本发明属于提取，尤其涉及一种松茸多肽及其制备方法和应用。
背景技术：
1、随着人们消费水平的提高，“健康衰老”逐渐发展成为新的发展市场，消费抗衰老产品的人群逐渐扩大且年轻化。衰老，是一个复杂、多阶段、渐进的过程，发生在生命的整个过程。从外在看，衰老表现为皮肤衰老；从内在看，衰老表现为细胞衰老、机体代谢和系统运行功能障碍等。科学家们从不同的维度出发，深度剖析人体衰老进程及影响因素，揭秘衰老机制。其中，氧化应激和炎症反应是机体衰老的内源性因素之一。过度的氧化应激反应将导致机体产生大量的自由基，抗氧化酶失活，自由基不能被及时清除，将会引起严重细胞凋亡和组织损伤，从而加速衰老。此外，相关研究表明，炎症反应与衰老密不可分，从细胞层面上看，免疫细胞是衰老细胞的关键调节因子，肩负着清除衰老细胞的重任，当免疫细胞统衰老后，无法清除衰老细胞和促炎因子，炎症水平会相应升高；而当低水平的慢性炎症逐渐累积，会进一步加剧衰老，形成恶性循环。因此，要从根源上延缓机体衰老，达到健康衰老的目的，可从抗氧化和抗炎两大途径进行调节。
2、近年来，生物活性肽因具备良好的抗氧化、抗炎、抗糖和抗癌等活性受到了广泛的研究与应用。其中，食用菌因有着较高的食用和药用价值，含有丰富的蛋白质，可作为生物活性肽的重要来源。相关研究表明，食用菌多肽如香菇多肽、双孢菇多肽、云芝糖肽等具备良好的抗氧化、抗菌、降血压、抗肿瘤及免疫调节等生理活性。松茸，一种纯天然珍贵稀有的药食两用真菌，含有蛋白、多肽、多糖、多酚和维生素等功效活性组分，具有抗氧化、抗炎、免疫调节和抗肿瘤等功效。然而，近年来松茸的功效组分提取研究主要集中在多糖和多酚等组分，鲜少有关于松茸多肽提取及相关生理活性的研究。
3、传统的生物活性肽提取方法多为首先利用碱液对蛋白进行提取纯化，随后进行酶解获得小分子的生物活性肽。但传统的碱液提取工艺，毒性大，不仅对蛋白及多肽的物化特性均会造成一定的破坏，使其功效活性下降，更是不具备环境可持续性，在应用上具有较大的局限性。
技术实现思路
1、本发明的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供一种产率高且具有优异的抗氧化、抗炎和抗衰老活性的松茸多肽及其制备方法和应用。
2、为实现上述目的，在本发明的第一方面，本发明提供了一种松茸多肽的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
3、(1)将松茸粉加入至天然低共熔(nades)溶剂中加热提取，提取结束后离心，收集上清液；
4、(2)往上清液中加入蛋白酶进行酶解，随后灭酶、离心、超滤，得松茸多肽；
5、所述天然低共熔溶剂的原料包括氢键供体、氢键受体和水，所述氢键供体包括丙二醇、丁二醇、乙二醇中的至少一种，所述氢键受体包括苦参碱。
6、本发明通过先采用nades溶剂进行加热提取，能够有效的破壁，增加松茸内有效成分的溶出，随后往加热提取后的滤液中加入蛋白酶进行酶解，从而能够得到收率高且具有抗氧化、抗炎、抗衰老活性优异的松茸多肽。
7、作为本发明所述制备方法的优选实施方式，所述松茸粉的制备方法为：取松茸置于45-55℃下干燥12-14h，粉碎并过5-25目筛网，即得松茸粉。
8、作为本发明所述制备方法的优选实施方式，所述天然低共熔溶剂中，氢键受体和氢键供体的摩尔比为1：(0.1-5)。
9、优选地，所述天然低共熔溶剂中，氢键受体和氢键供体的摩尔比为1：(1-5)。
10、作为本发明所述制备方法的优选实施方式，所述天然低共熔溶剂中，水的质量百分数为40-95％。
11、作为本发明所述制备方法的优选实施方式，所述天然低共熔溶剂的制备方法为：将氢键供体和氢键受体混合后加热至30-60℃并搅拌3-6h，随后加入水搅拌均匀，得天然低共熔溶剂。
12、本发明提供的nades溶剂为绿色天然环境优化的溶剂，使用该溶剂作为提取溶剂时提取的条件温和，且具有良好的生物安全性；进一步地，当选择nades溶剂中原料的氢键供体和氢键受体的摩尔比在本发明给出的范围内以及采用本发明提供的制备方法制备而成时，能够使得到的nades溶剂应用于后续提取时，具有更优的提取率。
13、作为本发明所述制备方法的优选实施方式，所述步骤(1)中，加热提取的温度为30-60℃，加热提取的时间为1-3h。
14、作为本发明所述制备方法的优选实施方式，所述步骤(1)中，松茸粉和天然低共熔溶剂的质量体积比为1：(10-60)。
15、本发明研究发现，加热提取的温度以及提取过程中的固液比也会对提取率以及提取得到的物质的综合性能产生影响，当进一步选择提取的温度、时间以及提取的固液比在上述范围内时，得到的提取率更高且产品的综合性能更优。
16、作为本发明所述制备方法的优选实施方式，所述步骤(1)中，离心的转速为8000-12000r/min，离心的时间为8-12min。
17、作为本发明所述制备方法的优选实施方式，所述蛋白酶包括碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶中的至少一种。
18、优选地，所述蛋白酶为碱性蛋白酶。
19、本发明研究发现，当选择的蛋白酶为上述类型，尤其是碱性蛋白酶时，得到的松茸多肽的产率更高。
20、作为本发明所述制备方法的优选实施方式，所述步骤(2)中，酶解温度为35-65℃，酶解时间为1-3h。
21、作为本发明所述制备方法的优选实施方式，所述蛋白酶和松茸粉的质量比为1：(4-20)。
22、本发明研究发现，酶解过程中的参数也会影响到酶解效率以及制备得到的松茸多肽的抗氧化和抗炎活性，当进一步选择酶解的参数在上述范围内时，得到的产品的综合性能更优。
23、作为本发明所述制备方法的优选实施方式，所述步骤(2)中，酶解前还包括使用0.1mol/l的盐酸调节酶解体系至对应蛋白酶的适宜ph值范围内的步骤。
24、作为本发明所述制备方法的优选实施方式，所述步骤(2)中，灭酶的温度为90-100℃，灭酶的时间为8-12min。
25、作为本发明所述制备方法的优选实施方式，所述步骤(2)中，超滤使用的超滤膜的分子量为10kda。
26、在本发明的第二方面，本发明提供了一种松茸多肽，所述松茸多肽采用本发明所述制备方法制备而成。
27、在本发明的第三方面，本发明提供了所述松茸多肽在制备抗氧化、抗炎、抗衰老产品中的应用。
28、作为本发明所述应用的优选实施方式，所述产品包括食品、化妆品。
29、与现有技术相比，本发明的有益效果为：
30、本发明通过先采用nades溶剂进行加热提取，其能够有效的破壁，增加松茸内有效成分的溶出，随后往加热提取后的滤液中加入蛋白酶进行酶解，从而能够得到收率高且抗氧化活性、抗炎活性、抗衰老活性优异的松茸多肽。得到的松茸多肽能够应用于抗氧化、抗炎或抗衰老产品的制备上；并且，本发明提供的松茸多肽的制备方法操作简便，有利于实际生产。
1.一种松茸多肽的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述天然低共熔溶剂中，氢键受体和氢键供体的摩尔比为1：(0.1-5)；
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述天然低共熔溶剂的制备方法为：将氢键供体和氢键受体混合后加热至30-60℃并搅拌3-6h，随后加入水搅拌均匀，得天然低共熔溶剂。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中，加热提取的温度为30-60℃，加热提取的时间为1-3h；
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述蛋白酶包括碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶中的至少一种。
6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中，酶解温度为35-65℃，酶解时间为1-3h；
7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中，超滤使用的超滤膜的分子量为10kda。
8.一种松茸多肽，其特征在于，所述松茸多肽采用如权利要求1-7任一项所述的制备方法制备而成。
9.如权利要求8所述的松茸多肽在制备抗氧化、抗炎或抗衰老产品中的应用。
