-2受体的结合，其中第二il-2药剂是本文所描述的il-2药剂，
50、u)与第二il-2药剂竞争与il-2受体结合，其中第二il-2药剂是本文所描述的il-2药剂；
51、v)具有本文所描述的il-2药剂的一种或多种生物特性；
52、w)具有本文所描述的il-2药剂的一种或多种结构特性；或者
53、x)具有本文所描述的il-2药剂的一种或多种药代动力学特性。
54、在一实施例中，例如，相对于包括野生型il-2的il-2药剂或包括参考il-2变体的il-2药剂，il-2药剂在体外和/或体内以较高或增加的水平表达，例如，增加约1％、约2％、约3％、约4％、约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、约100％或更多，或者增加约0.5倍、约1倍、约1.5倍、约2倍、约2.5倍、约3倍、约3.5倍、约4倍、约4.5倍、约5倍、约5.5倍、约6倍、约6.5倍、约7倍、约7.5倍、约8倍、约8.5倍、约9倍、约9.5倍、约10倍或更多倍，例如，如通过蛋白质浓度的测定。在一实施例中，例如，相对于包括野生型il-2的il-2药剂或包括参考il-2变体的il-2药剂，il-2药剂在体外和/或体内以较低或降低的水平聚集，例如，降低约1％、约2％、约3％、约4％、约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、约100％或更多，或者降低约0.5倍、约1倍、约1.5倍、约2倍、约2.5倍、约3倍、约3.5倍、约4倍、约4.5倍、约5倍、约5.5倍、约6倍、约6.5倍、约7倍、约7.5倍、约8倍、约8.5倍、约9倍、约9.5倍、约10倍或更多倍，例如，如通过熔解温度分析(例如，使用荧光测定法)、动态光散射和/或尺寸排阻色谱法测定的。
55、在一实施例中，例如，相对于包括野生型il-2的il-2药剂或包括参考il-2变体的il-2药剂，il-2药剂在体外和/或体内稳定性增强或增加，例如，增加约1％、约2％、约3％、约4％、约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、约100％或更多，或者增加约0.5倍、约1倍、约1.5倍、约2倍、约2.5倍、约3倍、约3.5倍、约4倍、约4.5倍、约5倍、约5.5倍、约6倍、约6.5倍、约7倍、约7.5倍、约8倍、约8.5倍、约9倍、约9.5倍、约10倍或更多倍，例如，如通过酵母表面展示中的表达、哺乳动物细胞中的表达、色谱法、圆二色性或相关光谱技术和/或解链温度分析(例如，使用荧光测定法)测定的。
56、在一实施例中，例如，相对于包括野生型il-2的il-2药剂或包括参考il-2变体的il-2药剂，il-2药剂在体外和/或体内半衰期增强或增加，例如，增加约1％、约2％、约3％、约4％、约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、约100％或更多或大于约0.5倍、约1倍、约1.5倍、约2倍、约2.5倍、约3倍、约3.5倍、约4倍、约4.5倍、约5倍、约5.5倍、约6倍、约6.5倍、约7倍、约7.5倍、约8倍、约8.5倍、约9倍、约9.5倍、约10倍或更多倍，例如，如通过elisa、流式细胞术和/或质谱法测定的。
57、在一实施例中，例如，相对于包括野生型il-2的il-2药剂或包括参考il-2变体的il-2药剂，il-2药剂在体内的周转和/或清除速率或水平较低、下降或降低，例如，降低约1％、约2％、约3％、约4％、约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、约100％或更多，或者降低约0.5倍、约1倍、约1.5倍、约2倍、约2.5倍、约3倍、约3.5倍、约4倍、约4.5倍、约5倍、约5.5倍、约6倍、约6.5倍、约7倍、约7.5倍、约8倍、约8.5倍、约9倍、约9.5倍、约10倍或更多倍，例如，如通过elisa、流式细胞术和/或质谱法测定的。
58、在一实施例中，例如，相对于包括野生型il-2的il-2药剂或包括参考il-2变体的il-2药剂，il-2药剂对cd25(例如，人cd25)的结合亲和力下降或降低或基本上不变，例如，降低约1％、约2％、约3％、约4％、约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、约100％或更多(例如，约1％至约20％、约2％至约15％或约5％至约10％)，或者降低或增加不超过约1％、约2％、约3％、约4％、约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％或约50％，或者降低约0.5倍、约1倍、约1.5倍、约2倍、约2.5倍、约3倍、约3.5倍、约4倍、约4.5倍、约5倍、约5.5倍、约6倍、约6.5倍、约7倍、约7.5倍、约8倍、约8.5倍、约9倍、约9.5倍、约10倍或更多倍，或者降低或增加不超过约0.5倍、约1倍、约1.5倍、约2倍、约2.5倍、约3倍、约3.5倍、约4倍、约4.5倍或约5倍，例如，如通过酵母表面展示、生物层干涉测量法(例如octet结合)和/或表面等离子体共振(例如biacore)测定的。在一实施例中，对cd25的结合亲和力的下降或降低比对cd25的结合亲和力的下降或降低低至少10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％或80％。在一实施例中，对cd25的结合亲和力不显著下降或降低。
59、在一实施例中，il-2药剂以低亲和力与cd25(例如人cd25)结合，例如以约5-500pm的解离常数(kd)，例如约5、约10、约15、约20、约25、约30、约35、约40、约45、约50、约55、约60、约65、约70、约75、约80、约85、约90、约95、约100、约105、约110、约115、约120、约125、约130、约135、约140、约145、约150、约200、约250、约300、约350、约400、约450或约500pm或例如约10pm至约490pm、约20pm至约480pm、约30pm至约470pm、约40pm至约460pm、约50pm至约450pm、约60pm至约440pm、约70pm至约430pm、约80pm至约420pm、约90pm至约410pm、约100pm至约400pm、约110pm至约390pm、约120pm至约380pm、约130pm至约370pm、约140pm至约360pm、约150pm至约350pm、约160pm至约340pm、约170pm至约330pm、约180pm至约320pm、约190pm至约310pm、约200pm至约300pm、约210pm至约290pm、约220pm至约280pm、约230pm至约270pm、约240pm至约260pm或例如约5pm至约450pm、约5pm至约400pm、约5pm至约350pm、约5pm至约300pm、约5pm至约250pm、约5pm至约200pm、约5pm至约150pm、约5pm至约100pm、约5pm至约50pm或例如约10pm至约500pm、约20pm至约500pm、约50pm至约500pm、约100pm至约500pm、约150pm至约500pm、约200pm至约500pm、约250pm至约500pm、约300pm至约500pm、约350pm至约500pm、约400pm至约500pm、约450pm至约500pm或例如大于约5、约10、约15、约20、约25、约30、约35、约40、约45、约50、约55、约60、约65、约70、约75、约80、约85、约90、约95、约100、约105、约110、约115、约120、约125、约130、约135、约140、约145、约150、约200、约250、约300、约350、约400、约450或约500pm，例如，如酵母表面展示测定的。
60、在一实施例中，il-2药剂以低亲和力与cd25(例如人cd25)结合，例如以约0.1-10nm的解离常数(kd)，例如约0.1、约0.2、约0.3、约0.4、约0.5、约0.6、约0.7、约0.8、约0.9、约1、约1.5、约2、约2.5、约3、约3.5、约4、约4.5、约5、约6、约7、约8、约9或约10nm或例如约0.1至约9nm、约0.1至约8nm、约0.1至约7nm或约0.1至约6nm，例如约0.1至约5nm、约0.1至约4nm、约0.1至约3nm、约0.1至约2nm、约0.1至约1nm或约0.1至约0.5nm或例如约0.1至约10nm、约0.5至约10nm、约1至约10nm、约1.5至约10nm、约2至约10nm、约2.5至约10nm、约3至约10nm、约3.5至约10nm、约4至约10nm、约4.5至约10nm、约5至约10nm、约5.5至约10nm、约6至约10nm、约6.5至约10nm、约7至约10nm、约7.5至约10nm、约8至约10nm、约8.5至约10nm、约9至约10nm或约9.5至约10nm或例如约0.1至约9.5nm、约0.5至约9nm、约1至约8.5nm、约1.5至约8nm、约2至约7.5nm、约2.5至约7nm、约3至约6.5nm、约3.5至约6nm、约4至约5.5nm或约4.5至约5nm或例如大于约0.1、约0.2、约0.3、约0.4、约0.5、约0.6、约0.7、约0.8、约0.9、约1、约2、约3、约4、约5、约6、约7、约8、约9或约10nm，例如，如通过生物层干涉测量法(例如octet结合)和/或表面等离子体共振(例如biacore)测定的。
61、在一实施例中，例如，相对于包括野生型il-2的il-2药剂或包括参考il-2变体的il-2药剂，il-2药剂对cd122/cd132异二聚体(例如人cd122/cd132异二聚体)的结合亲和力下降或降低，例如降低约1％、约2％、约3％、约4％、约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、约100％或更多(例如约1％至约50％、约2％至约40％、约3％至约30％、约4％至约20％或约5％至约10％、约1％至约40％、约1％至约30％、约1％至约20％、约1％至约10％、约40％至约50％、约30％至约50％、约20％至约50％、约10％至约50％、约10％至约20％、约20％至约30％、约30％至约40％、约10％至约30％或20％至约40％)，或者降低约0.5倍、约1倍、约1.5倍、约2倍、约2.5倍、约3倍、约3.5倍、约4倍、约4.5倍、约5倍、约5.5倍、约6倍、约6.5倍、约7倍、约7.5倍、约8倍、约8.5倍、约9倍、约9.5倍、约10倍或更多倍(例如约0.5倍至约5倍、约1倍至约4倍或约2倍至约3倍)，例如，如通过酵母表面展示、生物层干涉测量法(例如octet结合)和/或表面等离子体共振(例如biacore)测定的。在一实施例中，对cd122/cd132异二聚体的结合亲和力的下降或降低是对cd25的结合亲和力的下降或降低的至少1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5或5倍。在一实施例中，对cd25的结合亲和力不显著下降或降低。
62、在一实施例中，il-2药剂以低亲和力与cd122/cd132异二聚体(例如人cd122/cd132异二聚体)结合，例如以约0.2-20nm的解离常数(kd)，例如约0.2、约0.3、约0.4、约0.5、约0.6、约0.7、约0.8、约0.9、约1、约1.1、约1.2、约1.3、约1.4、约1.5、约2、约3、约4、约5、约6、约7、约8、约9、约10、约11、约12、约13、约14、约15、约16、约17、约18或约20nm或例如约0.2至约19nm、约0.2至约18nm、约0.2至约17nm或约0.2至约16nm，例如约0.2至约15nm、约0.1至约4nm、约0.1至约3nm、约0.1至约2nm、约0.1至约1nm或约0.1至约0.5nm或例如约0.1至约10nm、约0.5至约10nm、约1至约10nm、约1.5至约10nm、约2至约10nm、约2.5至约10nm、约3至约10nm、约3.5至约10nm、约4至约10nm、约4.5至约10nm、约5至约10nm、约5.5至约10nm、约6至约10nm、约6.5至约10nm、约7至约10nm、约7.5至约10nm、约8至约10nm、约8.5至约10nm、约9至约10nm或约9.5至约10nm或例如约0.1至约9.5nm、约0.5至约9nm、约1至约8.5nm、约1.5至约8nm、约2至约7.5nm、约2.5至约7nm、约3至约6.5nm、约3.5至约6nm、约4至约5.5nm或约4.5至约5nm或例如大于约0.2、约0.3、约0.4、约0.5、约0.6、约0.7、约0.8、约0.9、约1、约1.1、约1.2、约1.3、约1.4、约1.5、约2、约3、约4、约5、约6、约7、约8、约9、约10、约11、约12、约13、约14、约15、约16、约17、约18或约20nm，例如，如通过酵母表面展示测定的。
63、在一实施例中，il-2药剂以低亲和力与cd122/cd132异二聚体(例如人cd122/cd132异二聚体)结合，例如以约0.2-300nm的解离常数(kd)，例如约0.2nm、约0.5nm、约1nm、约2nm、约5nm、约10nm、约15nm、约20nm、约25nm、约30nm、约40nm、约50nm、约60nm、约70nm、约80nm、约90nm、约100nm、约110nm、约120nm、约130nm、约140nm、约150nm、约160nm、约170nm、约180nm、约190nm、约200nm、约210nm、约220nm、约230nm、约240nm、约250nm、约260nm、约270nm、约280nm、约290nm或约300nm或例如约0.2至约280nm、约0.2至约260nm、约0.2至约240nm、约0.2至约220nm、约0.2至约200nm、约0.2至约180nm、约0.2至约160nm、约0.2至约140nm、约0.2至约120nm、约0.2至约100nm、约0.2至约80nm、约0.2至约60nm、约0.2至约40nm、约0.2至约20nm或例如约0.5至约300nm、约1至约300nm、约5至约300nm、约10至约300nm、约20至约300nm、约40至约300nm、约60至约300nm、约80至约300nm、约100至约300nm、约120至约300nm、约140至约300nm、约160至约300nm、约180至约300nm、约200至约300nm、约220至约300nm、约240至约300nm、约260至约300nm、约280至约300nm或例如约0.5至约280nm、约1至约260nm、约5至约240nm、约10至约220nm、约20至约200nm、约40至约180nm、约60至约160nm、约80至约140mm、约100至约120nm或例如大于约0.2、约0.5、约1、约2、约5、约10、约15、约20nm、约25nm、约30nm、约40nm、约50nm、约60nm、约70nm、约80nm、约90nm、约100nm、约110nm、约120nm、约130nm、约140nm、约150nm、约160nm、约170nm、约180nm、约190nm、约200nm、约210nm、约220nm、约230nm、约240nm、约250nm、约260nm、约270nm、约280nm、约290nm或大于约300nm，例如，如通过生物层干涉测量法(例如octet结合)和/或表面等离子体共振(例如biacore)测定的。
64、在一实施例中，相对于包括野生型il-2的il-2药剂或包括参考il-2变体的il-2药剂，il-2药剂在体外和/或体内选择性激活t调节性细胞中的il-2信号传导，例如t辅助ec50/treg ec50比率大于约1、约2、约3、约4、约5、约6、约7、约8、约9、约10、约11、约12、约13、约14、约15、约16、约17、约18、约19、约20、约21、约22、约23、约24、约25、约26、约27、约28、约29、约30、约35、约40、约45、约50、约55、约60、约65、约70、约75、约80、约85、约90、约95、约100、约150、约200、约250、约300、约350、约400、约450、约500、约600、约700、约800、约900、约1000、约1500、约2000、约2500或约3000或更多，或例如大于1和约1至2、约2至3、约3至4、约4至5、大于1和约1至10、大于1和约1至20、大于1和约1至30、大于1和约1至40、大于1和约1至50、约2至10、约2至20、约2至30、约2至40、2至50、约5至10、约5至20、约5至30、约5至40、约5至50、约10至20、约10至30、约10至40、约10至50、约20至40、约20至50、约50至100、约100至200、约200至500、约500至1000、约1000至2000或约1000至3000，例如，如流式细胞术测定的。在一实施例中，t辅助细胞是cd45+cd3+cd4+foxp3-细胞，例如通过流式细胞术测定。在一实施例中，treg是cd45+cd3+cd4+foxp3+细胞，例如通过流式细胞术测定。
65、在一实施例中，相对于包括野生型il-2的il-2药剂或包括参考il-2变体的il-2药剂，il-2药剂在体外和/或体内选择性激活t调节性细胞中的il-2信号传导，例如nk细胞ec50/treg ec50比率大于约1、约2、约3、约4、约5、约6、约7、约8、约9、约10、约11、约12、约13、约14、约15、约16、约17、约18、约19、约20、约21、约22、约23、约24、约25、约26、约27、约28、约29、约30、约35、约40、约45、约50、约55、约60、约65、约70、约75、约80、约85、约90、约95、约100、约150、约200、约250、约300、约350、约400、约450、约500、约600、约700、约800、约900、约1000、约1500、约2000、约2500或约3000或更多，或例如大于1和约1至2、约2至3、约3至4、约4至5、大于1和约1至10、大于1和约1至20、大于1和约1至30、大于1和约1至40、大于1和约1至50、约2至10、约2至20、约2至30、约2至40、2至50、约5至10、约5至20、约5至30、约5至40、约5至50、约10至20、约10至30、约10至40、约10至50、约20至40、约20至50、约50至100、约100至200、约200至500、约500至1000、约1000至2000或约1000至3000，例如，如流式细胞术测定的。在一实施例中，nk细胞是作为cd56+和/或cd16+的cd45+cd3-细胞，例如通过流式细胞术测定。在一实施例中，nk细胞是cd45+cd3-cd56+细胞，例如通过流式细胞术测定。在一实施例中，treg是cd45+cd3+cd4+foxp3+细胞，例如通过流式细胞术测定。
66、在一实施例中，例如，相对于包括野生型il-2的il-2药剂或包括参考il-2变体的il-2药剂，il-2药剂用于诱导或促进t调节性细胞活性的效力和/或能力增强或增加，例如treg的ec50降低约1％、约2％、约3％、约4％、约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、约100％或更多，或者例如降低约0.5倍、约1倍、约1.5倍、约2倍、约2.5倍、约3倍、约3.5倍、约4倍、约4.5倍、约5倍、约5.5倍、约6倍、约6.5倍、约7倍、约7.5倍、约8倍、约8.5倍、约9倍、约9.5倍、约10倍或更多倍，例如，如流式细胞术、体外或体内t调节性细胞增殖或扩增测定和/或t细胞抑制测定测定的。
67、在一实施例中，例如，相对于包括野生型il-2的il-2药剂或包括参考il-2变体的il-2药剂，il-2药剂用于诱导或促进t调节性细胞活性的效力和/或能力下降或降低，例如treg的ec50提高约1％、约2％、约3％、约4％、约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、约100％或更多，或者例如降低约0.5倍、约1倍、约1.5倍、约2倍、约2.5倍、约3倍、约3.5倍、约4倍、约4.5倍、约5倍、约5.5倍、约6倍、约6.5倍、约7倍、约7.5倍、约8倍、约8.5倍、约9倍、约9.5倍、约10倍、约50倍、约100倍、约200倍、约500倍、约1000倍、约2000倍、约5000倍、约10,000倍、约15,000倍、约20,000倍或更多倍，例如，如流式细胞术、体外或体内t调节性细胞增殖或扩增测定和/或t细胞抑制测定测定的。在一实施例中，相对于包括野生型il-2的il-2药剂或包括参考il-2变体的il-2药剂，il-2药剂用于诱导或促进t调节性细胞活性的效力和/或能力下降或降低，例如treg的ec50提高约100倍或更多倍(例如，如流式细胞术、体外或体内t调节性细胞增殖或扩增测定和/或t细胞抑制测定测定的)，并且不激活或不显著激活nk细胞。
68、在一实施例中，il-2药剂体外、离体或体内调节(例如降低(例如抑制、阻断或中和)或增加(例如激活、启动或增强)t细胞(例如treg)的一种或多种生物活性。
69、在一实施例中，il-2药剂示出与本文所描述的il-2药剂相同或类似的结合亲和力或特异性或两者。
70、在一实施例中，il-2药剂示出与包括本文所描述的一个或多个(例如，2、3、4、5、6、7、8、9、10个或更多个)改变(例如，取代)的il-2药剂相同或类似的结合亲和力或特异性或两者。
71、在一实施例中，il-2药剂示出与包括本文所描述的氨基酸序列的il-2药剂相同或类似的结合亲和力或特异性或两者。
72、在一实施例中，il-2药剂示出与包括由本文所描述的核苷酸序列编码的氨基酸序列的il-2药剂相同或类似的结合亲和力或特异性或两者。
73、在一实施例中，il-2药剂抑制例如竞争性地抑制第二il-2药剂与il-2受体的结合，其中第二il-2药剂是本文所描述的il-2药剂。
74、在一实施例中，il-2药剂与第二il-2药剂竞争与il-2受体结合，其中第二il-2药剂是本文所描述的il-2药剂。
75、在一实施例中，il-2药剂具有本文所描述的il-2药剂的一种或多种生物特性。
76、在一实施例中，il-2药剂具有本文所描述的il-2药剂的一种或多种结构特性。
77、在一实施例中，il-2药剂具有本文所描述的il-2药剂的一种或多种药代动力学特性。
78、在一实施例中，白细胞介素-2(il-2)药剂包括人il-2变体，所述人il-2变体包括在一个或多个(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14个或全部)位置处的氨基酸改变(例如取代)，所述一个或多个位置选自：t3、h16、i28、k35、r38、f42、e68、v69、q74、d84、s87、n88、i92、c125、q126或其组合，例如对应于野生型人il-2。在另一个实施例中，il-2药剂包括在位置v69、q74或其组合处的氨基酸改变(例如，取代)。在一实施例中，il-2药剂包括在位置v69和q74处的氨基酸改变(例如，取代)。在一实施例中，il-2药剂包括氨基酸取代v69a。在一实施例中，il-2药剂包括氨基酸取代q74p。在一实施例中，il-2药剂包括在位置h16、i92、d84或其组合处的氨基酸改变(例如，取代)。在一实施例中，il-2药剂包括在位置h16处的氨基酸改变(例如，取代)，任选地其中氨基酸取代是h16n、h16l或h16d。在一实施例中，il-2药剂包括氨基酸取代h16n。在一实施例中，il-2药剂包括氨基酸取代h16l。在一实施例中，il-2药剂包括在位置i92处的氨基酸改变(例如，取代)，任选地其中氨基酸取代是i92s。在一实施例中，il-2药剂包括在位置d84处的氨基酸改变(例如，取代)，任选地其中氨基酸取代是d84v。在一实施例中，il-2药剂包括在位置k35、r38、f42、e68或其组合处的氨基酸改变(例如，取代)。在一实施例中，il-2药剂包括在位置k35处的氨基酸改变(例如，取代)，任选地其中氨基酸取代是k35e。在一实施例中，il-2药剂包括在位置r38处的氨基酸改变(例如，取代)，任选地其中氨基酸取代是r38e、r38n或r38q。在一实施例中，il-2药剂包括氨基酸取代r38n。在一实施例中，il-2药剂包括氨基酸取代r38q。在一实施例中，il-2药剂包括在位置f42处的氨基酸改变(例如，取代)，任选地其中氨基酸取代是f42k或f42q。在一实施例中，il-2药剂包括氨基酸取代f42q。
79、在一实施例中，il-2药剂包括(i)-(v)中的一种或多种(例如两、三、四种或全部)：
80、(i)一个或多个(例如两、三、四、五、六或七个)氨基酸改变(例如取代)，所述一个或多个氨基酸改变降低或被鉴定为降低其对cd122(例如cd122/cd132异二聚体)的亲和力，例如在以下位置处的改变(例如取代)：h16(例如h16l、h16n或h16d)、i28(例如i28t或i28f)、d84(例如d84v)、s87(例如s87r)、n88(例如n88s、n88l或n88d)、i92(例如i92s)和/或q126(例如q126t、q126k或q126r)；
81、(ii)一个或多个(例如两个)氨基酸改变(例如取代)，所述一个或多个氨基酸改变增加或被鉴定为增加il-2药剂的稳定性，例如在位置v69(例如v69a)和/或q74(例如q74p)处的改变(例如取代)；
82、(iii)一个或多个(例如两、三或四个)氨基酸改变(例如取代)，所述一个或多个氨基酸改变降低或被鉴定为降低其对cd25的亲和力，例如在以下位置处的改变(例如取代)：k35(例如k35e)、r38(例如r38e、r38n或r38q)、f42(例如f42k或f42q)和/或e68(例如e68q或e68n)；或
83、(iv)一个或多个氨基酸改变(例如取代)，所述一个或多个氨基酸改变降低或被鉴定为降低il-2药剂的o-糖基化，例如在位置t3(例如t3a)处的改变(例如取代)；或
84、(v)一个或多个氨基酸改变(例如取代)，所述一个或多个氨基酸改变降低或被鉴定为降低il-2药剂的不正确二硫配对和/或聚集(例如提高稳定性)，例如位置c125处的改变(例如取代)(例如c125s)。
85、在一实施例中，il-2药剂包括(i)。在一实施例中，il-2药剂包括(ii)。在一实施例中，il-2药剂包括(iii)。在一实施例中，il-2药剂包括(iv)。在一实施例中，il-2药剂包括(v)。
86、在一实施例中，il-2药剂包括(i)和(ii)。在一实施例中，il-2药剂包括(i)和(iii)。在一实施例中，il-2药剂包括(i)和(iv)。在一实施例中，il-2药剂包括(i)和(v)。在一实施例中，il-2药剂包括(ii)和(iii)。在一实施例中，il-2药剂包括(ii)和(iv)。在一实施例中，il-2药剂包括(ii)和(v)。在一实施例中，il-2药剂包括(iii)和(iv)。在一实施例中，il-2药剂包括(iii)和(v)。在一实施例中，il-2药剂包括(iv)和(v)。
87、在一实施例中，il-2药剂包括(i)、(ii)和(iii)。在一实施例中，il-2药剂包括(i)、(ii)和(iv)。在一实施例中，il-2药剂包括(i)、(ii)和(v)。在一实施例中，il-2药剂包括(i)、(iii)和(iv)。在一实施例中，il-2药剂包括(i)、(iii)和(v)。在一实施例中，il-2药剂包括(i)、(iv)和(v)。在一实施例中，il-2药剂包括(ii)、(iii)和(iv)。在一实施例中，il-2药剂包括(ii)、(iii)和(v)。在一实施例中，il-2药剂包括(ii)、(iv)和(iv)。在一实施例中，il-2药剂包括(iii)、(iv)和(v)。
88、在一实施例中，il-2药剂包括(i)、(ii)、(iii)和(iv)。在一实施例中，il-2药剂包括(i)、(ii)、(iii)和(v)。在一实施例中，il-2药剂包括(i)、(ii)、(iv)和(v)。在一实施例中，il-2药剂包括(i)、(iii)、(iv)和(v)。在一实施例中，il-2药剂包括(ii)、(iii)、(iv)和(v)。
89、在一实施例中，il-2药剂包括(i)、(ii)、(iii)、(iv)和(v)。
90、在一实施例中，il-2药剂不包括(i)。在一实施例中，il-2药剂不包括(ii)。在一实施例中，il-2药剂不包括(iii)。在一实施例中，il-2药剂不包括(iv)。在一实施例中，il-2药剂不包括(v)。
91、在一实施例中，il-2药剂不包括(i)和(ii)。在一实施例中，il-2药剂不包括(i)和(iii)。在一实施例中，il-2药剂不包括(i)和(iv)。在一实施例中，il-2药剂不包括(i)和(v)。在一实施例中，il-2药剂不包括(ii)和(iii)。在一实施例中，il-2药剂不包括(ii)和(iv)。在一实施例中，il-2药剂不包括(ii)和(v)。在一实施例中，il-2药剂不包括(iii)和(iv)。在一实施例中，il-2药剂不包括(iii)和(v)。在一实施例中，il-2药剂不包括(iv)和(v)。
92、在一实施例中，il-2药剂不包括(i)、(ii)和(iii)。在一实施例中，il-2药剂不包括(i)、(ii)和(iv)。在一实施例中，il-2药剂不包括(i)、(ii)和(v)。在一实施例中，il-2药剂不包括(i)、(iii)和(iv)。在一实施例中，il-2药剂不包括(i)、(iii)和(v)。在一实施例中，il-2药剂不包括(i)、(iv)和(v)。在一实施例中，il-2药剂不包括(ii)、(iii)和(iv)。在一实施例中，il-2药剂不包括(ii)、(iii)和(v)。在一实施例中，il-2药剂不包括(ii)、(iv)和(iv)。在一实施例中，il-2药剂不包括(iii)、(iv)和(v)。
93、在一实施例中，il-2药剂不包括(i)、(ii)、(iii)和(iv)。在一实施例中，il-2药剂不包括(i)、(ii)、(iii)和(v)。在一实施例中，il-2药剂不包括(i)、(ii)、(iv)和(v)。在一实施例中，il-2药剂不包括(i)、(iii)、(iv)和(v)。在一实施例中，il-2药剂不包括(ii)、(iii)、(iv)和(v)。
94、在一实施例中，il-2药剂不包括(i)、(ii)、(iii)、(iv)和(v)。
95、在一实施例中，il-2药剂包括氨基酸改变(例如取代)：
96、(i)在位置v69和q74处和/或在位置k35处；以及
97、(ii)在位置h16、i92或d84处；和任选地
98、(iii)在位置r38、f42、e68或其组合处。
99、在一实施例中，il-2药剂包括氨基酸改变(例如取代)：
100、(i)在位置v69和q74处和/或在位置k35处；以及
101、(ii)在位置h16、i92或d84处；和
102、(iii)在位置r38、f42、e68或其组合处。
103、在一实施例中，il-2药剂包括氨基酸改变(例如取代)：
104、(i)在位置v69和q74处和/或在位置k35处；以及
105、(ii)在位置h16、i92或d84处；或
106、(iii)在位置r38、f42、e68或其组合处。
107、在一实施例中，il-2药剂包括氨基酸改变(例如取代)：
108、(i)在位置v69和q74处；和/或在位置k35处；以及
109、(ii)在位置h16、i92、d84或其组合处；和
110、(iii)在位置r38、f42、e68或其组合处。
111、在一实施例中，il-2药剂包括在位置v69、q74和h16处的氨基酸改变(例如取代)，任选地其中氨基酸取代分别是v69a、q74p和h16n或h16l，任选地其中氨基酸取代是v69a、q74p和h16l。在一实施例中，il-2药剂包括氨基酸取代v69a、q74p和h16l。
112、在一实施例中，il-2药剂包括在位置v69、q74和i92处的氨基酸改变(例如取代)，任选地其中氨基酸取代分别是v69a、q74p和i92s。在一实施例中，il-2药剂包括氨基酸取代v69a、q74p和i92s。
113、在一实施例中，il-2药剂包括在位置v69、q74和d84处的氨基酸改变(例如取代)，任选地其中氨基酸取代分别是v69a、q74p和d84v。在一实施例中，il-2药剂包括氨基酸取代v69a、q74p和d84v。
114、在一实施例中，il-2药剂包括在位置v69、q74和r38处的氨基酸改变(例如取代)，任选地其中氨基酸取代分别是v69a、q74p和r38q。
115、在一实施例中，il-2药剂包括在位置v69、q74和f42处的氨基酸改变(例如取代)，任选地其中氨基酸取代分别是v69a、q74p和f42q。在一实施例中，il-2药剂包括氨基酸取代v69a、q74p和f42q。
116、在一实施例中，il-2药剂包括在位置v69、q74和r38处的氨基酸改变(例如取代)，任选地其中氨基酸取代分别是v69a、q74p和r38n。在一实施例中，il-2药剂包括氨基酸取代v69a、q74p和r38n。
117、在一实施例中，il-2药剂包括在位置v69、q74和r38处的氨基酸改变(例如取代)，任选地其中氨基酸取代分别是v69a、q74p和r38e。在一实施例中，il-2药剂包括氨基酸取代v69a、q74p和r38e。
118、在一实施例中，il-2药剂包括在位置v69、q74、k35和h16处的氨基酸改变(例如取代)，任选地其中氨基酸取代分别是v69a、q74p、k35e和h16n或h16l。在一实施例中，il-2药剂包括氨基酸取代v69a、q74p、k35e和h16n或h16l。在一实施例中，il-2药剂包括氨基酸取代v69a、q74p、k35e和h16n。在一实施例中，il-2药剂包括氨基酸取代v69a、q74p、k35e和h16l。
119、在一实施例中，il-2药剂包括在位置v69、q74、k35、h16和r38处的氨基酸改变(例如取代)，任选地其中氨基酸取代分别是v69a、q74p、k35e、h16n和r38n。在一实施例中，il-2药剂包括氨基酸取代v69a、q74p、k35e、h16n和r38n。
120、在一实施例中，il-2药剂包括在位置v69、q74、h16和r38处的氨基酸改变(例如取代)，任选地其中氨基酸取代分别是v69a、q74p、h16n或h16l和r38n或r38q，任选地其中氨基酸取代是v69a、q74p、h16n或h16l和r38q。在一实施例中，il-2药剂包括氨基酸取代v69a、q74p、h16l和r38q。
121、在一实施例中，il-2药剂包括在位置i28、e68、s87、n88、q126或其组合处的氨基酸改变(例如，取代)。在一实施例中，il-2药剂包括在位置i28处的氨基酸改变(例如，取代)，任选地其中氨基酸取代是i28t或i28f。在一实施例中，il-2药剂包括氨基酸取代i28t。在一实施例中，il-2药剂包括氨基酸取代i28f。
122、在一实施例中，il-2药剂包括在位置e68处的氨基酸改变(例如，取代)，任选地其中氨基酸取代是e68q或e68n。在一实施例中，il-2药剂包括氨基酸取代e68q。在一实施例中，il-2药剂包括氨基酸取代e68n。
123、在一实施例中，il-2药剂包括在位置s87处的氨基酸改变(例如，取代)，任选地其中氨基酸取代是s87r。在一实施例中，il-2药剂包括氨基酸取代s87r。
124、在一实施例中，il-2药剂包括在位置n88处的氨基酸改变(例如，取代)，任选地其中氨基酸取代是n88r、n88s、n88l或n88d。在一实施例中，il-2药剂包括氨基酸取代n88r。在一实施例中，il-2药剂包括氨基酸取代n88s。在一实施例中，il-2药剂包括氨基酸取代n88l。在一实施例中，il-2药剂包括氨基酸取代n88d。
125、在一实施例中，il-2药剂包括在位置q126处的氨基酸改变(例如，取代)，任选地其中氨基酸取代是q126t、q126k或q126r。在一实施例中，il-2药剂包括氨基酸取代q126t。在一实施例中，il-2药剂包括氨基酸取代q126k。在一实施例中，il-2药剂包括氨基酸取代q126r。
126、在一实施例中，il-2药剂包括在位置c125处的氨基酸改变(例如，取代)，任选地其中氨基酸取代是c125s。在一实施例中，il-2药剂包括氨基酸取代c125s。
127、在一实施例中，il-2药剂包括在位置t3处的氨基酸改变(例如，取代)，任选地其中氨基酸取代是t3a。在一实施例中，il-2药剂包括氨基酸取代t3a。
128、在一实施例中，il-2药剂包括在位置v69、q74和c125处的氨基酸改变(例如取代)，任选地其中氨基酸取代分别是v69a、q74p和c125s。在一实施例中，il-2药剂包括氨基酸取代v69a、q74p和c125s。
129、在一实施例中，il-2药剂包括在位置t3、h16、i92或其组合处的氨基酸改变(例如取代)，任选地其中氨基酸取代分别是t3a、h16n和i92s。
130、在一实施例中，il-2药剂包括在位置h16、v69、q74和c125处的氨基酸改变(例如取代)，任选地其中氨基酸取代分别是h16n、v69a、q74p和c125s。在一实施例中，il-2药剂包括氨基酸取代h16n、v69a、q74p和c125s。
131、在一实施例中，il-2药剂包括在位置h16、v69、q74和c125处的氨基酸改变(例如取代)，任选地其中氨基酸取代分别是h16l、v69a、q74p和c125s。在一实施例中，il-2药剂包括氨基酸取代h16l、v69a、q74p和c125s。各种技术效果与包括上述氨基酸改变组合的il-2药剂相关。在不希望受理论束缚的情况下，据信在一实施例中，包括氨基酸取代h16l、v69a、q74p和c125s的il-2药剂可以具有以下有利特性中的至少一种或多种特性：(i)对cd122和/或cd132的结合亲和力降低，与其它t细胞类型相比，这增加了il-2药剂对调节性t细胞(treg)的效力和选择性；(ii)显著稳定，例如由于稳定v69a和q74p突变的存在；(iii)对cd25的结合能力和/或结合亲和力下降或降低(或具有微不足道的影响)，这提高了il-2药剂的寿命；(iv)不会在体外和/或体内显著促进t效应子细胞和/或自然杀伤(nk)细胞的扩增、激活、存活和/或增殖；和/或(v)减少了不正确的二硫键配对并提高了稳定性，例如由于c125s突变的存在。在一实施例中，与包括其它h16突变的il-2药剂相比，包括h16l突变的il-2药剂对cd122和/或cd132的结合亲和力降低和/或对treg的效力和选择性相对于其它t细胞类型增加。这些特性使得包括氨基酸取代h16l、v69a、q74p和c125s的il-2药剂特别适于治疗由异常免疫应答引起的如自身免疫性疾病等病症和病状。
132、因此，在一实施例中，包括氨基酸取代h16l、v69a、q74p和c125s的il-2药剂相对于野生型il-2或不包括氨基酸取代的参考il-2变体尤其具有以下特性中的一种或多种(例如2、3、4、5、6、7种或全部)特性：(i)体外或体内的稳定性增强或增加；(ii)体外和/或体内对人cd122的结合能力和/或结合亲和力下降或降低；(iii)体外和/或体内对人cd132的结合能力和/或结合亲和力下降或降低；(iv)il-2变体在体外和/或体内对由人cd122和人cd132构成的异二聚体il-2受体(即，人cd122/cd132异二聚体)的亲和力下降或降低；(v)体外和/或体内对人cd25的结合能力和/或结合亲和力下降或降低(例如，适度下降或降低)；(vi)与调节性t细胞(例如foxp3+t细胞)选择性结合；(vii)体外或体内选择性激活t调节性细胞(treg)中的il-2信号通路；或(viii)用于诱导或促进treg扩增、活性、存活和/或增殖的能力增强或增加。
133、在一实施例中，il-2药剂包括在位置h16、v69、q74、i92和c125处的氨基酸改变(例如取代)，任选地其中氨基酸取代分别是h16l、v69a、q74p、i92s和c125s。在一实施例中，il-2药剂包括氨基酸取代h16l、v69a、q74p、i92s和c125s。
134、在一实施例中，il-2药剂包括在位置t3、v69、q74和c125处的氨基酸改变(例如取代)，任选地其中氨基酸取代分别是t3a、v69a、q74p和c125s。在一实施例中，il-2药剂包括氨基酸取代t3a、v69a、q74p和c125s。
135、在一实施例中，il-2药剂包括在位置t3、h16、v69、q74和c125处的氨基酸改变(例如取代)，任选地其中氨基酸取代分别是t3a、h16n或h16l、v69a、q74p和c125s。在一实施例中，il-2药剂包括氨基酸取代t3a、h16n、v69a、q74p和c125s。在一实施例中，il-2药剂包括氨基酸取代t3a、h16l、v69a、q74p和c125s。
136、在一实施例中，il-2药剂包括在位置t3、v69、q74、i92和c125处的氨基酸改变(例如取代)，任选地其中氨基酸取代分别是t3a、v69a、q74p、i92s和c125s。在一实施例中，il-2药剂包括氨基酸取代t3a、v69a、q74p、i92s和c125s。在一实施例中，il-2药剂包括氨基酸取代t3a、v69a、q74p、i92s和c125s。
137、在一实施例中，il-2药剂包括人il-2变体，所述人il-2变体包括选自以下的氨基酸序列：seq id no:2、seq id no:3、seq id no:4、seq id no:5、seq id no:6、seq id no:7、seq id no:8、seq id no:9、seq id no:10、seq id no:11、seq id no:12、seq id no:13、seq id no:14、seq id no:15、seq id no:16、seq id no:17、seq id no:18、seq idno:19、seq id no:20、seq id no:21、seq id no:22、seq id no:23、seq id no:24、seq idno:25、seq id no:26、seq id no:27、seq id no:28、seq id no:29、seq id no:30、seq idno:31、seq id no:32、seq id no:33、seq id no:34、seq id no:35、seq id no:36、seq idno:37、seq id no:38、seq id no:1000、seq id no:1001、seq id no:1002或其功能片段、或与其具有至少80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更多序列同一性或与其相差不超过1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、20、25或30个氨基酸的氨基酸序列。
138、在一实施例中，氨基酸改变(例如取代)相对于不包括氨基酸改变(例如取代)的参考il-2药剂，为所述il-2药剂提供以下特性中的至少一种或多种(例如，2、3、4、5、6、7、8、9、10、11种或全部)特性：
139、(i)il-2药剂的表达增强或增加；
140、(ii)il-2药剂的聚集被抑制或减少；
141、(iii)il-2药剂的稳定性增强或增加；
142、(iv)il-2药剂的半衰期增强或增加；
143、(v)il-2药剂的周转率和/或清除率被抑制或降低；
144、(vi)il-2药剂与人cd25的结合被抑制或降低(例如中度抑制或降低)或基本上未改变；
145、(vii)il-2药剂对人cd122的亲和力被抑制或降低；
146、(viii)il-2药剂对人cd132的亲和力被抑制或降低；或
147、(ix)il-2药剂对由人cd122和人cd132构成的二聚体il-2受体的亲和力被抑制或降低；
148、(x)与调节性t细胞(例如foxp3+t细胞)选择性结合；
149、(xi)选择性激活treg中的il-2信号传导通路；或
150、(xii)用于诱导或促进treg扩增、活性、存活和/或增殖的能力增强或增加、或下降或降低。
151、在一实施例中，il-2药剂包括包含一个或多个选自以下的氨基酸改变(例如取代)的人il-2变体：h16d、h16n、h16l、i28t、k35e、r38q、r38n、r38e、f42k、f42q、v69a、q74p、d84v、s87r、n88l、n88s、i92s、c125s；本文所描述的多肽接头；以及本文所描述的非il-2部分，其中氨基酸改变(例如取代)相对于不包括氨基酸改变(例如取代)的参考il-2药剂，为所述il-2药剂提供以下特性中的至少一种或多种特性：
152、(i)il-2药剂的表达增强或增加；
153、(ii)il-2药剂的聚集被抑制或减少；
154、(iii)il-2药剂的稳定性增强或增加；
155、(iv)il-2药剂的半衰期增强或增加；
156、(v)il-2药剂的周转率和/或清除率被抑制或降低；
157、(vi)il-2药剂与人cd25的结合被抑制或降低(例如中度抑制或降低)或基本上未改变；
158、(vii)il-2药剂对人cd122的亲和力被抑制或降低；
159、(viii)il-2药剂对人cd132的亲和力被抑制或降低；
160、(ix)il-2药剂对由人cd122和人cd132构成的二聚体il-2受体的亲和力被抑制或降低；
161、(x)与调节性t细胞(例如foxp3+t细胞)选择性结合；
162、(xi)选择性激活treg中的il-2信号传导通路；和/或
163、(xii)用于诱导或促进treg扩增、活性、存活和/或增殖的能力增强或增加、或下降或降低。
164、在一实施例中，人il-2变体包括氨基酸改变(例如取代)：
165、(i)c125s；
166、(ii)v69a、q74p和c125s；
167、(iii)h16d、v69a、q74p和c125s；
168、(iv)h16n、v69a、q74p和c125s；
169、(v)h16l、v69a、q74p和c125s；
170、(vi)i28t、v69a、q74p和c125s；
171、(vii)v69a、q74p、d84v和c125s；
172、(viii)v69a、q74p、s87r和c125s；
173、(ix)v69a、q74p、n88l和c125s；
174、(x)v69a、q74p、n88s和c125s；
175、(xi)v69a、q74p、i92s和c125s；
176、(xii)k35e、v69a、q74p和c125s；
177、(xiii)k35e、h16n、v69a、q74p和c125s；
178、(xiv)k35e、h16l、v69a、q74p和c125s；
179、(xv)k35e、d84v、v69a、q74p和c125s；
180、(xvi)k35e、i92s、v69a、q74p和c125s；
181、(xvii)r38q、v69a、q74p和c125s；
182、(xviii)r38q、h16n、v69a、q74p和c125s；
183、(xix)r38q、h16l、v69a、q74p和c125s；
184、(xx)r38q、d84v、v69a、q74p和c125s；
185、(xxi)r38q、i92s、q74p和c125s；
186、(xxii)r38n、v69a、q74p和c125s；
187、(xxiii)r38n、h16n、v69a、q74p和c125s；
188、(xxiv)r38n、h16l、v69a、q74p和c125s；
189、(xxv)r38n、d84v、v69a、q74p和c125s；
190、(xxvi)r38n、i92s、q74p和c125s；
191、(xxvii)r38e、v69a、q74p和c125s；
192、(xxviii)f42k、v69a、q74p和c125s；
193、(xxix)f42q、v69a、q74p和c125s；
194、(xxx)f42a、y45a、l72g、n88d、v69a、q74p和c125s；
195、(xxxi)r38n、s87r、v69a、q74p和c125s；
196、(xxxii)r38e、h16n、v69a、q74p和c125s；
197、(xxxiii)r38e、d84v、v69a、q74p和c125s；
198、(xxxiv)r38e、s87r、v69a、q74p和c125s；
199、(xxxv)r38e、i92s、v69a、q74p和c125s；
200、(xxxvi)f42q、h16n、v69a、q74p和c125s；
201、(xxxvii)f42q、i92s、v69a、q74p和c125s；或
202、(xxxviii)k35e、r38n、h16n、v69a、q74p和c125s；
203、(xxxix)t3a、h16n、v69a、q74p和c125s；
204、(xl)t3a、h16l、v69a、q74p和c125s；或
205、(xli)t3a、v69a、q74p、i92s和c125s。
206、在一实施例中，il-2药剂包括包含选自以下的氨基酸序列的人il-2变体：seq idno:2、seq id no:3、seq id no:4、seq id no:5、seq id no:6、seq id no:7、seq id no:8、seq id no:9、seq id no:10、seq id no:11、seq id no:12、seq id no:13、seq id no:14、seq id no:15、seq id no:16、seq id no:17、seq id no:18、seq id no:19、seq id no:20、seq id no:21、seq id no:22、seq id no:23、seq id no:24、seq id no:25、seq idno:26、seq id no:27、seq id no:28、seq id no:29、seq id no:30、seq id no:31、seq idno:32、seq id no:33、seq id no:34、seq id no:35、seq id no:36、seq id no:37、seq idno:38、seq id no:1000、seq id no:1001、或seq id no:1002或其功能片段、或与其具有至少80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更多序列同一性或与其相差不超过1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、20、25或30个氨基酸的氨基酸序列；本文所描述的多肽接头；以及本文所描述的非il-2部分，其中相对于不包括人il-2多肽变体的参考il-2药剂，所述il-2药剂表现出以下特性中的至少一种或多种特性：
207、(i)il-2药剂的表达增强或增加；
208、(ii)il-2药剂的聚集被抑制或减少；
209、(iii)il-2药剂的稳定性增强或增加；
210、(iv)il-2药剂的半衰期增强或增加；
211、(v)il-2药剂的周转率和/或清除率被抑制或降低；
212、(vi)il-2药剂与人cd25的结合被抑制或降低(例如中度抑制或降低)或基本上未改变；
213、(vii)il-2药剂对人cd122的亲和力被抑制或降低；
214、(viii)il-2药剂对人cd132的亲和力被抑制或降低；
215、(ix)il-2药剂对由人cd122和人cd132构成的二聚体il-2受体的亲和力被抑制或降低；
216、(x)与调节性t细胞(例如foxp3+t细胞)选择性结合；
217、(xi)选择性激活treg中的il-2信号传导通路；和/或
218、(xii)用于诱导或促进treg扩增、活性和/或增殖的能力增强或增加、或下降或降低。
219、各种技术效果与包括seq id no:5的氨基酸序列的il-2药剂相关。在不希望受理论束缚的情况下，据信在一实施例中，包括seq id no:5的氨基酸序列的il-2药剂可以具有以下有利特性中的至少一种或多种特性：(i)对cd122和/或cd132的结合亲和力降低，与其它t细胞类型相比，这增加了il-2药剂对调节性t细胞(treg)的效力和选择性；(ii)显著稳定，例如由于稳定v69a和q74p突变的存在；(iii)对cd25的结合能力和/或结合亲和力下降或降低(或具有微不足道的影响)，这提高了il-2药剂的寿命；(iv)不会在体外和/或体内显著促进t效应子细胞和/或自然杀伤(nk)细胞的扩增、激活、存活和/或增殖；和/或(v)减少了不正确的二硫键配对并提高了稳定性，例如由于c125s突变的存在。在一实施例中，与包括其它h16突变的il-2药剂相比，包括h16l突变的il-2药剂对cd122和/或cd132的结合亲和力降低和/或对treg的效力和选择性相对于其它t细胞类型增加。这些特性使得包括seq idno:5的氨基酸序列的il-2药剂特别适于治疗由异常免疫应答引起的如自身免疫性疾病等病症和病状。
220、因此，在一实施例中，包括seq id no:5的氨基酸序列的il-2药剂相对于野生型il-2或不包括氨基酸取代的参考il-2变体尤其具有以下特性中的一种或多种(例如2、3、4、5、6、7种或全部)：(i)体外或体内的稳定性增强或增加；(ii)体外和/或体内对人cd122的结合能力和/或结合亲和力下降或降低；(iii)体外和/或体内对人cd132的结合能力和/或结合亲和力下降或降低；(iv)il-2变体在体外和/或体内对由人cd122和人cd132构成的异二聚体il-2受体(即，人cd122/cd132异二聚体)的亲和力下降或降低；(v)体外和/或体内对人cd25的结合能力和/或结合亲和力下降或降低(例如，适度下降或降低)；(vi)与调节性t细胞(例如foxp3+t细胞)选择性结合；(vii)体外或体内选择性激活t调节性细胞(treg)中的il-2信号通路；或(viii)用于诱导或促进treg扩增、活性、存活和/或增殖的能力增强或增加。
221、在一实施例中，参考il-2药剂包括seq id no:1031、seq id no:1、或seq id no:2的氨基酸序列或其功能片段。在一实施例中，参考il-2药剂包括seq id no:1031的氨基酸序列。在一实施例中，参考il-2药剂包括seq id no:1的氨基酸序列。在一实施例中，参考il-2药剂包括seq id no:2的氨基酸序列。
222、在一实施例中，il-2药剂包括通过接头与本文所描述的非il-2部分融合的本文所描述的人il-2变体，其中所述接头是多肽接头，任选地其中所述多肽接头是柔性接头、刚性接头或可切割接头。在一实施例中，多肽接头是gly-ser接头(例如(g4s)n接头，其中n＝1、2、3、4、5、6或更大(seq id no:1020))、富含脯氨酸的延伸接头(例如v1 gpc、v2 gpgc、v3gcgcp、纤维素酶接头4、纤维素酶接头4)、刚性接头(例如a(eaaak)na，其中n＝2、3、4、5或更大(seq id no:1021)；repr_12)、非gs接头(例如(gggsa)n，其中n＝1、2、3、4、5或更大(seqid no:1022))或其免疫球蛋白铰链区或部分。在一实施例中，多肽接头是gly-ser接头，所述gly-ser接头包括(g4s)1(seq id no:1023)、(g4s)2(seq id no:1024)、(g4s)3(seq idno:1025)、(g4s)4(seq id no:48)、(g4s)5(seq id no:1026)或(g4s)6(seq id no:1027)。在一实施例中，多肽接头是gly-ser接头，所述gly-ser接头包括(g4s)4(seq id no:48)。在一实施例中，多肽接头包括选自以下的氨基酸序列：seq id no:48、seq id no:49、seq idno:50、seq id no:51、seq id no:52、seq id no:53、seq id no:54、或seq id no:55。在一实施例中，多肽接头序列包括seq id no:48的氨基酸序列。
223、在一实施例中，非il-2部分是免疫球蛋白fc区、或其片段或部分(例如功能片段)。在一实施例中，免疫球蛋白fc区包括igg fc区、igd fc区、iga fc区、igm fc区或ige fc区、或其片段或部分。在一实施例中，igg fc区包括野生型人igg1 fc区(例如，igg1 m3同种异型)、野生型igg2 fc区或野生型人igg4 fc区、或其片段或部分。
224、在一实施例中，igg fc区包括突变igg1或突变igg4 fc区、或其片段或部分。在一实施例中，igg fc区包括一个或多个(例如，两、三、四或五个)突变，例如本文所描述的一个或多个(例如，两、三、四或五个)突变。
225、在一实施例中，igg fc区包括突变igg4 fc区、或其片段或部分，其中突变igg4 fc区是人的。
226、在一实施例中，突变igg4 fc区、或其片段或部分包括在根据eu编号编号的ser228处的氨基酸改变(例如取代)，任选地其中在ser228处的氨基酸改变(例如取代)是s228p。在一实施例中，突变igg4 fc区包括氨基酸取代s228p。
227、在一实施例中，突变igg4 fc区、或其片段或部分包括在根据eu编号编号的arg409处的氨基酸改变(例如取代)，任选地其中在arg409处的氨基酸改变(例如取代)是r409k。在一实施例中，突变igg4 fc区包括氨基酸取代r409k。
228、在一实施例中，突变igg4 fc区、或其片段或部分包括在根据eu编号编号的thr307、gln311和ala378处的氨基酸改变(例如取代)，任选地其中氨基酸改变(例如取代)分别是t307q、q311v和a378v。在一实施例中，突变igg4 fc区包括氨基酸取代t307q、q311v和a378v。
229、在一实施例中，突变igg4 fc区包括选自以下的氨基酸序列：seq id no:44、seqid no:45、seq id no:46、或seq id no:47、或与其具有至少80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更多序列同一性或与其相差不超过1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、20、25或30个氨基酸的氨基酸序列。
230、在一实施例中，igg fc区包括突变igg1 fc区、或其片段或部分，其中突变igg1 fc区是人的。在一实施例中，突变igg1 fc区(例如包括n297g取代)具有igg1 m3同种异型。
231、在一实施例中，突变igg1 fc区、或其片段或部分包括在根据eu编号编号的asn297处的氨基酸改变(例如取代)，任选地其中在asn297处的氨基酸改变(例如取代)是n297g。在一实施例中，突变igg1 fc区包括氨基酸取代n297g。
232、在一实施例中，突变igg1 fc区、或其片段或部分包括在根据eu编号编号的leu234、leu235和pro329处的氨基酸改变(例如取代)，任选地其中氨基酸改变(例如取代)分别是l234a、l235a和p329g。在一实施例中，突变igg1 fc区包括氨基酸取代l234a、l235a和p329g。
233、在一实施例中，突变igg1 fc区、或其片段或部分包括在根据eu编号编号的thr307、gln311和ala378处的氨基酸改变(例如取代)，任选地其中氨基酸改变(例如取代)分别是t307q、q311v和a378v。在一实施例中，突变igg1 fc区包括氨基酸取代t307q、q311v和a378v。
234、在一实施例中，突变igg1 fc区包括选自以下的氨基酸序列：seq id no:40、seqid no:41、seq id no:42、seq id no:43、或seq id no:1003、或与其具有至少80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更多序列同一性或与其相差不超过1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、20、25或30个氨基酸的氨基酸序列。在一实施例中，突变igg1 fc区包括seq id no:1003的氨基酸序列、或与其具有至少80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更多序列同一性或与其相差不超过1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、20、25或30个氨基酸的氨基酸序列。在一实施例中，突变igg1 fc区包括选seq id no:1003的氨基酸序列。
235、在一实施例中，非il-2部分抑制或降低il-2药剂引发fc受体介导的免疫效应子功能的能力。
236、在一实施例中，il-2药剂包括包含选自以下的氨基酸序列的il-2变体：seq idno:2、seq id no:3、seq id no:4、seq id no:5、seq id no:6、seq id no:7、seq id no:8、seq id no:9、seq id no:10、seq id no:11、seq id no:12、seq id no:13、seq id no:14、seq id no:15、seq id no:16、seq id no:17、seq id no:18、seq id no:19、seq id no:20、seq id no:21、seq id no:22、seq id no:23、seq id no:24、seq id no:25、seq idno:26、seq id no:27、seq id no:28、seq id no:29、seq id no:30、seq id no:31、seq idno:32、seq id no:33、seq id no:34、seq id no:35、seq id no:36、seq id no:37、或seqid no:38、seq id no:1000、seq id no:1001、或seq id no:1002或其功能片段，其中il-2药剂包括gly-ser接头，任选地其中gly-ser接头包括(g4s)4(seq id no:48)，并且其中il-2变体通过gly-ser接头与igg fc区融合，所述igg fc区包括选自以下的氨基酸序列：seq idno:39、seq id no:40、seq id no:41、seq id no:42、seq id no:43、seq id no:44、seq idno:45、seq id no:46、seq id no:47、或seq id no:1003。
237、在一实施例中，il-2药剂包括选自以下的氨基酸序列：seq id no:56、seq id no:57、seq id no:58、seq id no:59、seq id no:60、seq id no:61、seq id no:62、seq idno:63、seq id no:64、seq id no:65、seq id no:66、seq id no:67、seq id no:68、seq idno:69、seq id no:70、seq id no:71、seq id no:72、seq id no:73、seq id no:74、seq idno:75、seq id no:76、seq id no:77、seq id no:78、seq id no:79、seq id no:80、seq idno:81、seq id no:82、seq id no:83、seq id no:84、seq id no:85、seq id no:86、seq idno:87、seq id no:88、seq id no:89、seq id no:90、seq id no:91、seq id no:92、seq idno:93、seq id no:1004、seq id no:1005、seq id no:1006、seq id no:1007、seq id no:1008、或seq id no:1009或其功能片段。
238、在一实施例中，il-2药剂包括选自以下的氨基酸序列：seq id no:94、seq id no:95、seq id no:96、seq id no:97、seq id no:98、seq id no:99、seq id no:100、seq idno:101、seq id no:102、seq id no:103、seq id no:104、seq id no:105、seq id no:106、seq id no:107、seq id no:108、seq id no:109、seq id no:110、seq id no:111、seq idno:112、seq id no:113、seq id no:114、seq id no:115、seq id no:116、seq id no:117、seq id no:118、seq id no:119、seq id no:120、seq id no:121、seq id no:122、seq idno:123、seq id no:124、seq id no:125、seq id no:126、seq id no:127、seq id no:128、seq id no:129、seq id no:130、或seq id no:131或其功能片段。
239、在一实施例中，il-2药剂包括选自以下的氨基酸序列：seq id no:132、seq idno:133、seq id no:134、seq id no:135、seq id no:136、seq id no:137、seq id no:138、seq id no:139、seq id no:140、seq id no:141、seq id no:142、seq id no:143、seq idno:144、seq id no:145、seq id no:146、seq id no:147、seq id no:148、seq id no:149、seq id no:150、seq id no:151、seq id no:152、seq id no:153、seq id no:154、seq idno:155、seq id no:156、seq id no:157、seq idno:158、seq id no:159、seq id no:160、seq id no:161、seq id no:162、seq id no:163、seq id no:164、seq id no:165、seq idno:166、seq id no:167、seq id no:168、或seq id no:169或其功能片段。
240、在一实施例中，il-2药剂包括选自以下的氨基酸序列：seq id no:170、seq idno:171、seq id no:172、seq id no:173、seq id no:174、seq id no:175、seq id no:176、seq id no:177、seq id no:178、seq id no:179、seq id no:180、seq id no:181、seq idno:182、seq id no:183、seq id no:184、seq id no:185、seq id no:186、seq id no:187、seq id no:188、seq id no:189、seq id no:190、seq id no:191、seq id no:192、seq idno:193、seq id no:194、seq id no:195、seq id no:196、seq id no:197、seq id no:198、seq id no:199、seq id no:200、seq id no:201、seq id no:202、seq id no:203、seq idno:204、seq id no:205、seq id no:206、或seq id no:207或其功能片段。
241、在一实施例中，il-2药剂包括选自以下的氨基酸序列：seq id no:208、seq idno:209、seq id no:210、seq id no:211、seq id no:212、seq id no:213、seq id no:214、seq id no:215、seq id no:216、seq id no:217、seq id no:218、seq id no:219、seq idno:220、seq id no:221、seq id no:222、seq id no:223、seq id no:224、seq id no:225、seq id no:226、seq id no:227、seq id no:228、seq id no:229、seq id no:230、seq idno:231、seq id no:232、seq id no:233、seq id no:234、seq id no:235、seq id no:236、seq id no:237、seq id no:238、seq id no:239、seq id no:240、seq id no:241、seq idno:242、seq id no:243、seq id no:244、或seq id no:245或其功能片段。
242、在一实施例中，il-2药剂包括选自以下的氨基酸序列：seq id no:246、seq idno:247、seq id no:248、seq id no:249、seq id no:250、seq id no:251、seq id no:252、seq id no:253、seq id no:254、seq id no:255、seq id no:256、seq id no:257、seq idno:258、seq id no:259、seq id no:260、seq id no:261、seq id no:262、seq id no:263、seq id no:264、seq id no:265、seq id no:266、seq id no:267、seq id no:268、seq idno:269、seq id no:270、seq id no:271、seq id no:272、seq id no:273、seq id no:274、seq id no:275、seq id no:276、seq id no:277、seq id no:278、seq id no:279、seq idno:280、seq id no:281、seq id no:282、或seq id no:283或其功能片段。
243、在一实施例中，il-2药剂包括选自以下的氨基酸序列：seq id no:284、seq idno:285、seq id no:286、seq id no:287、seq id no:288、seq id no:289、seq id no:290、seq id no:291、seq id no:292、seq id no:293、seq id no:294、seq id no:295、seq idno:296、seq id no:297、seq id no:298、seq id no:299、seq id no:300、seq id no:301、seq id no:302、seq id no:303、seq id no:304、seq id no:305、seq id no:306、seq idno:307、seq id no:308、seq id no:309、seq id no:310、seq id no:311、seq id no:312、seq id no:313、seq id no:314、seq id no:315、seq id no:316、seq id no:317、seq idno:318、seq id no:319、seq id no:320、或seq id no:321或其功能片段。
244、在一实施例中，il-2药剂包括选自以下的氨基酸序列：seq id no:322、seq idno:323、seq id no:324、seq id no:325、seq id no:326、seq id no:327、seq id no:328、seq id no:329、seq id no:330、seq id no:331、seq id no:332、seq id no:333、seq idno:334、seq id no:335、seq id no:336、seq id no:337、seq id no:338、seq id no:339、seq id no:340、seq id no:341、seq id no:342、seq id no:343、seq id no:344、seq idno:345、seq id no:346、seq id no:347、seq id no:348、seq id no:349、seq id no:350、seq id no:351、seq id no:352、seq id no:353、seq id no:354、seq id no:355、seq idno:356、seq id no:357、seq id no:358、或seq id no:359或其功能片段。
245、在一实施例中，il-2药剂包括seq id no:59的氨基酸序列或其功能片段。在一实施例中，il-2药剂包括seq id no:97的氨基酸序列或其功能片段。在一实施例中，il-2药剂包括seq id no:135的氨基酸序列或其功能片段。在一实施例中，il-2药剂包括seq id no:173的氨基酸序列或其功能片段。在一实施例中，il-2药剂包括seq id no:211的氨基酸序列或其功能片段。在一实施例中，il-2药剂包括seq id no:249的氨基酸序列或其功能片段。在一实施例中，il-2药剂包括seq id no:287的氨基酸序列或其功能片段。在一实施例中，il-2药剂包括seq id no:325的氨基酸序列或其功能片段。在一实施例中，il-2药剂包括seq id no:66的氨基酸序列或其功能片段。在一实施例中，il-2药剂包括seq id no:104的氨基酸序列或其功能片段。在一实施例中，il-2药剂包括seq id no:142的氨基酸序列或其功能片段。在一实施例中，il-2药剂包括seq id no:180的氨基酸序列或其功能片段。在一实施例中，il-2药剂包括seq id no:218的氨基酸序列或其功能片段。在一实施例中，il-2药剂包括seq id no:256的氨基酸序列或其功能片段。在一实施例中，il-2药剂包括seqid no:294的氨基酸序列或其功能片段。在一实施例中，il-2药剂包括seq id no:332的氨基酸序列或其功能片段。在一实施例中，il-2药剂包括seq id no:60的氨基酸序列或其功能片段。在一实施例中，il-2药剂包括seq id no:98的氨基酸序列或其功能片段。在一实施例中，il-2药剂包括seq id no:136的氨基酸序列或其功能片段。在一实施例中，il-2药剂包括seq id no:174的氨基酸序列或其功能片段。在一实施例中，il-2药剂包括seq id no:212的氨基酸序列或其功能片段。在一实施例中，il-2药剂包括seq id no:250的氨基酸序列或其功能片段。在一实施例中，il-2药剂包括seq id no:288的氨基酸序列或其功能片段。在一实施例中，il-2药剂包括seq id no:326的氨基酸序列或其功能片段。在一实施例中，il-2药剂包括seq id no:69的氨基酸序列或其功能片段。在一实施例中，il-2药剂包括seq id no:107的氨基酸序列或其功能片段。在一实施例中，il-2药剂包括seq id no:145的氨基酸序列或其功能片段。在一实施例中，il-2药剂包括seq id no:183的氨基酸序列或其功能片段。在一实施例中，il-2药剂包括seq id no:221的氨基酸序列或其功能片段。在一实施例中，il-2药剂包括seq id no:259的氨基酸序列或其功能片段。在一实施例中，il-2药剂包括seq id no:297的氨基酸序列或其功能片段。在一实施例中，il-2药剂包括seqid no:335的氨基酸序列或其功能片段。在一实施例中，il-2药剂包括seq id no:1004的氨基酸序列或其功能片段。在一实施例中，il-2药剂包括seq id no:1005的氨基酸序列或其功能片段。在一实施例中，il-2药剂包括seq id no:1006的氨基酸序列或其功能片段。在一实施例中，il-2药剂包括seq id no:1007的氨基酸序列或其功能片段。在一实施例中，il-2药剂包括seq id no:1008的氨基酸序列或其功能片段。在一实施例中，il-2药剂包括seqid no:1009的氨基酸序列或其功能片段。
246、各种技术效果与包括seq id no:1008的氨基酸序列的il-2药剂相关。在不希望受理论束缚的情况下，据信在一实施例中，包括seq id no:1008的氨基酸序列的il-2药剂可以具有以下有利特性中的至少一种或多种特性：(i)对cd122和/或cd132的结合亲和力降低，与其它t细胞类型相比，这增加了il-2药剂对调节性t细胞(treg)的效力和选择性；(ii)显著稳定，例如由于稳定v69a和q74p突变的存在；(iii)对cd25的结合能力和/或结合亲和力下降或降低(或具有微不足道的影响)，这提高了il-2药剂的寿命；(iv)不会在体外和/或体内显著促进t效应子细胞和/或自然杀伤(nk)细胞的扩增、激活、存活和/或增殖；和/或(v)减少了不正确的二硫键配对并提高了稳定性，例如由于c125s突变的存在。在一实施例中，与包括其它h16突变的il-2药剂相比，包括h16l突变的il-2药剂对cd122和/或cd132的结合亲和力降低和/或对treg的效力和选择性相对于其它t细胞类型增加。这些特性使得包括seq id no:1008的氨基酸序列的il-2变体、il-2药剂特别适于治疗由异常免疫应答引起的如自身免疫性疾病等病症和病状。
247、因此，在一实施例中，包括seq id no:1008的氨基酸序列的il-2药剂相对于野生型il-2或不包括氨基酸取代的参考il-2变体尤其具有以下特性中的一种或多种(例如2、3、4、5、6、7种或全部)：(i)体外或体内的稳定性增强或增加；(ii)体外和/或体内对人cd122的结合能力和/或结合亲和力下降或降低；(iii)体外和/或体内对人cd132的结合能力和/或结合亲和力下降或降低；(iv)il-2变体在体外和/或体内对由人cd122和人cd132构成的异二聚体il-2受体(即，人cd122/cd132异二聚体)的亲和力下降或降低；(v)体外和/或体内对人cd25的结合能力和/或结合亲和力下降或降低(例如，适度下降或降低)；(vi)与调节性t细胞(例如foxp3+t细胞)选择性结合；(vii)体外或体内选择性激活t调节性细胞(treg)中的il-2信号通路；或(viii)用于诱导或促进treg扩增、活性、存活和/或增殖的能力增强或增加。
248、在一实施例中，il-2药剂形成二聚体(例如同二聚体或异二聚体)。在一实施例中，il-2药剂包括il-2融合蛋白。在一实施例中，il-2药剂包括il-2药剂/抗il-2抗体复合物。在一实施例中，il-2药剂包括缀合物。
249、在一实施例中，il-2药剂在本文所描述的组合物(例如药物组合物)中调配。在一实施例中，il-2药剂由本文所描述的核酸编码。在一实施例中，il-2药剂由存在于本文所描述的载体(例如表达载体)中的核酸编码。在一实施例中，il-2药剂由存在于细胞(例如分离细胞)中的核酸编码。在一实施例中，il-2药剂通过本文所描述的方法产生，所述方法例如包括在允许表达il-2药剂的条件下培养(例如维持)包括编码本文所描述的il-2药剂的核酸的细胞或包括编码本文所描述的il-2药剂的核酸的载体(例如表达载体)。在一实施例中，分离或纯化il-2药剂。在一实施例中，il-2药剂存在于本文所描述的试剂盒中。在一实施例中，il-2药剂存在于本文所描述的容器中。
1.一种用于治疗人类受试者的自身免疫性疾病的方法的il-2药剂，其中所述il-2药剂以0.5μg/kg至300μg/kg的剂量施用，其中所述il-2药剂是il-2变体或包括所述il-2变体的il-2融合蛋白，并且其中所述il-2变体包括：
2.一种治疗自身免疫性疾病的方法，所述方法包括以0.5μg/kg至300μg/kg的剂量向有需要的人类受试者施用il-2药剂，其中所述il-2药剂是il-2变体或包括所述il-2变体的il-2融合蛋白，并且其中所述il-2变体包括：
3.根据权利要求1所述的供使用的il-2药剂或根据权利要求2所述的方法，其中所述il-2药剂以0.5μg/kg至100μg/kg、1μg/kg至50μg/kg、2μg/kg至40μg/kg、3μg/kg至30μg/kg、4μg/kg至25μg/kg、5μg/kg至20μg/kg、10μg/kg至15μg/kg、1μg/kg至40μg/kg、1μg/kg至30μg/kg、1μg/kg至20μg/kg、1μg/kg至10μg/kg、1μg/kg至5μg/kg、5μg/kg至50μg/kg、10μg/kg至50μg/kg、20μg/kg至50μg/kg、30μg/kg至50μg/kg、40μg/kg至50μg/kg、0.5μg/kg至2μg/kg、3μg/kg至5μg/kg、6μg/kg至10μg/kg、12μg/kg至20μg/kg或25μg/kg至40μg/kg的剂量施用。
4.根据权利要求1或3所述的供使用的il-2药剂或根据权利要求2或3所述的方法，其中所述il-2药剂以1μg/kg、4μg/kg、8μg/kg、16μg/kg或32μg/kg的剂量施用。
5.根据权利要求1或3至4中任一项所述的供使用的il-2药剂或根据权利要求2至4中任一项所述的方法，其中所述il-2药剂每周一次、每两周一次或每四周一次施用。
6.根据权利要求1或3至5中任一项所述的供使用的il-2药剂或根据权利要求2至5中任一项所述的方法，其中所述il-2药剂是皮下施用的。
7.根据权利要求1或3至6中任一项所述的供使用的il-2药剂或根据权利要求2至6中任一项所述的方法，其中所述自身免疫性病症是全身性红斑狼疮(sle)、自身免疫性肝炎(aih)、免疫介导的局灶性节段性肾小球硬化(fsgs)或斑秃(aa)。
8.根据权利要求1或3至7中任一项所述的供使用的il-2药剂或方法或根据权利要求2或5至7中任一项所述的方法，其中所述il-2变体进一步包括氨基酸取代t3a。
9.根据权利要求1或3至8中任一项所述的供使用的il-2药剂或根据权利要求2至8中任一项所述的方法，其中所述il-2变体包括seq id no:4、5、11、1000、1001或1002中的任何一个的氨基酸序列、与其至少95％相同或与其相差不超过1、2、3、4或5个氨基酸的氨基酸序列或其功能片段。
10.根据权利要求1或3至9中任一项所述的供使用的il-2药剂或根据权利要求2至9中任一项所述的方法，其中所述il-2药剂包括包含所述il-2变体的il-2融合蛋白。
11.根据权利要求10所述的供使用的il-2药剂或方法，其中所述il-2融合蛋白进一步包括fc区。
12.根据权利要求11所述的供使用的il-2药剂或方法，其中所述fc区包括igg1同种异型m3的fc区，所述fc区包括根据eu编号的n297g取代。
13.根据权利要求11或12所述的供使用的il-2药剂或方法，其中所述fc区包括seq idno:1003的氨基酸序列或与其至少95％相同或与其相差不超过1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个氨基酸的氨基酸序列或其功能片段。
14.根据权利要求11至13中任一项所述的供使用的il-2药剂或方法，其中所述fc区与所述il-2变体的c末端融合。
15.根据权利要求11至14中任一项所述的供使用的il-2药剂或方法，其中所述il-2融合蛋白进一步包括接头。
16.根据权利要求15所述的供使用的il-2药剂或方法，其中所述接头包括(g4s)4(seqid no:48)。
17.根据权利要求11至16中任一项所述的供使用的il-2药剂或方法，其中所述融合蛋白包括seq id no:1004、1005、1006、1007、1008或1009中的任何一个的氨基酸序列、与其至少95％相同或与其相差不超过1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个氨基酸的氨基酸序列或其功能片段。
18.根据权利要求11至17中任一项所述的供使用的il-2药剂或方法，其中所述融合蛋白形成二聚体。
