本发明涉及一种压力波动结合酶联提取制备龙胆提取物的方法。
背景技术：
0、技术背景
1、中药龙胆为龙胆科植物龙胆gentiana scabra bge、条叶龙胆 g.manshuricakitag.、三花龙胆 g. triflora pall.或滇龙胆 g.rigescens franch.的干燥根茎及根。龙胆的药理作用较为广泛，在中医学上，龙胆具有清热燥湿、泻肝胆火的功效，用于温热黄疸、阴肿阴痒、带下、湿疹瘙痒、目赤、耳聋、胁痛、口苦、惊风抽搐等症治疗。在现代医学上，龙胆草有保肝护肝、利胆、抗炎、抗肿瘤、健胃、降压等作用。在护肤方面，主要作用包括抗炎、抗菌、抗过敏、抗氧化、抗衰老、保湿修复等。龙胆中的化学成分主要有环烯醚萜类及其苷类、黄酮类、三萜类、生物碱类、香豆素类、甾体类、挥发油及糖类等。龙胆的主要生物活性（有效）成分单体有龙胆苦苷（环烯醚萜类，占原草的2~9%）、马钱苷酸、龙胆碱、獐牙菜苦苷等。而且，在《已使用化妆品原料名称目录》中，已收录的有黄龙胆（gentiana lutea）、滇龙胆（gentiana rigescens）、龙胆（gentiana scabra）、三花龙胆（gentiana triflora）、条叶龙胆（gentiana manshurica）相关提取物，所以对于龙胆提取物在化妆品中的应用受法规允许。
2、植物提取物类成分在化妆品的应用会受其气味、颜色、稳定性等因素的影响，存在无法大量使用的情况，故对植物提取物的工艺要求比较严格，如需要不断分离纯化，以去除大分子等易沉淀组分，脱除易变色酚类组分和有刺激性气味组分，以便将植物提取物更好的适用于化妆品使用。目前，对于龙胆中的龙胆苦苷、獐牙菜苦苷等微量活性成分的提取、分离纯化及其工业化生产，此过程中存在目标活性成分的损失、生产收率降低、生产周期长等系列问题。此外，柱层分离填料、萃取和系统溶剂的引入很大程度上增加了生产成本。同时，萃取和柱层分离过中使用乙醇、乙酸乙酯、石油醚等易燃易爆溶剂，对生产车间和设备的防爆要求极其严格，依旧存在安全问题。
3、例如公告号为cn 116854756 a的专利一种龙胆草提取物的制备方法，使用30~50%乙醇水超声提取，通过过滤、大孔树脂吸附和乙醇梯度洗脱得到适用于化妆品的龙胆提取物，所涉及的超声提取设备及不同浓度乙醇配制过程复杂，不便进行规模化工业生产。公告号为cn116211758 a的专利一种龙胆提取物及其制备方法和应用，是通过碱水浸提，再依次经酶解和酵母菌、乳酸菌发酵得到龙胆提取物。该方法存在三个弊端，一是碱性环境就会造成龙胆苦苷的部分分解。二是先提取，再使用蛋白酶和果胶酶酶解提取液，并不能增加提取率。三是经碱水提取、酶解前加酸中和，会使龙胆提取物中的盐含量增加。
技术实现思路
1、本发明提供一种压力波动结合酶联提取制备龙胆提取物的方法，该方法特别适用于化妆品用的多组分、多功效、分子量小、稳定性佳的龙胆提取物的生产。
2、本发明所采用的技术方案为：
3、一种压力波动结合酶联提取制备龙胆提取物的方法，其步骤如下：
4、（1）、原药材清洗除去泥土灰尘类杂质，无需粉碎直接投料提取；提取溶剂为水，加水量是原药材重量的5~15倍，同时加入蛋白酶和淀粉酶；
5、（2）、投料完毕进行升温提取，提取温度40~55℃；在该温度范围内搅拌或液料循环1~3h，进行充分酶解；
6、（3）、提取过程中提取设备连接真空设备，周期化间歇式启用真空泵，实现提取过程中绝对压力的波动，使得提取罐内压力在7~50kpa范围内波动，使物料处于间歇式沸腾状态；
7、（4）、压力循环若干周次后，过滤放料，得滤液；
8、（5）、滤液中加入原药材重量的1.0~5.0%活性炭，加热回流脱色处理30min，降温至20℃以下过滤除去活性炭；
9、（6）、再经精密过滤器过滤得到龙胆提取液。
10、进一步的：
11、步骤（6）得到的龙胆提取液中直接配入适量防腐剂、丙二醇或丁二醇后做为一种化妆品原料，或者浓缩喷雾干燥得到单一的化妆品用干粉原料。
12、所述蛋白酶选用中性蛋白酶，淀粉酶选用中温淀粉酶，蛋白酶的加入量为原药材重量的0.1~1.0%，淀粉酶加入量为原药材重量的0.2~2.0%
13、步骤（3）中压力循环4~10周次。
14、本发明在提取龙胆过程中，向提取罐内加入中性蛋白酶和中温淀粉，通过酶解提取提高提取收率，同时，通过蛋白酶和淀粉酶对大分子蛋白质和淀粉质的酶解，获得澄清度和稳定性更高的龙胆提取液；提取温度为中性蛋白酶和中温淀粉酶的活性温度区间40-55℃，实现低温提取、减少有效成分损失和降低能耗等目的；在提取过程中通过间歇式抽真空，使提取罐内发生7kpa~50kpa范围内的压力变化，达到提取液间歇式沸腾状态的目的，以增加提取率的同时缩短提取时间和降低能耗。综上，本发明采用的方法具有提高提取收率、缩短提取时间、降低提取能耗和提高产品稳定性等优势，且本发明获得的龙胆提取物无需复杂处理，可满足在化妆品配伍中的稳定性需求。此外，本发明在增加龙胆苦苷和獐牙菜苦苷提取率的同时，也提升了总糖、总氨基酸的提取率，且总糖、总氨基酸以分子量较为适宜的寡肽、寡肽形式居多，适用于护肤品市场对具有舒缓和调理、屏障修复、抗氧化等多功效原料的需求，具有强大的市场竞争优势和潜力。本发明同样适用于其他植物中多组分的提取。
1.一种压力波动结合酶联提取制备龙胆提取物的方法，其特征在于：其步骤如下：
2.根据权利要求1所述的一种压力波动结合酶联提取制备龙胆提取物的方法，其特征在于：步骤（6）得到的龙胆提取液中直接配入适量防腐剂、丙二醇或丁二醇后做为一种化妆品原料，或者浓缩喷雾干燥得到单一的化妆品用干粉原料。
3.根据权利要求1或2所述的一种压力波动结合酶联提取制备龙胆提取物的方法，其特征在于：所述蛋白酶选用中性蛋白酶，淀粉酶选用中温淀粉酶，蛋白酶的加入量为原药材重量的0.1~1.0%，淀粉酶加入量为原药材重量的0.2~2.0%。
4.根据权利要求1或2所述的一种压力波动结合酶联提取制备龙胆提取物的方法，其特征在于：步骤（3）中压力循环4~10周次。
