本发明涉及食品制剂,尤其是一种可降低皮肤炎症的人参肽食品制剂。
背景技术:
1、人参属于多年生的五加科草本植物,是我国传统的名贵中药材。众多研究表明,人参生理活性作用极为广泛,其药理作用包括免疫调节、抗炎、抗氧化、抗癌、抗诱变剂等;这些作用涉及并调节人体免疫系统、心血管系统、消化系统、免疫系统和内分泌系统等。
2、炎症是机体对于外界刺激或身体内刺激的一种防御反应,是身体的抵御功能。长时间或过度的炎症反应会导致机体免疫系统的功能受到抑制,使其对病原体的防御能力下降,从而增加感染风险,甚至可能导致长期健康问题。皮肤炎症是皮肤发生炎症的一种疾病,皮肤炎症可以削弱身体免疫力,使身体容易感染其他病菌,进一步影响身体健康。长期皮肤炎症引起的痒症、疼痛等不良反应会让人心理受到影响,容易出现焦虑、抑郁等心理问题。因此,对于皮肤炎症的治疗至关重要,有助于及时控制病情进展,减少对身体的不良影响。
3、其中,人参肽是从人参中获得的具有生物功能的肽段,人参肽在人体皮肤消炎上应用的研究较少,具有较好的研究前景。
技术实现思路
1、本申请的目的在于本发明提供一种人参肽食品制剂,该制剂具有良好的抗炎能力,可以降低脂多糖(lps)诱导的小鼠单核巨噬细胞(raw264.7)炎症模型释放炎症因子肿瘤坏死因子(tnf-α)、白介素1β(il-1β)和白介素6(il-6)的含量。此外,该人参肽制剂也可以降低小鼠皮肤炎症的症状,改善银屑病炎症模型小鼠的皮肤状态。
2、为实现上述目的,本发明提供了一种人参肽,氨基酸序列如seq id no:1所示。
3、本发明通过分离纯化及质谱法测定氨基酸序列的技术,分离鉴定了一种人参肽单体。这种人参肽单体具有良好的抗炎效果。
4、本发明将纯化的人参肽单体与麦芽糊精结合制备为人参肽食品制剂。
5、优选的,所述人参肽食品制剂中的人参肽和麦芽糊精的重量(g)比为1:5。
6、本发明通过lps刺激构建小鼠巨噬细胞(raw264.7)炎症模型、利用噻唑蓝(mtt)法检测细胞活力,利用实时定量pcr法检测细胞中炎症因子中肿瘤坏死因子(tnf-α)、白介素1β(il-1β)和白介素6(il-6)的mrna的表达水平,利用酶联免疫吸附测定法(elisa)检测细胞中肿瘤坏死因子(tnf-α)、白介素1β(il-1β)和白介素6(il-6)的蛋白含量,阐述人参肽单体和人参肽食品制剂可以抑制lps所致的raw264.7细胞炎症反应。
7、本发明以银屑病动物模型为皮肤损伤性炎症模型,检测人参肽食品制剂对银屑病动物的皮肤炎症,模型动物血清中炎症因子tnf-α、il-1β和il-6蛋白表达水平的影响,阐述人参肽食品制剂可以降低银屑病动物模型的皮肤炎症反应。
8、具体的:
9、利用硫酸铵沉淀法提取总蛋白的方法已经被广泛应用,然后采用醋酸纤维素透析的方法获得人参肽混合物,然后经过凝胶层析分离纯化,高效液相技术鉴定分离纯化物,并通过质谱法鉴定人参肽单体氨基酸序列,制备了人参肽单体。将纯化的人参肽单体与麦芽糊精结合制备为人参肽食品制剂。
10、利用脂多糖lps刺激构建小鼠巨噬细胞(raw264.7)炎症模型。发现人参肽单体和人参肽食品制剂分别单独作用于细胞时,对细胞没有毒性。经lps刺激raw264.7细胞12小时后,不同浓度的人参肽单体和人参肽食品制剂分别处理24小时后,细胞中炎症因子tnf-α、il-1β和il-6的mrna表达水平和蛋白表达水平明显降低,表明所述人参肽单体和人参肽食品制剂均可以抑制lps所致的raw264.7细胞炎症反应。
11、利用银屑病动物模型,采用6~8周龄的balb/c小鼠,小鼠的背部脱毛,局部涂抹咪喹莫特软膏于背部脱毛皮肤,在第6~7日炎症反应可达高峰,小鼠皮损具有典型的银屑病表现和组织学特点。将不同浓度的人参肽食品制剂分别给予治疗14天后,模型动物小鼠血清中的炎症因子tnf-α、il-1β和il-6蛋白表达水平显著低于模型组;且给予治疗组小鼠脱毛皮肤得到明显的改善,实验结果表明人参肽食品制剂均可以降低银屑病动物模型的皮肤炎症反应。
12、因此,本发明人参肽单体和人参肽食品制剂均可以抑制细胞体内的炎症反应,降低皮肤炎症反应。
13、本发明的有益效果是:由于本方法分离纯化的人参肽单体和人参肽食品制剂可调节机体免疫系统,具有较明显的抑制炎症的效果,且可抑制银屑病小鼠的皮肤炎症,将有进一步转向药物的潜力。
1.一种可降低皮肤炎症的人参肽食品制剂,其特征在于,包括氨基酸序列如seq idno:1所示的人参肽。
2.根据权利要求1所述的可降低皮肤炎症的人参肽食品制剂,其特征在于,还包括在食品中所有可接受的添加剂。
3.根据权利要求1所述的可降低皮肤炎症的人参肽食品制剂,其特征在于,将纯化的人参肽与麦芽糊精结合制备为人参肽食品制剂。
4.根据权利要求2所述的可降低皮肤炎症的人参肽食品制剂,其特征在于,所述人参肽食品制剂中的人参肽和麦芽糊精的重量比为1:5。
5.根据权利要求1所述的可降低皮肤炎症的人参肽食品制剂,其特征在于,人参肽的制备方法包括以下步骤:
6.根据权利要求5所述的可降低皮肤炎症的人参肽食品制剂,其特征在于,步骤s3中,人参多肽粗品经sephadex g-15凝胶柱层析分离,用20mm磷酸盐缓冲溶液进行洗脱,收集洗脱峰,并进行浓缩,冻干后得人参肽分离纯化物。
7.根据权利要求5所述的可降低皮肤炎症的人参肽食品制剂,其特征在于,步骤s3中,采用高效液相c18色谱柱检测,流动相为20mm的磷酸盐缓冲溶液,流速为1ml/min,检测波长为280nm。
8.根据权利要求5所述的可降低皮肤炎症的人参肽食品制剂,其特征在于,步骤s3中质谱检测:用0.1%的甲酸、2%乙腈的溶解液溶解人参肽肽段,涡旋振荡,4℃条件下,以10000r/min的转速离心10min,取上清进行质谱鉴定;分离后的肽段依次进入一级质谱、二级质谱进行检测;一级质谱参数resolution,80000;agc target,3e6;maximum it,50ms;scan range,100~2000m/z;二级质谱参数:resolution,20000;agc target,1e5;maximumit,50ms;topn,20nce/stepped nce 28。
