本发明涉及微生物，特别涉及一种高糖苷酶活性的冠突散囊菌sr-05及其筛选方法。
背景技术：
1、化橘红来源于芸香科植物化州柚(citrus grandis(l.)osbeck)未成熟或近成熟果实的干燥外层果皮，具有散寒、燥湿、利气、消痰的功效，用于治疗风寒咳嗽、喉痒痰多、食积伤酒、呕恶痞闷等。化州市化橘红产业发展稳定，目前种植面积达11.62万亩，年产干果1.2万t。化橘红具有深厚的文化底蕴，从梁朝发展至今已有约1500年的应用历史。在明清时期，化橘红作为贡品被进献给皇室。清代《橘红辨》谓：“化州所产橘红，医家以之利气化痰，功倍于他药，人皆宝之”，更是有“一片橘红价值千金”的说法。
2、已有研究证实，化橘红主要含有黄酮类、香豆素类、挥发油、多糖等成分，其中，柚皮苷(黄酮类)的含量达到其干重的10％左右。多糖含量在4％到14％之间。现代药理学研究结果表明，化橘红具有化痰、抗炎、抗氧化、免疫调节、防治糖尿病患者心肌功能损伤等作用，其主要有效成分黄酮、多糖和挥发油均有使动物呼息道分泌物变多变稀薄、促进痰液排出的功效。因此，化橘红具有较好的开发利用价值。
3、作为化橘红主要活性成分之一，柚皮苷具有浓烈的苦味，同时，该物质的溶解性很差。常温下，柚皮苷在水中的溶解度为0.1％，在人体内吸收差、生物利用度低的缺点限制了它的进一步开发利用。因此，进行柚皮苷药剂改良型的开发具有重要意义。
技术实现思路
1、针对现有技术存在的不足，本发明提供了一种高糖苷酶活性的冠突散囊菌sr-05及其筛选方法，其能解决现有技术中存在的化橘红中柚皮苷的苦味浓烈且溶解度低，从而导致化橘红高效功能性产品开发困难的技术问题。
2、本发明的上述目的是通过以下技术方案实现的：
3、第一方面，本发明提供了一株高糖苷酶活性的冠突散囊菌sr-05，所述冠突散囊菌sr-05(aspergillus cristatus)的保藏日期为2024年2月2日，保藏单位为广东省微生物菌种保藏中心，保藏地址为广东省广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，保藏编号为gdmccno.64361，用于发酵化橘红以提升柚皮苷的含量与利用效率。
4、本发明经过筛选后发现，所获得的上述冠突散囊菌sr-05具有非常强的β-葡萄糖苷酶活性，通过水解大分子黄酮糖苷结构中的糖苷键，将其转化成小分子黄酮组分，从而能够提高黄酮的生物利用率并减轻其苦味。同时冠突散囊菌sr-05具有纤维素酶和果胶酶的活性，能够破坏细胞间的纤维素和果胶等组分，促进柚皮苷等组分的释放，提高化橘红的功效。
5、一些实施例中，所述冠突散囊菌sr-05的内转录间隔区(its)序列如seq id no:1所示。
6、第二方面，本发明提供了一种高糖苷酶活性的冠突散囊菌sr-05的筛选方法，所述筛选方法包括以下步骤：
7、将黑茶样品接种于产β-葡萄糖苷酶选择性富集培养基中进行第一次培养；
8、所述第一次培养结束后稀释，取稀释后的培养液，涂布在产β-葡萄糖苷酶固体培养基表面进行第二次培养；
9、所述第二次培养结束后筛选出产β-葡萄糖苷酶活性强的菌落，将所述菌落接种到新的所述产β-葡萄糖苷酶固体培养基上继续培养，获得冠突散囊菌sr-05。
10、在一些实施例中，所述第一次培养的条件包括：温度为28℃、转速为180r/min条件下培养3天。
11、在一些实施例中，所述第二次培养的条件包括：温度为28℃条件下恒温培养箱中避光培养5天。
12、在一些实施例中，所述产β-葡萄糖苷酶选择性富集培养基的配方包括：橙皮苷5.0g/l，蛋白胨5.0g/l，葡萄糖10.0g/l，磷酸二氢钾1.0g/l，硫酸镁0.5g/l，孟加拉红0.033g/l，氯霉素0.1g/l，ph 7.0。
13、在一些实施例中，所述产β-葡萄糖苷酶固体培养基的配方为：在所述产β-葡萄糖苷酶选择性富集培养基的基础上还加入琼脂，所述琼脂的加入量为15g/l。
14、在一些实施例中，所述第一次培养结束后稀释，具体包括：取1ml所述第一次培养后的培养液稀释到104cfu/ml。
15、在一些实施例中，所述第二次培养结束后筛选出产β-葡萄糖苷酶活性强的菌落，具体包括：
16、比较所述第二次培养前后的产β-葡萄糖苷酶固体培养基上透明圈的大小；
17、将透明圈直径至少增大50％的菌落作为产β-葡萄糖苷酶活性强的菌落。
18、第三方面，本发明提供了一种高糖苷酶活性的冠突散囊菌sr-05在化橘红发酵中的应用。
19、与现有技术相比，本发明的有益之处在于：
20、(1)本发明获得的冠突散囊菌sr-05，具有更高的β-葡萄糖苷酶活性。将冠突散囊菌sr-05用于化橘红发酵中，其分泌的β-葡萄糖苷酶可通过水解大分子黄酮糖苷结构中的糖苷键，将其转化成小分子黄酮组分，从而能够提高黄酮糖苷的溶解度和生物利用度，显著减轻了化橘红的苦味。
21、(2)冠突散囊菌sr-05具有纤维素酶和果胶酶的活性。将冠突散囊菌sr-05用于化橘红发酵中，其分泌的纤维素酶和果胶酶能够破坏细胞间的纤维素和果胶等组分，转化形成多糖，不仅提升了化橘红中多糖的整体含量，还促进了柚皮苷等组分的释放。柚皮苷与多糖结合后能发挥协同作用，更有利于人体吸收，提升柚皮苷的生物利用度，提高化橘红的功效。
1.一株高糖苷酶活性的冠突散囊菌sr-05，其特征在于，所述冠突散囊菌sr-05(aspergillus cristatus)的保藏日期为2024年2月2日，保藏单位为广东省微生物菌种保藏中心，保藏地址为广东省广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，保藏编号为gdmccno.64361，用于发酵化橘红以提升柚皮苷的含量与利用效率。
2.根据权利要求1所述的高糖苷酶活性的冠突散囊菌sr-05，其特征在于，所述冠突散囊菌sr-05的内转录间隔区(its)序列如seq id no:1所示。
3.一种权利要求1或2所述的高糖苷酶活性的冠突散囊菌sr-05的筛选方法，其特征在于，所述筛选方法包括以下步骤：
4.根据权利要求3所述的高糖苷酶活性的冠突散囊菌sr-05的筛选方法，其特征在于，所述产β-葡萄糖苷酶选择性富集培养基的配方包括：橙皮苷5.0g/l，蛋白胨5.0g/l，葡萄糖10.0g/l，磷酸二氢钾1.0g/l，硫酸镁0.5g/l，孟加拉红0.033g/l，氯霉素0.1g/l，ph 7.0。
5.根据权利要求3所述的高糖苷酶活性的冠突散囊菌sr-05的筛选方法，其特征在于，所述产β-葡萄糖苷酶固体培养基的配方在所述产β-葡萄糖苷酶选择性富集培养基的基础上还加入琼脂，所述琼脂的加入量为15g/l。
6.根据权利要求3所述的高糖苷酶活性的冠突散囊菌sr-05的筛选方法，其特征在于，所述第一次培养结束后稀释，具体包括：取1ml所述第一次培养后的培养液稀释到104cfu/ml。
7.根据权利要求3所述的高糖苷酶活性的冠突散囊菌sr-05的筛选方法，其特征在于，所述第二次培养后筛选出产β-葡萄糖苷酶活性强的菌落，具体包括：
