本发明涉及药物分析与质量控制领域，具体涉及一种地氯雷他定原料或其制剂中有关物质的检测方法。
背景技术：
1、地氯雷他定(desloratadine)，化学名为8-氯-6,11-二氢-11-(4-哌啶亚基)-5h-苯并[5,6]-环庚烷并[1,2-b]吡啶。地氯雷他定是一种长效的三环类组胺拮抗剂，对h1受体具有选择性拮抗作用，用于缓解慢性特发性荨麻疹及过敏性鼻炎的全身及局部症状。地氯雷他定在体外可抑制人肥大细胞组胺释放。大鼠放射性标记组织分布研究和豚鼠放射性配体h1受体结合研究显示，地氯雷他定不易通过血脑屏障。地氯雷他定的化学结构式为：
2、
3、地氯雷他定的相关杂质结构极性相近，在常规色谱条件下，使用c8、c18等常规色谱柱时，分离难度较大，难以实现所有杂质的有效分离和准确定量。
4、因此，寻找一种能够有效分离和准确定量地氯雷他定原料或其制剂中有关物质的检测方法，对地氯雷他定的质量控制尤为重要。
技术实现思路
1、本发明的目的是克服现有技术的缺陷，提供一种地氯雷他定原料或其制剂中有关物质的检测方法，该检测方法选择磷酸盐缓冲液与甲醇、乙腈搭配，结合反相色谱柱和特定的梯度程序进行洗脱，可实现地氯雷他定与杂质之间以及杂质与杂质之间的有效分离，并且能够准确定量。
2、为了实现以上目的，本发明提供如下技术方案。
3、一种地氯雷他定原料或其制剂中有关物质的检测方法，采用高效液相色谱法进行定性和/或定量检测，检测条件包括：
4、色谱柱：反相色谱柱；
5、流动相：流动相a和流动相b，其中，所述流动相a为磷酸盐缓冲溶液，所述流动相b为甲醇和乙腈的混合溶液进行梯度洗脱。
6、本发明的检测方法无需使用离子对试剂(如十二烷基硫酸钠、庚烷磺酸钠、戊烷磺酸钠、己烷磺酸钠、四氢呋喃等)即可实现对地氯雷他定原料或其制剂中有关物质的有效分离，能够避免因使用离子对试剂而导致的基线较差、色谱不稳当，对色谱柱损耗较大等问题；也无需使用对照品外标定量，溶液配制简单；因此，本发明的检测方法还能够节约实验成本。
7、在本发明的一些实施例中，所述洗脱条件：
8、
9、在本发明的一些实施例中，所述检测方法采用如下洗脱程序进行梯度洗脱：
10、
11、在本发明的一些实施例中，所述检测方法采用如下洗脱程序进行梯度洗脱：
12、
13、通过优化洗脱程度，能够更好地实现对地氯雷他定原料或其制剂中有关物质的有效分离，使定量更准确。
14、在本发明的一些实施例中，在所述梯度洗脱程序中，时间限制至35～45min，其后还可包括其他的洗脱程序。
15、例如，所述流动相在35-45min以后采用等度洗脱程序，流动相a 75-85体积％，流动相b 25-15体积％。优选在40min以后采用如下等度洗脱程序：流动相a 75-82体积％，流动相b 25-18体积％；
16、优选地，所述流动相在40min以后可采用如下等度洗脱程序：
17、
18、在本发明的一些实施例中，所述流动相b中，甲醇与乙腈的体积比可为(1-3):(3-1)，优选为(1-2):(3-1)，最优选为1:1。通过优化流动相b，能够更好地实现对地氯雷他定原料或其制剂中有关物质的有效分离。
19、在本发明的一些实施例中，所述磷酸盐缓冲溶液的ph值可为1.5～2.5，例如可为1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.1、2.2、2.3、2.4或2.5，优选为1.9-2.1，最优选为2.00。发明人发现，ph增大，杂质保留(出峰时间)增强，部分杂质响应较低。另外，在流动相中含有有机胺的情况下，有机胺碱性较强，容易超过色谱柱的耐受范围，本发明选择1.5-2.5的ph值范围，不会对色谱柱产生影响，延长使用寿命。
20、在本发明的一些实施例中，所述磷酸盐缓冲溶液可包括磷酸二氢钾溶液、磷酸二氢钠溶液、磷酸氢二钾溶液、磷酸氢二钠溶液中一种或多种。
21、在本发明的一些实施例中，所述磷酸盐缓冲溶液的浓度可为0.005～0.015mol/l，例如可为0.005mol/l、0.006mol/l、0.007mol/l、0.008mol/l、0.009mol/l、0.01mol/l、0.011mol/l、0.012mol/l、0.013mol/l、0.014mol/l或0.015mol/l，最优选为0.01mol/l。
22、在本发明的一些实施例中，所述流动相a为所述磷酸盐缓冲溶液和有机胺的混合物。优选地，所述有机胺可选自三乙胺、四丁基硫酸氢铵、四丁基溴化铵、四丁基氢氧化铵或全氟三乙胺中一种或多种。优选地，有机胺与所述磷酸盐缓冲溶液的体积比为(1ml～20ml):1l，例如可为1ml:1l、5ml:1l、10ml:1l、15ml:1l或20ml:1l，最优选为10ml:1l。在所述磷酸盐缓冲溶液中加入有机胺，可以减弱碱性溶质与残余硅醇基的强相互作用，减轻或消除峰拖尾现象。优选三乙胺，本技术的检测波长在280nm，三乙胺在230nm有较强吸收峰，因此选三乙胺作为拖尾抑制剂不会干扰灵敏度。
23、在本发明的一些实施例中，所述检测方法使用的反相色谱柱可为c8色谱柱、c18色谱柱或其他等效色谱柱。在一些具体实施例中，所用色谱柱具有较低的硅烷醇活性，是选择性与c18色谱柱类似的碱性去活热电色谱柱。色谱柱的规格可为4.6mm×250mm，3μm～5μm，优选5μm。色谱柱优选为thermo bds hypersil c8色谱柱。
24、在本发明的一些实施例中，柱温可为30℃～45℃，例如可为30℃、31℃、32℃、33℃、34℃、35℃、36℃、37℃、38℃、39℃、40℃、41℃、42℃、43℃、44℃或45℃，优选38℃～42℃。
25、在本发明的一些实施例中，流速可为0.5ml/min～1.5ml/min，例如可为0.5ml/min、0.6ml/min、0.7ml/min、0.8ml/min、0.9ml/min、1.0ml/min、1.1ml/min、1.2ml/min、1.3ml/min、1.4ml/min或1.5ml/min，优选1.0ml/min。
26、在本发明的一些实施例中，进样量可为20～60μl，优选为30～50μl，更优选为40μl。
27、在本发明的一些实施例中，检测器可为紫外检测器。
28、在本发明的一些实施例中，检测波长可为280nm。
29、在本发明的一些实施例中，所述地氯雷他定原料或其制剂中有关物质包括以下化合物中的一种或多种：
30、
31、本发明的检测方法可实现地氯雷他定与以上8种杂质之间以及杂质与杂质之间的有效分离，分离效果好。
32、在本发明的一些实施例中，所述检测方法还包括配制以下溶液中的一种或多种：
33、空白辅料溶液：精密称取地氯雷他定口服溶液中除地氯雷他定外的辅料，用水溶解定容；
34、配制供试品溶液：精密量取地氯雷他定口服溶液适量，加溶剂稀释，即可得到所述供试品溶液，地氯雷他定的浓度为0.01mg/ml～2mg/ml，优选为0.1mg/ml～1mg/ml，更优选为0.2mg/ml；
35、配制自身对照溶液：精密量取所述供试品溶液适量，加溶剂稀释，即可得到所述自身对照溶液，地氯雷他定的浓度为0.05～10μg/ml，优选为1μg/ml；
36、配制系统适用性溶液：采用破坏方式进行制备，精密称取地氯雷他定对照品适量，加丙二醇溶解(必要时超声使溶解)并稀释，制成每1ml中约含地氯雷他定0.1～10mg的溶液，放置0.1～24h，作为系统适用性溶液贮备液；精密量取所述系统适用性溶液贮备液适量，加溶剂定量稀释，制成每1ml中约含地氯雷他定0.01mg/ml～2mg/ml的溶液，作为系统适用性溶液；优选地，精密称取地氯雷他定对照品适量，加丙二醇溶解(必要时超声使溶解)并稀释制成每1ml中约含1mg的溶液，放置2h，作为系统适用性溶液贮备液；精密量取系统适用性溶液贮备液适量，加溶剂定量稀释，制成每1ml中约含地氯雷他定0.2mg的溶液；
37、所述溶剂为甲醇和水的混合溶液。优选地，甲醇和水的体积比为(40-60)：(60-40)，优选为(45-55)：(55-45)，更优选50:50。
38、在本发明的一些实施例中，所述检测方法使用不加校正因子的主成分自身对照法来计算杂质含量。
39、相比现有技术，本发明的有益效果：
40、本发明提供了一种地氯雷他定原料或其制剂中有关物质的检测方法，该检测方法选择磷酸盐缓冲液与甲醇、乙腈搭配，结合反相色谱柱和特定的梯度程序进行洗脱，可实现地氯雷他定与8种杂质之间以及杂质与杂质之间的有效分离，克服了使用离子对试剂(如十二烷基硫酸钠、庚烷磺酸钠、四氢呋喃等)分离极性相近化合物而导致的峰形较差、色谱不稳定、损耗色谱柱等问题，同时克服了磷酸盐缓冲体系需搭配多种有机溶剂且分离杂质种类较少、需要采用杂质外标进行定量、成本较高等问题，配制操作简便，检测结果准确、可靠；是目前分析地氯雷他定最先进、成本最低的方法，有助于对产品开展进一步的质量研究，为产品开发和检测放行提供可靠依据。
41、本发明的检测方法系统适用性和专属性好，线性、准确度、精密度均符合规定，耐用性良好，能够达到有效分离、准确定量、节约成本的目的，可更好地对地氯雷他定原料及其制剂进行质量控制，方法新颖，成本较低，可推广使用。
1.一种地氯雷他定原料或其制剂中有关物质的检测方法，其特征在于，采用高效液相色谱法进行定性和/或定量检测，检测条件包括：
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述洗脱条件：
3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述流动相在35-45min以后采用等度洗脱程序，流动相a 75-85体积％，流动相b 25-15体积％；优选在40min以后采用如下等度洗脱程序：流动相a 75-82体积％，流动相b 25-18体积％；优选在40min以后采用如下等度洗脱程序：
4.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述流动相b中，甲醇与乙腈的体积比为(1-3):(3-1)，优选为(1-2):(3-1)。
5.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述磷酸盐缓冲溶液的ph值为1.5～2.5，优选为1.9-2.1；
6.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述流动相a为所述磷酸盐缓冲溶液和有机胺的混合物；
7.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述检测条件还包括以下中的一项或多项：
8.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述地氯雷他定原料或其制剂中有关物质包括以下化合物中的一种或多种：
9.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，还包括配制以下溶液中的一种或多种：
10.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述检测方法使用不加校正因子的主成分自身对照法来计算杂质含量。
