本文涉及药物分析，尤其涉及一种二甲磺酸利右苯丙胺中对映异构体的分析方法及其应用。
背景技术：
1、二甲磺酸利右苯丙胺(lisdexamfetamine dimesylate)化学名为((2s)-2,6-二氨基-n-[(1s)-1-甲基-2-苯基乙基]己酰胺二甲磺酸盐)，分子式为c17h33n3o7s2，cas登记号608137-33-3，化学结构式如下：
2、
3、二甲磺酸利右苯丙胺是由英国希雷(shire)生物制药公司与new riverpharmaceutical inc.合作开发的苯丙胺衍生物，该药于2007年2月23日获得美国食品和药物管理局(fda)的批准，以商品名vyvanse首次在美国上市，是口服用的胶囊剂，用于治疗儿童注意力缺陷和多动障碍(attention-deficit/hyperactivity disorder adhd)，目前二甲磺酸利右苯丙胺是唯一一种被批准用于所有年龄大于6岁的adhd患者维持治疗的兴奋药。而在2015年1月fda又批准该药作为首款和唯一一款成人中度至重度暴食症治疗药物。
4、利右苯丙胺有2个手性碳中心，其中(r)-2,6-二氨基-n-((r)-1-苯丙-2-基)己酰胺为其对映异构体，也是原料药及其制剂中亟需控制的潜在杂质，具体结构如下式所示：
5、
6、鉴于目前二甲磺酸利右苯丙胺胶囊质量标准在各国药典中均未收载，文献中也尚未记载该产品上述对映异构体的分析方法，由于不同药物及其异构体的结构和物理化学性质不同，无法确定二甲磺酸利右苯丙胺及其异构体的分析检测能否使用现有的分析检测技术，但是杂质的控制在药品的整个生命周期有举足轻重的作用，因此，亟需建立一种易操作的关于二甲磺酸利右苯丙胺上述对映异构体的分析方法，以便更好地促进该药物的研发，确保产品的质量控制。
技术实现思路
1、为了实现上述发明目的，本技术提供了一种二甲磺酸利右苯丙胺对映异构体的分析方法，由于二甲磺酸利右苯丙胺及其对映异构体均无紫外吸收，因此采用衍生化方法使之紫外吸收增强，再通过正相高效液相色谱法进行检测分析，通过选择特定的色谱条件，能够简单、快速、准确地分析、检测二甲磺酸利右苯丙胺及其对映异构体，从而保证了二甲磺酸利右苯丙胺及其制剂的质量可控。
2、本技术第一个方面提供了一种二甲磺酸利右苯丙胺中对映异构体的检测方法，该方法包括如下步骤：
3、i)将二甲磺酸利右苯丙胺及其对映异构体与衍生化试剂进行衍生化反应，得到二甲磺酸利右苯丙胺及其对映异构体的衍生化产物；
4、ii)采用正相高效液相色谱法对步骤i)中的衍生化产物进行检测分析，检测和分离衍生化的二甲磺酸利右苯丙胺及其对映异构体。
5、在一种示例性的实施例中，步骤i)中，衍生化反应可按照如下方法进行：
6、将二甲磺酸利右苯丙胺及其对映异构体加入溶剂超声溶解过滤；
7、加入碱性调节剂使其呈碱性；
8、加入衍生化试剂进行衍生化反应，
9、反应结束后冷却至常温，即得二甲磺酸利右苯丙胺及其对映异构体的衍生化产物溶液。
10、在一种示例性的实施例中，步骤i)中，任选地，所述溶剂为甲醇，所述二甲磺酸利右苯丙胺及其对映异构体的浓度为10mg/ml；
11、任选地，所述碱性调节剂为三乙胺或氢氧化钠，优选地，为三乙胺；其中，每10ml的二甲磺酸利右苯丙胺及其对映异构体溶液中加入碱性调节剂200μl。
12、在一种示例性的实施例中，步骤i)中，任选地，所述衍生化试剂为羧酸酯，优选地，为二碳酸二叔丁酯；每10ml的二甲磺酸利右苯丙胺及其对映异构体溶液中加入衍生化试剂250μl或更多。
13、在一种示例性的实施例中，步骤i)中，优选地，所述衍生化反应可以在水浴锅中水浴加热，其中，反应温度为40～60℃，反应时间为1h以上，优选地，反应温度为50℃，反应时间为1h。
14、在一种示例性的实施例中，步骤ii)中，将步骤i)中的二甲磺酸利右苯丙胺及其对映异构体的衍生化溶液注入正相高效色谱仪中，记录色谱图；其中，正相高效液相色谱法是以手性色谱柱为分离柱，所述手性色谱柱的固定相为多糖，任选地，所述固定相为硅胶表面共价键合直链淀粉-三-(3-氯-5-甲基苯基氨基甲酸酯)。
15、在一种示例性的实施例中，所述色谱柱为chiralpak ig，4.6×250mm；5μm。
16、在一种示例性的实施例中，步骤ii)中，任选地，正相高效液相色谱柱中的流动相为有机溶剂和酸碱调节剂的混合液，其中：有机溶剂和酸碱调节剂体积比为100∶(0.05-0.15)，优选地，为100∶0.1。
17、在一种示例性的实施例中，任选地，所述酸碱调节剂为有机酸，优选地，为三氟乙酸。
18、在一种示例性的实施例中，任选地，所述有机溶剂为正己烷和低级醇的混合溶剂，体积比为(85-90)∶(10-15)，优选地，为90∶10。
19、在一种示例性的实施例中，任选地，所述低级醇选自甲醇或乙醇中的一种或两种，优选地，所述低级醇为甲醇和乙醇的组合。
20、在一种示例性的实施例中，有机溶剂中各组分的体积比为正己烷∶甲醇∶乙醇为90∶2.5∶7.5。
21、在一种示例性的实施例中，步骤ii)中，任选地，正相高效液相色谱法的其他条件还包括：波长范围为200～400nm，优选地，波长为210nm；
22、进样量为20μl；
23、流速为1.0～1.2ml/min，优选地，流速为1.1ml/min；
24、柱温为32℃-38℃，优选地，为35℃；
25、等度洗脱。
26、本发明第二方面提供了一种二甲磺酸利右苯丙胺制剂中对映异构体的检测方法，包括按照该上述方法对二甲磺酸利右苯丙胺制剂进行衍生化处理，并采用正相高效液相色谱法，在上述色谱条件下对二甲磺酸利右苯丙胺制剂中含有的对映异构体进行定性和定量分析。
27、在一种示例性的实施例中，任选地，所述二甲磺酸利右苯丙胺制剂为胶囊制剂。
28、在一种示例性的实施例中，所述方法包括如下步骤：
29、s100：配制溶液
30、s101：配制对照品溶液：分别配制二甲磺酸利右苯丙胺储备液和其对映异构体对照品的储备液，并分别与衍生化试剂进行衍生化反应，得到二甲磺酸利右苯丙胺对照品溶液a1和其对映异构体的对照品溶液a2；
31、s102：配制供试品溶液：配制二甲磺酸利右苯丙胺制剂的供试品储备液并与衍生化试剂进行衍生化反应，得到供试品溶液；
32、s103：配制对照溶液：将步骤s102中的供试品溶液稀释，即得对照溶液；
33、s200：检测
34、对步骤s101中的对照品溶液a1和a2、s102中的供试品溶液和s103中的对照溶液进行检测并记录色谱图；
35、s300：分析
36、根据步骤s200中的色谱图确定二甲磺酸利右苯丙胺及其对映异构体衍生化产物的保留时间；
37、采用自身对照法，根据供试品溶液和对照溶液色谱图中二甲磺酸利右苯丙胺对映异构体衍生化产物的峰面积计算供试品中对映异构体的含量。
38、在一种示例性实施例中，步骤s101中，二甲磺酸利右苯丙胺对照品溶液a1和其对映异构体的对照品溶液a2的配制方法如下：
39、二甲磺酸利右苯丙胺对照品溶液a1：二甲磺酸利右苯丙胺对照品加溶剂溶解即得二甲磺酸利右苯丙胺对照品储备液，其中，二甲磺酸利右苯丙胺对照品储备液的浓度为10mg/ml；移取部分二甲磺酸利右苯丙胺对照品储备液，加入碱性调节剂至其呈碱性并与衍生化试剂进行衍生化反应即得二甲磺酸利右苯丙胺对照品溶液a1；具体地，移取5ml二甲磺酸利右苯丙胺对照品储备液于带瓶塞的100ml锥形瓶中，加入100μl碱性调节剂至呈碱性，加入125μl衍生化试剂，密封，加热；反应结束后，冷却至常温，即得；
40、对映异构体对照品溶液a2：二甲磺酸利右苯丙胺对映异构体对照品加溶剂溶解即得二甲磺酸利右苯丙胺对映异构体对照品储备液，其中，二甲磺酸利右苯丙胺对映异构体对照品储备液的浓度为1mg/ml；移取部分二甲磺酸利右苯丙胺对映异构体对照品储备液，加入碱性调节剂至其呈碱性并与衍生化试剂进行衍生化反应即得二甲磺酸利右苯丙胺对映异构体对照品溶液a2；具体地，移取100μl对映异构体对照品储备液置于装有5ml甲醇的带瓶塞的100ml锥形瓶中，加入100μl碱性调节剂至呈碱性，加入125μl衍生化试剂，密封，加热；反应结束后，冷却至常温，即得。
41、在一种示例性实施例中，步骤s102中，所述供试品溶液的配制方法如下：
42、将二甲磺酸利右苯丙胺制剂加溶剂溶解过滤，取续滤液作为供试品储备液，其中，二甲磺酸利右苯丙胺供试品储备液的浓度为10mg/ml；移取部分供试品储备液，加入碱性调节剂至其呈碱性并与衍生化试剂进行衍生化反应即得所述供试品溶液；具体地，取二甲磺酸利右苯丙胺胶囊制剂的内容物(约相当于二甲磺酸利右苯丙胺200mg)，加入20ml甲醇超声溶解，过滤即得供试品储备液；精密移取供试品储备液10ml置于100ml锥形瓶中，加入200μl碱性调节剂至呈碱性，加入250μl衍生化试剂，密封，加热，反应结束后，冷却至常温，即得。
43、在一种示例性实施例中，步骤s103中，所述对照溶液的配制方法如下：
44、取步骤s102中的供试品溶液100μl于10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得所述对照溶液。
45、在一种示例性的实施例中，步骤s300中，供试品中对映异构体含量的计算公式：
46、
47、与相关技术相比，本技术具有以下优点：
48、由于二甲磺酸利右苯丙胺及其对映异构体均无紫外吸收，因此本技术采用衍生化方法使之紫外吸收增强，再通过正相高效液相色谱法进行检测分析，通过选择特定的色谱条件，能够简单、快速、准确地分析、检测出二甲磺酸利右苯丙胺及其对映异构体，从而保证了二甲磺酸利右苯丙胺及其制剂的质量可控，用本发明的方法能够测定出二甲磺酸利右苯丙胺中对映异构体的含量，对合成工艺以及相关制剂的开发起到了指导作用，同时有助于对原料药的质量标准的制定。
49、本技术的其它特征和优点将在随后的说明书中阐述，并且，部分地从说明书中变得显而易见，或者通过实施本技术而了解。本技术的其他优点可通过在说明书以及附图中所描述的方案来实现和获得。
1.一种二甲磺酸利右苯丙胺中对映异构体的检测方法，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，步骤i)中，衍生化反应可按照如下方法进行：
3.根据权利要求2所述的方法，任选地，所述溶剂为甲醇；
4.根据权利要求3所述的方法，任选地，所述二甲磺酸利右苯丙胺及其对映异构体溶液的浓度可为10mg/ml；
5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，步骤ii)中，正相高效液相色谱法的色谱条件为：
6.根据权利要求5所述的方法，任选地，正相高效液相色谱法的其他条件还包括：
7.一种二甲磺酸利右苯丙胺制剂中的对映异构体的检测方法，包括按照权利要求1-6中任一项所述的方法对二甲磺酸利右苯丙胺制剂进行衍生化处理，并采用正相高效液相色谱法，在权利要求1-6任一项所述的色谱条件下对二甲磺酸利右苯丙胺制剂中含有的对映异构体进行定性和定量分析；包括如下步骤：
8.根据权利要求7所述的方法，步骤s101中，二甲磺酸利右苯丙胺对照品溶液a1和其对映异构体的对照品溶液a2的配制方法如下：
9.根据权利要求8所述的方法，任选地，所述二甲磺酸利右苯丙胺制剂为胶囊制剂。
10.根据权利要求7-9任一项所述的方法，步骤s300中，供试品中对映异构体含量的计算公式：
