本发明涉及组织培养及种苗高通量繁育，特别涉及丁香罗勒种苗的高通量繁育方法。
背景技术：
1、丁香罗勒(ocimumgratissimum l.)为唇形科罗勒属，一年生香草植物。
2、丁香罗勒是一种天然的药食两用植物，在食品、医药和化工等领域有广泛的应用，但传统繁育以种子繁育为主。此方法受到母株的生长程度和时间气候限制，无法满足日益发展产业对于丁香罗勒的需求，而高通量种苗繁育技术的缺乏制约了丁香罗勒产业进一步发展。而通过组织培养再生，能够在短时间内且不受时间和气候的影响下，由一株母体组织发展出许多个体，极大地激发出丁香罗勒组织的繁殖能力。但组织培养具有污染率高，存活率低的特点，目前关于丁香罗勒组织快繁研究还没有报道。
技术实现思路
1、有鉴于此，本发明提供了丁香罗勒种苗的高通量繁育方法。本发明提供了培养基、组合物以及丁香罗勒种苗的高通量繁育方法。本发明以顶芽为外植体材料及特定的生根培养基，能够在14d内获得具有根茎叶的完整植株，极大地提高了种苗的繁育效率，对日后的丁香罗勒种苗的高通量繁育与工厂化育苗具有重要意义。
2、为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
3、本发明提供了培养基，所述培养基包括含有0.1～0.5mg/l 6-ba、0.1～0.5mg/l2,4-d、1.0～3.0g/l活性炭和15～30g/l蔗糖的1/2ms培养基。
4、在本发明的一些具体实施方案中，所述培养基包括含有0.5mg/l 6-ba、0.1mg/l2,4-d、1.0g/l活性炭和15g/l蔗糖的1/2ms培养基。
5、本发明还提供了组合物，包括所述培养基，以及消毒剂。
6、在本发明的一些具体实施方案中，所述消毒剂包括乙醇、次氯酸钠和生汞溶液中的一种或多种。
7、在本发明的一些具体实施方案中，所述组合物中所述乙醇的浓度包括75％；所述次氯酸钠的浓度包括1.5％～2.5％；所述生汞溶液的浓度包括0.1％。
8、在本发明的一些具体实施方案中，所述组合物中所述乙醇的浓度包括75％；所述次氯酸钠的浓度包括2.5％；所述生汞溶液的浓度包括0.1％。
9、本发明还提供了如下任意项在丁香罗勒种苗高通量繁育中的应用：
10、(i)、所述培养基；和/或
11、(ii)、所述组合物。
12、本发明还提供了丁香罗勒种苗的高通量繁育方法，取半木质化的丁香罗勒顶芽作为外植体，经所述培养基或所述组合物培养，获得所述丁香罗勒种苗。
13、在本发明的一些具体实施方案中，所述高通量繁育方法包括如下步骤：
14、步骤1、取半木质化的丁香罗勒顶芽作为外植体，采用所述组合物中的消毒剂消毒，获得消毒后的外植体；
15、步骤2、将消毒后的外植体接种到所述培养基中培养，获得所述丁香罗勒种苗。
16、在本发明的一些具体实施方案中，步骤1所述外植体包括去除顶芽叶片后的半木质化的丁香罗勒顶芽。
17、在本发明的一些具体实施方案中，所述外植体的长度包括2.0～3.0cm。
18、在本发明的一些具体实施方案中，步骤1所述消毒的程序包括：所述外植体分别经所述组合物中所述乙醇、所述次氯酸钠、所述生汞溶液消毒。
19、在本发明的一些具体实施方案中，将所述外植体于乙醇中消毒的操作之前还包括将所述外植体于5℃放置0.5h的步骤。
20、在本发明的一些具体实施方案中，步骤1所述消毒的程序包括：取所述外植体于5℃放置0.5h，然后在无菌环境中，先用体积分数为75％的乙醇浸没30s，再置于体积分数为1.5％～2.5％的次氯酸钠溶液中2min，而后转入质量体积分数为0.1％的升汞溶液(1g升汞溶解1000ml水中)3min，最后用无菌水冲洗4次后沥干水分备用；优选地，步骤1所述消毒的程序包括：取所述外植体于5℃放置0.5h，然后在无菌环境中，先用体积分数为75％的乙醇浸没30s，再置于体积分数为2.5％的次氯酸钠溶液中2min，而后转入0.1％升汞溶液3min，最后用无菌水冲洗4次后沥干水分备用。
21、在本发明的一些具体实施方案中，步骤2包括将消毒后的外植体接种到含有0.5mg/l 6-ba、0.1mg/l 2,4-d、1.0g/l活性炭和15g/l蔗糖的1/2ms培养基中培养，获得所述丁香罗勒种苗。
22、在本发明的一些具体实施方案中，步骤2所述培养时的光照强度包括500～800lux；或
23、步骤2所述培养的时间包括14d。
24、在本发明的一些具体实施方案中，步骤2所述培养的条件包括：28±2℃，光照强度500lux，光照周期12h/d。
25、本发明包括但不限于提供了如下有益效果：
26、本发明涉及丁香罗勒组织培养及种苗高通量繁育技术领域，公开了一种以丁香罗勒顶芽为外植体的种苗快繁技术方法。本发明技术所述方法将丁香罗勒母株2.0～3.0cm的顶芽，首先在5℃冷藏冰箱里放置0.5h后，转入超净工作台中，先用75％酒精浸没30s后直接转入1.5～2.5％次氯酸钠溶液中2min，再转入0.1％升汞溶液3min，用无菌水冲洗4次后沥干水分，接种到含有0.1～0.5mg/l 6-ba、0.1～0.5mg/l 2,4-d、1.0～3.0g/l活性炭(ac)以及15～30g/l蔗糖的1/2ms生根优化培养基，在28±2℃，光照强度为500～800lux的暗光下培养，获得具有根茎叶的完整植株。本发明以顶芽为外植体材料及特定的生根培养基，能够在14d内获得具有根茎叶的完整植株，极大地提高了种苗的繁育效率，对日后的丁香罗勒种苗的高通量繁育与工厂化育苗具有重要意义。
1.培养基，其特征在于，所述培养基包括含有0.1～0.5mg/l 6-ba、0.1～0.5mg/l 2,4-d、1.0～3.0g/l活性炭和15～30g/l蔗糖的1/2ms培养基。
2.组合物，其特征在于，包括如权利要求1所述的培养基，以及消毒剂。
3.如权利要求2所述的组合物，其特征在于，所述消毒剂包括乙醇、次氯酸钠和生汞溶液中的一种或多种。
4.如下任意项在丁香罗勒种苗高通量繁育中的应用：
5.丁香罗勒种苗的高通量繁育方法，其特征在于，取半木质化的丁香罗勒顶芽作为外植体，经如权利要求1所述的培养基或如权利要求2或3所述的组合物培养，获得所述丁香罗勒种苗。
6.如权利要求5所述的高通量繁育方法，其特征在于，包括如下步骤：
7.如权利要求5或6所述的高通量繁育方法，其特征在于，所述外植体的长度包括2.0～3.0cm；或
8.如权利要求6或7所述的高通量繁育方法，其特征在于，将所述外植体于乙醇中消毒的操作之前还包括将所述外植体于5℃放置0.5h的步骤。
9.如权利要求6至8任一项所述的高通量繁育方法，其特征在于，步骤1所述消毒的程序包括：取所述外植体于5℃放置0.5h，然后在无菌环境中，先用体积分数为75％的乙醇浸没30s，再置于体积分数为1.5％～2.5％的次氯酸钠溶液中2min，而后转入质量体积分数为0.1％的升汞溶液3min，最后用无菌水冲洗4次后沥干水分备用；优选地，步骤1所述消毒的程序包括：取所述外植体于5℃放置0.5h，然后在无菌环境中，先用体积分数为75％的乙醇浸没30s，再置于体积分数为2.5％的次氯酸钠溶液中2min，而后转入0.1％升汞溶液3min，最后用无菌水冲洗4次后沥干水分备用；或
10.如权利要求6至9任一项所述的高通量繁育方法，其特征在于，步骤2所述培养的条件包括：28±2℃，光照强度500lux，光照周期12h/d；或
