本发明属于生物制药，具体地涉及抗新型冠状病毒抗体及其应用。
背景技术：
1、重症急性呼吸综合征(sars)为一种由sars冠状病毒(sars-cov)引起的急性呼吸道传染病，其命名为重症急性呼吸综合征。sars为呼吸道传染性疾病，主要传播方式为近距离飞沫传播或接触患者呼吸道分泌物。
2、sars-cov-2是属于β冠状病毒属的单链rna病毒，与sars-cov的基因组具有79.6％的同一性，与蝙蝠冠状病毒ratg13的基因组具有96.2％的同一性。与其他β冠状病毒类似，sars-cov-2感染是由刺突(s)糖蛋白与其受体人血管紧张素转换酶2(hace2)结合介导的。s蛋白是病毒体表面的三聚体融合蛋白，与宿主细胞结合后，由细胞丝氨酸蛋白酶tmprss2和溶酶体蛋白酶组织蛋白酶切割成受体结合片段s1亚基和融合片段s2亚基。s1亚基通过其c末端的受体结合结构域(rbd)与hace2相互作用，然后将构象从“坐下”转换为“站立”以解离和暴露驱动病毒与细胞膜融合的s2亚基。目前靶向sars-cov-2的天然抗体序列中，很多新型冠状病毒天然抗体的抗原亲和力和抗原中和能力尚待提高，难以满足临床需求。
技术实现思路
1、本发明旨在至少在一定程度上解决现有技术中存在的技术问题至少之一。为此，本发明提供了一种抗新型冠状病毒抗体，该抗体与新型冠状病毒的s蛋白具有高结合亲和力。
2、在本发明的第一方面，本发明提出了一种抗体或抗原结合片段。根据本发明的实施例，所述抗体或抗原结合片段包括具有如seq id no:3或其保守修饰形式的氨基酸序列所示的hcdr3。与天然抗体相比，含有本发明hcdr3的抗体具有更好的新型冠状病毒亲和力和新型冠状病毒中和能力，可有效检测新型冠状病毒、诊断新型冠状病毒引起的相关疾病、或者预防和/或治疗新型冠状病毒引起的相关疾病。
3、根据本发明的实施例，所述抗体或抗原结合片段还可以进一步包括如下技术特征的至少之一：
4、根据本发明的实施例，所述抗体或抗原结合片段进一步包括选自下列至少之一的cdr：重链可变区cdr：seq id no:1～2或其保守修饰形式的氨基酸序列；轻链可变区cdr：seq id no:4～6或其保守修饰形式的氨基酸序列。
5、根据本发明的实施例，所述抗体或抗原结合片段包括：分别如seq id no:1、2和3的氨基酸序列所示的hcdr1、hcdr2、hcdr3；和分别如seq id no:4、5和6的氨基酸序列所示的lcdr1、lcdr2、lcdr3。
6、根据本发明的实施例，所述抗体或抗原结合片段包括重链框架区。
7、根据本发明的实施例，所述重链框架区的至少一部分来自于鼠源抗体、灵长目源抗体、牛源抗体、马源抗体、乳牛源抗体、猪源抗体、绵羊源抗体、山羊源抗体、狗源抗体、猫源抗体、兔源抗体、骆驼源抗体、驴源抗体、鹿源抗体、貂源抗体、鸡源抗体、鸭源抗体、鹅源抗体、火鸡源抗体、斗鸡源抗体或其突变体中的至少之一。
8、根据本发明的实施例，所述重链框架区的至少一部分来自于鼠源抗体和人源抗体中的至少之一。
9、根据本发明的实施例，所述抗体或抗原结合片段包括轻链框架区。
10、根据本发明的实施例，所述轻链框架区的至少一部分来自于鼠源抗体、灵长目源抗体、牛源抗体、马源抗体、乳牛源抗体、猪源抗体、绵羊源抗体、山羊源抗体、狗源抗体、猫源抗体、兔源抗体、骆驼源抗体、驴源抗体、鹿源抗体、貂源抗体、鸡源抗体、鸭源抗体、鹅源抗体、火鸡源抗体、斗鸡源抗体或其突变体中的至少之一。
11、根据本发明的实施例，所述轻链框架区的至少一部分来自于鼠源抗体和人源抗体中的至少之一。
12、根据本发明的实施例，所述抗体或抗原结合片段包括：如seq id no:7所示的氨基酸序列或与其具有至少90％同源性的氨基酸序列的重链可变区；和如seq id no:8所示的氨基酸序列或与其具有至少90％同源性的氨基酸序列的轻链可变区。
13、根据本发明的实施例，所述抗体或抗原结合片段进一步包括重链恒定区。
14、根据本发明的实施例，所述抗体或抗原结合片段进一步包括轻链恒定区。
15、根据本发明的实施例，所述重链恒定区和轻链恒定区的至少之一的至少一部分来自于鼠源抗体、灵长目源抗体、牛源抗体、马源抗体、乳牛源抗体、猪源抗体、绵羊源抗体、山羊源抗体、狗源抗体、猫源抗体、兔源抗体、骆驼源抗体、驴源抗体、鹿源抗体、貂源抗体、鸡源抗体、鸭源抗体、鹅源抗体、火鸡源抗体、斗鸡源抗体或其突变体中的至少之一。
16、根据本发明的实施例，所述重链恒定区包括选自igg1、igg2、igg3、igg4、iga、igm、ige或igd的重链恒定区；或者所述轻链恒定区包括选自κ型或λ型轻链恒定区。
17、根据本发明的实施例，所述轻链恒定区和重链恒定区均来自于鼠源抗体或其突变体、或人源抗体或其突变体。
18、根据本发明的实施例，所述重链恒定区的n端与所述重链可变区的c端相连。
19、根据本发明的实施例，所述轻链恒定区的n端与所述轻链可变区的c端相连。
20、根据本发明的实施例，所述重链恒定区包括如seq id no:9或与其具有至少80％同一性的氨基酸序列所示的重链恒定区。
21、根据本发明的实施例，所述轻链恒定区包括如seq id no:10或与其具有至少80％同一性的氨基酸序列所示的轻链恒定区。
22、根据本发明的实施例，所述抗体包括多抗、全长单抗、fab抗体、fab’抗体、f(ab’)2抗体、fv抗体、单链抗体、单域抗体以及最小识别单位中的至少之一；或者所述抗原结合片段包括f(ab’)2片段、fab’片段、fab片段、f(ab)2片段、fv片段、scfv片段、scfv-fc融合蛋白、scfv-fv融合蛋白和最小识别单位中的至少之一。
23、根据本发明的实施例，所述抗体或抗原结合片段包括：如seq id no:11所示的氨基酸序列或与其具有至少80％同源性的氨基酸序列的重链；和如seq id no:12所示的氨基酸序列或与其具有至少80％同源性的氨基酸序列的轻链。
24、在本发明的第二方面，本发明提出了一种重组蛋白。根据本发明的实施例，所述重组蛋白包括：第一方面所述的抗体或抗原结合片段。本发明的重组蛋白具有更好的新型冠状病毒亲和力和新型冠状病毒中和能力，可有效检测新型冠状病毒、诊断新型冠状病毒引起的相关疾病、或者预防和/或治疗新型冠状病毒引起的相关疾病。
25、根据本发明的实施例，所述重组蛋白进一步包括生物活性蛋白或其片段、生物活性多肽或其片段中的至少之一。
26、根据本发明的实施例，所述生物活性蛋白或其片段包括选自蛋白标签、蛋白毒素或其片段、干扰素或其片段、生物反应调节物或其片段和fc片段中的至少之一。
27、在本发明的第三方面，本发明提出了一种多特异性抗体。根据本发明的实施例，所述多特异性抗体包括：第一结合区，所述第一结合区包括第一方面所述的抗体或抗原结合片段；第二结合区，所述第二结合区具有第一分子结合活性。本发明的多特异性抗体具有更好的新型冠状病毒亲和力和新型冠状病毒中和能力，可有效检测新型冠状病毒、诊断新型冠状病毒引起的相关疾病、或者预防和/或治疗新型冠状病毒引起的相关疾病。
28、根据本发明的实施例，所述第一分子包括抗原、病毒、细菌、内毒素、细胞因子和细胞因子受体中的至少之一。
29、在本发明的第四方面，本发明提出了一种核酸分子。根据本发明的实施例，所述核酸分子编码第一方面所述的抗体或抗原结合片段、第二方面所述的重组蛋白或者第三方面所述的多特异性抗体。本发明的核酸分子可编码第一方面的抗体或抗原结合片段、第二方面所述的重组蛋白或者第三方面所述的多特异性抗体。
30、根据本发明的实施例，所述核酸分子为dna。
31、在本发明的第五方面，本发明提出了一种表达载体。根据本发明的实施例，所述表达载体携带第四方面所述的核酸分子。由此，采用本发明的表达载体可有效实现第一方面的抗体或抗原结合片段、第二方面所述的重组蛋白或者第三方面所述的多特异性抗体的表达，进而实现抗体或抗原结合片段、重组蛋白或者多特异性抗体的体外大量获得。
32、根据本发明的实施例，所述表达载体包括选自真核表达载体或原核表达载体。
33、在本发明的第六方面，本发明提出了一种重组细胞。根据本发明的实施例，所述重组细胞包括携带第四方面所述的核酸分子或第五方面所述的表达载体；或表达第一方面所述的抗体或抗原结合片段、第二方面所述的重组蛋白或者第三方面所述的多特异性抗体。利用该重组细胞在适合条件下，能够在细胞内有效地表达前述的抗体或抗原结合片段、重组蛋白或者多特异性抗体。
34、根据本发明的实施例，所述重组细胞是通过将第五方面所述的表达载体引入至宿主细胞中而获得的。
35、在本发明的第七方面，本发明提出了一种偶联物。根据本发明的实施例，所述偶联物包含第一方面所述的抗体或抗原结合片段、第二方面所述的重组蛋白或者第三方面所述的多特异性抗体；以及偶联部分，所述偶联部分与所述抗体或抗原结合片段、重组蛋白或多特异性抗体相连。本发明的偶联物可结合新型冠状病毒，具有更好的新型冠状病毒亲和力和新型冠状病毒中和能力，可有效检测新型冠状病毒、诊断新型冠状病毒引起的相关疾病、或者预防和/或治疗新型冠状病毒引起的相关疾病。
36、根据本发明的实施例，所述偶联部分包括选自为载体、药物、毒素、细胞因子、蛋白标签和修饰物中的至少之一。
37、在本发明的第八方面，本发明提出了一种药物组合物。根据本发明的实施例，所述药物组合物包括第一方面所述的抗体或抗原结合片段、第二方面所述的重组蛋白、第三方面所述的多特异性抗体、第四方面所述的核酸分子、第五方面所述的表达载体、第六方面所述的重组细胞或第七方面所述的偶联物。本发明的药物组合物可结合新型冠状病毒，具有更好的新型冠状病毒亲和力和新型冠状病毒中和能力，可有效预防和/或治疗新型冠状病毒引起的相关疾病。
38、根据本发明的实施例，所述药物组合物进一步包括药学上可接受的辅料。
39、在本发明的第九方面，本发明提出了一种试剂盒。根据本发明的实施例，所述试剂盒包括第一方面所述的抗体或抗原结合片段、第二方面所述的重组蛋白、第三方面所述的多特异性抗体、第四方面所述的核酸分子、第五方面所述的表达载体、第六方面所述的重组细胞或第七方面所述的偶联物。本发明的试剂盒可结合新型冠状病毒，且具有较强的新型冠状病毒亲和力，可有效检测新型冠状病毒、或者诊断新型冠状病毒引起的相关疾病。
40、在本发明的第十方面，本发明提出了一种第一方面所述的抗体或抗原结合片段、第二方面所述的重组蛋白、第三方面所述的多特异性抗体、第四方面所述的核酸分子、第五方面所述的表达载体、第六方面所述的重组细胞或第七方面所述的偶联物在制备药物中的用途，所述药物用于预防和/或治疗新型冠状病毒引起的相关疾病。
41、在本发明的第十一方面，本发明提出了一种第一方面所述的抗体或抗原结合片段、第二方面所述的重组蛋白、第三方面所述的多特异性抗体、第四方面所述的核酸分子、第五方面所述的表达载体、第六方面所述的重组细胞或第七方面所述的偶联物在制备试剂盒中的用途，所述试剂盒用于检测新型冠状病毒、诊断新型冠状病毒引起的相关疾病、或者评估新型冠状病毒引起的相关疾病的预后。
42、在本发明的第十二方面，本发明提出了一种检测新型冠状病毒的方法。根据本发明的实施例，所述方法包括：采用第一方面所述的抗体或抗原结合片段、第二方面所述的重组蛋白、第三方面所述的多特异性抗体或第七方面所述的偶联物与待检测样本进行接触，形成免疫复合物。本发明的方法具有检测新型冠状病毒，尤其是用于体外检测，具有检测准确性高等优点。
43、根据本发明的实施例，基于所述免疫复合物的信号，确定所述待检测样本中是否含有新型冠状病毒的含量。
44、根据本发明的实施例，所述免疫复合物还包括第二抗体，所述第二抗体与所述抗体或抗原结合片段结合。
45、根据本发明的实施例，所述免疫复合物还包括第二抗体，所述第二抗体与新型冠状病毒结合。
46、本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本发明的实践了解到。
1.一种抗体或抗原结合片段，其特征在于，包括具有如seq id no:3或其保守修饰形式的氨基酸序列所示的hcdr3。
2.根据权利要求1所述的抗体或抗原结合片段，其特征在于，进一步包括选自下列至少之一的cdr：
3.根据权利要求2所述的抗体或抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或抗原结合片段包括重链框架区；
4.根据权利要求1所述的抗体或抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或抗原结合片段包括：
5.根据权利要求1～4任一项所述的抗体或抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或抗原结合片段进一步包括重链恒定区；
6.根据权利要求1～4任一项所述的抗体或抗原结合片段，其特征在于，所述抗体包括多抗、全长单抗、fab抗体、fab’抗体、f(ab’)2抗体、fv抗体、单链抗体、单域抗体以及最小识别单位中的至少之一；或者
7.一种重组蛋白，其特征在于，包括：
8.一种多特异性抗体，其特征在于，包括：
9.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子编码权利要求1～6任一项所述的抗体或抗原结合片段、权利要求7所述的重组蛋白或者权利要求8所述的多特异性抗体；
10.一种表达载体，其特征在于，携带权利要求9所述的核酸分子；
11.一种重组细胞，其特征在于，包括：
12.一种偶联物，其特征在于，包含：
13.一种药物组合物，其特征在于，包括：
14.一种试剂盒，其特征在于，包括：
15.权利要求1～6任一项所述的抗体或抗原结合片段、权利要求7所述的重组蛋白、权利要求8所述的多特异性抗体、权利要求9所述的核酸分子、权利要求10所述的表达载体、权利要求11所述的重组细胞或权利要求12所述的偶联物在制备药物中的用途，所述药物用于预防和治疗新型冠状病毒引起的相关疾病。
16.权利要求1～6任一项所述的抗体或抗原结合片段、权利要求7所述的重组蛋白、权利要求8所述的多特异性抗体、权利要求9所述的核酸分子、权利要求10所述的表达载体、权利要求11所述的重组细胞或权利要求12所述的偶联物在制备试剂盒中的用途，所述试剂盒用于检测新型冠状病毒、诊断新型冠状病毒引起的相关疾病、或者评估新型冠状病毒引起的相关疾病的预后。
17.一种检测新型冠状病毒的方法，其特征在于，包括：
