本发明涉及生物医药，尤其涉及一种hc-cath/cpg odn颗粒-铝免疫佐剂及其应用。
背景技术：
1、免疫佐剂简称佐剂，指同抗原一起或预先注入机体内能增强机体对抗原的免疫应答能力或改变免疫应答类型的辅助物质。佐剂的免疫生物学作用包括增强免疫原性、增强抗体的滴度、改变抗体产生的类型、引起或增强迟发超敏反应等。理想的免疫佐剂应具有以下特点：对于特定的动物，要具有较小的副作用；佐剂作用要持久稳定；生产成本要尽量低；产生的免疫应答反应要适当，最好能够诱导机体细胞或体液免疫的强度要能达到保护要求等。研发高效低毒，能够提高机体免疫水平、细胞因子分泌和免疫记忆的新型免疫佐剂是目前研究的热点之一。
2、抗菌肽(antimicrobialpeptides，amps)是多细胞生物体内一类由基因编码的天然小分子多肽，具有直接杀伤微生物的活性。cpg odn是人工合成的含有非甲基化的胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸(cpg)的寡脱氧核苷酸(odn)，能够与树突状细胞、b细胞、单核细胞及巨噬细胞等免疫细胞内质网膜上的toll样受体9(tlr-9)结合，通过产生th1型免疫反应和分泌促炎因子来增强免疫应答的强度，在机体抵抗病原入侵和抗肿瘤等方面起到免疫增强剂的作用。铝佐剂是目前使用最广泛的佐剂，具有长达九十年的历史，安全性和经济性具有充分的保证。
3、但是，cpg带负电，半衰期短，并且特异性较低；铝佐剂在生理条件下(ph＝5-7)时带有净正电荷，这使其能够很好的吸附带有负电的抗原，但对带有正电的抗原(如sars/mers/2019-ncov等病毒的抗原)则效果不佳。
技术实现思路
1、为解决上述技术问题，本发明利用抗菌肽hc-cath与cpg odn在特定条件下形成纳米级或微米级粒子，再与铝佐剂联用形成复合物，该复合物的形成提高了cpg的特异性和稳定性，一方面提高了cpg的特异性和稳定性，另一方面拓宽了铝佐剂的适用范围，且相比抗菌肽hc-cath或铝佐剂单独使用效果有显著提升，作为新型免疫佐剂具有良好的前景。
2、本发明的第一个目的是提供一种免疫佐剂(hc-cath/cpg odn颗粒-铝)，所述免疫佐剂中含有微纳粒子和铝佐剂，
3、所述微纳粒子为纳米级或微米级，微纳粒子由seq id no.1所示抗菌肽与seq idno.2所示cpg odn以不低于5:1的质量比混合孵育得到。
4、进一步地，所述免疫佐剂中，微纳粒子与铝佐剂中铝的质量比为1：5-15。如1：5、1：6、1：7、1：8、1：9、1：10、1：11、1：12、1：13、1：14、1：15，包括但不限于以上比例，最优选为1:8-9。
5、进一步地，所述微纳粒子中，抗菌肽与cpg odn的质量比不低于5:1，如5:1、6:1、7:1、8:1、9:1、10:1、11:1、12:1、13:1、14:1、15:1、16:1、17:1、18:1、19:1、20:1、25:1、30:1、35:1、40:1、45:1、50:1等。当然，包括但不限于以上比例，最优选为5-20:1。
6、进一步地，所述混合孵育包括：按设定配比将抗菌肽与cpg odn于含有山梨醇的tris-hcl缓冲液中孵育。
7、进一步地，在30℃-40℃下孵育至少10min。
8、进一步地，所述tris-hcl缓冲液的ph优选为6.5-8.0，如6.8、7.0、7.1、7.2、7.3、7.5、7.7、7.9、8.0等，包括但不限于以上ph值。
9、进一步地，所述山梨醇在体系中的浓度为200-350mm，如210mm、220mm、230mm、240mm、250mm、260mm、270mm、280mm、290mm、300mm、310mm、320mm、330mm、340mm等，包括但不限于以上浓度，最优选为250-280mm。当体系中含有山梨醇时形成微纳粒子，可能与其能够维持多肽结构、减少聚集、增加溶解度有关。
10、本发明的第二个目的是提供一种免疫佐剂的制备方法，包括以下步骤：
11、s1、按配比将seq id no.1所示抗菌肽与seq id no.2所示cpg odn与含有山梨醇的tris-hcl缓冲液混合，孵育后得到含有微纳粒子的溶液；
12、s2、将s1中含有微纳粒子的溶液与铝佐剂混合，得到所述免疫佐剂。
13、进一步地，所述铝佐剂包括但不限于氢氧化铝胶体等。优选地，所述氢氧化铝中铝的含量为5-20mg/ml。
14、本发明的第三个目的是提供一种药物组合物，所述药物组合物中含有上述免疫佐剂。
15、进一步地，所述药物组合物中还含有抗原，如制备成疫苗。
16、本发明的第四个目的是提供上述免疫佐剂在制备预防或治疗肿瘤的药物中的应用。
17、进一步地，所述预防或治疗肿瘤的药物中含有肿瘤相关抗原，优选为肿瘤特异性抗原。
18、本发明的第六个目的是提供上述免疫佐剂在制备抗感染药物中的应用。
19、进一步地，所述抗感染药物中含有病毒抗原或细菌抗原，所述抗感染药物用于抗病毒感染和/或抗细菌感染。
20、借由上述方案，本发明至少具有以下优点：
21、(1)为了解决目前铝佐剂对带有正电的抗原效果不佳的问题，本发明将抗菌肽hc-cath与cpg odn在一定条件下形成稳定的微纳粒子，再与铝佐剂复合，该复合物作为免疫佐剂时具有明显的效果优势，拓展了铝佐剂的应用领域。
22、(2)本发明将抗菌肽hc-cath与cpg odn形成微纳粒子之后再与铝佐剂结合形成的复合免疫佐剂，相对于单独使用hc-cath、cpg odn、铝佐剂以及联用的效果更佳，可以用于制备抗体、疫苗、免疫治疗药物或免疫激活剂。
23、上述说明仅是本发明技术方案的概述，为了能够更清楚了解本发明的技术手段，并可依照说明书的内容予以实施，以下以本发明的较佳实施例并配合详细附图说明如后。
1.一种免疫佐剂，其特征在于，所述免疫佐剂中含有微纳粒子和铝佐剂，
2.根据权利要求1所述的免疫佐剂，其特征在于，所述免疫佐剂中，微纳粒子与铝佐剂中铝的质量比为1：5-15。
3.根据权利要求1所述的免疫佐剂，其特征在于，所述混合孵育包括：按设定配比将抗菌肽与cpg odn于含有山梨醇的tris-hcl缓冲液中孵育。
4.根据权利要求3所述的免疫佐剂，其特征在于，至少选自以下特征中的一项：
5.一种免疫佐剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述铝佐剂包括氢氧化铝胶体。
7.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物中含有权利要求1-4任一项所述免疫佐剂或权利要求5或6所述制备方法制备得到的免疫佐剂。
8.权利要求1-4任一项所述免疫佐剂或权利要求5或6所述制备方法制备得到的免疫佐剂在制备预防或治疗肿瘤的药物中的应用。
9.权利要求1-4任一项所述免疫佐剂或权利要求5或6所述制备方法制备得到的免疫佐剂在制备抗感染药物中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述抗感染药物用于抗病毒感染和/或抗细菌感染。
