本申请涉及多糖分析，特别涉及一种多糖微球偶联的苯基含量的检测方法。
背景技术：
1、多糖是一类广泛存在在动物、植物和微生物中的大分子，研究人员正在不断从海藻、微生物和植物中寻找新的多糖来源，通过乳化法、悬浮聚合法等先进技术制备可以将这些多糖制备为多糖微球，多糖微球粒径均匀、形状规整，可用于层析填料，通过精确调控多糖的交联度和聚合度，可以调整填料的孔径大小和比表面积，以满足不同分子大小的分离需求。多糖微球层析填料具有优良的生物相容性和可生物降解性，他们在生物医药领域的应用正日益收到重视。例如，利用ph敏感、温度敏感等智能响应材料制备的多糖微球层析填料，能够实现对生物分子的智能分离和纯化。在高通量筛选平台中，多糖微球层析填料可用于快速识别和纯化活性成分。随着技术的进步和应用领域的不断扩展，多糖层析填料不仅在传统的生物大分子分离领域发挥作用，还被应用于小分子药物、食品工业、环境监测等多个领域。此外，多糖微球层析填料还能与其他层析技术（如离子交换层析、亲和层析）相结合，形成多维度分离系统，显著提高分离效率。
2、对多糖微球进行物理或化学手段改性，可以增强其特定性能，例如，对多糖微球进行物理改性，使其能够承受工业生产中的压力和流速，在凝胶过滤层析、亲和层析、疏水层析、离子交换层析及混合模式层析得填料中得以应用。多糖微球经过化学修饰，引入羧基、氨基等特定官能团，能够增强其特异性吸附能力和选择性，引入含有醚基和苯基的官能团，能够改善多糖微球的疏水性。
3、对多糖微球改性的研究显示了其在生物分离技术等领域中的潜力和多样性。虽然多糖微球经过改性后功能适用更广泛，但是改性后的多糖微球结构的表征方法却很有限，尤其是多糖微球上偶联含有醚基和苯基的官能团后，苯基官能团定量起来往往有很大困难，这些阻碍限制了多糖微球应用潜力的发挥，基于此，有必要找到苯基官能团的定量测试方法，助力多糖微球的前端结构设计。
技术实现思路
1、基于此，本申请第一方面提供一种多糖微球偶联的功能基团的含量的检测方法，其技术方案如下：
2、一种多糖微球偶联的苯基含量检测方法，包括以下步骤：
3、混合偶联有功能基团的多糖微球和第一酸剂，使所述功能基团中的醚键断裂，得到解离液，所述功能基团的结构如式i所示：式i，其中，l1选自单键或c1-3亚烷基，l2各自独立地选自单键或c1-6亚烷基，r选自-oh、c1-3烷基、、卤素，n为0、1、2、3、4或5；
4、混合所述解离液和第一溶剂，得到待测样品；
5、混合标准品和第二酸剂，得到混合液，用第二溶剂稀释所述混合液制备不同浓度的标准品溶液，所述标准品的结构式如式ii所示：式ii，其中，r1选自-oh、c1-3烷基、、卤素，r2选自-h、卤素或-oh，n1为0、1、2、3、4或5；
6、测试不同浓度的所述标准品溶液以及所述待测样品在波长λ下的吸光值，根据不同浓度的所述标准品溶液的浓度和吸光值绘制标准曲线，根据所述标准曲线计算所述待测样品中苯基的浓度。
7、与传统方案相比，本申请具有以下有益效果：
8、本申请公开了一种多糖微球上偶联含有醚基和苯基的官能团后，苯基官能团定量的检测方法，先通过第一酸剂提供的酸性条件将醚键断裂，得到含有苯基的解离液，再测定其吸光值，带入标准曲线中得到苯基的浓度。上述方法可以克服多糖微球上苯基官能团的定量检测困难的问题，对多糖微球进行的结构表征，助力多糖微球的前段结构设计，测试方法简洁。
1.一种多糖微球偶联的苯基含量的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的多糖微球偶联的苯基含量的检测方法，其特征在于，所述l1为单键，所述r2为-oh。
3.根据权利要求1所述的多糖微球偶联的苯基含量的检测方法，其特征在于，所述l1为c1-3亚烷基，所述r2选自-h或卤素。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的多糖微球偶联的功苯基含量的检测方法，其特征在于，所述第一酸剂选自氢碘酸、氢溴酸、盐酸和硫酸中的至少一种。
5.根据权利要求4所述的多糖微球偶联的苯基含量的检测方法，其特征在于，所述偶联有功能基团的多糖微球与所述第一酸剂的混合后反应时间为1h~2h。
6.根据权利要求1至3、5中任一项所述的多糖微球偶联的苯基含量的检测方法，其特征在于，所述第二酸剂选自盐酸或硫酸。
7.根据权利要求6所述的多糖微球偶联的苯基含量的检测方法，其特征在于，所述标准品和所述第二酸剂的混合液中第二酸剂的浓度为0.2m~1.2m。
8.根据权利要求1至3、5中任一项所述的多糖微球偶联的苯基含量的检测方法，其特征在于，所述第一溶剂和所述第二溶剂均选自甲醇。
9.根据权利要求1至3、5中任一项所述的多糖微球偶联的苯基含量的检测方法，其特征在于，波长λ选自260nm~270nm范围内的任一值。
10.根据权利要求1至3、5中任一项所述的多糖微球偶联的苯基含量的检测方法，其特征在于，所述多糖微球选自琼脂糖微球、葡聚糖微球、壳聚糖微球、甘露聚糖微球和混合糖基质微球中的至少一种。
