本发明涉及微生物发酵，尤其涉及一种红发夫酵母产虾青素的方法。
背景技术：
1、虾青素是一种具有抗氧化、抗炎、抗癌的酮式类胡萝卜素，其生产方法主要有化学合成法、提取法以及微生物合成法。虾壳、蟹壳等甲壳废弃物中虾青素含量低，提取高纯度虾青素过程复杂、成本高，获取虾青素的方法包括生物提取富集、微生物发酵等。
2、生物提取富集的对象有多种，例如废弃虾壳，废弃虾壳通常被直接丢弃或填埋，产生了严重的环境问题；目前，工业上废弃虾壳的主要用途是制备甲壳素，然而虾壳中蛋白质、碳酸钙以及虾青素等活性物质的利用率并不高，虾壳中虾青素的含量只有0.04%，其并未得到充分的回收利用；微生物发酵合成虾青素的微生物主要包括雨生红球藻和红发夫酵母，而红发夫酵母存在合成虾青素产量及效率低的问题。
3、因此需提供一种既能充分利用废弃虾壳又能提高红发夫酵母合成虾青素能力的方案。
技术实现思路
1、有鉴于此，本申请提供一种红发夫酵母产虾青素的方法，用于解决红发夫酵母合成虾青素能力弱的问题。
2、为达到上述技术目的，本申请采用以下技术方案：
3、第一方面，本申请提供一种红发夫酵母产虾青素的方法，包括以下步骤：
4、s1. 利用碱性蛋白酶酶解废弃虾壳粉后，用乙醇水溶液抽提，过滤，得滤渣及滤液，滤渣用盐酸提取得虾壳素，滤液进入下一步工序；
5、s2. 浓缩滤液后，用超滤膜过滤，稀释，得醇提液；
6、s3. 以ypd培养基作为种子培养基培养红发夫酵母，而后接种至发酵培养基中，并在发酵培养过程中流加醇提液，得发酵液；
7、s4. 将发酵液离心、水洗后，超声处理，而后用提取剂提取，即得虾青素。
8、优选的，步骤s1中，碱性蛋白酶的用量为2000-4000u/g。
9、优选的，步骤s1中，乙醇水溶液的浓度为50-70%。
10、优选的，步骤s2中，超滤膜的截留率为10-30kd。
11、优选的，步骤s2中，醇提液中，乙醇的含量为0.2-1wt%。
12、优选的，步骤s3中，以ypd培养基作为种子培养基培养红发夫酵母，25-30℃温度下培养16 -20h，而后以10-15%的接种量接种至发酵培养基中，并在发酵培养的第100-120h之间，流加醇提液，得发酵液。
13、优选的，流加醇提液的速率为5-10ml/h。
14、优选的，步骤s3中，在流加醇提液的同时，还包括流加碳源和氮源，碳源和氮源的流加速率均为10-60ml/h。
15、优选的，步骤s3中，碳源包括糖蜜，氮源包括硫酸铵。
16、优选的，步骤s4中，提取剂包括乙酸乙酯、乙醇中的一种或几种。
17、本申请的有益效果如下：本发明将虾壳的提取液作为促进剂用于培养红发夫酵母，采用流加补料工艺提高了红发夫酵母合成虾青素的产量，采用生物富集方法拓展了虾壳副产物的利用率，同时强化了红发夫酵母合成虾青素的能力。
1.一种红发夫酵母产虾青素的方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的红发夫酵母产虾青素的方法，其特征在于，步骤s1中，所述碱性蛋白酶的用量为2000-4000u/g。
3.根据权利要求1所述的红发夫酵母产虾青素的方法，其特征在于，步骤s1中，所述乙醇水溶液的浓度为50-70%。
4.根据权利要求1所述的红发夫酵母产虾青素的方法，其特征在于，步骤s2中，所述超滤膜的截留率为10-30kd。
5.根据权利要求1所述的红发夫酵母产虾青素的方法，其特征在于，步骤s2中，所述醇提液中，乙醇的含量为0.2-1wt%。
6. 根据权利要求1所述的红发夫酵母产虾青素的方法，其特征在于，步骤s3中，以ypd培养基作为种子培养基培养红发夫酵母，25-30℃温度下培养16 -20h，而后以10-15%的接种量接种至发酵培养基中，并在发酵培养的第100-120h之间，流加所述醇提液，得发酵液。
7.根据权利要求1所述的红发夫酵母产虾青素的方法，其特征在于，流加所述醇提液的速率为5-10ml/h。
8.根据权利要求1所述的红发夫酵母产虾青素的方法，其特征在于，步骤s3中，在流加所述醇提液的同时，还包括流加碳源和氮源，所述碳源和氮源的流加速率均为10-60ml/h。
9.根据权利要求8所述的红发夫酵母产虾青素的方法，其特征在于，步骤s3中，所述碳源包括糖蜜，所述氮源包括硫酸铵。
10.根据权利要求1所述的红发夫酵母产虾青素的方法，其特征在于，步骤s4中，所述提取剂包括乙酸乙酯、乙醇中的一种或几种。
