本发明涉及关节软骨修复材料的制备，具体涉及一种用于预防骨质疏松症的药物组合物及其制备工艺。
背景技术：
1、骨质疏松症(osteoporosis，op)是一种以全身骨量减少，骨组织微结构损坏，骨脆性增加，从而易发生骨折为特征的全身性骨病，骨质疏松症的病因复杂多样，包括内分泌、营养状况、遗传、生理和免疫等因素之间的相互作用，骨吸收的增加和骨形成的减少导致骨偶联的失衡，成骨细胞和破骨细胞介导的骨形成和骨吸收的调节是复杂的生物学过程，骨不断地进行重塑，形成和吸收需要保持紧密的平衡，以维持骨内稳态，成骨细胞骨形成与破骨细胞骨吸收之间骨稳态不平衡是骨质疏松症的根本原因。
2、目前，治疗和预防骨质疏松症的常用药物给药方式一般为口服制剂和注射针剂，口服递送是利用人体的生理腔道进行全身性治疗的一种给药途径，具有非侵入性、低成本和给药方便等特点，然而，复杂的胃肠道生理环境(胃内酸性环境、大量消化酶和肠道的黏液/黏膜屏障等)可导致口服药物稳定性降低及生物利用度降低，而且大多数口服药物无骨靶向性，难以靶向骨组织和骨细胞，从而进一步降低了治疗和预防骨质疏松症药物的生物利用度。
3、因此，需要一种稳定性好且具有骨靶向性的用于预防骨质疏松症的药物组合物及其制备工艺，以提高药物的生物利用度。
技术实现思路
1、针对现有技术存在的不足，本发明的目的在于提供一种用于预防骨质疏松症的药物组合物及其制备工艺。
2、一种用于预防骨质疏松症的药物组合物的制备工艺，包括如下步骤：
3、s1：制备槐米黄酮提取物
4、将槐米清洗、烘干、粉碎后，加入甲醇溶液中，再加入盐酸，进行超声波辅助回流提取，过滤后，将滤渣重复提取一次，合并滤液并蒸发浓缩，得到槐米黄酮提取物；
5、s2：预处理鲟鱼
6、将鲟鱼段解冻、去肉，取出头部、级索和鳍软骨，并投入80-100℃水中烫浸5-10min，再取出冷却至30-40℃，剔除头部、脊索和鳍软骨上残留的肌肉、脂肪和其他结缔组织，然后用绞肉机绞碎，放入水中搅拌，经过筛、清洗和烘干，得到预处理骨料；
7、s3：制备硫酸软骨素和胶原蛋白肽
8、将上述预处理骨料与去离子水混合磨浆，再进行加热，降温后，加入碳酸钠调节ph，然后依次加入碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶进行酶解，灭酶后，经过滤、超滤和冷冻干燥，得到硫酸软骨素和胶原蛋白肽；
9、s4：制备靶向中间体
10、将硬脂酸、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺、1-羟基苯并三唑和n,n-二甲基甲酰胺混合加热溶解制成混合溶液，再将盐酸四环素溶解制成盐酸四环素溶液，然后将盐酸四环素溶液加入混合溶液中，进行反应，经透析、离心、洗涤和干燥，得到靶向中间体；
11、s5：制备药物组合物
12、将上述靶向中间体溶解在乙醇中制成靶向中间体溶液，再将海藻酸钠溶解于超纯水中，加入氯化钙溶液并搅拌制成海藻酸钠混合溶液，将上述槐米黄酮提取物、上述硫酸软骨素和上述胶原蛋白肽加入海藻酸钠混合溶液中，再加入靶向中间体溶液，加热搅拌混合，再进行胶液分离、冷冻干燥和研磨，得到药物组合物。
13、进一步地，s1具体包括如下步骤：
14、s1.1：将槐米进行清洗和烘干，再置于粉碎机中，进行充分粉碎，得到槐米粉；
15、s1.2：按固液比1g：(90-100)ml将上述槐米粉加入60％甲醇溶液中，搅拌混合均匀后，再按0.01-0.03mmol/l加入盐酸，得到浸提液；
16、s1.3：将上述浸提液以60-70℃加热回流提取20-30min，再超声辅助回流提取1-2h，冷却后，进行过滤，再将滤渣重复提取1次，合并滤液并将合并后的滤液置于旋转蒸发仪中进行蒸发浓缩，得到槐米黄酮提取物。
17、进一步地，s3具体包括如下步骤：
18、s3.1：按质量比1：(4-6)将步骤s2制得的预处理骨料与去离子水混合磨成浆状，再以90-100℃的温度加热20-30min，待降温至25-30℃时，加入碳酸钠调节ph至8-9，得到混合浆料；
19、s3.2：向上述混合浆料中加入碱性蛋白酶，以40-45℃加热酶解1-2h，再加入木瓜蛋白酶，以45-50℃加热酶解1-2h，然后再加入菠萝蛋白酶，以45-50℃加热酶解1-2h后，升温至90-95℃，灭酶20-30min，得到酶解液；
20、s3.3：对上述酶解液进行过滤，再用截留分子量10000da的中空纤维膜对滤液进行超滤，截留部分冷冻干燥，得到硫酸软骨素，透过液冷冻干燥，得到胶原蛋白肽。
21、进一步地，s4具体包括如下步骤：
22、s4.1：按固液比(1.4-2)g：(1.5-1.9)g：1g：(130-150)ml将硬脂酸、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺、1-羟基苯并三唑和n,n-二甲基甲酰胺一起加入反应器中，以40-50℃加热搅拌1-2h，进行充分溶解，再保温20-30min，得到混合溶液；
23、s4.2：按固液比1g：(20-30)ml将盐酸四环素溶解在n,n-二甲基甲酰胺中，得到盐酸四环素溶液；
24、s4.3：将上述盐酸四环素加入上述混合溶液中，在氮气氛围下，反应20-24h，再置于透析袋中透析48-50h，取出透析袋中的混悬液，并置于离心机中，以4000-5000r/min的速率离心8-10min，收集沉淀并洗涤、干燥，得到靶向中间体。
25、进一步地，s5具体包括如下步骤：
26、s5.1：按固液比1g：(10-12)ml将步骤s4.3制得的靶向中间体加入乙醇中，搅拌至完全溶解，得到靶向中间体溶液；
27、s5.2：按固液比1g：(60-70)ml将海藻酸钠溶解于超纯水中，再加入氯化钙溶液，并进行超声搅拌，直至呈黏稠状，得到海藻酸钠混合溶液；
28、s5.3：将步骤s1.3制得的槐米黄酮提取物、步骤s3.3制得的硫酸软骨素和胶原蛋白肽加入上述海藻酸钠混合溶液中，搅拌混合均匀，再按靶向中间体与海藻酸钠的质量比为1：(8-12)加入上述靶向中间体溶液，并以30-40℃加热搅拌12-14h，胶液分离，得到复合凝胶；
29、s5.4：将上述复合凝胶置于冷冻干燥机中，进行冷冻干燥，再置于研磨机中进行研磨，得到药物组合物。
30、进一步地，碱性蛋白酶的用量为200u/g、木瓜蛋白酶的用量为100u/g、菠萝蛋白酶的用量为30u/g。
31、进一步地，盐酸四环素与硬脂酸的质量比为(1.3-1.5)：1。
32、进一步地，氯化钙溶液的浓度为1-3％，氯化钙溶液与超纯水的体积比为1：(25-35)。
33、进一步地，槐米黄酮提取物、硫酸软骨素和胶原蛋白肽的质量比为(6-8)：(3-5)：1，且槐米黄酮提取物与海藻酸钠的质量比为1：(20-30)。
34、一种用于预防骨质疏松症的药物组合物，其由上述任一项所述的一种用于预防骨质疏松症的药物组合物的制备工艺所制备。
35、与现有技术相比，本发明的有益效果是：
36、1、本发明先将海藻酸钠溶解在超纯水中，加入氯化钙作为交联剂，搅拌交联制成水凝胶，再加入槐米黄酮提取物、硫酸软骨素和胶原蛋白肽，充分混合均匀，使槐米黄酮提取物、硫酸软骨素和胶原蛋白肽负载在海藻酸钠水凝胶中，通过海藻酸钠作为预防骨质疏松活性成分槐米黄酮提取物的载体，能够有效提高槐米黄酮提取物的稳定性，进而提高槐米黄酮提取物的生物利用度。
37、2、本发明通过将硬脂酸、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺、1-羟基苯并三唑混合溶解在n,n-二甲基甲酰胺中，配制成混合溶液，再将盐酸四环素溶解在n,n-二甲基甲酰胺中配制成盐酸四环素溶液，然后将盐酸四环素溶液加入混合溶液中进行反应，制成具有骨靶向作用的靶向中间体，将该骨靶向中间体接枝在海藻酸钠水凝胶上后，能够提高海藻酸钠载药水凝胶的骨靶向性，修正水凝胶负载槐米黄酮提取物等成分特异性差的问题，从而增强成骨细胞成骨分化，进一步提高槐米黄酮提取物的生物利用度。
38、3、本发明槐米黄酮提取物能够干预wnt/β-catenin信号通路调控β-catenin数量以及β-catenin-tcf/lef复合体形成，促进bmp骨形态发生蛋白的生成以及成骨细胞增殖分化，抑制破骨细胞形成，而硫酸软骨素能够帮助维持关节的润滑性和弹性，影响骨细胞的代谢，保护骨组织，增加骨矿含量及骨密度，促进成骨细胞增殖和新骨形成，将槐米黄酮提取物和硫酸软骨素复配具有协效作用，预防骨质疏松的风险，此外，胶原蛋白肽的加入，能够与硫酸软骨素相互作用，有助于加速受损软骨的再生。
1.一种用于预防骨质疏松症的药物组合物的制备工艺，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种用于预防骨质疏松症的药物组合物的制备工艺，其特征在于，s1具体包括如下步骤：
3.根据权利要求2所述的一种用于预防骨质疏松症的药物组合物的制备工艺，其特征在于，s3具体包括如下步骤：
4.根据权利要求3所述的一种用于预防骨质疏松症的药物组合物的制备工艺，其特征在于，s4具体包括如下步骤：
5.根据权利要求4所述的一种用于预防骨质疏松症的药物组合物的制备工艺，其特征在于，s5具体包括如下步骤：
6.根据权利要求3所述的一种用于预防骨质疏松症的药物组合物的制备工艺，其特征在于，碱性蛋白酶的用量为200u/g、木瓜蛋白酶的用量为100u/g、菠萝蛋白酶的用量为30u/g。
7.根据权利要求4所述的一种用于预防骨质疏松症的药物组合物的制备工艺，其特征在于，盐酸四环素与硬脂酸的质量比为(1.3-1.5)：1。
8.根据权利要求5所述的一种用于预防骨质疏松症的药物组合物的制备工艺，其特征在于，氯化钙溶液的浓度为1-3％，氯化钙溶液与超纯水的体积比为1：(25-35)。
9.根据权利要求5所述的一种用于预防骨质疏松症的药物组合物的制备工艺，其特征在于，槐米黄酮提取物、硫酸软骨素和胶原蛋白肽的质量比为(6-8)：(3-5)：1，且槐米黄酮提取物与海藻酸钠的质量比为1：(20-30)。
10.一种用于预防骨质疏松症的药物组合物，其特征在于，其由权利要求1-9任一项所述的一种用于预防骨质疏松症的药物组合物的制备工艺所制备。
