本发明涉及生物医学领域中,一种评价或辅助评价机体系统衰老的生物标志物及其在制备细胞衰老模型中的应用。
背景技术:
1、衰老的特征是随着年龄的增长,全身功能下降,从而导致多种慢性疾病。阐明衰老的基本机制对于开发与衰老相关的退化和疾病的干预措施至关重要。随着不断深入的探索,已经发现了一些与年龄相关的分子机制,如刺激衰老相关分泌表型(sasp)、端粒损耗和表观遗传改变等。然而,还需要更多的衰老生物标志物来评估衰老状态,以便及早警告衰老并采取预防措施,预防与年龄相关的慢性疾病,并且这种评估方法不会对个体造成伤害。因此,深入探索可在血清水平检测的衰老生物标志物用以评估个体衰老状态具有重要的科学和临床意义。
技术实现思路
1、本发明所要解决的技术问题是如何检测动物衰老以及如何制备细胞衰老模型。
2、为解决上述技术问题,本发明首先提供了下述任一应用:
3、1.检测s100a8和/或s100a9含量的物质在制备检测动物衰老产品中的应用;
4、2.检测s100a8基因和/或s100a9基因表达量的物质在制备检测动物衰老产品中的应用。
5、上述应用中,所述s100a8和/或s100a9含量可为s100a8和/或s100a9在动物组织或细胞中的含量;
6、所述s100a8基因和/或s100a9基因表达量可为s100a8基因和/或s100a9基因在动物组织或细胞中的表达量。
7、在本发明的一个实施例中,所述动物组织为肾脏组织、肺脏组织、肝脏组织、大脑组织、皮肤组织、心脏组织或外周血。
8、所述动物为哺乳动物。
9、所述检测s100a8基因和/或s100a9基因表达量的物质可为利用现有技术中的方法检测所述s100a8基因和/或s100a9基因表达量所需的试剂和/或仪器,如利用高通量测序检测所述s100a8基因和/或s100a9基因表达量所需的试剂和/或仪器,或利用定量pcr检测所述s100a8基因和/或s100a9基因表达量所需的试剂和/或仪器。
10、所述检测s100a8和/或s100a9含量的物质可为利用现有技术中的方法检测所述s100a8和/或s100a9含量所需的试剂和/或仪器,如利用免疫组织化学检测所述s100a8和/或s100a9含量所需的试剂和/或仪器,或利用酶联免疫吸附试验检测所述s100a8和/或s100a9含量所需的试剂和/或仪器。
11、上述应用中,所述检测s100a8和/或s100a9含量的物质可为s100a8抗体和/或s100a9抗体。
12、在本发明的一个实施例中,所述s100a8抗体为兔抗s100a8(abcam,货号为ab92331),所述s100a9抗体为兔抗s100a9(abcam,货号为ab92507)。
13、上述应用中,所述产品的检测样本可为从哺乳动物分离的器官或组织或细胞样本、或其石蜡切片或其冰冻切片。
14、上述应用中,所述动物衰老可为动物个体、器官、组织或细胞的衰老。
15、具体的,所述动物可为哺乳动物。
16、进一步,所述哺乳动物可为智人、猕猴、食蟹猴、大鼠或小鼠。
17、本发明还提供了衰老细胞模型的制备方法,所述方法包括:利用蛋白质s100a8和/或s100a9处理细胞,得到衰老细胞模型;
18、所述蛋白质为s100a8和/或s100a9,或s100a8/a9重组蛋白。
19、具体的,所述蛋白质为人s100a8和/或s100a9,或来源于人的s100a8/a9重组蛋白。
20、上述方法中,所述s100a8/a9重组蛋白可由s100a8与s100a9组成。
21、上述方法中,所述细胞衰老可体现在细胞ros水平增加、细胞的炎症水平增加、单克隆形成能力降低和/或ki67阳性细胞比例减少上。
22、上述方法还可包括利用过氧化氢处理细胞。
23、在本发明的一个实施例中,所述细胞为人外周血单个核细胞或人主动脉内皮细胞。
24、在本发明的一个实施例中,所述方法包括利用s100a8/a9重组蛋白处理所述细胞,所述s100a8/a9重组蛋白在体系中的浓度为2-10μg/ml。
25、在本发明的一个实施例中,所述方法包括利用s100a8/a9重组蛋白与过氧化氢处理所述细胞。所述s100a8/a9重组蛋白在体系中的浓度为10μg/ml,过氧化氢在体系中的浓度为100μm。
26、本发明中,检测s100a8和/或s100a9含量可为检测s100a8的含量,或检测s100a9的含量,或检测s100a8和s100a9形成的异源二聚体蛋白的含量。
27、本发明中,s100a8基因gene id为6279,更新日期2023年5月17日;s100a9基因geneid为6280,更新日期2023年5月17日。
28、本发明通过整合分析大鼠,小鼠,食蟹猴,人多组织转录组数据集,结合小鼠,食蟹猴多组织免疫组织化学染色分析与人血清水平检测,揭示s100a8/a9可以作为评估或辅助评估机体系统衰老的生物标志物。本发明标志物在评估机体衰老程度上具有重要作用,可以在保证安全的前提下进行衰老程度的评估,为衰老及年龄相关疾病进行预警,还可以用于制备细胞衰老模型,具有重要的应用价值和临床转化价值。
29、下面结合具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述,给出的实施例仅为了阐明本发明,而不是为了限制本发明的范围。以下提供的实施例可作为本技术领域普通技术人员进行进一步改进的指南,并不以任何方式构成对本发明的限制。
1.检测s100a8和/或s100a9含量的物质在制备检测动物衰老产品中的应用。
2.检测s100a8基因和/或s100a9基因表达量的物质在制备检测动物衰老产品中的应用。
3.根据权利要求1或2所述的应用,其特征在于:所述s100a8和/或s100a9含量为s100a8和/或s100a9在动物组织或细胞中的含量;
4.根据权利要求1或3所述的应用,其特征在于:所述检测s100a8和/或s100a9含量的物质为s100a8抗体和/或s100a9抗体。
5.根据权利要求1-4中任一所述的应用,其特征在于:所述动物衰老为动物个体、器官、组织或细胞的衰老。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于:所述动物为哺乳动物;
7.衰老细胞模型的制备方法,包括:利用蛋白质s100a8和/或s100a9处理细胞,得到衰老细胞模型;
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于:所述s100a8/a9重组蛋白由s100a8与s100a9组成。
9.根据权利要求7或8所述的方法,其特征在于:所述细胞衰老体现在细胞ros水平增加、细胞的炎症水平增加、单克隆形成能力降低和/或ki67阳性细胞比例减少上。
10.根据权利要求7-9中任一所述的方法,其特征在于:所述方法还包括利用过氧化氢处理细胞。
