本发明涉及植物有效成分提取，具体是一种从薏苡茎叶分离柚皮素的方法。
背景技术：
1、薏苡(coix lachryma-jobi l)为禾本科(gramineae)薏苡属(coixl.)草本植物，在中药学课本中，它的干燥成熟种仁称为薏苡仁，薏苡仁为很常用的中药，其味甘、淡，性凉，归脾、胃、肺经，有利水渗湿、健脾止泻、除痹、排脓、解毒散结的功。薏苡仁可以药食两用，薏苡仁有营养价值的化学成分，包括碳水化合物、氨基酸、脂肪、蛋白、微量元素、食物纤维和维生素等，后期应用现代技术对薏苡茎叶提取物和薏苡仁提取物进行研究，鉴定了其中55个组分，主要为醇类、醛类、烷类、酮类、酸类、酯类，另外发现4个含硫杂环或含杂氮环类化合物。薏苡的药理作用广泛，主要有抗肿瘤、提高机体免疫力、抗氧化、降血脂、降血糖和抗炎镇痛等作用，近年来，越来越多的人们关注薏苡仁的药理作用和保健功能，但对薏苡茎叶有效成分关注减少。
2、柚皮素(naringenin，nar，分子式：c15h12o5，分子量：272.25g/mol)是一种二氢黄酮类化合物，存在于蔷薇科、芸香科、柑橘属植物中，许多体内外实验研究表明柚皮素具有抗菌、降脂、抗炎、抗肿瘤等药理活性，具有很强的药用潜力。为此，本发明将开展从薏苡茎叶分离柚皮素的研究，为后期研究柚皮素的抗肿瘤、提高机体免疫力、抗氧化、降血脂、降血糖和抗炎镇痛等机理研究打下基础，为研制出疗效确切、副作用小和能够广泛应用于临床的新药奠定基础，为薏苡茎叶的综合开发利用提供保障。
技术实现思路
1、本发明目的在于提供一种从薏苡茎叶分离柚皮素的方法，本发明方法以薏苡茎叶作为原料，经过硫酸铵和食盐，利用乙醇超声回流提取，乙酸乙酯和丙酮萃取，再经活性炭和分子筛进行除杂处理，最后经过聚丙烯酰胺凝胶层析柱分离出柚皮素，提取的柚皮素具有产品纯度高、提取率高、工艺简单等特点，为后期研究柚皮素的抗肿瘤、提高机体免疫力、抗氧化、降血脂、降血糖和抗炎镇痛等机理研究打下基础，为研制出疗效确切、副作用小和能够广泛应用于临床的新药奠定基础，为薏苡茎叶的综合开发利用提供保障。
2、为了实现以上目的，本发明采用的技术方案如下：
3、一种从薏苡茎叶分离柚皮素的方法，包括如下步骤：
4、(1)将薏苡茎叶清洗干净后，粉碎至40-80目，加入含有硫酸铵和食盐的水溶液浸泡30-60min，再将浸泡液加入超声提取罐，利用乙醇回流提取3次以上，每次回流提取1-1.5h，并减压浓缩至无醇，获得浓缩液；
5、(2)将浓缩液加水稀释后，再利用乙酸乙酯和丙酮进行萃取，萃取有机相减压浓缩至膏状，水相减压浓缩至无有机溶剂；
6、(3)将有机相膏状物用甲醇溶解，加入活性炭和分子筛组成的吸附剂进行除杂处理，获得提取液；
7、(4)将提取液过聚丙烯酰胺凝胶层析柱，以甲醇-磷酸水溶液-三乙胺水溶液洗脱，λ＝283nm回收馏分，再经过50℃浓缩至固体析出，干燥，即可分离得柚皮素。
8、作为本发明优选的技术方案：步骤(1)浸泡液中硫酸铵和食盐的使用量为薏苡茎叶质量的0.5-1.5％，所述硫酸铵和食盐的质量比为1-3:1。
9、作为本发明优选的技术方案：所述萃取剂乙酸乙酯和丙酮的体积为3-5:1。
10、作为本发明优选的技术方案：步骤(3)所述除杂处理活性炭和分子筛的质量比为3-5:1,除杂处理时间为20-30min。
11、作为本发明优选的技术方案：所述洗脱剂甲醇-磷酸水溶液-三乙胺水溶液体积比为3:1:1。
12、作为本发明优选的技术方案：所述磷酸水溶液的质量浓度为0.1％，三乙胺水溶液的质量浓度为0.3％。
13、作为本发明优选的技术方案：所述干燥是先经50℃鼓风干燥，再经40℃减压干燥。
14、与现有技术相比，本发明的优点及有益效果包括：
15、1、本发明方法以薏苡茎叶作为原料，经过硫酸铵和食盐，利用乙醇超声回流提取，乙酸乙酯和丙酮萃取，再经活性炭和分子筛进行除杂处理，最后经过聚丙烯酰胺凝胶层析柱分离出柚皮素，提取的柚皮素具有产品纯度高、提取率高、工艺简单等特点，为后期研究柚皮素的抗肿瘤、提高机体免疫力、抗氧化、降血脂、降血糖和抗炎镇痛等机理研究打下基础，为研制出疗效确切、副作用小和能够广泛应用于临床的新药奠定基础，为薏苡茎叶的综合开发利用提供保障。
16、2、本方法通过加入硫酸铵和食盐浸泡薏苡茎叶，有利于改善薏苡茎叶细胞的通透性，乙醇回流提取体系能较好渗透入细胞内部，从而使得柚皮素活性成分能够从薏苡茎叶中有效提取出来，提高了柚皮素的提取率。
17、3、本方法还将萃取后得到的粗提物经过活性炭和分子筛，能够有效去除提取物中的杂质，提高目标产物的纯度。
18、4、本方法采用选择性更高的聚丙烯酰胺凝胶层析柱进行提纯处理，再利用甲醇-磷酸水溶液-三乙胺水溶液作为洗脱液，能够将柚皮素目标产物完全彻底的分离出，提高柚皮素的产率和产品纯度。
1.一种从薏苡茎叶分离柚皮素的方法，其特征在于：包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述一种从薏苡茎叶分离柚皮素的方法，其特征在于：步骤(1)浸泡液中硫酸铵和食盐的使用量为薏苡茎叶质量的0.5-1.5％。
3.根据权利要求2所述一种从薏苡茎叶分离柚皮素的方法，其特征在于：所述硫酸铵和食盐的质量比为1-3:1。
4.根据权利要求1所述一种从薏苡茎叶分离柚皮素的方法，其特征在于：所述萃取剂乙酸乙酯和丙酮的体积为3-5:1。
5.根据权利要求1所述一种从薏苡茎叶分离柚皮素的方法，其特征在于：步骤(3)所述除杂处理活性炭和分子筛的质量比为3-5:1,除杂处理时间为20-30min。
6.根据权利要求1所述一种从薏苡茎叶分离柚皮素的方法，其特征在于：所述洗脱剂甲醇-磷酸水溶液-三乙胺水溶液体积比为3:1:1。
7.根据权利要求6所述一种从薏苡茎叶分离柚皮素的方法，其特征在于：所述磷酸水溶液的质量浓度为0.1％，三乙胺水溶液的质量浓度为0.3％。
8.根据权利要求1所述的一种从薏苡茎叶分离柚皮素的方法，其特征在于：所述干燥是先经50℃鼓风干燥，再经40℃减压干燥。
