本发明涉及生物检测，尤其涉及一对脂联素抗体及基于该抗体的胶乳增强免疫比浊法测定脂联素试剂盒。
背景技术：
1、脂联素(adiponectin/adpn)，脂肪细胞分泌的一种内源性生物活性多肽或蛋白质，是一种胰岛素增敏激素(an insulin-sensitizing hormone)。脂联素检测主要用于预测糖尿病发病风险，针对高危人群进行糖尿病筛查，有助于早期发现糖尿病，降低发病率和并发症。
2、大量研究表明，脂联素浓度与胰岛素抵抗之间存在反比关系，脂联素可以促进胰岛素水平升高，反映胰岛素敏感性。所以，脂联素可作为糖尿病的风险预测指标。通过脂联素可筛查出血糖尚且正常，但机体生理代谢已经出现异常的糖尿病高风险人群。而且，脂联素在血液中含量稳定，检测不受进食与否、情绪波动、睡眠缺乏、饮食习惯改变等因素影响。
3、除血糖代谢外，脂联素也参与脂质代谢，诱导循环脂质水平降低，在体内发挥降脂作用。肥胖被认为是多种心血管疾病和恶性肿瘤的危险因素，脂联素能抑制动脉脂质斑块形成，并阻止癌细胞生长增殖。因此，脂联素检测，也可用于评估心血管疾病的发病风险，早期发现癌症等。
4、然而，目前市面上的脂联素测定方法主要有酶联免疫法和化学发光法。其中，酶联免疫法成本低，仪器设备简单，但检测结果稳定性和重复性较差、检测耗时较长。化学发光法的仪器使用成本较高，且多为封闭通道，不适用于二级以下医院的普及。
5、胶乳增强免疫比浊法(petia)，是利用抗原抗体的特异性结合，在纳米尺度的胶乳微球的表面交联或物理吸附抗体，试剂反应液中交联有抗体的微球与样本中的抗原结合后，在短时间内会迅速聚集在一起，形成浊度，从而改变反应液的散光性能或透光性能，在线性范围内可以反映被测抗原的浓度。胶乳增强免疫比浊法的优点是操作简便，几分钟就能获得结果。此外，全自动免疫比浊法操作步骤的简化也相应地避免了许多人为操作因素和试剂、环境等外界因素的干扰，稳定性和重复性都较好，能较真实地反映被测物质的含量，且成本不高。
6、据此，急需研发出一种基于胶乳增强免疫比浊法的脂联素测定新方法。
技术实现思路
1、本发明所要解决的技术问题在于提供一对脂联素抗体及基于该抗体的胶乳增强免疫比浊法测定脂联素试剂盒，采用该脂联素抗体并搭配相应胶乳增强免疫比浊法试剂盒进行adpn的测定，不仅操作简便、检测速度快，还具有稳定性、重复性好，灵敏度、准确性高的优点。
2、本发明采用以下技术方案解决上述技术问题：
3、一对脂联素抗体，包括adpn抗体i和adpn抗体ii；所述adpn抗体i包括轻链和重链，对应氨基酸序列分别如seq id no.1、seq id no.2所示；所述adpn抗体ii包括轻链和重链，对应氨基酸序列分别如seq id no.3、seq id no.4所示。
4、作为本发明的优选方式之一，所述adpn抗体i和adpn抗体ii能够结合血清中的脂联素，且在结合后，增加所述脂联素活性。
5、一种胶乳增强免疫比浊法测定脂联素试剂盒，包括上述脂联素抗体，即adpn抗体i和adpn抗体ii。
6、作为本发明的优选方式之一，具体包括r1试剂和r2试剂；
7、所述r1试剂包括：tris缓冲液10～100mmol/l，氯化钠10～50g/l，proclin3000.5～1.5g/l，吐温-20 1～5g/l，peg6000 10～30g/l，ph 7.0～8.0；
8、所述r2试剂包括：磷酸盐缓冲液5～20mmol/l，丙三醇250～350ml/l，嵌段式聚醚f68 0.5～1.5g/l，surfynol 465 0.5～1.5g/l，proclin300 0.5～1.5g/l，adpn混合抗体30～100mg/l，150～400nm乳胶微球颗粒0.5％～1.5％，ph 7.0～8.0；
9、其中，所述adpn混合抗体为adpn抗体i和adpn抗体ii的混合抗体。
10、作为本发明的优选方式之一，所述r1试剂具体包括：tris缓冲液50mmol/l，氯化钠25g/l，proclin300 1g/l，吐温-20 1.5g/l，peg6000 20g/l，ph 7.4。
11、作为本发明的优选方式之一，所述r2试剂具体包括：磷酸盐缓冲液10mmol/l，丙三醇300ml/l，嵌段式聚醚f68 1g/l，surfynol 465 1g/l，proclin3001g/l，adpn混合抗体60mg/l，250nm乳胶微球颗粒0.5％，ph 7.4。
12、作为本发明的优选方式之一，所述adpn混合抗体中，adpn抗体i和adpn抗体ii的质量比为1：1。
13、作为本发明的优选方式之一，所述r2试剂中，adpn混合抗体与胶乳微球颗粒之间偶联，形成包被adpn抗体的乳颗粒。
14、作为本发明的优选方式之一，所述包被adpn抗体的乳颗粒制备方法如下：
15、①将胶乳微球加入到偶联缓冲液中；接着，置于恒温水浴锅中预热；
16、②加入活化剂edc溶液和nhs溶液，混匀，并置于恒温搅拌器中反应；
17、③加入adpn抗体i和adpn抗体ii，混匀，并置于恒温搅拌器中反应；
18、④加入封闭液，混匀，并置于恒温搅拌器中反应；
19、⑤置于离心机离心；
20、⑥加入保存缓冲液，置于冰水浴中，放置于超声波细胞破碎仪中，充分分散。
21、作为本发明的优选方式之一，还包括校准品；所述校准品包括：pbs缓冲液5～20mmol/l，氯化钠5～10g/l，bsa 5～15g/l，叠氮钠0.5～1.5g/l，adpn抗原0～40mg/l，ph7.0～8.0。
22、本发明相比现有技术的优点在于：
23、(1)本发明设计的一对脂联素抗体(adpn抗体i、adpn抗体ii)，可以与血清中的adpn相互结合，结合后能够增加adpn的活性，进而在adpn胶乳免疫比浊法检测中显著增加试剂的灵敏度、准确度、稳定性及重复性；
24、(2)本发明试剂盒基于胶乳增强比浊法，抗原、抗体反应后，直接测定反应液的吸光度值，几分钟就能获得结果，操作简单，省时省力；同时，自动化程度高、适用性强、测试方便、成本低，可广泛应用于临床检测；
25、(3)本发明在试剂盒中增加丙三醇、嵌段式聚醚f68与surfynol 465作为稳定剂，进一步提高检测的稳定性。
1.一对脂联素抗体，其特征在于，包括adpn抗体i和adpn抗体ii；所述adpn抗体i包括轻链和重链，对应氨基酸序列分别如seq id no.1、seq id no.2所示；所述adpn抗体ii包括轻链和重链，对应氨基酸序列分别如seq id no.3、seq id no.4所示。
2.根据权利要求1所述的脂联素抗体，其特征在于，所述adpn抗体i和adpn抗体ii能够结合血清中的脂联素，且在结合后，增加所述脂联素活性。
3.一种胶乳增强免疫比浊法测定脂联素试剂盒，其特征在于，包括权利要求1或2所述的脂联素抗体。
4.根据权利要求3所述的胶乳增强免疫比浊法测定脂联素试剂盒，其特征在于，具体包括r1试剂和r2试剂；
5.根据权利要求4所述的胶乳增强免疫比浊法测定脂联素试剂盒，其特征在于，所述r1试剂具体包括：tris缓冲液50mmol/l，氯化钠25g/l，proclin3001g/l，吐温-20 1.5g/l，peg6000 20g/l，ph 7.4。
6.根据权利要求4所述的胶乳增强免疫比浊法测定脂联素试剂盒，其特征在于，所述r2试剂具体包括：磷酸盐缓冲液10mmol/l，丙三醇300ml/l，嵌段式聚醚f68 1g/l，surfynol465 1g/l，proclin300 1g/l，adpn混合抗体60mg/l，250nm乳胶微球颗粒0.5％，ph 7.4。
7.根据权利要求4所述的胶乳增强免疫比浊法测定脂联素试剂盒，其特征在于，所述adpn混合抗体中，adpn抗体i和adpn抗体ii的质量比为1：1。
8.根据权利要求4所述的胶乳增强免疫比浊法测定脂联素试剂盒，其特征在于，所述r2试剂中，adpn混合抗体与胶乳微球颗粒之间偶联，形成包被adpn抗体的乳颗粒。
9.根据权利要求8所述的胶乳增强免疫比浊法测定脂联素试剂盒，其特征在于，所述包被adpn抗体的乳颗粒制备方法如下：
10.根据权利要求4所述的胶乳增强免疫比浊法测定脂联素试剂盒，其特征在于，还包括校准品；所述校准品包括：pbs缓冲液5～20mmol/l，氯化钠5～10g/l，bsa 5～15g/l，叠氮钠0.5～1.5g/l，adpn抗原0～40mg/l，ph 7.0～8.0。
