本发明属于生物医药领域,涉及一种小鼠食管鳞癌细胞系及其应用。
背景技术:
1、食管癌是我国高发的肿瘤之一,食管癌是食管细胞的鳞状上皮癌,分为两种肿瘤,一种是腺细胞癌,一种是鳞状细胞癌。食管癌的发病原因复杂,比如遗传因素,环境因素,生活习惯等,没有主导因素。食管鳞状细胞癌的治疗以手术、放疗、化疗等综合治疗为主。近年来,随着分子靶向治疗、免疫治疗新药的不断发现,药物治疗在食管癌综合治疗中的作用前景广阔。近年来,基因组学、表观组学、转录组、蛋白组学、微生物组学以及生物信息分析技术等多组学技术的发展,为全方面深入剖析食管鳞癌的遗传变异、分子特征提供了先进的手段,为食管鳞癌的预防、筛查、早期诊断和精准治疗提供了重要的理论基础。但是目前仍然缺乏良好的食管鳞癌动物模型用于研究食管鳞癌的发生发展,各种治疗机制等。小鼠食管鳞癌类器官培养以及肿瘤模型的建立,为研究食管癌发生发展以及探索各种治疗手段提供了可能的技术平台。
2、类器官是疾病研究的临床前模型。在食管癌研究领域用到的动物肿瘤模型大多都是将人的肿瘤组织或细胞系移植到裸鼠上构成的pdx或cdx肿瘤模型。目前人源化小鼠模型还不够成熟,建立过程复杂且容易失败,费用高昂。应用于食管癌免疫研究的人源化小鼠模型截至目前尚未有报道,非常不利于食管癌的相关研究。传统的细胞培养,往往细胞种类单一,且在细胞永生化的过程中,遗传信息发生偏移,丢失或者增加了某些特定染色体片段。正常组织或者肿瘤都有高度异质性,种类单一的细胞系与体内状态差异极大,都不能反应病人的真实情况。基因鼠模型的遗传背景明晰,成瘤的位置基本在食管原位,但是该模型成本非常高,基因鼠繁殖周期太长。类器官在体外3d培养条件下可在体外表现出与体内细胞相似的细胞组成和生理功能。类器官的3d培养技术可以用于组织发育,肿瘤发生,药物测试等相关领域的研究。
3、目前国内外,已经有科学家通过化学致癌剂或基因缺陷等方法建立了小鼠食管癌的原发癌模型,比较典型的通过化学致癌剂4-硝基喹啉-1-氧化物(4nqo)诱导16个星期后,改用无菌水继续喂养12~16个星期,可以诱导明显的食管癌肿瘤组织的形成。每次需要建立小鼠食管癌动物模型时,都需要从化学致癌剂诱导肿瘤开始,这样耗费时间过长,对研究很不利。也有基于原位性小鼠食管癌模型进一步建立小鼠食管癌细胞系mec25和用p53缺失的转基因小鼠食管组织建立类器官,再通过smad4、pten突变,cmyc、krasg12d高表达改造为食管癌类器官模型的报道。有明确基因突变,缺失或者过表达的类器官模型,可能会影响一些靶标的研究,存在一定的局限性。
技术实现思路
1、一些实施方案中,本发明提供了一种食管癌细胞系,所述食管癌细胞系命名为syec2,保藏于广东省微生物菌种保藏中心,保藏编号为gdmcc no.64654。
2、本发明细胞系的保藏信息如下:本发明的食管癌细胞系命名为syec2,分类命名为:小鼠食管鳞癌细胞;已于2024年5月20日保藏于广东省微生物菌种保藏中心,保藏编号为gdmcc no.64654;保藏单位代码:gdmcc。
3、一些实施方案中,本发明提供了一种食管癌子代细胞,所述子代细胞系由所述的食管癌细胞系传代得到。
4、一些实施方案中,本发明提供了一种试剂盒,所述的试剂盒含有所述的食管癌细胞系。
5、一些实施方案中,所述试剂盒包括容器,以及装于容器中的所述的食管癌细胞系。
6、一些实施方案中,所述试剂盒为用于分析食管癌或建立食管癌动物或细胞模型的试剂盒。
7、一些实施方案中,所述动物选自哺乳动物。
8、一些实施方案中,所述哺乳动物选自啮齿类动物。
9、一些实施方案中,所述啮齿类动物选自鼠。
10、一些实施方案中,所述鼠选自小鼠。
11、一些实施方案中,本发明提供了所述的食管癌细胞系或所述的食管癌子代细胞获得的培养物。
12、一些实施方案中,本发明提供了所述的食管癌细胞系在制备食管癌动物模型中的用途。
13、一些实施方案中,所述试剂盒为用于分析食管癌或建立食管癌动物或细胞模型的试剂盒。
14、本发明获得了能够符合临床研究的食管癌细胞系,以及用其制备的类器官模型和动物模型,该模型可以在探究食管癌发生发展机制、寻找和优化新的食管癌可能的治疗方式等研究领域提供有利工具。
15、一些实施方案中,所述动物选自哺乳动物。
16、一些实施方案中,所述哺乳动物选自啮齿类动物。
17、一些实施方案中,所述啮齿类动物选自鼠。
18、一些实施方案中,所述鼠选自小鼠。
19、一些实施方案中,本发明提供了所述的食管癌细胞系在制备食管癌细胞模型或类器官模型中的用途。
20、一些实施方案中,所述食管癌选自食管鳞状细胞癌。
21、一些实施方案中,本发明提供了所述的食管癌细胞系或所述的食管癌子代细胞或所述的试剂盒在制备食管癌的诊断试剂的用途。
22、一些实施方案中,本发明提供了所述的食管癌细胞系或所述的食管癌子代细胞在用于建立所述食管癌发生发展、转移机制,药物筛选或者耐药机理的基础或临床前期研究平台或作为实验工具在研究癌症中的用途。
23、一些实施方案中,所述癌症为食管癌。
24、一些实施方案中,所述癌症为食管鳞状细胞癌。
25、一些实施方案中,本发明提供了一种制备食管癌细胞动物模型或类器官的方法,所述方法包括使用了所述的食管癌细胞系或所述的食管癌子代细胞。
26、一些实施方案中,所述方法包括如下步骤:将所述的食管癌细胞系或所述的食管癌子代细胞接种到动物体内构建得到食管癌细胞动物模型或类器官。
27、一些实施方案中,所述食管癌为食管鳞状细胞癌。
28、一些实施方案中,所述动物选自哺乳动物。
29、一些实施方案中,所述哺乳动物选自啮齿类动物。
30、一些实施方案中,所述啮齿类动物选自鼠。
31、一些实施方案中,所述鼠选自小鼠。
32、一些实施方案中,本发明提供了一种食管癌的候选药物的体外筛选方法,包括如下步骤:(1)将待测物质接触所述的食管癌细胞系中;(2)若步骤(1)中所述的待测物质接触所述食管癌细胞系后,导致所述食管癌细胞系凋亡或抑制细胞增殖,则所述待测物质为治疗食管癌的候选药物。
33、一些实施方案中,所述食管癌为食管鳞状细胞癌。
1.一种食管癌细胞系,其特征在于,所述食管癌细胞系命名为syec2,保藏于广东省微生物菌种保藏中心,保藏编号为gdmcc no.64654。
2.一种食管癌子代细胞,其特征在于,所述子代细胞系由权利要求1所述的食管癌细胞系传代得到。
3.一种试剂盒,其特征在于,所述的试剂盒含有权利要求1所述的食管癌细胞系;
4.权利要求1所述的食管癌细胞系或权利要求2所述的食管癌子代细胞获得的培养物。
5.权利要求1所述的食管癌细胞系在制备食管癌动物模型中的用途;
6.权利要求1所述的食管癌细胞系在制备食管癌细胞模型或类器官模型中的用途;
7.权利要求1所述的食管癌细胞系或权利要求2所述的食管癌子代细胞或权利要求3所述的试剂盒在制备食管癌的诊断试剂的用途。
8.权利要求1所述的食管癌细胞系或权利要求2所述的食管癌子代细胞在用于建立所述食管癌发生发展、转移机制,药物筛选或者耐药机理的基础或临床前期研究平台或作为实验工具在研究癌症中的用途;
9.一种制备食管癌细胞动物模型或类器官的方法,其特征在于,所述方法包括使用了权利要求1所述的食管癌细胞系或权利要求2所述的食管癌子代细胞;
10.一种食管癌的候选药物的体外筛选方法,其特征在于,包括如下步骤:
