本发明属于酶解制备低分子量右旋糖酐的，尤其是一种固定化酶酶解调控的方法。
背景技术：
1、在食品加工和生物技术当中，已知酶、产生酶的微生物、细胞和一些细胞组分可以固定到某些载体，特别是当他们用作生物催化剂时，这个过程一般称为固定化。
2、右旋糖酐酶是一类由微生物发酵生产的水解右旋糖酐的酶，属于糖酐水解酶，它可以专一性的水解右旋糖酐分子中的α-1，6糖苷键，从而降低右旋糖酐的分子量。右旋糖酐酶存在多种微生物当中，不同的微生物来源的右旋糖酐酶的酶学性质各有差异，酶活容易受到外界环境(如温度、ph等)的影响，并且随着保存时间和反应时间的延长而缩短，由于游离的右旋糖酐酶在应用过程中存在稳定性差、不可重复使用、难与目标产品分离的问题，限制了其在食品工业中的应用。因此有必要对右旋糖酐酶进行固定化。
3、在现有的固定化酶制备技术共价结合法尤为出色。
4、本发明提供一种高效生产低分子量右旋糖酐的方法，利用固定化右旋糖酐酶可特异性降解右旋糖酐链中的α-1，6糖苷键的性质，以右旋糖酐t100为高分子量的底物，从而制备出分子量分布均一、降解速率高及降解速率稳定的右旋糖酐。。
技术实现思路
1、本发明以固定化酶为酶源，以右旋糖酐t100为高分子量的底物，制备出分子量分布均一、降解速率高及降解速率稳定的右旋糖酐。
2、本发明为实现上述目的，提供的方案如下：
3、(1)使用壳聚糖珠作为右旋糖酐酶载体，通过京尼平共价交联得到固定化酶。使用一定量固定化酶与大分子量右旋糖酐醋酸钠缓冲液中混合后，反应在水浴锅中进行。
4、(2)间隔取样，于沸水浴中终止反应，样品经流动相稀释后使用凝胶色谱仪上机测样。
5、1、优选的：步骤(1)所述的固定化酶添加量为4g。
6、2、优选的：步骤(1)所述的醋酸钠缓冲液溶液为ph＝5.0的醋酸钠缓冲溶液。
7、3、具体的：步骤(1)所述的反应体积为3ml右旋糖酐t100底物。
8、4、优选的：步骤(1)所述的右旋糖酐t100底物为30mg/ml。
9、5、优选的：步骤(1)所述的水浴反应时间为50min。
10、6、具体的：步骤(2)所述的凝胶色谱流动相包含0.03％的叠氮钠和0.1mol/l的硝酸钠。
11、7、具体的：步骤(2)所述的流动相流速为0.5ml/min。
12、8、优选的：步骤(2)所述的进样量为200μl。
13、9、优选的：步骤(2)所述的采样时间设置为70min。
14、10、优选的：步骤(2)所述的十八角度激光光散射仪折光指数增量(dn/dc)为0.138。
15、本发明制备得到的固定化酶的具有良好的机械性能，同时保留了壳聚糖原有的特性，拥有较高的生物安全性；固定化酶以高分子量的右旋糖酐为底物，制备得到的低分子量右旋糖酐分子量分布均一。
1.一种固定化酶酶解制备低分子量右旋糖酐的应用，其特征在于：包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的固定化右旋糖酐酶的制备方法，其特征在于：步骤(1)所述的壳聚糖粉末的脱乙酰度≥95％。
3.根据权利要求1所述的固定化酶的制备低分子量右旋糖酐的方法，其特征在于：步骤(2)所述的固定化酶添加量为4g。
4.根据权利要求1所述的固定化酶的制备低分子量右旋糖酐的方法，其特征在于：步骤(2)所述的醋酸钠缓冲液溶液为ph＝5.0的醋酸钠缓冲溶液。
5.根据权利要求1所述的固定化酶的制备低分子量右旋糖酐的方法，其特征在于：步骤(2)所述的右旋糖酐t100底物为3ml。
6.根据权利要求1所述的固定化酶的制备低分子量右旋糖酐的方法，其特征在于：步骤(2)所述的水浴反应时间为50min。
7.根据权利要求1所述的固定化酶的制备低分子量右旋糖酐的方法，其特征在于：步骤(2)所述的流动相流速为0.5ml/min。
8.根据权利要求1所述的固定化酶的制备低分子量右旋糖酐的方法，其特征在于：步骤(2)所述的采样时间设置为70min。
9.根据权利要求1所述的固定化酶的制备低分子量右旋糖酐的方法，其特征在于：步骤(2)所述的进样量为200μl。
10.根据权利要求1～10任一项所述的固定化右旋糖酐酶的制备方法，其特征在于：将制得的壳聚糖小球作为酶固定化材料的应用。
