一株不动杆菌A-1及其在降解苯醚甲环唑中的应用

    专利查询2026-02-16  12


    本发明属于微生物降解,具体涉及一株不动杆菌( acinetobacter sp.)a-1及其在降解苯醚甲环唑中的应用。


    背景技术:

    1、苯醚甲环唑属于三唑类内吸性杀菌剂,常用于防治农作物的真菌性病害。它通过抑制真菌细胞内的麦角固醇合成来破坏细胞膜,从而达到杀菌效果。其杀菌谱广,对子囊菌纲、担子菌纲和包括链格孢属、壳二孢属、尾孢霉属、刺盘孢属、球痤菌属、茎点霉属、柱隔孢属、壳针孢属、黑星菌属在内的半知菌、白粉菌科、锈菌目及某些种传病原菌有持久的防治和治疗作用,同时对甜菜褐斑病、小麦颖枯病、叶枯病、锈病和由几种致病菌引起的霉病均有较好的治疗效果。

    2、由于苯醚甲环唑的高稳定性和持久性,使得土壤中的苯醚甲环唑通过雨水冲刷和地表径流迁移到环境介质中,对水生生态和土壤生态构成长期风险,其在各地的土壤中都难以在短时间内降解,它在环境中长期残留,不仅对环境造成严重污染,还会进入食物链,对人类和其他非靶标生物造成危害。目前,苯醚甲环唑对不同生物的各种毒理效应以及生物整个生命周期的不利影响已有报道,例如暴露于苯醚甲环唑会增加鲤鱼呼吸系统中活性氧的产生,导致氧化应激、炎症以及鳃组织和紧密连接蛋白的损伤,苯醚甲环唑诱导线粒体动态失衡和鳃细胞凋亡。有研究发现,暴露于1.0μg/l和10.0μg/l的苯醚甲环唑会抑制斑马鱼的配子成熟并诱发生殖毒性。此外,高浓度的苯醚甲环唑还会诱导斑马鱼肝脏变形、肠道菌群失衡和脂质代谢异常。另外,一些研究也指出,苯醚甲环唑残留可以通过径流和冲刷进入水体,可能对水生生物和非靶标物种产生毒性效应,如能抑制鱼类和藻类的生长发育,还对蜜蜂具有一定的毒性影响。不仅如此,还会降低土壤细菌群落多样性,破坏土壤生态平衡。由此可见苯醚甲环唑能对生态系统和人类健康造成严重威胁。

    3、微生物降解农药的研究始于20世纪40年代末,在目前已有的处理农药残留方法中,微生物降解以其安全、成本低、操作便利且无二次污染的优点倍受国内外研究人员的关注。而微生物降解特异性比较明显,因此需要筛选到高效降解的菌种。目前,关于苯醚甲环唑降解菌的研究非常少,目前有关于苯醚甲环唑生物修复的报道十分少见。


    技术实现思路

    1、针对苯醚甲环唑杀菌剂农药残留降解修复技术的不足,本发明提供了一株不动杆菌( acinetobacter sp.)a-1,其于2024年6月6日保藏于广东省微生物菌种保藏中心,保藏编号为gdmcc no:64727,保藏地址:广州市先烈中路100号大院59号楼5楼 广东省科学院微生物研究所。

    2、本发明另一目的是将上述不动杆菌(acinetobacter sp.)a-1应用在降解苯醚甲环唑中。

    3、为了实现以上目的,本发明采取以下技术方案:

    4、1、采集云南省昆明市寻甸回族彝族自治县鸡街镇种植园区土壤,将土壤添加到含有苯醚甲环唑的msm 液体培养基中,采用连续富集培养的方法富集、分离纯化后获得多株具有降解苯醚甲环唑能力的菌株,通过高效液相色谱法(hplc)检测菌株对苯醚甲环唑的降解能力,最终挑选菌株a-1进行后续实验;

    5、2、菌株a-1的鉴定

    6、(1)菌株a-1的形态学特征:在lb培养基上菌落呈圆形,微凸起,乳黄色,湿润,不透明,边缘整齐,表面光滑;扫描电镜下可以观察到该菌细胞呈杆状;采用革兰氏染色试剂盒对菌株a-1进行革兰氏染色,光学显微镜下菌株呈红色,为革兰氏阴性菌。

    7、(2)分子鉴定

    8、 采用细菌基因组dna提取试剂盒提取菌株a-1基因组 dna,以提取的基因组为模板,采用16s rdna细菌通用引物进行pcr扩增,pcr产物测序后,测序结果与ncbi上序列进行比对,结合形态学特征和分子鉴定结果,最终将该菌株鉴定为不动杆菌( acinetobactersp.);

    9、3、将不动杆菌a-1应用在降解苯醚甲环唑中,实验结果显示该菌株在第7天对苯醚甲环唑的降解率达到82.77%;菌株a-1 的最佳降解条件是ph 7、苯醚甲环唑初始浓度为50mg·l-1、接种量为2%。

    10、本发明具有以下有益效果:

    11、本发明筛选获得的不动杆菌a-1可用于修复苯醚甲环唑污染的水体、土壤等自然环境;本发明提供的不动杆菌a-1丰富了农药降解菌的种质资源库,在苯醚甲环唑残留污染的水体和土壤生物修复中有重大应用价值,为打破现有治理农药残留污染瓶颈提供了新的途径。



    技术特征:

    1.一株不动杆菌(acinetobacter sp.)a-1,其在广东省微生物菌种保藏中心的保藏编号为gdmcc no:64727。

    2.权利要求1所述的不动杆菌a-1在降解苯醚甲环唑中的应用。


    技术总结
    本发明公开了一种不动杆菌(Acinetobacter sp.)A‑1,其在广东省微生物菌种保藏中心的保藏编号为GDMCC NO:64727;将该菌株应用在降解苯醚甲环唑中,实验结果显示该菌在较宽pH和浓度范围内均能有效降解苯醚甲环唑,可以作为优良的农药降解菌应用于水体或土壤等污染环境的生物修复中,本发明为治理农药残留提供了新的途径,丰富了农药降解菌的种质资源库,应用前景好。

    技术研发人员:张文平,陈飞宇,杨野,周怡,王李萍,眭静怡,王天月
    受保护的技术使用者:昆明理工大学
    技术研发日:
    技术公布日:2024/11/26
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