本发明涉及zip12抗体，本发明扩展到包含该抗体的组合物，包括药物组合物和试剂盒。本发明还扩展到制备和使用该抗体的方法，例如用于治疗和诊断缺氧相关疾病的方法，这样的疾病例如肺动脉高压和癌症。
背景技术：
1、肺动脉高压(ph)是一种病理性疾病，其特征是肺动脉压力升高和肺血管结构重塑。对于肺动脉高压，目前的治疗主要集中在血管活性因子所使用的信号传导机制的药理学操作上，并且治疗效果有限。对于这种潜在致命疾病，对新治疗方法和诊断方法的医疗需求尚未得到满足。
2、成年哺乳动物肺循环对低氧环境的典型反应是肺小动脉的血管收缩和结构重塑，导致肺动脉压的慢性升高(肺动脉高压)和右心室肥大的慢性升高。然而，一些哺乳动物对缺氧诱导的肺动脉高压表现出遗传抗性(wilkins,m.r.等人，pathophysiology andtreatment of high-altitude pulmonary vascular disease.circulation.2015,131,582-590；zhao,l.等人，right ventricular hypertrophy secondary to pulmonaryhypertension is linked to rat chromosome 17:evaluation of cardiac ryanodineryr2 receptor as a candidate.circulation.2001,103,442-447；rhodes,j.，comparative physiology of hypoxic pulmonary hypertension:historical cluesfrom brisket disease.journal of applied physiology.2005,98,1092-1100)。本发明的发明人们先前已经报道，与wistar kyoto(wky)大鼠品系相比，fisher 344(f344)大鼠品系对缺氧诱导的肺动脉高压具有抗性(zhao,l.等人，right ventricular hypertrophysecondary to pulmonary hypertension is linked to rat chromosome 17:evaluationof cardiac ryanodine ryr2 receptor as a candidate.circulation.2001,103,442-447)。然而，这种抗性的原因尚不清楚。
3、本发明人之前还利用了一种适宜的育种计划和比较基因组学来利用大鼠的这种变异，并已将slc39a12基因鉴定为缺氧诱导的肺血管重塑的主要调节因子。slc39a12编码锌转运蛋白zip12。他们发现，在易受缺氧诱导的肺动脉高压影响的大鼠、奶牛和人类重塑的肺小动脉中，zip12在许多细胞类型中的表达增加，包括内皮细胞、平滑肌细胞和间质细胞。本发明人已经表明，zip12在肺血管平滑肌细胞中的表达是缺氧依赖性的，并且靶向抑制zip12可抑制缺氧暴露的肺血管平滑肌细胞中细胞内不稳定锌的升高，并抑制其在培养中的增殖。本发明人先前还证明了zip12表达的遗传性中断削弱了在缺氧环境中饲养的大鼠的肺动脉高压的发展。
4、然而，到目前为止，还没有靶向zip12蛋白的特异性治疗方法，本发明人认为这可以为治疗肺动脉高压提供一种改进手段。此外，肺动脉高压的诊断通常需要侵入性手术，如右心导管插入术和超声心动图。因此，确定可通过简单和较少侵入性程序测量的肺动脉高压的新标记物也是可取的。
技术实现思路
1、本发明人假定，对zip12的抑制可以阻止缺氧诱导的肺血管平滑肌细胞(pvsmc)在体外的增殖和离体肺血管的生成。这确定了zip12是治疗肺动脉高压潜在疾病机制的潜在新治疗靶标，这促使发明人进一步开展工作，开发能够靶向zip12细胞外结构域的抗体，以抑制其功能。这些抗体的抗zip12活性意味着它们本身就是有用的治疗剂，可以用于治疗、改善或预防任何缺氧诱导的或缺氧相关的病症，特别是，但不限于，肺动脉高压。
2、相应地，在本发明的第一方面，提供了一种抗体或其抗原结合片段，其特异性结合zip12的细胞外结构域，并识别包含adllqvlsagdhpphnhsrs(seq id no:252)或其变体或片段的或是由adllqvlsagdhpphnhsrs或其变体或片段组成的表位，或优选地，其识别包含llqvlsagdhpphnhsrs(seq id no:1)或其变体或片段的或是由llqvlsagdhpphnhsrs或其变体或片段组成的表位。
3、在另一方面，提供了一种抗体或其抗原结合片段，其特异性结合zip12的细胞外结构域，并识别包含llqvlsagdhpphnhsrs(seq id no:1)或其变体或片段的或是由llqvlsagdhpphnhsrs或变体或片段组成的表位。
4、如实施例所示(如图8所示)，本发明人已经确定zip12蛋白的细胞外区域或结构域是其发挥功能的关键，因此已经开发出能够结合并抑制zip12的功能的抗体。例如，如图9b所示，本发明人已经开发了大量抗体，并已经证明这些抗体专门靶向细胞外结构域并抑制zip12的功能。
5、优选地，本发明的抗体或其抗原结合片段能够抑制zip12的功能。优选地，本发明的抗体或其抗原结合片段能够抑制zip12的功能，从而抑制缺氧暴露的肺血管平滑肌细胞中细胞内不稳定锌的升高及其在培养物中的增殖。
6、表位可在本文中提供为seq id no:252：
7、adllqvlsagdhpphnhsrs
8、[seq id no:252]
9、优选地，表位可以在本文中提供为seq id no:1，如下所示：
10、llqvlsagdhpphnhsrs
11、[seq id no:1]
12、如图10中的c所示，本发明人确定序列adllq(seq id no:253)是在几个候选表位中发现的常见基序。
13、优选地，因此，表位可以在本文中提供为seq id no:253，如下所示：
14、adllq
15、[seq id no:253]
16、相应地，在一个实施方案中，其抗体或其抗原结合片段识别包含adllq(seq idno:253)或其变体或片段的或是由adllq或其变体或片段组成的表位。
17、在一个实施方案中，zip12可以由genbank id no:np-001138667表示，其在本文中提供为seq id no:2，如下所示：
18、mcfrtklsvswvplflllsrvfstetdkpsaqdsrsrgssgqpadllqvlsagdhpphnhsrsliktllektgcprrrngmqgdcnlcfepdallliaggnfedqlreevvqrvsllllyyiihqeeicssklnmsnkeykfylhsllslrqdedssflsqnetedilaftrqyfdtsqsqcmetktlqkksgivsseganestlpqlaamiitlslqgvclgqgnlpspdyfteyifsslnrtntlrlseldqllntlwtrstciknekihqfqrkqnniithdqdysnfsssmekesedgpvswdqtcfsarqlveiflqkglsliskedfkqmspgiiqqllscschlpkdqqaklppttlekygystvavtlltlgsmlgtalvlfhsceenyrlilqlfvglavgtlsgdallhlipqvlglhkqeapefghfheskghiwklmgliggihgffliekcfillvspndkqglslvnghvghshhlalnselsdqagrgksastiqlkspedsqaaempigsmtasnrkckaisllaimilvgdslhnfadglaigaafssssesgvtttiailcheiphemgdfavllssglsmktailmnfissltafmglyiglsvsadpcvqdwiftvtagmflylslvemlpemthvqtqrpwmmfllqnfglilgwlsllllaiyeqniki
19、[seq id no:2]
20、该抗体或其抗原结合片段可以与表位结合，该表位是seq id no:2的一部分或其片段或变体。
21、优选地，抗体或其抗原结合片段与包含在seq id no:252和/或seq id no:1的氨基酸序列中的表位结合。优选地，抗体或其抗原结合片段与包含在seq id no:252和/或seqidno:1中的一个或多个氨基酸或其片段或变体结合。优选地，抗体或其抗原结合片段与包含在seq id no:252和/或seq id no:1中存在的任何5个、6个或7个氨基酸或其变体或片段结合。优选地，抗体或其抗原结合片段与包含在seq id no:252和/或seq id no:1中存在的任何8个、9个或10个氨基酸或其变体或片段结合。优选地，抗体或其抗原结合片段与包含在seq id no:252和/或seq id no:1中存在的任何11个、12个或13个氨基酸或其变体或片段结合。优选地，抗体或其抗原结合片段与包含在seq id no:252和/或seq id no:1中存在的任何14个、15个或16个氨基酸或其变体或片段结合。优选地，抗体或其抗原结合片段与包含在seq id no:252和/或seq id no:1中存在的任何17或18个氨基酸或其变体或片段结合。
22、表位可以是线性的或构象的。术语"线性表位"可以指由氨基酸残基组成的表位，这些残基在蛋白质抗原的主序列中一起形成序列，即顺序或连续表位。线性表位可能存在于折叠的zip12上。
23、术语"构象表位"可以指由氨基酸残基组成的表位，其中至少有一些氨基酸残基在蛋白抗原的主序列中与其他残基分开，但它们一起组装在三维结构中并被抗体识别，即不连续或非顺序的表位。
24、根据图8中获得的数据，本发明人认为抗体或其抗原结合片段的表位至少部分线性。实际上，抗体很可能与主要的线性表位结合。然而，抗体或其抗原结合片段可能不会与seq idno:252和/或seq id no:1中的每一个氨基酸结合。
25、zip12、zip13和zip4都是锌转运体。然而，zip4不参与肺动脉高压的发病机制，但在组织的平衡、代谢、发育和免疫方面有重要作用。此外，zip13已被证明可调节细胞内的锌和smad信号，这对bmp/tgf-beta信号很重要(参见fakuda等人，j biol inorg chem,2011)。已知bmp信号受损与肺动脉高压有关，如morrell et a l na ture reviews cardiology,2015中所示。因此，抑制zip13会导致锌浓度降低，进而可能会损害bmp信号并导致肺动脉高压，而不是治愈肺动脉高压。
26、因此，重要的是，本发明中针对zip12的抗体是特异性的，并且与zip13和/或zip4没有或很少有交叉反应，因为这可能导致显著的不期望的脱靶效应。
27、相应地，优选地，本发明的抗体或其抗原结合片段基本上不与人zip13结合。优选地，本发明的抗体或其抗原结合片段与人的zip13没有交叉反应性。
28、在一个实施方案中，zip13可由gene id no:91252表示，在本文中提供为seq idno:3，如下所示：
29、mpgcpcpgcgmagprllfltalalelleraggsqpalrsrgtatacrldnkeseswgallsgerldtwicsllgslmvglsgvfpllviplemgtmlrseagawrlkqllsfalggllgnvflhllpeawaytcsaspggegqslqqqqqlglwviagiltflalekmfldskeegtsqapnkdptaaaaalngghclaqpaaepglgavvrsikvsgylnllantidnfthglavaasflvskkigllttmaillheiphevgdfaillragfdrwsaaklqlstalggllgagfaictqspkgvvgcspaaeetaawvlpftsggflyialvnvlpdlleeedpwrslqqllllcagivvmvlfslfvd
30、[seq id no:3]
31、因此，优选地，该抗体或其抗原结合片段不与seq id no:3中基本上列出的序列或其变体或片段结合。
32、此外，优选地，本发明的抗体或其抗原结合片段基本上不与人zip4结合。优选地，本发明的抗体或其抗原结合片段与人的zip4没有交叉反应性。
33、在一个实施方案中，zip4可由gene id no:np-570901表示，在本文中提供为seqidno:4，如下所示：
34、maslvslelglllavlvvtatasppagllslltsgqgaldqealggllntladrvhcangpcgkclsvedalglgepegsglppgpvlearyvarlsaaavlylsnpegtcedaraglwashadhllallespkaltpglswllqrmqaraagqtpktacvdipqlleeavgagapgsaggvlaalldhvrsgscfhalpspqyfvdfvfqqhssevpmtlaelsalmqrlgvgreahsdhshrhrgassrdpvplisssnsssvwdtvclsardvmaayglseqagvtpeawaqlspallqqqlsgactsqsrppvqdqlsqserylygslatlliclcavfglllltctgcrgvthyilqtflslavgaltgdavlhltpkvlglhthseeglspqptwrllamlaglyafflfenlfnlllprdpedledgpcghsshshgghshgvslqlapselrqpkpphegsradlvaeespellnpeprrlspelrllpymitlgdavhnfadglavgaafasswktglatslavfchelphelgdfaallhaglsvrqalllnlasaltafaglyvalavgvseeseawilavatglflyvalcdmlpamlkvrdprpwllfllhnvgllggwtvllllslyedditf
35、[seq id no:4]
36、因此，优选地，该抗体或其抗原结合片段不与seq id no:4中基本上列出的序列或其变体或片段结合。
37、优选地，该抗体或其抗原结合片段与人和/或食蟹猴zip12结合。优选地，该抗体或其抗原结合片段不与犬和/或猪zip12结合。
38、本发明扩展到对zip12细胞外表位具有免疫特异性的整个抗体(即免疫球蛋白)，zip12细胞外表位包含seq id no:252和/或seq id no:1或其变体或片段组成，以及扩展到相应全长抗体的抗原结合片段或区域。
39、该抗体或其抗原结合片段可以是单价的、二价的或多价的。单价抗体是二聚体(hl)，其包括由二硫桥与轻链(l)相连的重链(h)。二价抗体是四聚体(h2l2)，其包括由至少一个二硫桥连接的两个二聚体。多价抗体也可以被生产出来，例如通过连接多个二聚体。抗体分子的基本结构包括两条相同的轻链和两条相同的重链，它们以非共价方式结合，并且可以通过二硫键连接。每条重链和轻链都包含一个大约110个氨基酸的氨基末端可变区，在链的其余部分有恒定序列。可变区包括几个超变区，或互补决定区(cdr)，形成抗体分子的抗原结合点，并决定其对抗原的特异性，即zip12的细胞外部分，或其变体或片段(如表位)。在重链和轻链的cdr的两侧是一个框架区，它是一个相对保守的氨基酸序列，用于锚定和定向cdr。抗体片段可以包括双特异性抗体(bsab)或嵌合抗原受体(car)。
40、重链恒定区通常包括三个结构域，ch1、ch2和ch3。每个轻链通常包括一个轻链可变区(vl)和一个轻链恒定区。轻链恒定区通常包括一个结构域，缩写为cl。
41、每个重链和轻链一般包括三个cdrs和四个frs，按以下顺序排列(从n端到c端)：fr1-cdr1-fr2-cdr2-fr3-cdr3-fr4。cdr参与抗原结合并赋予抗原特异性和抗体的结合亲和力。参见kabat等人，sequences of proteins of immunological interest 5th ed.(1991)public health service,national institutes of health,bethesda,md，其内容通过引用全部纳入。
42、任何脊椎动物的重链都可以被归入五个不同的类别(或同种型)之一：iga、igd、ige、igg和igm。这些类别也分别被称为α、δ、ε、γ和μ。根据序列和功能的不同，igg和iga类又被进一步划分为亚类。人类表达以下亚类：igg1、igg2、igg3、igg4、iga1和iga2。
43、任何脊椎动物的轻链都可以根据恒定结构域的序列被归入两种类型之一，称为kappa和lambda。
44、恒定区由五个重链序列(μ、γ、ζ、α或ε)之一和两个轻链序列(κ或λ)之一组成。重链恒定区序列决定了抗体的同种型和分子的效应子功能。
45、优选地，抗体或其抗原结合片段被分离或纯化。
46、在一个优选的实施方案中，抗体或其抗原结合片段包括多克隆抗体或其抗体结合片段。抗体或其抗原结合片段可以在兔、小鼠或大鼠中产生。
47、优选地，抗体或其抗原结合片段通过用zip12的细胞外表位或其变体或片段免疫宿主动物，然后收集抗体或其抗原结合片段而获得，其中zip12的细胞外表位包含seq idno:252和/或seq id no:1或其变体或片段，或是由seq id no:252和/或seq id no:1或其变体或片段组成。宿主动物可以是兔子。
48、在另一优选实施方案中，该抗体或其抗原结合片段包括单克隆抗体或其抗体结合片段。优选地，本发明的抗体是人抗体。如本文所用，术语“人抗体”可以是指抗体，如单克隆抗体，其包含与在对zip12的细胞外部分或其变体或片段表现出免疫特异性的特定人抗体中发现的基本相同的重链和轻链cdr氨基酸序列。与重链或轻链cdr基本相同的氨基酸序列与参考序列相比表现出相当大的序列同一性。这种同一性被明确地称为或可识别为代表特定人抗体的氨基酸序列。基本相同的重链和轻链cdr氨基酸序列可以具有例如氨基酸的微小修饰或保守取代。这样的人抗体维持其选择性结合zip12细胞外表位的功能，zip12细胞外表位包含seq id no:252和/或seq id no:1或其变体或片段，或是由seq id no:252和/或seq id no:1或其变体或片段组成。
49、术语“人单克隆抗体”可以包括具有基本上或完全人cdr氨基酸序列的单克隆抗体，单克隆抗体例如通过重组方法产生，例如通过噬菌体文库、淋巴细胞或杂交瘤细胞产生。
50、术语“单克隆抗体”是指来自基本上同质的抗体群体的抗体。基本上同质的抗体群体包括基本上相似的抗体，并且结合相同的表位，除了在单克隆抗体的生产过程中通常可能出现的变体。这种变体通常仅以少量存在。单克隆抗体通常通过包括从多种抗体中选择单个抗体的过程获得。例如，选择过程可以是从多个克隆中选择独特的克隆，例如杂交瘤克隆库、噬菌体克隆库、酵母克隆库、细菌克隆库或其他重组dna克隆库。所选择的抗体可以进一步改变，例如，以提高对靶标的亲和力(通过所谓的“亲和力成熟(affinitymaturation)”)，使抗体人源化，提高其在细胞培养中的产量，和/或降低其在受试者中的免疫原性。
51、术语“人源化抗体”可以指来自非人类物种(如小鼠或兔子)的抗体，其蛋白质序列经过修饰，以增加其与人类自然产生的抗体的相似性。
52、抗体可以是重组抗体。术语“重组人抗体”可包括使用重组dna技术生产的人抗体。
53、术语“抗原结合区”可以指抗体的对其靶抗原具有特异性结合亲和力的区域，例如zip12的细胞外表位，其包含seq id no:252和/或seq id no:1或其变体或片段或是由seqid no:252和/或seq id no:1或其变体或片段组成。优选地，该片段是表位。抗原结合区可以是高变cdr或其功能部分。cdr的术语“功能部分”可以指cdr内对靶抗原显示特异性亲和力的序列。cdr的功能部分可以包括特异性结合zip12的细胞外表位，其包含seq idno:252和/或seq id no:1或其变体或片段或是由seq id no:252和/或seq id no:1或其变体或片段组成。
54、术语“cdr”可以指重链和轻链中的高变区。在抗体的重链和轻链中的每一个中可能存在一个、两个、三个或更多cdr。通常，每条链上至少有三个cdr，当它们配置在一起时，形成抗原结合位点，即抗原结合或特异性反应的三维结合位点。然而，据推测，在一些抗体的重链中可能有四个cdr。
55、cdr的定义还包括当相互比较时氨基酸残基的重叠或亚群。包含特定cdr或其功能部分的确切残基数将根据cdr的序列和大小而变化。给定抗体的可变区氨基酸序列，本领域技术人员可以常规确定哪些残基包含特定cdr。
56、cdr的氨基酸序列边界可以通过使用多种已知编号方案中的任何一种来确定，包括kabat等人在上文中描述的那些(“kabat”编号方案)；al-lazikani等人，1997,j.mol.biol.,273:927-948(“chothia”编号方案)；maccallum等人，1996,j.mol.biol.262:732-745(“contact”编号方案)；lefranc等人，dev.comp.immunol.,2003,27:55-77(“imgt”编号方案)；以及honegge和plückthun，j.mol.biol。，2001309:657-70(“aho”编号方案)。
57、抗体的术语“功能片段”可以指抗体中保留功能活性的部分。功能活性可以是例如抗原结合活性或特异性。功能活性也可以是，例如由抗体恒定区提供的效应子功能。术语“功能性片段”还旨在包括，例如通过蛋白酶消化或还原人单克隆抗体和本领域技术人员已知的重组dna方法产生的片段。人单克隆抗体功能性片段包括，例如单个重链或轻链及其片段，如vl、vh和fd；单价片段，如fv、fab和fab’；二价片段，如ff(ab’)2；单链v(scfv)；以及fc片段。
58、术语“vl片段”可以指人单克隆抗体的轻链片段，其包括全部或部分轻链可变区，包括cdr。vl片段可以进一步包括轻链恒定区序列。
59、术语“vh片段”可以指人单克隆抗体的重链片段，其包括重链可变区的全部或部分，包括cdr。
60、术语“fd片段”可以指与耦合到第一个重链恒定区(即vh和ch-1)的重链可变区。
61、“fd片段”不包括轻链，也不包括重链的第二和第三恒定区。
62、术语“fv片段”可以指人单克隆抗体的单价抗原结合片段，包括重链和轻链的全部或部分可变区，并且不存在重链和重链的恒定区。重链和轻链的可变区包括例如cdr。例如，fv片段包括重链和轻链的约110个氨基酸的全部或部分氨基末端可变区。
63、术语“fab片段”可以指大于fv片段的人单克隆抗体的单价抗原结合片段。例如，fab片段包括可变区，以及重链和轻链的第一恒定结构域的全部或部分。因此，fab片段另外包括例如重链和轻链的约110至约220的氨基酸残基。
64、术语“fab’片段”可以指比fab片段大的人单克隆抗体的单价抗原结合片段。例如，fab’片段包括所有轻链、所有重链可变区以及所有或部分重链第一和第二恒定结构域。例如，fab’片段可以另外包括重链的220至330个氨基酸残基中的一些或全部。
65、术语“f(ab’)2片段”可以指人单克隆抗体的二价抗原结合片段。f(ab’)2片段包括，例如，两个重链和两个轻链的全部或部分可变区，并且可以进一步包括两条重链和二条轻链的所有或部分第一恒定结构域。
66、术语“单链fv(scfv)”可以指与短连接肽连接的重链(vh)和轻链(vl)可变区的融合。
67、术语“双特异性抗体(bsab)”可以是指包含两个通过较短连接肽相互连接的scfv的双特异性的抗体。
68、本领域技术人员知道，抗体片段的确切边界并不重要，只要该片段保持功能活性即可。使用众所周知的重组方法，本领域技术人员可以设计多核苷酸序列来表达具有特定应用所需的任何终点的功能片段。抗体的功能性片段可以包含具有与人抗体基本相同的重链和轻链可变区的片段组成。
69、优选地，关于本发明的第一方面，其抗原结合片段对包含seq id no:252和/或seqidno:1或其变体或片段组成的zip12细胞外表位具有免疫特异性。该抗原结合片段可包含选自vh,vl,fd,fv,fab,fab’,scfv,f(ab’)2以及fc片段的任何片段组成。
70、抗原结合片段可以是单结构域抗体(sdab)，也称为纳米抗体(nanobody)，本领域技术人员将其理解为由单个单体可变抗体结构域组成的抗体片段。
71、抗原结合片段可包含vl的抗原结合区序列中的任何一个、vh的抗原接合区序列中任何一个或人抗体的vl和vh抗原结合区的组合组成。vh和vl抗原结合区序列的适当数量和组合可以由本领域技术人员根据所需的亲和力和特异性以及抗原结合片段的预期用途来确定。抗体的功能片段或抗原结合片段可以使用本领域技术人员熟知的方法容易地产生和分离。这些方法包括例如蛋白水解方法、重组方法和化学合成。用于分离功能片段的蛋白质水解方法包括使用人抗体作为起始材料。适合于人免疫球蛋白蛋白水解的酶可以包括，例如木瓜蛋白酶和胃蛋白酶。本领域技术人员可以容易地选择合适的酶，这取决于例如是否需要单价或二价片段。例如，木瓜蛋白酶切割产生两个结合抗原和fc片段的单价fab’片段。例如，胃蛋白酶切割产生二价f(ab’)片段。本发明的f(ab’)2片段可以使用例如dtt或2-巯基乙醇进一步还原以产生两个单价fab’片段。
72、通过蛋白水解产生的抗体的功能性或抗原结合片段可以通过亲和以及柱色谱程序纯化。例如，未消化的抗体和fc片段可以通过与蛋白质a结合来去除。此外，功能性片段可以通过它们的电荷和大小来纯化，例如使用离子交换和凝胶过滤色谱。这样的方法对于本领域的技术人员来说是众所周知的。
73、抗体或其抗原结合片段可以通过重组方法产生。优选地，首先分离编码抗体重链和轻链的期望区域的多核苷酸。这样的区域可以包括，例如，重链和轻链的可变区域的全部或部分。优选地，这样的区域可以特别包括重链和轻链的抗原结合区域，优选抗原结合位点，最优选cdr。
74、根据本发明的编码抗体或其抗原结合片段的多核苷酸可使用本领域技术人员已知的方法生产。编码抗体或抗原结合碎片的多核苷酸可以通过本领域已知的寡核苷酸合成方法直接合成。或者，可以使用本领域已知的重组方法合成并连接较小的片段以形成较大的功能片段。
75、如本文所用，术语“免疫特异性”可以指抗体或其抗原结合片段的结合区能够通过与zip12的细胞外表位结合而与之发生免疫反应，zip12的细胞外表位包含seq id no:252和/或seq id no:1或其变体或片段组成。抗体或其抗原结合片段可以优选地选择性地与抗原(即包含seq id no:252和/或seq id no:1或其变体或片段、或是由seq id no:252和/或seq id no:1或其变体或片段组成的zip12的细胞外表位)相互作用，抗原的亲和常数为约10-5至10-13m-1，优选为10-6至10-9m-1，甚至更优选为10-10至10-12m-1。抗体或其抗原结合片段优选基本上不与zip4和/或zip13结合，使得亲和常数约大于10-10m-1、10-9m-1、10-8m-1、10-7m-1或10-6m-1，优选大于10-5m-1、10-4m-1或10-3m-1，甚至更优选为10-2m-1、10-1m-1或10-2m-1，最优选为10+1m-1、10+2m-1或10+3m-1。
76、术语“免疫反应”可以指结合区能够在与zip12的细胞外表位结合时引发免疫反应，zip12的细胞外表位包含seq id no:252和/或seq id no:1或其变体或片段、或是由seqid no:252和/或seq id no:1或其变体或片段组成。
77、术语“表位”可以指具有引发抗体或其抗原结合片段的结合区并与其结合的能力的抗原的任何区域。
78、因此，抗体或其抗原结合片段可以包含重链。重链可以选自iga、igd、ige、igg和igm。优选地，重链是igg。优选地，重链是iga。
79、重链可以是igg1。重链可以是igg2。重链可以是igg3。重链可以是igg4。重链可以是iga1。重链可以是iga2。
80、如实施例中所述以及如图1中所示，本发明人已经开发了一种抗体候选，其结合zip12的细胞外结构域(在此称为51b12)，其能够靶向并抑制zip12的功能。这种所谓的“51b12-亲本”抗体的六个cdr、vh和vl序列总结在图9a所示的表中。然后，本发明人对“51b12-亲本”抗体进行亲和力成熟，以产生新的变体或突变体。
81、如实施例一所述，在三个重cdr和轻cdr中，每个cdr残基设计8或9个突变体。对于可变重链(vh)cdr变体，合成可变区并将其克隆到含有fc的无效人igg1的表达载体中。对于可变轻链(vl)cdr变体，合成可变区并将其克隆到含有人kappa轻链恒定区的表达载体中。
82、图9b示出了一个表格，总结了衍生自“51b12-亲本”的26种不同亲和力成熟抗体实施例的序列。表中第一行表示51b12-亲本的亲和力成熟变体的相应序列(六个cdr、vh和vl)，被称为“h3_w99h_l1”，其中cdr-h3序列除w99h氨基酸交换外与亲本相同，cdr-l1 cdr如表中所示。表中第二行表示51b12-亲本的亲和力成熟变体的相应序列，被称为“h3_w99h_l2”，其中cdr-h3序列除w99h氨基酸交换外与亲本相同，cdr-l2 cdr如表中所示，以此类推。
83、以下将根据其序列描述这些亲和力成熟的变体中的每一个。
84、h3_w99h_l1
85、相应地，在一个实施方案中，抗体或其抗原结合片段在其中被称为h3_w99h_l1。
86、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h1结构域，cdr-h1结构域包含seq idno:13中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h2结构域，cdr-h2结构域包含seq id no:14中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h3结构域，cdr-h3结构域包含seq id no:15中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。
87、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:13的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:14的或由其组成的cdr-h2结构域、和/或包含seq id no:15的或由其组成的cdr-h3结构域。然而，优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:13的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:14的或由其组成的cdr-h2结构域以及包含seq id no:15的或由其组成的cdr-h3结构域。
88、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括重链可变(vh)区，其包含seq id no:19中基本上列出的序列或其变体或片段或由其组成。
89、优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l1结构域，cdr-l1结构域包含seq idno:16中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l2结构域，cdr-l2结构域包含seq id no:17中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l3结构域，cdr-l3结构域包含seq id no:18中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。
90、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:16的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:17的或由其组成的cdr-l2结构域、和/或包含seq id no:18的或由其组成的cdr-l3结构域。然而，优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:16的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:17的或由其组成的cdr-l2结构域以及包含seq id no:18的或由其组成的cdr-l3结构域。
91、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括轻链可变(vl)区，其包含seq id no:20中基本上列出的序列或其变体或片段或是由其组成。
92、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括至少一个、至少两个、至少三个、至少四个、至少五个或至少六个cdr。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含至少cdr-h3。
93、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:13的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:14的或由其组成的cdr-h2结构域、包含seq id no:15的或由其组成的cdr-h3结构域、包含seq id no:16的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:17的或由其组成的cdr-l2结构域、以及包含seq id no:18的或由其组成的cdr-l3结构域。
94、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:19的或由其组成的重链可变区以及包含seq id no:20的或由其组成的轻链可变区。
95、h3_w99h_l2
96、在一个实施方案中，抗体或其抗原结合片段在其中被称为h3_w99h_l2。
97、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h1结构域，其包含seq id no:21中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h2结构域，其包含seq id no:22中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h3结构域，其包含seq id no:23中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。
98、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:21的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:22的或由其组成的cdr-h2结构域、和/或包含seq id no:23的或由其组成的cdr-h3结构域。然而，优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:21的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:22的或由其组成的cdr-h2结构域以及包含seq id no:23的或由其组成的cdr-h3结构域。
99、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括重链可变(vh)区，其包含seq id no:27中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。
100、优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l1结构域，其包含seq id no:24中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l2结构域，其包含seq id no:25中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l3结构域，其包含seq id no:26中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。
101、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:24的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:25的或由其组成的cdr-l2结构域、和/或包含seq id no:26的或由其组成的cdr-l3结构域。然而，优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:24的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:25的或由其组成的cdr-l2结构域以及包含seq id no:26的或由其组成的cdr-l3结构域。
102、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括轻链可变(vl)区，其包含seq id no:28中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。
103、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括至少一个、至少两个、至少三个、至少四个、至少五个或至少六个cdr。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含至少cdr-h3。
104、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:21的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:22的或由其组成的cdr-h2结构域、包含seq id no:23的或由其组成的cdr-h3结构域、包含seq id no:24的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:25的或由其组成的cdr-l2结构域、以及包含seq id no:26的或由其组成的cdr-l3结构域。
105、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:27的或由其组成的重链可变区以及包含seq id no:28的或由其组成的轻链可变区。
106、h3_w99vl-par
107、在一个实施方案中，抗体或其抗原结合片段在其中被称为h3_w99h_vl-par。
108、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h1结构域，其包含seq id no:29中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h2结构域，其包含seq id no:30中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h3结构域，其包含seq id no:31中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。
109、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:29的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:30的或由其组成的cdr-h2结构域、和/或包含seq id no:31的或由其组成的cdr-h3结构域。然而，优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:29的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:30的或由其组成的cdr-h2结构域以及包含seq id no:31的或由其组成的cdr-h3结构域。
110、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括重链可变(vh)区，其包含seq id no:35中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。
111、优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l1结构域，其包含seq id no:32中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l2结构域，其包含seq id no:33中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l3结构域，其包含seq id no:34中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。
112、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:32的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:33的或由其组成的cdr-l2结构域、和/或包含seq id no:34的或由其组成的cdr-l3结构域。优选地，然而，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:32的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:33的或由其组成的cdr-l2结构域以及包含seq id no:34的或由其组成的cdr-l3结构域。
113、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括轻链可变(vl)区，其包含seq id no:36中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。
114、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括至少一个、至少两个、至少三个、至少四个、至少五个或至少六个cdr。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含至少cdr-h3。
115、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:29的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:30的或由其组成的cdr-h2结构域、包含seq id no:31的或由其组成的cdr-h3结构域、包含seq id no:32的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:33的或由其组成的cdr-l2结构域、以及包含seq id no:34的或由其组成的cdr-l3结构域。
116、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:35的或由其组成的重链可变区以及包含seq id no:36的或由其组成的轻链可变区。
117、h2_t56h_l1
118、在一个实施方案中，抗体或其抗原结合片段在其中被称为h2_t56h_l1。
119、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h1结构域，其包含seq id no:37中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h2结构域，其包含seq id no:38中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h3结构域，其包含seq id no:39中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。
120、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:37的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:38的或由其组成的cdr-h2结构域、和/或包含seq id no:39的或由其组成的cdr-h3结构域。然而，优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:37的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:38的或由其组成的cdr-h2结构域以及包含seq id no:39的或由其组成的cdr-h3结构域。
121、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括重链可变(vh)区，其包含seq id no:43中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。
122、优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l1结构域，其包含seq id no:40中基本上列出的序列或其变体或片段组成、或是由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l2结构域，其包含seq id no:41中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l3结构域，其包含seq id no:42中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。
123、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:40的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:41的或由其组成的cdr-l2结构域、和/或包含seq id no:42的或由其组成的cdr-l3结构域。优选地，然而，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:40的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:41的或由其组成的cdr-l2结构域以及包含seq id no:42的或由其组成的cdr-l3结构域。
124、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括轻链可变(vl)区，其包含seq id no:44中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。
125、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括至少一个、至少两个、至少三个、至少四个、至少五个或至少六个cdr。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含至少cdr-h3。
126、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:37的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:38的或由其组成的cdr-h2结构域、包含seq id no:39的或由其组成的cdr-h3结构域、包含seq id no:40的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:41的或由其组成的cdr-l2结构域和包含seq id no:42的或由其组成的cdr-l3结构域。
127、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:43的或由其组成的重链可变区以及包含seq id no:44的或由其组成的轻链可变区。
128、t2_t57h_l1
129、在一个实施方案中，抗体或其抗原结合片段在其中被称为t2_t57h_l1。
130、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h1结构域，其包含seq id no:45中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h2结构域，其包含seq id no:46中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h3结构域，其包含seq id no:47中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。
131、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:45的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:46的或由其组成的cdr-h2结构域、和/或包含seq id no:47的或由其组成的cdr-h3结构域。然而，优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:45的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:46的或由其组成的cdr-h2结构域以及包含seq id no:47的或由其组成的cdr-h3结构域。
132、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括重链可变(vh)区，其包含seq id no:51中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。
133、优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l1结构域，其包含seq id no:48中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l2结构域，其包含seq id no:49中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l3结构域，其包含seq id no:50中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。
134、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:48的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:49的或由其组成的cdr-l2结构域、和/或包含seq id no:50的或由其组成的cdr-l3结构域。然而，优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:48的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:49的或由其组成的cdr-l2结构域以及包含seq id no:50的或由其组成的cdr-l3结构域。
135、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括轻链可变(vl)区，其包含seq id no:52中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。
136、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括至少一个、至少两个、至少三个、至少四个、至少五个或至少六个cdr。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含至少cdr-h3。
137、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:45的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:46的或由其组成的cdr-h2结构域、包含seq id no:47的或由其组成的cdr-h3结构域、包含seq id no:48的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:49的或由其组成的cdr-l2结构域以及包含seq id no:50的或由其组成的cdr-l3结构域。
138、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:51的或由其组成的重链可变区以及包含seq id no:52的或由其组成的轻链可变区。
139、h2_y60k_l1
140、在一个实施方案中，抗体或其抗原结合片段在其中被称为h2_y60k_l1。
141、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h1结构域，其包含seq id no:53中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h2结构域，其包含seq id no:54中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h3结构域，其包含seq id no:55中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。
142、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:53的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:54的或由其组成的cdr-h2结构域、和/或包含seq id no:55的或由其组成的cdr-h3结构域。然而，优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:53的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:54的或由其组成的cdr-h2结构域以及包含seq id no:55的或由其组成的cdr-h3结构域。
143、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括重链可变(vh)区，其包含seq id no:59中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。
144、优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l1结构域，其包含seq id no:56中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l2结构域，其包含seq id no:57中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l3结构域，其包含seq id no:58中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。
145、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:56的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:57的或由其组成的cdr-l2结构域、和/或包含seq id no:58的或由其组成的cdr-l3结构域。优选地，然而，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:56的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:57的或由其组成的cdr-l2结构域以及包含seq id no:58的或由其组成的cdr-l3结构域。
146、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括轻链可变(vl)区，其包含seq id no:60中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。
147、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括至少一个、至少两个、至少三个、至少四个、至少五个或至少六个cdr。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含至少cdr-h3。
148、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:53的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:54的或由其组成的cdr-h2结构域、包含seq id no:55的或由其组成的cdr-h3结构域、包含seq id no:56的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:57的或由其组成的cdr-l2结构域以及包含seq id no:58的或由其组成的cdr-l3结构域。
149、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:59的或由其组成的重链可变区以及包含seq id no:60的或由其组成的轻链可变区。
150、h2_t63y_l1
151、在一个实施方案中，抗体或其抗原结合片段在其中被称为h2_t63y_l1。
152、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h1结构域，其包含seq id no:61中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h2结构域，其包含seq id no:62中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h3结构域，其包含seq id no:63中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段。
153、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:61的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:62的或由其组成的cdr-h2结构域、和/或包含seq id no:63的或由其组成的cdr-h3结构域。然而，优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:61的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:62的或由其组成的cdr-h2结构域以及包含seq id no:63的或由其组成的cdr-h3结构域。
154、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括重链可变(vh)区，其包含seq id no:67中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段。
155、优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l1结构域，其包含seq id no:64中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l2结构域，其包含seq id no:65中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l3结构域，其包含seq id no:66中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段。
156、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:64的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:65的或由其组成的cdr-l2结构域、和/或包含seq id no:66的或由其组成的cdr-l3结构域。优选地，然而，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:64的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:65的或由其组成的cdr-l2结构域以及包含seq id no:66的或由其组成的cdr-l3结构域。
157、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括轻链可变(vl)区，其包含seq id no:68中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段。
158、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括至少一个、至少两个、至少三个、至少四个、至少五个或至少六个cdr。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含至少cdr-h3。
159、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:61的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:62的或由其组成的cdr-h2结构域、包含seq id no:63的或由其组成的cdr-h3结构域、包含seq id no:64的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:65的或由其组成的cdr-l2结构域以及包含seq id no:66的或由其组成的cdr-l3结构域。
160、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:67的或由其组成的重链可变区以及包含seq id no:68的或由其组成的轻链可变区。
161、h2_k65p_l1
162、在一个实施方案中，抗体或其抗原结合片段在其中被称为h2_k65p_l1。
163、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h1结构域，其包含seq id no:69中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h2结构域，其包含seq id no:70中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h3结构域，其包含seq id no:71中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。
164、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:69的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:70的或由其组成的cdr-h2结构域、和/或包含seq id no:71的或由其组成的cdr-h3结构域。优选地，然而，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:69的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:70的或由其组成的cdr-h2结构域以及包含seq id no:71的或由其组成的cdr-h3结构域。
165、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括重链可变(vh)区，其包含seq id no:75中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。
166、优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l1结构域，其包含seq id no:72中基本上列出的序列或其变体或片段组成、或是由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l2结构域，其包含seq id no:73中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l3结构域，其包含seq id no:74中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
167、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:72的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:73的或由其组成的cdr-l2结构域、和/或包含seq id no:74的或由其组成的cdr-l3结构域。优选地，然而，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:72的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:73的或由其组成的cdr-l2结构域以及包含seq id no:74的或由其组成的cdr-l3结构域。
168、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括轻链可变(vl)区，其包含seq id no:76中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。
169、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括至少一个、至少两个、至少三个、至少四个、至少五个或至少六个cdr。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含至少cdr-h3。
170、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:69的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:70的或由其组成的cdr-h2结构域、包含seq id no:71的或由其组成的cdr-h3结构域、包含seq id no:72的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:73的或由其组成的cdr-l2结构域以及包含seq id no:74的或由其组成的cdr-l3结构域。
171、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:75的或由其组成的重链可变区以及包含seq id no:76的或由其组成的轻链可变区。
172、h2_g66q_l1
173、在一个实施方案中，抗体或其抗原结合片段在其中被称为h2_g66q_l1。
174、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h1结构域，其包含seq id no:77中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h2结构域，其包含seq id no:78中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h3结构域，其包含seq id no:79中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。
175、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:77的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:78的或由其组成的cdr-h2结构域、和/或包含seq id no:79的或由其组成的cdr-h3结构域。优选地，然而，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:77的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:78的或由其组成的cdr-h2结构域以及包含seq id no:79的或由其组成的cdr-h3结构域。
176、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括重链可变(vh)区，其包含seq id no:83中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。
177、优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l1结构域，其包含seq id no:80中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l2结构域，其包含seq id no:81中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l3结构域，其包含seq id no:82中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。
178、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:80的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:81的或由其组成的cdr-l2结构域、和/或包含seq id no:82的或由其组成的cdr-l3结构域。优选地，然而，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:80的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:81的或由其组成的cdr-l2结构域以及包含seq id no:82的或由其组成的cdr-l3结构域。
179、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括轻链可变(vl)区，其包含seq id no:84中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。
180、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括至少一个、至少两个、至少三个、至少四个、至少五个或至少六个cdr。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含至少cdr-h3。
181、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:77的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:78的或由其组成的cdr-h2结构域、包含seq id no:79的或由其组成的cdr-h3结构域、包含seq id no:80的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:81的或由其组成的cdr-l2结构域以及包含seq id no:82的或由其组成的cdr-l3结构域。
182、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:83的或由其组成的重链可变区以及包含seq id no:84的或由其组成的轻链可变区。
183、h3_m105p_l1
184、在一个实施方案中，抗体或其抗原结合片段在其中被称为h3_m105p_l1。
185、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h1结构域，其包含seq id no:85中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h2结构域，其包含seq id no:86中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h3结构域，其包含seq id no:87中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。
186、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:85的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:86的或由其组成的cdr-h2结构域、和/或包含seq id no:87的或由其组成的cdr-h3结构域。优选地，然而，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:85的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:86的或由其组成的cdr-h2结构域以及包含seq id no:87的或由其组成的cdr-h3结构域。
187、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括重链可变(vh)区，其包含seq id no:91中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。
188、优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l1结构域，其包含seq id no:88中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l2结构域，其包含seq id no:89中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l3结构域，其包含seq id no:90中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。
189、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:88的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:89的或由其组成的cdr-l2结构域、和/或包含seq id no:90的或由其组成的cdr-l3结构域。优选地，然而，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:88的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:89的或由其组成的cdr-l2结构域以及包含seq id no:90的或由其组成的cdr-l3结构域。
190、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括轻链可变(vl)区，其包含seq id no:92中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。
191、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括至少一个、至少两个、至少三个、至少四个、至少五个或至少六个cdr。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含至少cdr-h3。
192、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:85的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:86的或由其组成的cdr-h2结构域、包含seq id no:87的或由其组成的cdr-h3结构域、包含seq id no:88的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:89的或由其组成的cdr-l2结构域以及包含seq id no:90的或由其组成的cdr-l3结构域。
193、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:91的或由其组成的重链可变区以及包含seq id no:92的或由其组成的轻链可变区。
194、51b12_vh_l1
195、在一个实施方案中，抗体或其抗原结合片段在其中被称为51b12_vh_l1。
196、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h1结构域，其包含seq id no:93中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h2结构域，其包含seq id no:94中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h3结构域，其包含seq id no:95中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。
197、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:93的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:94的或由其组成的cdr-h2结构域、和/或包含seq id no:95的或由其组成的cdr-h3结构域。优选地，然而，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:93的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:94的或由其组成的cdr-h2结构域以及包含seq id no:95的或由其组成的cdr-h3结构域。
198、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括重链可变(vh)区，其包含seq id no:99中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。
199、优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l1结构域，其包含seq id no:96中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l2结构域，其包含seq id no:97中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l3结构域，其包含seq id no:98中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。
200、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:96的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:97的或由其组成的cdr-l2结构域、和/或包含seq id no:98的或由其组成的cdr-l3结构域。优选地，然而，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:96的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:97的或由其组成的cdr-l2结构域以及包含seq id no:98的或由其组成的cdr-l3结构域。
201、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括轻链可变(vl)区，其包含seq id no:100中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。
202、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括至少一个、至少两个、至少三个、至少四个、至少五个或至少六个cdr。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含至少cdr-h3。
203、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:93的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:94的或由其组成的cdr-h2结构域、包含seq id no:95的或由其组成的cdr-h3结构域、包含的或由其seq id no:96组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:97的或由其组成的cdr-l2结构域以及包含seq id no:98的或由其组成的cdr-l3结构域。
204、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:99的或由其组成的重链可变区以及包含seq id no:100的或由其组成的轻链可变区。
205、h2_t56h_l2
206、在一个实施方案中，抗体或其抗原结合片段在其中被称为h2_t56h_l2。
207、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h1结构域，其包含seq id no:101中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h2结构域，其包含seq id no:102中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h3结构域，其包含seq id no:103中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。
208、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:101的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:102的或由其组成的cdr-h2结构域、和/或包含seq id no:103的或由其组成的cdr-h3结构域。优选地，然而，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq idno:101的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:102的或由其组成的cdr-h2结构域以及包含seq id no:103的或由其组成的cdr-h3结构域。
209、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括重链可变(vh)区，其包含seq id no:107中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。
210、优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l1结构域，其包含seq id no:104中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l2结构域，其包含seq id no:105中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l3结构域，其包含seq id no:106中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。
211、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:104的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:105的或由其组成的cdr-l2结构域、和/或包含seq id no:106的或由其组成的cdr-l3结构域。优选地，然而，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq idno:104的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:105的或由其组成的cdr-l2结构域以及包含seq id no:106的或由其组成的cdr-l3结构域。
212、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括轻链可变(vl)区，其包含seq id no:108中基本上列出的序列或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成。
213、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括至少一个、至少两个、至少三个、至少四个、至少五个或至少六个cdr。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含至少cdr-h3。
214、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:101的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:102的或由其组成的cdr-h2结构域、包含seq id no:103的或由其组成的cdr-h3结构域、包含seq id no:104的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq idno:105的或由其组成的cdr-l2结构域、以及包含seq id no:106的或由其组成的cdr-l3结构域。
215、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:107的或由其组成的重链可变区以及包含seq id no:108的或由其组成的轻链可变区。
216、h2_t57h_l2
217、在一个实施方案中，抗体或其抗原结合片段在其中被称为h2_t57h_l2。
218、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h1结构域，其包含seq id no:109中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h2结构域，其包含seq id no:110中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h3结构域，其包含seq id no:111中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
219、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:109的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:110的或由其组成的cdr-h2结构域、和/或包含seq id no:111的或由其组成的cdr-h3结构域。优选地，然而，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq idno:109的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:110的或由其组成的cdr-h2结构域以及包含seq id no:111的或由其组成的cdr-h3结构域。
220、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括重链可变(vh)区，其包含seq id no:115中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
221、优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l1结构域，其包含seq id no:112中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l2结构域，其包含seq id no:113中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l3结构域，其包含seq id no:114中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
222、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:112的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:113的或由其组成的cdr-l2结构域、和/或包含seq id no:114的或由其组成的cdr-l3结构域。优选地，然而，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq idno:112的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:113的或由其组成的cdr-l2结构域以及包含seq id no:114的或由其组成的cdr-l3结构域。
223、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括轻链可变(vl)区，其包含seq id no:116中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
224、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括至少一个、至少两个、至少三个、至少四个、至少五个或至少六个cdr。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含至少cdr-h3。
225、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:109的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:110的或由其组成的cdr-h2结构域、包含seq id no:111的或由其组成的cdr-h3结构域、包含seq id no:112的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq idno:113的或由其组成的cdr-l2结构域、以及包含seq id no:114的或由其组成的cdr-l3结构域。
226、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:115的或由其组成的重链可变区以及包含seq id no:116的或由其组成的轻链可变区。
227、h2_y60k_l2
228、在一个实施方案中，抗体或其抗原结合片段在其中被称为h2_y60k_l2。
229、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h1结构域，其包含seq id no:117中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h2结构域，其包含seq id no:118中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h3结构域，其包含seq id no:119中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
230、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:117的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:118的或由其组成的cdr-h2结构域、和/或包含seq id no:119的或由其组成的cdr-h3结构域。优选地，然而，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq idno:117的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:118的或由其组成的cdr-h2结构域以及包含seq id no:119的或由其组成的cdr-h3结构域。
231、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括重链可变(vh)区，其包含seq id no:123中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
232、优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l1结构域，其包含seq id no:120中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l2结构域，其包含seq id no:121中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l3结构域，其包含seq id no:122中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
233、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:120的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:121的或由其组成的cdr-l2结构域、和/或包含seq id no:122的或由其组成的cdr-l3结构域。优选地，然而，该抗体或其抗原结合片段包括包含seq id no:120的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:121的或由其组成的cdr-l2结构域以及包含seq id no:122的或由其组成的cdr-l3结构域。
234、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括轻链可变(vl)区，其包含seq id no:124中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
235、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括至少一个、至少两个、至少三个、至少四个、至少五个或至少六个cdr。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含至少cdr-h3。
236、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:117的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:118的或由其组成的cdr-h2结构域、包含seq id no:119的或由其组成的cdr-h3结构域、包含seq id no:120的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq idno:121的或由其组成的cdr-l2结构域、以及包含seq id no:122的或由其组成的cdr-l3结构域。
237、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:123的或由其组成的重链可变区以及包含seq id no:124的或由其组成的轻链可变区。
238、h2_t63y_l2
239、在一个实施方案中，抗体或其抗原结合片段在其中被称为h2_t63y_l2。
240、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h1结构域，其包含seq id no:125中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h2结构域，其包含seq id no:126中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h3结构域，其包含seq id no:127中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
241、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:125的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:126的或由其组成的cdr-h2结构域、和/或包含seq id no:127的或由其组成的cdr-h3结构域。优选地，然而，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq idno:125的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:126的或由其组成的cdr-h2结构域以及包含seq id no:127的或由其组成的cdr-h3结构域。
242、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括重链可变(vh)区，其包含seq id no:131中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
243、优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l1结构域，其包含seq id no:128中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l2结构域，其包含seq id no:129中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l3结构域，其包含seq id no:130中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
244、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:128的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:129的或由其组成的cdr-l2结构域、和/或包含seq id no:130的或由其组成的cdr-l3结构域。优选地，然而，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq idno:128的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:129的或由其组成的cdr-l2结构域以及包含seq id no:130的或由其组成的cdr-l3结构域。
245、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括轻链可变(vl)区，其包含seq id no:132中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
246、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括至少一个、至少两个、至少三个、至少四个、至少五个或至少六个cdr。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含至少cdr-h3。
247、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:125的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:126的或由其组成的cdr-h2结构域、包含seq id no:127的或由其组成的cdr-h3结构域、包含seq id no:128的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq idno:129的或由其组成的cdr-l2结构域、以及包含seq id no:130的或由其组成的cdr-l3结构域。
248、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:131的或由其组成的重链可变区以及包含seq id no:132的或由其组成的轻链可变区。
249、h3_m105p_vl-par
250、在一个实施方案中，抗体或其抗原结合片段在其中被称为h3_m105p_vl-par。
251、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h1结构域，其包含seq id no:133中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h2结构域，其包含seq id no:134中基本上列出的序列或其变体或片段或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h3结构域，其包含seq id no:135中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
252、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:133的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:134的或由其组成的cdr-h2结构域、和/或包含seq id no:135的或由其组成的cdr-h3结构域。优选地，然而，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq idno:133的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:134的或由其组成的cdr-h2结构域以及包含seq id no:135的或由其组成的cdr-h3结构域。
253、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括重链可变(vh)区，其包含seq id no:139中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
254、优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l1结构域，其包含seq id no:136中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l2结构域，其包含seq id no:137中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l3结构域，其包含seq id no:138中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
255、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:136的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:137的或由其组成的cdr-l2结构域、和/或包含seq id no:138的或由其组成的cdr-l3结构域。优选地，然而，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq idno:136的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:137的或由其组成的cdr-l2结构域以及包含seq id no:138的或由其组成的cdr-l3结构域。
256、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括轻链可变(vl)区，其包含seq id no:140中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
257、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括至少一个、至少两个、至少三个、至少四个、至少五个或至少六个cdr。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含至少cdr-h3。
258、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:133的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:134的或由其组成的cdr-h2结构域、包含seq id no:135的或由其组成的cdr-h3结构域、包含seq id no:136的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq idno:137的或由其组成的cdr-l2结构域、以及包含seq id no:138的或由其组成的cdr-l3结构域。
259、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:139的或由其组成的重链可变区以及包含seq id no:140的或由其组成的轻链可变区。
260、h2_k65p_l2
261、在一个实施方案中，抗体或其抗原结合片段在其中被称为h2_k65p_l2。
262、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h1结构域，其包含seq id no:141中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h2结构域，其包含seq id no:142中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h3结构域，其包含seq id no:143中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
263、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:141的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:142的或由其组成的cdr-h2结构域、和/或包含seq id no:143的或由其组成的cdr-h3结构域。优选地，然而，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq idno:141的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:142的或由其组成的cdr-h2结构域以及包含seq id no:143的或由其组成的cdr-h3结构域。
264、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括重链可变(vh)区，其包含seq id no:147中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
265、优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l1结构域，其包含seq id no:144中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l2结构域，其包含seq id no:145中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l3结构域，其包含seq id no:146中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
266、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:144的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:145的或由其组成的cdr-l2结构域、和/或包含seq id no:146的或由其组成的cdr-l3结构域。优选地，然而，该抗体或其抗原结合片段包括包含seq id no:144的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:145的或由其组成的cdr-l2结构域以及包含seq id no:146的或由其组成的cdr-l3结构域。
267、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括轻链可变(vl)区，其包含seq id no:148中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
268、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括至少一个、至少两个、至少三个、至少四个、至少五个或至少六个cdr。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含至少cdr-h3。
269、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:141的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:142的或由其组成的cdr-h2结构域、包含seq id no:143的或由其组成的cdr-h3结构域、包含seq id no:144的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq idno:145的或由其组成的cdr-l2结构域、以及包含seq id no:146的或由其组成的cdr-l3结构域。
270、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:147的或由其组成的重链可变区以及包含seq id no:148的或由其组成的轻链可变区。
271、h2_g66q_l2
272、在一个实施方案中，抗体或其抗原结合片段在其中被称为h2_g66q_l2。
273、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h1结构域，其包含seq id no:149中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h2结构域，其包含seq id no:150中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h3结构域，其包含seq id no:151中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
274、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:149的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:150的或由其组成的cdr-h2结构域、和/或包含seq id no:151的或由其组成的cdr-h3结构域。优选地，然而，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq idno:149的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:150的或由其组成的cdr-h2结构域以及包含seq id no:151的或由其组成的cdr-h3结构域。
275、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括重链可变(vh)区，其包含seq id no:155中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
276、优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l1结构域，其包含seq id no:152中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l2结构域，其包含seq id no:153中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l3结构域，其包含seq id no:154中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
277、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:152的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:153的或由其组成的cdr-l2结构域、和/或包含seq id no:154的或由其组成的cdr-l3结构域。优选地，然而，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq idno:152的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:153的或由其组成的cdr-l2结构域以及包含seq id no:154的或由其组成的cdr-l3结构域。
278、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括轻链可变(vl)区，其包含seq id no:156中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
279、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括至少一个、至少两个、至少三个、至少四个、至少五个或至少六个cdr。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含至少cdr-h3。
280、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:149的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:150的或由其组成的cdr-h2结构域、包含seq id no:151的或由其组成的cdr-h3结构域、包含seq id no:152的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq idno:153的或由其组成的cdr-l2结构域、以及包含seq id no:154的或由其组成的cdr-l3结构域。
281、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:155的或由其组成的重链可变区以及包含seq id no:156的或由其组成的轻链可变区。
282、h3_m105p_l2
283、在一个实施方案中，抗体或其抗原结合片段在其中被称为h3_m105p_l2。
284、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h1结构域，其包含seq id no:157中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h2结构域，其包含seq id no:158中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h3结构域，其包含seq id no:159中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
285、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:157的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:158的或由其组成的cdr-h2结构域、和/或包含seq id no:159的或由其组成的cdr-h3结构域。优选地，然而，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq idno:157的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:158的或由其组成的cdr-h2结构域以及包含seq id no:159的或由其组成的cdr-h3结构域。
286、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括重链可变(vh)区，其包含seq id no:163中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
287、优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l1结构域，其包含seq id no:160中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l2结构域，其包含seq id no:161中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l3结构域，其包含seq id no:162中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
288、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:160的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:161的或由其组成的cdr-l2结构域、和/或包含seq id no:162的或由其组成的cdr-l3结构域。优选地，然而，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq idno:160的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:161的或由其组成的cdr-l2结构域以及包含seq id no:162的或由其组成的cdr-l3结构域。
289、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括轻链可变(vl)区，其包含seq id no:164中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
290、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括至少一个、至少两个、至少三个、至少四个、至少五个或至少六个cdr。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含至少cdr-h3。
291、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:157的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:158的或由其组成的cdr-h2结构域、包含seq id no:159的或由其组成的cdr-h3结构域、包含seq id no:160的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq idno:161的或由其组成的cdr-l2结构域、以及包含seq id no:162的或由其组成的cdr-l3结构域。
292、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:163的或由其组成的重链可变区以及包含seq id no:164的或由其组成的轻链可变区。
293、51b12_vh_l2
294、在一个实施方案中，抗体或其抗原结合片段在其中被称为51b12_vh_l2。
295、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h1结构域，其包含seq id no:165中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h2结构域，其包含seq id no:166中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h3结构域，其包含seq id no:167中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
296、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:165的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:166的或由其组成的cdr-h2结构域、和/或包含seq id no:167的或由其组成的cdr-h3结构域。优选地，然而，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq idno:165的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:166的或由其组成的cdr-h2结构域以及包含seq id no:167的或由其组成的cdr-h3结构域。
297、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括重链可变(vh)区，其包含seq id no:171中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
298、优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l1结构域，其包含seq id no:168中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l2结构域，其包含seq id no:169中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l3结构域，其包含seq id no:170中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
299、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:168的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:169的或由其组成的cdr-l2结构域、和/或包含seq id no:170的或由其组成的cdr-l3结构域。优选地，然而，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq idno:168的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:169的或由其组成的cdr-l2结构域以及包含seq id no:170的或由其组成的cdr-l3结构域。
300、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括轻链可变(vl)区，其包含seq id no:172中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
301、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括至少一个、至少两个、至少三个、至少四个、至少五个或至少六个cdr。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含至少cdr-h3。
302、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:165的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:166的或由其组成的cdr-h2结构域、包含seq id no:167的或由其组成的cdr-h3结构域、包含seq id no:168的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq idno:169的或由其组成的cdr-l2结构域、以及包含seq id no:170的或由其组成的cdr-l3结构域。
303、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:171的或由其组成的重链可变区以及包含seq id no:172的或由其组成的轻链可变区。
304、h2_t56h_vl-par
305、在一个实施方案中，抗体或其抗原结合片段在其中被称为h2_t56h_vl-par。
306、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h1结构域，其包含seq id no:173中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h2结构域，其包含seq id no:174中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h3结构域，其包含seq id no:175中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
307、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:173的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:174的或由其组成的cdr-h2结构域、和/或包含seq id no:175的或由其组成的cdr-h3结构域。优选地，然而，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq idno:173的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:174的或由其组成的cdr-h2结构域以及包含seq id no:175的或由其组成的cdr-h3结构域。
308、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括重链可变(vh)区，其包含seq id no:179中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
309、优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l1结构域，其包含seq id no:176中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l2结构域，其包含seq id no:177中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l3结构域，其包含seq id no:178中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
310、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:176的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:177的或由其组成的cdr-l2结构域、和/或包含seq id no:178的或由其组成的cdr-l3结构域。优选地，然而，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq idno:176的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:177的或由其组成的cdr-l2结构域以及包含seq id no:178的或由其组成的cdr-l3结构域。
311、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括轻链可变(vl)区，其包含seq id no:180中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
312、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括至少一个、至少两个、至少三个、至少四个、至少五个或至少六个cdr。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含至少cdr-h3。
313、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:173的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:174的或由其组成的cdr-h2结构域、包含seq id no:175的或由其组成的cdr-h3结构域、包含seq id no:176的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq idno:177的或由其组成的cdr-l2结构域、以及包含seq id no:178的或由其组成的cdr-l3结构域。
314、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:179的或由其组成的重链可变区以及包含seq id no:180的或由其组成的轻链可变区。
315、h2_t57h_vl-par
316、在一个实施方案中，抗体或其抗原结合片段在其中被称为h2_t57h_vl-par。
317、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h1结构域，其包含seq id no:181中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h2结构域，其包含seq id no:182中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h3结构域，其包含seq id no:183中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
318、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:181的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:182的或由其组成的cdr-h2结构域、和/或包含seq id no:183的或由其组成的cdr-h3结构域。优选地，然而，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq idno:181的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:182的或由其组成的cdr-h2结构域以及包含seq id no:183的或由其组成的cdr-h3结构域。
319、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括重链可变(vh)区，其包含seq id no:187中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
320、优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l1结构域，其包含seq id no:184中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l2结构域，其包含seq id no:185中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l3结构域，其包含seq id no:186中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
321、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括包含seq id no:184的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:185的或由其组成的cdr-l2结构域、和/或包含seq id no:186的或由其组成的cdr-l3结构域。优选地，然而，该抗体或其抗原结合片段包括包含seq id no:184的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:185的或由其组成的cdr-l2结构域以及包含seq id no:186的或由其组成的cdr-l3结构域。
322、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括轻链可变(vl)区，其包含seq id no:188中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
323、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括至少一个、至少两个、至少三个、至少四个、至少五个或至少六个cdr。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含至少cdr-h3。
324、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:181的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:182的或由其组成的cdr-h2结构域、包含seq id no:183的或由其组成的cdr-h3结构域、包含seq id no:184的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq idno:185的或由其组成的cdr-l2结构域、以及包含seq id no:186的或由其组成的cdr-l3结构域。
325、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:187的或由其组成的重链可变区以及包含seq id no:188的或由其组成的轻链可变区。
326、h2_y60k_vl-par
327、在一个实施方案中，抗体或其抗原结合片段在其中被称为h2_y60k_vl-par。
328、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h1结构域，其包含seq id no:189中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h2结构域，其包含seq id no:190中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h3结构域，其包含seq id no:191中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
329、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:189的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:190的或由其组成的cdr-h2结构域、和/或包含seq id no:191的或由其组成的cdr-h3结构域。优选地，然而，该抗体或其抗原结合片段包括包含seq id no:189的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:190的或由其组成的cdr-h2结构域以及包含seq id no:191的或由其组成的cdr-h3结构域。
330、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括重链可变(vh)区，其包含seq id no:195中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
331、优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l1结构域，其包含seq id no:192中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l2结构域，其包含seq id no:193中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l3结构域，其包含seq id no:194中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
332、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括包含seq id no:192的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:193的或由其组成的cdr-l2结构域、和/或包含seq id no:194的或由其组成的cdr-l3结构域。优选地，然而，该抗体或其抗原结合片段包括包含seq id no:192的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:193的或由其组成的cdr-l2结构域以及包含seq id no:194的或由其组成的cdr-l3结构域。
333、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括轻链可变(vl)区，其包含seq id no:196中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
334、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括至少一个、至少两个、至少三个、至少四个、至少五个或至少六个cdr。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含至少cdr-h3。
335、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括包含seq id no:189的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:190的或由其组成的cdr-h2结构域、包含seq id no:191的或由其组成的cdr-h3结构域、包含seq id no:192的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seqidno:193的或由其组成的cdr-l2结构域、以及包含seq id no:194的或由其组成的cdr-l3结构域。
336、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:195的或由其组成的重链可变区以及包含seq id no:196的或由其组成的轻链可变区。
337、h2_t63y_vl-par
338、在一个实施方案中，抗体或其抗原结合片段在其中被称为h2_t63y_vl-par。
339、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h1结构域，其包含seq id no:197中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h2结构域，其包含seq id no:198中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h3结构域，其包含seq id no:199中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
340、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:197的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:198组成的cdr-h2结构域、和/或包含seq id no:199组成的cdr-h3结构域。优选地，然而，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:197组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:198组成的cdr-h2结构域以及包含seq id no:199组成的cdr-h3结构域。
341、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括重链可变(vh)区，其包含seq id no:203中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
342、优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l1结构域，其包含seq id no:200中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l2结构域，其包含seq id no:201中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l3结构域，其包含seq id no:202中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
343、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:200的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:201的或由其组成的cdr-l2结构域、和/或包含seq id no:202的或由其组成的cdr-l3结构域。优选地，然而，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq idno:200的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:201的或由其组成的cdr-l2结构域以及包含seq id no:202的或由其组成的cdr-l3结构域。
344、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括轻链可变(vl)区，其包含seq id no:204中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
345、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括至少一个、至少两个、至少三个、至少四个、至少五个或至少六个cdr。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含至少cdr-h3。
346、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:197的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:198的或由其组成的cdr-h2结构域、包含seq id no:199的或由其组成的cdr-h3结构域、包含seq id no:200的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq idno:201的或由其组成的cdr-l2结构域、以及包含seq id no:202的或由其组成的cdr-l3结构域。
347、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:203的或由其组成的重链可变区以及包含seq id no:204的或由其组成的轻链可变区。
348、h2_k65p_vl-par
349、在一个实施方案中，抗体或其抗原结合片段在其中被称为h2_k65p_vl-par。
350、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h1结构域，其包含seq id no:205中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h2结构域，其包含seq id no:206中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h3结构域，其包含seq id no:207中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
351、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:205的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:206的或由其组成的cdr-h2结构域、和/或包含seq id no:207的或由其组成的cdr-h3结构域。优选地，然而，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq idno:205的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:206的或由其组成的cdr-h2结构域以及包含seq id no:207的或由其组成的cdr-h3结构域。
352、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括重链可变(vh)区，其包含seq id no:211中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
353、优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l1结构域，其包含seq id no:208中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l2结构域，其包含seq id no:209中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l3结构域，其包含seq id no:210中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
354、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:208的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:209的或由其组成的cdr-l2结构域、和/或包含seq id no:210的或由其组成的cdr-l3结构域。优选地，然而，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq idno:208的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:209的或由其组成的cdr-l2结构域以及包含seq id no:210的或由其组成的cdr-l3结构域。
355、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括轻链可变(vl)区，其包含seq id no:212中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
356、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括至少一个、至少两个、至少三个、至少四个、至少五个或至少六个cdr。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含至少cdr-h3。
357、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:205的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:206的或由其组成的cdr-h2结构域、包含seq id no:207的或由其组成的cdr-h3结构域、包含seq id no:208的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq idno:209的或由其组成的cdr-l2结构域、以及包含seq id no:210的或由其组成的cdr-l3结构域。
358、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:211的或由其组成的重链可变区以及包含seq id no:212的或由其组成的轻链可变区。
359、h2_g66q_vl-par
360、在一个实施方案中，抗体或其抗原结合片段在其中被称为h2_g66q_vl-par。
361、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h1结构域，其包含seq id no:213中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h2结构域，其包含seq id no:214中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包括cdr-h3结构域，其包含seq id no:215中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
362、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:213的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:214的或由其组成的cdr-h2结构域、和/或包含seq id no:215的或由其组成的cdr-h3结构域。优选地，然而，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq idno:213的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:214的或由其组成的cdr-h2结构域以及包含seq id no:215的或由其组成的cdr-h3结构域。
363、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括重链可变(vh)区，其包含seq id no:219中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
364、优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l1结构域，其包含seq id no:216中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l2结构域，其包含seq id no:217中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含cdr-l3结构域，其包含seq id no:218中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
365、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:216的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:217的或由其组成的cdr-l2结构域、和/或包含seq id no:218的或由其组成的cdr-l3结构域。优选地，然而，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq idno:216的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq id no:217的或由其组成的cdr-l2结构域以及包含seq id no:218的或由其组成的cdr-l3结构域。
366、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括轻链可变(vl)区，其包含seq id no:220中基本上列出的序列或其变体或片段、或由该序列或其变体或片段组成。
367、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括至少一个、至少两个、至少三个、至少四个、至少五个或至少六个cdr。优选地，该抗体或其抗原结合片段包含至少cdr-h3。
368、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:213的或由其组成的cdr-h1结构域、包含seq id no:214的或由其组成的cdr-h2结构域、包含seq id no:215的或由其组成的cdr-h3结构域、包含seq id no:216的或由其组成的cdr-l1结构域、包含seq idno:217的或由其组成的cdr-l2结构域、以及包含seq id no:218的或由其组成的cdr-l3结构域。
369、优选地，该抗体或其抗原结合片段包括：包含seq id no:219的或由其组成的重链可变区以及包含seq id no:220的或由其组成的轻链可变区。
370、在本发明的第二方面，提供了一种抗体或其抗原结合片段，其中抗体或其抗原结合片段特异性结合zip12，并包括六个cdr序列，如图9b中为每种抗体所示。
371、例如，在一个实施方案中，抗体或其抗原结合片段优选包括针对被称为“h3_w99h_l1”的抗体所述的六个cdr序列，如图9b所示，即cdr-h1＝seq id no:13；cdr-h2＝seqidno:14；cdr-h3＝seq id no:15；cdr-l1＝seq id no:16；cdr-l2＝seq id no:17；cdr-l3＝seq id no:18。图9b所示的每种其他抗体的cdr序列也是同理。
372、此外，抗体或其抗原结合片段优选包括如图9b中为每种抗体所示出的vh/vl序列对。例如，在一个实施方案中，抗体或其抗原结合片段优选包括针对被称为“h3_w99h_l1”的抗体克隆的vh/vl序列，如图9b所示，即vh＝seq id no:19；vl＝seq id no:20。图9b所示的每种其他抗体的vh/vl序列也是同理。
373、如图9a中针对称为“51b12亲本”的抗体克隆所示，本发明的抗体或其抗原结合片段可以不包括六个cdr序列(或是vh/vl序列)。
374、第二方面的抗体或其抗原结合片段特异性结合zip12的细胞外结构域，并识别包含adllqvlsagdhpphnhsrs(seq id no:252)或其变体或片段组成的表位。优选地，第二方面的抗体或其抗原结合片段特异性结合zip12的细胞外结构域，并识别包含llqvlsagdhpphnhsrs(seq id no:1)或其变体或片段组成的表位。抗体或其抗原结合片段的表位可以如第一方面中所定义的。
375、有利地，根据本发明的第一方面和第二方面的抗体或其抗原结合片段的抗zip12活性意味着其本身具有作为治疗剂的效用，并且可以用于治疗、改善或预防缺氧诱导的或缺氧相关病症，特别是肺动脉高压。
376、相应地，在发明的第三方面，提供了一种根据第一方面或第二方面的抗体或其抗原结合片段在治疗中的应用。
377、在本发明的第四方面，提供了根据第一方面或第二方面的抗体或其抗原结合片段，用于治疗、预防或改善缺氧相关病症。
378、根据本发明的第五方面，提供了一种治疗、预防或改善受试者缺氧相关病症的方法，该方法包括向需要这种治疗的患者施用或已经施用治疗有效量的根据第一方面或第二方面的抗体或其抗原结合片段。
379、缺氧相关病症可以从包含以下的组中选择：缺血再灌注损伤(iri)，心血管疾病，缺血性心脏病，缺血性脑疾病，黄斑变性，眼缺血综合征，缺血性视神经病变(ion)，糖尿病视网膜病变，关节炎，炎症，败血症，败血症引起的休克，肾脏疾病，组织纤维化，胃肠道疾病，神经退行性疾病，呼吸窘迫综合征，支气管肺发育不良，肺动脉高压，缺氧性肺动脉高压，严重肺动脉高压，copd，特发性肺纤维化(ipf)，糖尿病视网膜病变，糖尿病，角膜新生血管，致病性血管生长，癌症和肌肉骨骼疾病。
380、本发明人已经证明，肿瘤的缺氧核心是缺氧刺激的新血管生成的部位(zhao等人，2015,the zinc transporter,zip12,regulates the pulmonary vascular response tochronic hypoxia,nature,vol:524,issn:0028-0836,pages:356-360)，缺氧被认为是肿瘤的普遍标志，并导致了对放射和化疗的抗性。因此，zip12已被发明人证明在缺氧条件下被上调，并且是疾病进展的关键因素，并已经被发明人确定为癌症的理想治疗靶标。在肿瘤微环境中抑制zip12可能会限制肿瘤的血液供应，从而限制肿瘤生长和/或诱导缺氧性肿瘤细胞死亡。
381、因此，在一个实施方案中，缺氧相关病症是癌症。
382、优选地，治疗、预防或改善癌症的应用或方法包括抑制血管生成。优选地，该应用或方法包括限制对肿瘤的血液供应。
383、然而优选地，缺氧相关病症是肺动脉高压。最优选地，缺氧相关病症是缺氧性肺动脉高压。
384、应当理解，根据本发明的抗体或其抗原结合片段(在本文中统称为“制剂”)可用于单一疗法(例如，单独使用抗体或其抗原结合片段)，用于治疗、改善或预防缺氧相关病症，优选为肺动脉高压。或者，根据本发明的制剂可用于作为治疗、改善或预防缺氧相关病症(优选肺动脉高压)的已知疗法(已知治疗物)的辅助疗法或与之组合，这样的已知疗法例如：抗凝血剂，例如华法林(warfarin)、利尿剂(diuretics)、地高辛(digoxin)；内皮素受体拮抗剂，例如波生坦(bosentan)、安立生坦(ambrisentan)和马西坦(macitentan)；磷酸二酯酶5抑制剂，如西地那非(sildenafil)和他达拉非(tadalafil)；前列腺素，如依前列醇(epoprostenol)、伊洛前列素(iloprost)和曲前列素(treprostinil)；可溶性鸟苷酸环化酶刺激剂，如里奥雪卡(riociguat)；以及钙通道阻滞剂硝苯地平(nifedipine)、地尔硫卓(diltiazem)、尼卡地平(nicardipine)和氨氯地平(amlodipine)。
385、根据本发明的制剂可以组合成具有多种不同形式的组合物，具体取决于组合物的使用方式。因此，例如，该组合物可以是粉末、片剂、胶囊、液体、软膏、乳膏、凝胶、水凝胶、气溶胶、喷雾、胶束溶液、透皮贴剂、脂质体悬浮液或任何其他合适形式的形式，可以给需要治疗的人或动物服用。应当理解，根据本发明的药物载体应该是被给予它的受试者能够良好耐受的载体。
386、包含本发明的制剂的药物可以以多种方式使用。例如，可能需要口服给药，在这种情况下，制剂可以包含在可以例如以片剂、胶囊或液体的形式口服摄入的组合物中。包含本发明制剂和药物的组合物可以通过吸入(例如鼻内)给药。组合物也可以配制用于局部使用。例如，可以将面霜或软膏涂抹在皮肤上。
387、根据本发明的药剂和药物也可以结合在缓释或延迟释放装置中。例如，这种装置可以插入皮肤上或皮肤下，并且药物可以在数周甚至数月内释放。该装置可以位于至少邻近治疗部位的位置。当需要用根据本发明使用的药剂进行长期治疗并且通常需要频繁给药(例如至少每天注射)时，这种装置可能是特别有利的。
388、在一个优选的实施方案中，根据本发明的药剂和药物可以通过注射到血流中或直接注射到需要治疗的部位来给药于受试者。注射可以是静脉内注射(推注或输注)或皮下注射(推注或输注)。
389、应当理解，所需抗体和片段(即制剂)的数量取决于其生物活性和生物利用度，而生物利用度又取决于给药方式、制剂的理化特性，以及它是用作单一疗法还是用于联合疗法。给药频率也会受到受试者体内药剂半衰期的影响。给药的最佳剂量可由本领域技术人员确定，并将随着使用的特定药剂、药物组合物的强度、给药方式和肺动脉高压的进展而变化。取决于接受治疗的特定受试者的其他因素将导致需要调整剂量，包括受试者年龄、体重、性别、饮食和给药时间。
390、一般来说，本发明的药剂的日剂量在0.01μg/kg体重和100mg/kg体重之间可用于治疗、改善或预防诸如肺动脉高压的病症，具体日剂量取决于使用哪种制剂。更优选地，制剂的日剂量在1μg/kg体重和100mg/kg体重之间，更优选地在10μg/kg和10mg/kg体重之间，最优选地在约100μg/kg和10mg/kg体重之间。
391、该制剂可以在肺动脉高压发作之前、期间或之后给药。每日剂量可作为一次给药(例如，每日一次注射)。或者，该制剂可能需要在一天内给药两次或多次。例如，制剂可以分两次(或更多次，取决于正在治疗的肺动脉高压的严重程度)给药，日剂量在0.07μg和700mg(即，假设体重为70kg)。接受治疗的患者可以在醒来时服用第一剂，然后在晚上服用第二剂(如果是两剂的方案)，或者之后每隔3或4小时服用一次。或者，可以使用缓释装置向患者提供最佳剂量的本发明药剂，而不需要给予重复剂量。已知的程序，例如制药工业常规使用的程序(例如体内实验、临床试验等)，可以用于形成本发明的制剂的特定制剂和精确的治疗方案(例如制剂的日剂量和给药频率)。
392、在本发明的第六方面，提供了一种药物组合物，其包括根据第一方面或第二方面的抗体或其抗原结合片段、以及任选的药学上可接受的载体。
393、该药物组合物优选为抗高血压药物，即用于治疗性改善、预防或治疗肺动脉高压的药物制剂。
394、本发明还在第七方面中提供了制备根据第六方面的药物组合物的方法，该方法包括将治疗有效量的第一方面或第二方面的抗体或其抗原结合片段与药学上可接受的载体组合。
395、抗体或其抗原结合片段可以如关于第一方面或第二方面中所定义。
396、“受试者”可能是脊椎动物、哺乳动物或家畜。因此，根据本发明的药物可用于治疗任何哺乳动物，例如牲畜(例如马)、宠物，或者可以用于其他兽医应用。最优选地，受试者是人。
397、抗体或其抗原结合片段的“治疗有效量”是当给予受试者时，是治疗肺动脉高压或产生所需效果所需的药剂量的任何量。
398、例如，所使用的抗体或其片段的治疗有效量可以为约0.1ng/kg至约100mg/kg，优选为约1ng/kg至约10mg/kg。优选抗体或片段的量为约10ng/kg至约10mg/kg，最优选约50ng/kg至约5mg/kg。
399、本文所指的“可药用载体”是本领域技术人员已知的可用于配制药物组合物的任何已知化合物或已知化合物的组合。
400、在一个实施方案中，，药学上可接受的载体可以是固体，并且组合物可以是粉末或片剂的形式。固体药学上可接受的载体可以包括一种或多种物质，其也可以用作调味剂、润滑剂、增溶剂、悬浮剂、染料、填料、增粘剂、压缩助剂、惰性粘合剂、甜味剂、防腐剂、染料、涂层或片剂崩解剂。载体也可以是封装材料。在粉末中，载体是与本发明的细碎活性剂混合的细碎固体。在片剂中，活性剂可与具有必要压缩特性的载体以适当比例混合，并按所需形状和尺寸压实。粉末和片剂优选含有高达99％的活性剂。合适的固体载体包括，例如磷酸钙、硬脂酸镁、滑石、糖、乳糖、糊精、淀粉、明胶、纤维素、聚乙烯吡咯烷、低熔点蜡和离子交换树脂。在另一个实施方案中，药物载体可以是凝胶，并且组合物可以是乳膏或类似物的形式。
401、然而，药物载体可以是液体，并且药物组合物是溶液的形式。液体载体用于制备溶液、悬浮液、乳液、糖浆、酏剂(elixirs)和加压组合物。本发明的活性剂可以溶解或悬浮在药学上可接受的液体载体中，例如水、有机溶剂、二者的混合物或药学上可接收的油或脂肪。液体载体可以包含其他合适的药物添加剂，例如增溶剂、乳化剂、缓冲剂、防腐剂、甜味剂、调味剂、悬浮剂、增稠剂、着色剂、粘度调节剂、稳定剂或渗透调节剂。用于口服和非肠道给药的液体载体的合适实例包括水(部分含有如上所述的添加剂，例如纤维素衍生物，优选羧甲基纤维素钠溶液)、醇(包括一元醇和多元醇，例如二醇)及其衍生物，以及油(例如分馏椰子油和花生油)。对于非肠道给药，载体也可以是油性酯，如油酸乙酯和肉豆蔻酸异丙酯。无菌液体载体可用于非肠道给药的无菌液体形式组合物。用于加压组合物的液体载体可以是卤代烃或其他药学上可接受的推进剂(propellant)。
402、作为无菌溶液或悬浮液的液体药物组合物可以通过例如肌内注射、鞘内注射、硬膜外注射、腹膜内注射、静脉内注射，特别是皮下注射来使用。该药剂可以制备成无菌固体组合物，其可以在施用时使用无菌水、盐水或其他适当的无菌可注射培养基溶解或悬浮。
403、本发明的制剂和组合物可以无菌溶液或悬浮液的形式口服，其中含有其他溶质或悬浮剂(例如，足够的盐水或葡萄糖使溶液等渗)、胆汁盐、金合欢(acacia)、明胶、山梨糖醇单油酸酯、聚山梨酯80(山梨醇及其酸酐与环氧乙烷共聚的油酸酯)等。根据本发明使用的制剂也可以以液体或固体组合物的形式进行口服。适合口服的组合物包括固体形式，如丸剂、胶囊、颗粒、片剂和粉剂；以及液体形式，如溶液、糖浆、酏剂和悬浮液。适用于肠外给药的形式包括无菌溶液、乳剂和悬浮液。
404、本发明还扩展至制备第一方面或第二方面的抗体方法，以及如此产生的抗体。
405、在第八方面，提供了通过以下方法获得的抗体或其抗原结合片段：
406、(i)用zip12细胞外表位免疫宿主生物体，zip12细胞外表位包含seq id no:252或seq id no:1或其变体或片段、或是由该序列或其变体或片段组成；以及
407、(ii)从宿主收集抗体或其抗原结合片段。
408、宿主可以是哺乳动物，并且可以是人、兔或小鼠。
409、表位可以是线性的或构象的。表位可能变性或折叠。然而，优选地，用折叠的表位来免疫宿主。
410、优选地，该方法包括给宿主动物放血，然后优选从血液，最优选血清中收集抗体或其抗原结合片段。优选地，使血清通过具有共价结合的肽载体的重力柱。洗涤后，优选将抗体或其抗原结合片段在优选为酸性缓冲液的缓冲液中洗脱，然后可以中和该溶液。该方法可以进一步包括对合适的缓冲液(例如pbs)进行透析并可选择进行冻干。
411、在本发明的第九方面，提供了编码第一方面或第二方面中定义的抗体或其抗原结合片段的多核苷酸序列。
412、在本发明的第十方面，提供了一种表达盒，其包含根据第九方面的多核苷酸序列。
413、编码本发明的抗体或抗原结合片段的多核苷酸序列优选包含在重组载体中，例如用于递送到目的宿主细胞中以产生抗体或其抗原结合片段的重组载体。
414、相应地，在本发明的第十一方面，提供了包含根据第十方面的表达盒的重组载体。
415、编码第一方面或第二方面的抗体或其抗原结合片段的载体可以例如是质粒、粘粒或噬菌体和/或病毒载体。这种重组载体在本发明的递送系统中非常有用，用于用核苷酸序列转化细胞。核苷酸序列可以优选是dna序列，并且正是该dna序列编码形成第一方面的抗体或其抗原结合片段的抗体或其抗原结合片段。
416、编码第一方面或第二方面的抗体或其抗原结合片段的重组载体也可以包括其他功能元件。例如，它们可以进一步包含多种其他功能元件，包括用于在将载体引入宿主细胞后启动转基因表达的合适启动子。例如，载体优选能够在宿主细胞的细胞核中自主复制。在这种情况下，重组载体中可能需要诱导或调节dna复制的元件。或者，可以设计重组载体，使其整合到宿主细胞的基因组中。在这种情况下，设想有利于靶向整合的dna序列(例如通过同源重组)。合适的启动子可以包括sv40启动子、cmv、ef1a、pgk、病毒长末端重复序列以及诱导型启动子，作为实例，例如四环素诱导系统。盒或载体还可以包含终止子，例如β-珠蛋白、sv40多腺苷酸化序列或合成多腺苷酸化序列。重组载体还可以包含启动子或调节子或增强子，以根据需要控制核酸的表达。
417、该载体还可以包含编码可以在克隆过程中用作选择标记的基因的dna，即能够选择已经转染或转化的细胞，并且能够选择携带掺入异源dna的载体的细胞。例如，设想对氨苄青霉素、新霉素、嘌呤霉素或氯霉素具有抗性。另外，选择标记基因可以在与含有转基因的载体同时使用的不同载体中。盒或载体还可以包含涉及调节核苷酸序列表达或用于将表达的多肽靶向宿主细胞的某一部分的dna。
418、可以通过合适的手段将纯化的载体直接插入宿主细胞中，例如直接内吞摄取。可以通过转染、感染、电穿孔、显微注射、细胞融合、原生质体融合、磷酸钙、基于阳离子脂质的脂质转染、基于聚合物或树枝状聚合物的方法(dendrimer-based methods)或弹道轰击(ballistic bombardment)将载体直接引入宿主细胞(例如真核或原核细胞)。或者，可以使用粒子枪将本发明的载体直接引入宿主细胞中。
419、可选地，递送系统可以将多核苷酸提供给宿主细胞而不将其掺入载体中。例如，核酸分子可以掺入脂质体或病毒颗粒内。可选地，可以通过合适的手段例如直接内吞摄取将“裸”多核苷酸插入宿主细胞中。
420、在本发明的第十二方面，提供了一种宿主细胞，其包含根据第九方面的多核苷酸序列、根据第十方面的表达盒或根据第十一方面的载体。
421、宿主细胞可以是真核或原核宿主细胞。优选地，宿主细胞是真核宿主细胞。更优选地，宿主细胞是哺乳动物宿主细胞，例如ns0鼠骨髓瘤细胞、per.人细胞、人类胚胎肾293细胞或中国仓鼠卵巢(cho)细胞。最优选地，宿主细胞是cho细胞。
422、在第十三方面，提供了一种制备第一方面或第二方面的抗体或其抗原结合片段的方法，该方法包括：
423、a)将第十一方面的重组载体引入宿主细胞；以及
424、b)在能够产生根据第一方面或第二方面的抗体或其抗原结合片段的条件下培养宿主细胞。
425、步骤a)中的宿主细胞可以是真核或原核宿主细胞。优选地，宿主细胞是真核宿主细胞。更优选地，宿主细胞是哺乳动物宿主细胞，例如ns0鼠骨髓瘤细胞、per.人细胞、人类胚胎肾293细胞或中国仓鼠卵巢(cho)细胞。最优选地，宿主细胞是cho细胞。
426、该方法还可以进一步包括(c)采集、离心和/或过滤细胞培养基以获得包含该抗体或其抗原结合片段的细胞培养上清液。
427、该方法还可以进一步包括(d)从细胞培养上清液中分离和纯化抗体或其抗原结合片段。优选地，通过至少一个色谱步骤进行纯化。
428、合适的色谱步骤包括亲和层析和/或离子交换色谱。优选地，亲和层析是蛋白a层析。离子交换色谱可以是阴离子交换色谱和/或阳离子交换色谱。
429、优选地，步骤(d)包括通过以下方法从细胞培养上清液中分离和纯化抗体或其抗原结合片段：
430、i)蛋白a层析；
431、ii)阴离子交换色谱；和/或
432、iii)阳离子交换色谱。
433、该方法还可以进一步包括(e)过滤由步骤(d)产生的纯化的抗体或其抗原结合片段。优选地，步骤(e)包括病毒过滤。因此，优选使用病毒滤膜过滤由步骤(d)产生的纯化的抗体或其抗原结合片段。合适的膜对本领域技术人员来说是已知的。
434、如本文所讨论的，在易受缺氧诱导的肺动脉高压影响的大鼠、奶牛和人类的重塑肺小动脉中，zip12表达在许多细胞类型中增加，包括内皮细胞、平滑肌细胞和间质细胞。因此，鉴于本发明的抗体能够结合包含seq id no:252和/或seq id no:1或其变体或片段组成的zip12细胞外表位，通过检测zip12的存在并确定其浓度，该抗体或其抗原结合片段可用于作为一种稳健的诊断工具。
435、因此，在第十四方面，提供了根据第一方面或第二方面的抗体或其抗原结合片段在诊断或预断(预后)中的应用。
436、根据本发明的第十五方面，提供了一种根据第一方面或第二方面的抗体或其抗原结合片段在诊断或预断缺氧相关病症中的应用。
437、根据第十六方面，提供了一种诊断或预断受试者缺氧相关病症的方法，该方法包括用根据第一方面或第二方面的抗体或其抗原结合片段检测从受试者获得的生物样品中的zip12。
438、优选地，缺氧相关病症选自：缺血再灌注损伤(iri)、心血管疾病、缺血性心脏病、缺血性脑病症、黄斑变性、眼缺血综合征、缺血性视神经病变(ion)、糖尿病性视网膜病、关节炎、炎症、败血症、败血症诱发的休克、肾病、组织纤维化、胃肠疾病、神经退行性疾病、呼吸窘迫综合征、支气管肺发育不良、肺动脉高压、缺氧性肺动脉高压、严重肺动脉高压、慢性阻塞性肺病(copd)、特发性肺纤维化(ipf)、糖尿病视网膜病变、糖尿病、角膜新血管形成、致病性血管生长以及肌肉骨骼疾病。
439、优选地，缺氧相关病症是癌症或肺动脉高压。最优选地，缺氧相关病症是肺动脉高压。
440、该方法可以是体外或离体方法。优选地，该方法是体外方法。
441、上述应用和方法可以包括确定受试者中zip12的表达水平，优选地，其中，与来自健康对照群体的参考浓度相比时，生物样品中zip12浓度的增加指示肺动脉高压或不良的预后。
442、在一个实施方案中，肺中zip12的存在可被认为是肺动脉高压或不良预后的指征。zip12的存在可以通过免疫细胞化学检测。
443、在一个实施方案中，与来自健康对照群体的参考相比，zip12增加1倍表明肺动脉高压或不良的预后。在一个实施方案中，与来自健康对照群体的参考相比，zip12增加2倍、3倍、4倍或5倍表明肺动脉高压或不良的预后。在一个实施方案中，与来自健康对照群体的参考相比，zip12增加10倍、50倍或100倍表明肺动脉高压或不良的预后。
444、根据本发明的第十七方面，提供了一种试剂盒，用于诊断患有缺氧相关病症的受试者，或用于提供受试者病症的预断，该试剂盒包含根据第一方面或第二方面的抗体或其抗原结合片段，用于检测来自受试者的样品中的zip12。
445、该试剂盒可以进一步包括使用说明书和/或用于从受试者获得生物样品的容器。
446、优选地，缺氧相关病症如本文中所定义，并且优选为肺动脉高压。
447、预后可能与确定已诊断患有肺动脉高压的受试者的治疗结果有关。预后可以涉及预测受试者中肺动脉高压的进展或改善速率和/或持续时间，存活概率和/或各种治疗方案的功效。因此，不良预后可能表明肺动脉高压进展、存活概率低和治疗方案疗效降低。良好预后可能表明肺动脉高压得到缓解、存活率提高、以及治疗方案疗效提高。
448、优选地，样品包含生物样品。样品可以是从可从其获得蛋白质的受试者可获得的任何材料。
449、生物样品可以是组织或生物流体。生物样品可以是从可从其获得内皮细胞、平滑肌细胞和/或间质细胞的受试者获得的任何材料。此外，样本可以是血液、血浆、血清、脊髓液、尿液、汗液、唾液、泪液、乳房抽吸物、母乳、前列腺液、精液、阴道液、粪便、宫颈刮伤、细胞、羊水、眼内液、粘液、呼吸水分、动物组织、细胞裂解物、肿瘤组织、头发、皮肤、颊刮、淋巴、间质液、指甲、骨髓、软骨、朊病毒、骨粉、耳蜡、淋巴、肉芽肿、癌症活组织检查或其组合。
450、样品可以是液体吸出物。例如，样品可以是支气管肺泡灌洗(bal)、腹水、胸膜灌洗或心包灌洗。
451、样品可以包含血液、尿液、组织等。在一个优选实施方案中，生物样品包含血液样品。血液可以是静脉或动脉血。可以立即测定血液样品。或者，血液样品可以在低温下储存，例如在冰箱中，或甚至在进行该方法之前冷冻。或者，在进行该方法之前，血液样品可以在室温下储存，例如在18℃至22℃之间。血液样品可以包含血清。血液样品可以包含血浆。然而，优选地，检测在全血上进行，最优选地血液样品是外周血。
452、在与本发明的抗体接触之前，血液可以进一步处理。例如，可以加入抗凝血剂，例如柠檬酸盐(例如柠檬酸钠)、水蛭素(hirudin)、肝素，ppack或氟化钠。因此，样品收集容器可以包含抗凝血剂以防止血液样品凝结。
453、优选地，样品可以包含内皮细胞、平滑肌细胞和/或间质细胞，优选肺内皮细胞、平滑肌细胞和/或间质细胞。
454、应当理解，本发明延伸至其任何核酸或肽或变体、衍生物或类似物，其基本上包含本文所述序列中的任何序列的氨基酸或核酸序列，包括变体或其片段。术语“基本上(substantially)是该氨基酸/核苷酸/肽序列”、“变体”和“片段”可以是与本文提及的任何一个序列的氨基酸/核苷酸/肽序列具有至少40％序列同一性的序列，例如与本文提及的任何序列具有40％的序列同一性的序列。
455、也可以设想氨基酸/多核苷酸/多肽序列与上述任何序列的序列同一性大于65％，更优选大于70％，甚至更优选大于75％，更优选大于80％。优选地，氨基酸/核苷酸/多肽序列与本文提及的任何序列具有至少85％的同一性，更优选地至少90％的同一性，甚至更优选地至少92％的同一性，甚至更优选地至少95％的同一性，甚至更优选地至少97％的同一性，甚至更优选地至少98％的同一性，最优选地与本文提及的任何序列有至少99％的同一性。
456、本领域技术人员了解如何计算两个氨基酸/多核苷酸/多肽序列之间的百分比同一性。为了计算两个氨基酸/多核苷酸/多肽序列之间的同一性百分比，必须首先制备两个序列的比对，然后计算序列同一性值。两个序列的同一性百分比可以取不同的值，具体取决于：(i)用于比对序列的方法，例如，clustalw、blast、fasta、smith-waterman(在不同程序中实现)，或来自3d的结构比对比较；(ii)比对方法使用的参数，例如局部比对与全局比对，使用的对得分矩阵(例如blosum62、pam250、gonnet等)和空位罚分(gap-penalty)，例如函数形式和常数。
457、在进行了比对之后，有许多不同的方法来计算两个序列之间的百分比同一性。例如，可以将相同数目除以：(i)最短序列的长度；(ii)比对长度；(iii)序列的平均长度；(iv)非空位位置的数目；或(v)不包括突出部分(overhangs)的等效位置(equivalencedpositions)的数目。此外，应当理解，百分比同一性也强烈依赖于长度。因此，一对序列越短，人们可能期望偶然出现的序列同一性就越高。
458、因此，可以理解的是，蛋白质或dna序列的准确比对是一个复杂的过程。流行的多重比对程序clustalw(thompson等，1994，nucleic acids research，224673-4680；thompson等，1997，nucleic acids research，244876-4882)是根据本发明产生蛋白质或dna多重比对的首选方法。clustalw的合适参数可以如下：对于dna比对：gap open penalty＝15.0,gap extension penalty＝6.66,matrix＝identity。对于蛋白质比对：gap openpenalty＝10.0,gap extension penalty＝0.2,matrix＝gonnet。对于dna和蛋白质比对：endgap＝-1，gapdist＝4。本领域技术人员能够意识到，可能有必要改变这些和其他参数以实现最佳序列比对。
459、优选地，然后，两个氨基酸/多核苷酸/多肽序列之间的百分比同一性的计算可以根据(n/t)*100这样的比对来计算，其中n是序列共享相同残基的位置的数量，t是包括空位和包括或不包括突出部分的比较位置的总数。优选地，计算中包括突出部分。因此，用于计算两个序列之间的百分比同一性的最优选方法包括(i)使用clustalw程序使用合适的一组参数准备序列比对(例如，如上所述)；以及(ii)将n和t的值代入以下公式：序列同一性＝(n/t)*100。
460、本领域技术人员知道用于鉴定相似序列的其他替代方法。例如，基本相似的核苷酸序列将由在严格条件下与dna序列或其互补物杂交的序列编码。通过严格的条件，本发明人指的是在约45℃下在3x氯化钠/柠檬酸钠(ssc)中与过滤结合的dna或rna杂交，然后在约20℃-65℃下在0.2x ssc/0.1％ sds中至少洗涤一次。或者，基本上类似的多肽可以与上文所述的任何序列相差至少1个但少于5个、10个、20个、50个或100个氨基酸。
461、由于遗传密码的简并性，很明显，本文所述的任何核酸序列都可以在不实质上影响其编码的蛋白质序列的情况下进行变化或改变，以提供其功能变体。合适的核苷酸变体是那些具有通过替换编码序列中相同氨基酸的不同密码子而改变的序列，从而产生沉默(同义)变化的核苷酸变体。其他合适的变体是那些具有同源核苷酸序列但包含全部或部分序列的变体，这些变体通过将编码氨基酸的不同密码子替换为其替代氨基酸的具有类似生物物理财产的侧链来改变，从而产生保守变化。例如，小的非极性疏水性氨基酸包括甘氨酸、丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、脯氨酸和蛋氨酸。大的非极性疏水性氨基酸包括苯丙氨酸、色氨酸和酪氨酸。极性的中性氨基酸包括丝氨酸、苏氨酸、半胱氨酸、天冬酰胺和谷氨酰胺。带正电的(碱性)氨基酸包括赖氨酸、精氨酸和组氨酸。带负电的(酸性)氨基酸包括天冬氨酸和谷氨酸。因此，可以理解哪些氨基酸可以用具有类似生物物理特性的氨基酸替代，本领域技术人员知道编码这些氨基酸的核苷酸序列。
462、本文所述的所有特征(包括任何随附的权利要求、摘要和附图)和/或如此公开的任何方法或过程的所有步骤可以以任何组合的方式与上述任何方面组合，但至少一些这样的特征和/或步骤是相互排斥的组合除外。
1.一种抗体或其抗原结合片段，其特异性结合zip12的细胞外结构域，并识别包含adllqvlsagdhpphnhsrs(seq id no:252)或其变体或片段或是由adllqvlsagdhpphnhsrs或其变体或片段组成的表位。
2.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中，所述抗体或其抗原结合片段识别：(i)包含llqvlsagdhpphnhsrs(seq id no:1)或其变体或片段的表位或是由llqvlsagdhpphnhsrs或其变体或片段组成的表位；或者(ii)包含adllq(seq id no:253)或其变体或片段的表位或是由adllq或其变体或片段组成的表位。
3.根据权利要求1或2所述的抗体或其抗原结合片段，其中，所述抗体或其抗原结合片段基本上不与人的zip4和/或zip13结合。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中，所述抗体或其抗原结合片段包括：
5.根据权利要求1-4中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中，所述抗体或其抗原结合片段包括：
6.一种抗体或其抗原结合片段，其中，所述抗体或其抗原结合片段特异性结合zip12，并包括六个如图9b中为每种抗体所示出的cdr序列。
7.根据权利要求6所述的抗体或其抗原结合片段，其中，所述抗体或其抗原结合片段包括如图9b中为每种抗体所示出的vh/vl序列对。
8.根据权利要求6或7所述的抗体或其抗原结合片段，其中，所述抗体或其抗原结合片段特异性结合zip12的细胞外结构域，并识别包含adllqvlsagdhpphnhsrs(seq id no:252)的或由其组成的表位。
9.根据权利要求8所述的抗体或其抗原结合片段，其中，所述抗体或其抗原结合片段异性结合zip12的细胞外结构域，并识别包含llqvlsagdhpphnhsrs(seq id no:1)的或由其组成的表位。
10.一种如权利要求1-9中任一项所述的抗体或其抗原结合片段在治疗中的应用。
11.一种如权利要求1-9中任一项所述的抗体或其抗原结合片段在治疗、预防或改善缺氧相关病症中的应用。
12.根据权利要求11所述的抗体或其抗原结合片段的应用，其中，所述缺氧相关病症是肺动脉高压或癌症。
13.一种药物组合物，其包含如权利要求1-9中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，以及任选的药学上可接受的载体。
14.一种制备如权利要求13所述的药物组合物的方法，所述方法包括将治疗有效量的如权利要求1-9中任一项所述的抗体或其抗原结合片段与药学上可接受的载体组合。
15.一种通过以下方法获得的抗体或其抗原结合片段，所述方法包括：
16.一种多核苷酸序列，其编码如权利要求1-9中任一项所述的抗体或其抗原结合片段。
17.一种表达盒，其包含如权利要求16所述的多核苷酸序列。
18.一种重组载体，其包含如权利要求17所述的表达盒。
19.一种宿主细胞，其包含如权利要求16所述的多核苷酸序列、如权利要求17所述的表达盒、或权利要求18所述的重组载体。
20.一种制备如权利要求1-9中任一项所述的抗体或其抗原结合片段的方法，所述方法包括：
21.一种如权利要求1-9中任一项所述的抗体或其抗原结合片段在诊断或预断中的应用。
22.一种如权利要求1-9中任一项所述的抗体或其抗原结合片段在诊断或预断缺氧相关病症中的应用。
23.一种诊断或预断受试者缺氧相关病症的方法，所述方法包括用如权利要求1-9中任一项所述的抗体或其抗原结合片段检测从受试者获得的生物样品中的zip12。
24.一种试剂盒，用于诊断患有缺氧相关病症的受试者或用于提供所述受试者的病症的预断，所述试剂盒包含如权利要求1-9中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，用于检测来自所述受试者的样品中的zip12。
25.根据权利要求21所述的应用、根据权利要求23所述的方法、或根据权利要求24所述的试剂盒，其中，所缺氧相关病症是是肺动脉高压或癌症。
