本发明涉及生物，具体为一种脂质体装载nmn的方法及其应用。
背景技术：
1、透皮给药系统是一种新型给药系统，由于其具有更人性化的给药治疗特点以及透皮技术的不断发展，现已成为制药行业发展最快的领域之一。其是指在皮肤表面给药，药物一定速率透过皮肤各层，由毛细血管进入人体全身血液循环而达到有效血药浓度、实现全身或局部治疗作用的新剂型。相比于口服、静脉注射等给药方式，透皮给药由于药物吸收不受消化道内ph、食物、转运时间等因素影响，具有可避免肝脏和胃肠首过效应、降低血药浓度的波动、避免药物对胃肠道的刺激、给药无创伤、顺应性强等优点。
2、化妆品领域使用活性物以达到保湿、美白、抗衰老、抗氧化等各种功效，其中一大部分的活性物为水溶性的。众所周知，角质层更容易让脂溶性物质透过，而水溶性活性物只有极少的一部分可以透过角质层，因此无法充分发挥水溶性活性物的功能。对于水溶性活性物的透皮吸收，可以采用脂质体包裹等方法实现。脂质体是一种具有低毒性、低免疫性、良好的细胞相容性的物质，可同时装载水溶性、脂溶性和大分子药物，在药物递送尤其是透皮给药技术领域受到了广泛关注。
3、脂质体是由一个或多个包围水核的同心脂质双层组成的人造球形囊泡，于1964年bangham等人发表的论文中首次出现。脂质体的脂双层结构结合药物后改变药物的药动学特征，脂质体具有生物相容性好、无生物毒性、完全可生物降解且无免疫原性等优势，这些优势决定了脂质体可以作为输送药物的载体，药物可通过脂质体的封装减少药物直接与敏感组织接触的次数、增加稳定性、延长在体内循环时间，减少用药量，降低副作用。(脂质体制备工艺的研究进展)在载药过程中，脂质体首先携带药物经细胞间途径穿透角质层到达皮肤深层，再释放药物，使药物向皮肤深层分布并促进药物经皮肤吸收。
4、nmn，全称：β-烟酰胺单核苷酸，是一种自然存在的具有生物活性核苷酸，存在于各种生物体内透明质酸广泛分布于动物组织细胞外基质和细胞间质中。目前烟酰胺在皮肤抗衰中被证实的各种作用，nmn有可能可以更好地完成，因为nmn可以更直接更高效地转化为nad+(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸)，从而激活下游各类调节细胞周期、细胞寿命、dna修复和能量代谢的信号通路。具有抗氧化、减少氧化应激的作用。
5、2013年p&g日本团队利用双光子显微镜在80位亚洲女性皮肤上观察到的数据显示，表皮层细胞中nad+/nadh含量随着年纪增大显著下降,这可能与细胞老化和光损伤直接相关，而补充nad+可以减缓细胞的老化。
6、另外，经临床验证和长期应用表明nmn不仅有抗皱、祛斑祛色素等显著功效外，还有抗炎、防晒、保健、延缓衰老等作用。但由于在常温下稳定性差，容易被氧化，生物半衰期短，易被酶解以及具有免疫原性等缺点，而限制了其潜在应用。
7、根据目前有nmn护肤人体临床数据的文献报道，虽然在人体内nmn可以转换成nad+，但外用nmn能否透过皮肤屏障在细胞内转换为nad+，成为了研究难题亟需解决。
技术实现思路
1、(一)解决的技术问题
2、针对现有技术的不足，本发明提供了一种脂质体装载nmn的方法及其应用，脂质体主要是由磷脂和胆固醇或者其他附加剂形成的类似于生物膜结构的双分子层微小囊泡，对水溶性和脂溶性药物均有较好的包载能力，同时有效防止nmn的氧化，能有效透过皮肤屏障达到内皮细胞层，利用脂质体的透皮性再装载nmn，能有效的将nmn运输至内皮层，使nmn在皮内转化为nad+，帮助促生胶原蛋白、调节皮肤细胞周期，起到延缓皮肤细胞衰老，美白皮肤的作用，解决了外用nmn不便于透过皮肤屏障在细胞内转换为nad+的问题。
3、(二)技术方案
4、本发明为了实现上述目的具体采用以下技术方案：
5、一种脂质体装载nmn的方法，包括以下步骤：
6、s1、制备油相：将准确称量的甘油10-20％、1，2-戊二醇5-10％、peg-40氢化蓖麻油1-5％、异山梨醇酐二甲醚1-5％、卵磷脂1-5％、己基癸醇1-5％、支链淀粉0.1-10％溶液依次加入锥形瓶中，进行磁力搅拌，水浴搅拌温度为10-40℃，使其完全溶解，得到油相；
7、s2、制备水相：将nmn溶解于水中，使得nmn的质量百分比为0.03-1％，加热至75-85℃，得到水相；
8、s3、制备脂质体装载nmn：将适量的油相和水相混合到一起，所得混合溶液搅拌30min，将上述溶液进行高速分散均质机进行整粒，均质时间为10min，均质速度为8000r/min，将均质后的溶液进行超声操作，超声时间为20min，最后用0.22μm滤膜过滤，即得到脂质体滤液。
9、进一步地，脂质体以质量百分比计，如下组分组成：水40-70％、甘油10-20％、1，2-戊二醇5-10％、peg-40氢化蓖麻油1-5％、异山梨醇酐二甲醚1-5％、卵磷脂1-5％、己基癸醇1-5％、支链淀粉0.1-10％。
10、进一步地，所述脂质体具有双层膜结构，包括外层膜和内层膜，外层膜包括成膜剂和诱导剂，内层膜包括成膜剂和诱导剂；
11、其中，诱导剂镶嵌于成膜剂之间；
12、其中，外层膜和内层膜均还包括电荷调整剂，电荷调整剂镶嵌于所述成膜剂之间，电荷调整剂与所述诱导剂相邻或不相邻；
13、其中，脂质体还包括表皮细胞受体的配体，表皮细胞受体的配体位于外层膜的外部，与外层膜结合。
14、一种脂质体装载nmn方法制备的脂质体在化妆品中的应用；
15、其中，上述的脂质体在可通过表皮细胞受体的配体促进皮肤对活性物质吸收的化妆品中的应用。
16、(三)有益效果
17、与现有技术相比，本发明提供了一种脂质体装载nmn的方法及其应用，具备以下有益效果：
18、1、本发明以含有水、甘油、1，2-戊二醇、peg-40氢化蓖麻油、异山梨醇酐二甲醚、卵磷脂、己基癸醇、支链淀粉等成分的脂质体和nmn为原料，将nmn装载至脂质体上，此方法可以使nmn高效的透过皮肤屏障在内皮细胞层转化为nad+发挥作用，脂质体获取更便捷成本亦更低，易推广，同时脂质体对nmn有较好的包载能力，同时有效防止nmn的氧化。
19、2、本发明中nmn本身是机体细胞内的单一物质，其作为化妆品乳液的安全性较高，且该护肤品能够防止皮肤粗糙老化，减少皮肤皱纹出现，保持皮肤光鲜有弹性。
20、3、本发明方法提取的脂质体负载nmn能够有效透过表皮层抵达内皮细胞发挥抗衰老、屏障修复和皮肤美白的功效，具有巨大的临床和经济价值。
1.一种脂质体装载nmn的方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种脂质体装载nmn的方法，其特征在于：所述脂质体以质量百分比计，如下组分组成：水40-70％、甘油10-20％、1，2-戊二醇5-10％、peg-40氢化蓖麻油1-5％、异山梨醇酐二甲醚1-5％、卵磷脂1-5％、己基癸醇1-5％、支链淀粉0.1-10％。
3.根据权利要求1所述的一种脂质体装载nmn的方法，其特征在于：所述油相制备过程中，将准确称量的甘油10-20％、1，2-戊二醇5-10％、peg-40氢化蓖麻油1-5％、异山梨醇酐二甲醚1-5％、卵磷脂1-5％、己基癸醇1-5％、支链淀粉0.1-10％溶液依次加入锥形瓶中，进行磁力搅拌，水浴搅拌温度为10-40℃，使其完全溶解，得到油相。
4.根据权利要求1所述的一种脂质体装载nmn的方法，其特征在于：所述水相制备过程中，将nmn溶解于水中，使得nmn的质量百分比为0.03-1％，加热至75-85℃，得到水相。
5.根据权利要求1所述的一种脂质体装载nmn的方法，其特征在于：所述脂质体装载nmn过程中，将适量的油相和水相混合到一起，所得混合溶液搅拌30min，将上述溶液进行高速分散均质机进行整粒，均质时间为10min，均质速度为8000r/min，将均质后的溶液进行超声操作，超声时间为20min，最后用0.22μm滤膜过滤，即得到脂质体滤液。
6.根据权利要求1所述的一种脂质体装载nmn的方法，其特征在于：所述脂质体具有双层膜结构，包括外层膜和内层膜，外层膜包括成膜剂和诱导剂，内层膜包括成膜剂和诱导剂；
7.一种根据权利要求1-6任一项所述脂质体装载nmn方法制备的脂质体在化妆品中的应用；
