本发明属于生物医学领域，具体涉及一种诊断重症肺结核和预后的标志物。
背景技术：
1、结核病(tb)是一种由结核分枝杆菌(mtb)复合体的细菌引起的传染病，这种疾病主要通过吸入含有mtb bacilli的液滴的气溶胶传播。虽然大多数感染结核分枝杆菌的人是无症状(潜伏性结核病感染，tbi)，轻度或中度结核病，但是一些结核病患者会发展为严重疾病。在严重的结核病患者中，纤维化、空洞化和坏死会对肺组织和功能造成长期和不可逆的损伤，可能导致呼吸衰竭和死亡，目前临床上缺少诊断重症肺结核和预后的有效标志物。
2、pd-l1也称为cd274和b7-h1，是重要的免疫抑制型共刺激分子pd-1的配体，其广泛表达于人体免疫细胞或非免疫细胞中，通过与其受体pd-1相互作用发挥相应功能。pd-l1是b7家族的一员，其可溶形式spd-l1被认为可能通过金属蛋白酶(mmp/adam)水解膜结合蛋白，或者通过mrna差异剪切产生，是细胞表面的pd-l1分子被基质金属蛋白酶剪切而成的具有功能的可溶性形式(khan m,zhao z,arooj s,et al.soluble pd-1:predictive,prognostic,and therapeutic value for cancer immunotherapy.front immunol,2020,11:587460.)，通过与细胞表面受体(如mpd-1)相互作用而激活pd-1/pd-l1负性调节通路，在t细胞活化、增殖及细胞因子的产生过程中起到抑制作用，对维持免疫耐受具有一定作用(blank c,kuball j,voelkl s,et al.blockade ofpd-l1(b7-h1)augments human tumor-specific t cell responses in vitro.int j cancer,2006,119(2):317–327)。spd-l1在多种疾病如肿瘤、固有免疫、炎症过程中起着重要作用，且对监测治疗、重症死亡预测有一定的意义，是潜在的生物标志物。研究发现，初治弥漫大b细胞淋巴瘤患者的血清spd-l1水平显著高于对照组，血清spd-l1是弥漫大b细胞淋巴瘤患者对免疫化疗代谢反应的预测因子(el-ghammaz ams,gadallah ha,kamal g,et al.impact ofserum soluble programeddeath ligand 1on end of treatment metabolic response of diffuse large b celllymphoma patients.clin exp med,2018,18(4):505–512)。肺结核患者血清中高表达的spd-l1可能通过与t淋巴细胞上的mpd-l1结合，介导产生mpd-1/spd-l1负性信号通路，减弱了机体抵御、清除mtb的t细胞免疫应答能力，使mtb逃避机体免疫杀伤并使机体呈持续性感染状态。在结核性胸膜炎患者胸腔积液和外周血中也发现spd-l1表达显著增高(潘雪，邢玉斐，施敏骅，等.可溶性程序性死亡配体1在结核性胸膜炎患者胸腔积液和外周血中的表达及意义[j].中华医学杂志，2014，94(20):1543-1546)。进一步确定spd-l1是否为有效的诊断重症肺结核和预后的有效biomarker正适合当前的临床检测需要。
技术实现思路
1、本发明筛选出了一种用于诊断重症肺结核和预测肺结核预后效果的标志物，标志物在患者的血浆中表现出显著的变化，对诊断重症肺结核和预测肺结核预后效果具有较强的诊断效能。基于此，完成了本发明。
2、第一方面，本发明提供了一种诊断重症肺结核的生物标志物，所述生物标志物为spd-l1。
3、进一步，所述生物标志物来自于患者全血、血浆或者血清。
4、进一步，检测样本中spd-l1的浓度是采用流式细胞术或elisa方法检测；采用流式细胞术检测样本中spd-l1的浓度，当spd-l1的浓度>53.94pg/ml时，判断患者为重症肺结核；采用elisa方法检测样本中spd-l1的浓度，当spd-l1的浓度>511.7pg/ml时，判断患者为重症肺结核。
5、进一步的，所述肺结核是由结核分枝杆菌的存在引起的感染。
6、进一步的，所述的肺结核包括原发性肺结核、继发性肺结核、血型播散性肺结核、气管-支气管结核、结核性胸膜炎、菌阴肺结核等。
7、进一步的，所述结核分枝杆菌感染包括：原发性感染、继发性感染、肺外感染。
8、第二方面，本发明提供一种生物标志物在制备诊断重症肺结核的试剂中的应用，所述生物标志物为spd-l1，所述试剂为含有可以检测患者生物样本中spd-l1含量的试剂。
9、进一步，所述生物样本为患者全血、血浆或者血清。
10、进一步，检测生物样本中spd-l1的浓度是采用流式细胞术或elisa方法检测；采用流式细胞术检测生物样本中spd-l1的浓度，当spd-l1的浓度>53.94pg/ml时，判断患者为重症肺结核；采用elisa方法检测生物样本中spd-l1的浓度，当spd-l1的浓度>511.7pg/ml时，判断患者为重症肺结核。
11、第三方面，本发明提供一种诊断重症肺结核的试剂盒，所述试剂盒包含如本发明第二发明所述的试剂。
12、进一步，所述试剂盒可以为elisa检测试剂盒、胶体金检测试剂盒、免疫组化试剂盒、免疫荧光试剂盒和/或原位杂交染色试剂盒中的一种或多种。
13、更进一步，所述试剂盒诊断方法包括直接法、间接法、双抗夹心法和/或竞争法中的一种或多种。
14、第四方面，本发明提供一种预测肺结核预后效果的生物标志物，所述生物标志物为spd-l1。
15、进一步，所述生物标志物来自于患者全血、血浆或者血清。
16、进一步，检测样本中spd-l1的浓度是采用流式细胞术或elisa方法检测；采用流式细胞术检测spd-l1的浓度，当spd-l1的浓度>67.41pg/ml时，判断患者有死亡风险；采用elisa方法检测spd-l1的浓度，当spd-l1的浓度>791.9pg/ml时，判断患者有死亡风险。
17、第五方面，本发明提供一种生物标志物在预测肺结核预后效果的试剂中的应用，所述生物标志物为spd-l1。
18、进一步，所述生物标志物来自于患者全血、血浆或者血清。
19、进一步，检测样本中spd-l1的浓度是采用流式细胞术或elisa方法检测；采用流式细胞术检测spd-l1的浓度，当spd-l1的浓度>67.41pg/ml时，判断患者有死亡风险；采用elisa方法检测spd-l1的浓度，当spd-l1的浓度>791.9pg/ml时，判断患者有死亡风险。
20、第六方面，本发明提供一种肺结核预后效果的试剂盒，所述试剂盒包含如本发明第五方面所述的试剂。
21、进一步，所述试剂盒可以为elisa检测试剂盒、胶体金检测试剂盒、免疫组化试剂盒、免疫荧光试剂盒和/或原位杂交染色试剂盒中的一种或多种。
22、有益效果
23、本发明筛选得到的生物标志物spd-l1可以显著的区分重症肺结核患者和非重肺结核患者，预测肺结核预后效果。当用流式细胞术检测样本中spd-l1的浓度时，诊断重症肺结核患者的auc值和预测肺结核预后效果的auc值均>0.7；当采用elisa方法检测样本中spd-l1的浓度，诊断重症肺结核患者的auc值和预测肺结核预后效果的auc值均>0.8，表明本发明筛选得到的生物标志物对肺结核具有较高的诊断效能。
1.一种诊断重症肺结核的生物标志物，所述生物标志物为spd-l1。
2.一种生物标志物在制备诊断重症肺结核的试剂中的应用，所述生物标志物为如权利要求1所述的spd-l1，所述试剂为含有可以检测患者生物样本中spd-l1含量的试剂。
3.一种诊断重症肺结核的试剂盒，所述试剂盒包含如权利要求2所述的试剂。
4.如权利要求1所述的标志物，检测样本中spd-l1的浓度是采用流式细胞术或elisa方法检测；采用流式细胞术检测样本中spd-l1的浓度，当spd-l1的浓度>53.94pg/ml时，判断患者为重症肺结核；采用elisa方法检测样本中spd-l1的浓度，当spd-l1的浓度>511.7pg/ml时，判断患者为重症肺结核。
5.一种预测肺结核预后效果的生物标志物，所述生物标志物为spd-l1。
6.一种生物标志物在预测肺结核预后效果的试剂中的应用，所述生物标志物为权利要求5所述的spd-l1，所述试剂为含有可以检测患者生物样本中spd-l1含量的试剂。
7.一种肺结核预后效果的试剂盒，所述试剂盒包含如权利要求6所述的试剂。
8.如权利要求5所述的标志物，检测样本中spd-l1的浓度是采用流式细胞术或elisa方法检测；采用流式细胞术检测spd-l1的浓度，当spd-l1的浓度>67.41pg/ml时，判断患者有死亡风险；采用elisa方法检测spd-l1的浓度，当spd-l1的浓度>791.9pg/ml时，判断患者有死亡风险。
9.如权利要求1或5所述生物标志物来自于患者全血、血浆或者血清。
