一种诱导干细胞分化为心肌细胞的方法和试剂盒

    专利查询2025-12-06  1


    本发明涉及细胞分化,具体而言,涉及一种诱导干细胞分化为心肌细胞的方法和试剂盒。


    背景技术:

    1、人类多能干细胞(hpscs)可以分化为人体内的所有细胞类型。通过hpsc分化产生的特定细胞类型不但是研究人类胚胎发育的重要模型系统,而且可用于细胞治疗、药物筛选和疾病研究,有较广的应用前景。

    2、心肌细胞是心脏疾病的再生修复以及药物筛选的重要材料。由于心肌细胞具有不可再生性,因此,由hpsc分化产生的心肌细胞是重要的心肌细胞来源。目前常用的心肌分化手段采用小分子抑制剂诱导心肌细胞,效率不稳定,并且费用较高,不利于大规模生产。

    3、鉴于此,特提出本发明。


    技术实现思路

    1、本发明的目的在于提供一种诱导干细胞分化为心肌细胞的方法和试剂盒。

    2、本发明是这样实现的:

    3、第一方面,本发明实施例提供了一种诱导干细胞分化为心肌细胞的方法,其包括:

    4、诱导干细胞分化至中胚层;

    5、对所述中胚层进行细胞传代;

    6、将细胞传代后的细胞继续分化培养至心肌细胞形成。

    7、第二方面,本发明实施例提供了一种试剂盒,其包括:用于实施前述实施例所述的方法的试剂组合。

    8、本发明具有以下有益效果:

    9、本发明实施例提供的通过细胞传代诱导干细胞往心肌细胞方向分化的方法能够为干细胞来源的心肌细胞的产生提供有效可行的新方法,且该方法效率稳定,费用较低,产量较高,利于大规模生产,得到心肌细胞存活率及纯度较高,应用前景较广,可为心脏疾病的再生修复以及药物筛选提供材料。



    技术特征:

    1.一种诱导干细胞分化为心肌细胞的方法,其特征在于,其包括:

    2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,进行所述细胞传代的时间为获得所述中胚层后的1~3天;

    3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述方法包括:采用基础分化培养基或含胰岛素的基础分化培养基将传代后的细胞继续分化培养至心肌细胞形成;

    4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述细胞传代的方法包括:edta方法或蛋白水解酶方法;

    5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述蛋白水解酶方法包括:

    6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述诱导干细胞分化至中胚层的步骤包括:

    7.根据权利要求3~6任一项所述的方法,其特征在于,所述基础分化培养基的成分包括:dmem/f12、l-抗坏血酸-2-磷酸镁、钠硒、转铁蛋白、青链霉素和化学成分明确的脂质浓缩液中的至少一种;

    8.根据权利要求1~6任一项所述的方法,其特征在于,所述干细胞包括:多能干细胞;

    9.一种试剂盒,其特征在于,其包括:用于实施权利要求1~8任一项所述的方法的试剂组合。

    10.根据权利要求9所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂组合包括:权利要求3中所述的基础分化培养基和/或添加有胰岛素的基础分化培养基和wnt抑制剂、权利要求4中所述的基础分化培养基和/或添加有rock抑制剂和/或胰岛素的基础分化培养基和权利要求6中所述的添加有wnt通路激活剂的基础分化培养基;


    技术总结
    本发明公开了一种诱导干细胞分化为心肌细胞的方法和试剂盒,涉及细胞分化技术领域。通过细胞传代诱导干细胞往心肌细胞方向分化的方法能够为干细胞来源的心肌细胞的产生提供有效可行的新方法,且该方法效率稳定,费用较低,产量较高,利于大规模生产,得到心肌细胞存活率及纯度较高,应用前景较广,可为心脏疾病的再生修复以及药物筛选提供材料。

    技术研发人员:刘蔚蔚,陈国凯,刘楚羽,邵宁一
    受保护的技术使用者:澳门大学
    技术研发日:
    技术公布日:2024/11/26
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