本发明属于比率荧光探针检测四环素，具体涉及一种基于β-环糊精衍生物荧光探针检测四环素的方法。
背景技术：
1、四环素(tc)作为抗生素中的一种，因其抗菌谱广、价格低廉等特点，被广泛应用于水产和养殖业中动物疾病的预防与治疗。目前，tc的残留物已在许多环境水体中被发现，而水体中tc的残留和累积会给人类健康和环境安全造成潜在威胁。常用的tc检测方法有高效液相色谱-质谱法、毛细管电泳法及酶联免疫法等，但这些方法通常需要昂贵的仪器及繁琐的样品前处理步骤等。荧光分析法具有操作简单、选择性好、灵敏度高及成本低等优势。因此，亟需开发一个简便、可靠的tc荧光检测方法。
2、近年来，非典型发光化合物是一类不含有大共轭结构的发光体，表现出本征的发光行为，具有易于合成、水溶性和生物相容性好等优点引起了相关领域研究者的关注。目前，非典型发光化合物的研究主要集中不同种类非典型发光化合物的制备及其发光机理的探索、生物成像等方面，在分析检测领域应用较少。
技术实现思路
1、本发明解决的技术问题是提供了一种基于β-环糊精衍生物荧光探针检测四环素的方法，该方法以β-环糊精和h2o2为原料，在碱性条件下采用一锅法合成非典型发光化合物-β-环糊精衍生物(β-cdox)，通过β-cdox与eu3+结合构建比率荧光传感器用于四环素的检测。本发明提供的非典型发光化合物β-cdox的合成方法具有操作简单、环境友好、合成效率高等优点。
2、本发明为解决上述技术问题采用如下技术方案，基于β-环糊精衍生物荧光探针检测四环素的方法，其特征在于具体步骤为：
3、步骤s1，依次在离心管中加入0.50mlph＝7.5tris-hcl缓冲液、0.50mlβ-cdox荧光探针溶液、160μl1.0mmol/leu(no3)3·6h2o溶液和40μl20mmol/l柠檬酸三钠溶液，再加入不同梯度浓度的四环素溶液，定容至4.00ml，摇匀，于室温避光放置15min，以303nm为激发波长扫描其荧光发射光谱，分别记录430nm和614nm的荧光强度，计算f614/f430比值，f614/f430比值与四环素的含量具有良好的线性关系，线性回归方程为：f614/f430＝0.07153ctc-0.05596，r2＝0.9932，线性范围为3.0～30.0μmol/l，检出限为2.5μmol/l，对四环素浓度为10μm和20μm体系进行平行测定11次，相对标准偏差分别为1.3％和1.5％；
4、步骤s2，依次在离心管中加入0.50mlph＝7.5tris-hcl缓冲液、0.50mlβ-cdox荧光探针溶液、160μl 1.0mmol/l eu(no3)3·6h2o溶液和40μl 20mmol/l柠檬酸三钠溶液，再加入待测四环素溶液，定容至4.00ml，摇匀，于室温避光放置15min，以303nm为激发波长扫描其荧光发射光谱，分别记录430nm和614nm波长处的荧光强度，计算f614/f430比值，并基于线性回归方程计算得到待测四环素溶液中四环素浓度；
5、所述β-cdox荧光探针溶液的具体制备过程为：向100ml圆底烧瓶中加入0.25gβ-环糊精(β-cd)、1.00ml 1.0mol/lnaoh溶液和17.00ml纯净水，于100℃加热搅拌，待β-环糊精溶解后，再向混合溶液中滴加2.00ml 3wt％h2o2溶液，再于100℃反应，反应完成后冷却至室温得到β-cdox荧光探针溶液。
6、本发明合成的β-环糊精衍生物荧光探针具有优异的光学性能，通过β-cdox与eu3+结合构建比率荧光传感器用于四环素的检测，可以减少光源波动等外部因素带来的检测误差，实现自校准效果，能够显著提高四环素的测定准确度。
1.基于β-环糊精衍生物荧光探针检测四环素的方法，其特征在于具体步骤为：
