本发明涉及生物,尤其涉及一种蜡样芽孢杆菌氨甲基转移酶抗菌肽ba14及其应用。
背景技术:
1、金黄色葡萄球菌( staphylococcus aureus)属于葡萄球菌属,革兰氏阳性菌,是食物中常见的污染细菌,属于五大食源性致病菌之一,能够产生肠毒素,引起食物中毒。感染金黄色葡萄球菌的患者会出现恶心、呕吐,中上腹部痉挛性疼痛,腹泻等症状,其中呕吐最为突出,是引起动物感染的重要病原体。
2、目前,对于细菌性疾病的治疗仍以抗生素为主,但由于抗生素滥用,导致细菌对抗生素的耐药性越来越严重,对人类健康造成重大威胁。抗菌肽(amps)是一类广泛存在于生物体内的小分子肽,构成人体抵御病原体第一道防线的一部分,可有效抵抗病原微生物的入侵。同干扰病原微生物代谢过程的抗生素不同,抗菌肽大多是通过破坏微生物表面的细胞膜和诱导细胞内容物泄漏来产生抗菌作用,受到细菌耐药性影响概率较小。抗菌肽具有广谱抗生物膜活性、利于调节宿主免疫反应、不易产生耐药性等特点,因此在治疗感染性疾病方面具有独特的优势,有望成为理想的抗感染药物。目前,人们已经从细菌、真菌、高等植物、动物等中发现并分离获得抗菌肽。
3、蜡样芽孢杆菌是一种革兰氏阳性,杆状并且能够形成孢子的兼性厌氧菌,经常在土壤、水、动物肠道中被发现,它可以产生毒素导致不同类型胃肠道疾病或其它疾病的致病菌。芽孢杆菌也可通过抗菌、营养竞争、位点排斥、寄生或诱导的方法对真菌病原体产生拮抗作用,同时其也能够产生的多种活性物质,例如低分子多肽、脂肽类抗生素和抗菌蛋白等可以有效抑制多种病原微生物的生长,具有良好的研究和应用价值。
技术实现思路
1、本发明的目的在于克服现有技术的不足之处,提供了一种蜡样芽孢杆菌氨甲基转移酶抗菌肽ba14及其应用,解决了上述背景技术中的问题。
2、本发明解决其技术问题所采用的技术方案之一是:提供了一种蜡样芽孢杆菌氨甲基转移酶抗菌肽ba14,其氨基酸序列如seq id no:1所示:
3、seq id no:1:
4、hkkemvlawlqnqk
5、所述抗菌肽ba14的分子量为1753.092道尔顿,所带正电荷为+2.25,总疏水性比为43%,通过apd3预测该肽可能形成α螺旋。
6、优选地,上述蜡样芽孢杆菌氨甲基转移酶抗菌肽ba14在制备抗菌药物中的应用,该抗菌药物用于抑制和/或杀灭金黄色葡萄球菌。
7、本发明解决其技术问题所采用的技术方案之二是:提供了一种抗菌药物,其有效成分包括蜡样芽孢杆菌氨甲基转移酶抗菌肽ba14,所述抗菌肽ba14的氨基酸序列为seq idno:1。
8、在本发明一较佳实施例中,所述抗菌药物的有效成分为蜡样芽孢杆菌氨甲基转移酶抗菌肽ba14,所述抗菌肽ba14的氨基酸序列为seq id no:1。
9、在本发明一较佳实施例中,所述抗菌药物用于抑制和/或杀灭金黄色葡萄球菌。
10、优选地,上述蜡样芽孢杆菌氨甲基转移酶抗菌肽ba14在制备饲料添加剂中的应用,该饲料添加剂用于抑制和/或杀灭金黄色葡萄球菌。
11、本发明解决其技术问题所采用的技术方案之三是:提供了一种饲料添加剂,其有效成分包括蜡样芽孢杆菌氨甲基转移酶抗菌肽ba14,所述抗菌肽ba14的氨基酸序列为seqid no:1。
12、在本发明一较佳实施例中,所述饲料添加剂的有效成分为蜡样芽孢杆菌氨甲基转移酶抗菌肽ba14,所述抗菌肽ba14的氨基酸序列为seq id no:1。
13、在本发明一较佳实施例中,所述饲料添加剂用于抑制和/或杀灭金黄色葡萄球菌。
14、优选地,上述蜡样芽孢杆菌氨甲基转移酶抗菌肽ba14在制备食品防腐剂中的应用,该食品防腐剂用于抑制和/或杀灭金黄色葡萄球菌。
15、本发明解决其技术问题所采用的技术方案之四是:提供了一种食品防腐剂,其有效成分包括蜡样芽孢杆菌氨甲基转移酶抗菌肽ba14,所述抗菌肽ba14的氨基酸序列为seqid no:1。
16、在本发明一较佳实施例中,所述食品防腐剂的有效成分为蜡样芽孢杆菌氨甲基转移酶抗菌肽ba14,所述抗菌肽ba14的氨基酸序列为seq id no:1。
17、在本发明一较佳实施例中,所述食品防腐剂用于抑制和/或杀灭金黄色葡萄球菌。
18、本发明利用apd3、pymol2.0、swiss-model等软件及网站以蜡样芽孢杆菌具有抗菌活性的氨甲基转移酶的蛋白序列为对象进行生物信息学预测,得到一个新的氨基酸序列的多肽ba14。研究ba14或与联用维生素d3对金黄色葡萄球菌的抑菌活性;并以金黄色葡萄球菌为例,利用流式细胞术、tem观察ba14对细菌细胞膜的破坏程度;同时提取金黄色葡萄球菌的基因组dna,验证其对细菌dna的影响作用。实验结果表明,该肽对金黄色葡萄球菌具有明显抑制作用。
19、抗菌肽ba14将从以下作用对细菌造成破坏:抗菌肽ba14可以穿透细胞膜,与细菌基因组dna相结合,抑制细菌dna的合成,从而导致细菌死亡。
20、本发明的抗菌肽可以采用本领域技术人员已知的方法合成,例如固相合成,并采用本领域技术人员已知的方法进行纯化,例如高效液相色谱法。
21、实施本发明,具有如下有益效果:
22、本发明抗菌肽ba14对金黄色葡萄球菌具有明显抑制作用,与维生素d3联用效果更佳。其抑菌机理是首先穿透细菌的细胞膜,然后与细菌基因组dna相结合,抑制细菌dna的合成,从而导致细菌死亡。本发明抗菌肽ba14联用维生素d3可被制成抗菌药物、饲料添加剂、食品防腐剂等用于预防或治疗金黄色葡萄球菌感染引起的疾病。
1.一种蜡样芽孢杆菌氨甲基转移酶抗菌肽ba14,其氨基酸序列如seq id no:1所示。
2.如权利要求1所述的蜡样芽孢杆菌氨甲基转移酶抗菌肽ba14在制备抗菌药物中的应用,其特征在于:所述抗菌药物用于抑制和/或杀灭金黄色葡萄球菌。
3.一种抗菌药物,其特征在于:其有效成分包括蜡样芽孢杆菌氨甲基转移酶抗菌肽ba14,所述抗菌肽ba14的氨基酸序列为seq id no:1。
4.如权利要求3所述的抗菌药物,其特征在于:所述抗菌药物用于抑制和/或杀灭金黄色葡萄球菌。
5.如权利要求1所述的蜡样芽孢杆菌氨甲基转移酶抗菌肽ba14在制备饲料添加剂中的应用,其特征在于:所述饲料添加剂用于抑制和/或杀灭金黄色葡萄球菌。
6.一种饲料添加剂,其特征在于:其有效成分包括蜡样芽孢杆菌氨甲基转移酶抗菌肽ba14,所述抗菌肽ba14的氨基酸序列为seq id no:1。
7.如权利要求6所述的饲料添加剂,其特征在于:所述饲料添加剂用于抑制和/或杀灭金黄色葡萄球菌。
8.如权利要求1所述的蜡样芽孢杆菌氨甲基转移酶抗菌肽ba14在制备食品防腐剂中的应用,其特征在于:所述食品防腐剂用于抑制和/或杀灭金黄色葡萄球菌。
9.一种食品防腐剂,其特征在于:其有效成分包括蜡样芽孢杆菌氨甲基转移酶抗菌肽ba14,所述抗菌肽ba14的氨基酸序列为seq id no:1。
10.如权利要求9所述的食品防腐剂,其特征在于:所述食品防腐剂用于抑制和/或杀灭金黄色葡萄球菌。
