本发明属于微生物应用，涉及枯草芽孢杆菌k6对亚硒酸钠的转化和富集、以及对黄曲霉毒素的降解，具体涉及一种富硒花生粕及富硒花生肽的制备方法。
背景技术：
1、花生粕作为花生制油后的副产品，含有约50％的蛋白，花生蛋白有较高的营养价值，为了提高花生粕蛋白的利用价值，近年来利用花生粕蛋白制取花生多肽备受关注，但花生粕容易感染黄曲霉毒素。
2、花生肽的生产方式主要有酶解法和发酵法。发酵法不仅可有效的去除黄曲霉毒素，也能将微生物产酶和酶解两步合二为一，省去了酶的分离和提纯步骤，且制备的花生多肽没有苦味，具有发酵的天然芳香味，适口性好。花生粕经微生物发酵后，蛋白质、氨基酸、小肽、水溶性蛋白和总酸含量均显著增加，营养价值明显提升，小肽、水溶性蛋白含量的增加可提高动物的消化利用率；同时，黄曲霉毒素含量下降，提高了产品安全性。
3、硒是动植物以及人体内必需的微量元素之一，对于治疗和预防克山病起到关键作用，还具有抗氧化、降压、抗癌防癌、免疫、抗病毒等功能。人体补充硒主要来源于食物中以有机化合物形式存在的有机硒，尤其是硒蛋白。我国处于地球低硒带，从东北三省起斜穿至云贵高原，一条狭长的缺硒带占据我国72％的土地，近10亿中国人硒元素摄取量在标准以下。因此，加强富硒食品的开发，将硒元素带到人们的日常饮食中，有利于提高人民健康水平。微生物发酵法制备富硒、脱毒的花生粕和制备富硒花生肽是一种高效、绿色、安全的方法，在粮食、饲料和食品加工中具有很好的应用前景。
技术实现思路
1、要解决的技术问题：本发明的目的是提供一种富硒花生粕及富硒花生肽的制备方法，枯草芽孢杆菌k6能够降解黄曲霉毒素和富集硒，具有较好的脱毒、富硒作用，在粮食、饲料和食品加工中具有很好的应用前景，尤其对油料副产物价值的提升和品质的改善具有较好的应用前景。从花生粕中分级分离得到的富硒肽具有多种生物活性，具有极大的开发潜力和应用价值。
2、技术方案：一种富硒花生粕及富硒花生肽的制备方法。
3、进一步的，所述枯草芽孢杆菌k6的保藏编号为cctcc no:m 20231096，该菌株已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为中国.武汉.武汉大学
4、进一步的，所述的一种富硒花生粕及富硒花生肽的制备方法包括以下步骤：
5、s1.将枯草芽孢杆菌k6接种于lb液体培养基中初次培养，得到种子液，将种子液接种于含有亚硒酸钠的lb液体培养基中再次培养，得到富硒菌体发酵液；
6、s2.将发酵液与含黄曲霉毒素的花生粕混合发酵，获得富硒且脱毒的花生粕；
7、s3.将富硒花生粕分级超滤提取，得到富硒花生肽。
8、进一步的，所述步骤s1中lb液体培养基的制备方法为：称取胰蛋白胨10g、酵母粉5g、氯化钠10g，加水至1l，混合均匀，灭菌处理20-35min。
9、进一步的，所述步骤s1中初次培养条件为于37℃，ph 7，160rpm的摇床上过夜培养。
10、进一步的，所述步骤s1中种子液接种量为4-8％。
11、进一步的，所述步骤s1中含有亚硒酸钠的lb液体培养基中亚硒酸钠的添加浓度为15-100ug/ml。
12、进一步的，所述步骤s1中再次培养条件为于27-47℃，ph4-8，160rpm震荡培养9-48h。
13、进一步的，所述步骤s1中发酵液中枯草芽孢杆菌k6的含量≥2.8×108cfu/ml。
14、进一步的，所述步骤s2中混合发酵条件为：发酵温度为27-47℃，接菌量为10％，花生粕料液比为(1:0.6)-(1:1.2)，发酵时间为36-84h。
15、进一步的，所述步骤s3中分级超滤提取具体为：采用截留分子量为10000da的超滤管进行超滤，得到滤过液；再将滤过液采用截留分子量为3000da的超滤管进行超滤，得到分子量在3000da以下的富硒花生肽。
16、有益效果：
17、1.本发明中采用的枯草芽孢杆菌k6在降解黄曲霉毒素的同时，使无机硒在生物体内转化为有机硒；黄曲霉毒素脱除率能达到80％以上，培养基中亚硒酸钠的转化率能达到95％以上，花生粕中硒保留率达到50％左右，从而使硒在生物体内富集，具有较好的脱毒、富硒作用；同时，将枯草芽孢杆菌k6发酵液接种于花生粕中，分级超滤提取，即可制备富硒花生肽；2.本发明提供的一种富硒花生粕及富硒花生肽的制备方法，在粮食、饲料和食品加工中具有很好的应用前景，尤其对油料副产物价值的提升和品质的改善具有较好的应用前景。
1.一种富硒花生粕及富硒花生肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种富硒花生粕及富硒花生肽的制备方法，其特征在于，所述步骤s1中lb液体培养基的制备方法为：称取胰蛋白胨10g、酵母粉5g、氯化钠10g，加水至1l，混合均匀，灭菌处理20-35min。
3.根据权利要求1所述的一种富硒花生粕及富硒花生肽的制备方法，其特征在于：所述步骤s1中初次培养条件为于37℃，ph 7，160rpm的摇床上过夜培养。
4.根据权利要求1所述的一种富硒花生粕及富硒花生肽的制备方法，其特征在于：所述步骤s1中种子液接种量为4-8％。
5.根据权利要求1所述的一种富硒花生粕及富硒花生肽的制备方法，其特征在于：所述步骤s1中含有亚硒酸钠的lb液体培养基中亚硒酸钠的添加浓度为15-100ug/ml。
6.根据权利要求1所述的一种富硒花生粕及富硒花生肽的制备方法，其特征在于：所述步骤s1中再次培养条件为于27-47℃，ph4-8，160rpm震荡培养9-48h。
7.根据权利要求1所述的一种富硒花生粕及富硒花生肽的制备方法，其特征在于：所述步骤s1中发酵液中枯草芽孢杆菌k6的含量≥2.8×108cfu/ml。
8.根据权利要求1所述的一种富硒花生粕及富硒花生肽的制备方法，其特征在于：所述步骤s2中混合发酵条件为：发酵温度为27-47℃，接菌量为10％，花生粕料液比为(1:0.6)-(1:1.2)，发酵时间为36-84h。
9.根据权利要求1所述的一种富硒花生粕及富硒花生肽的制备方法，其特征在于，所述步骤s3中分级超滤提取具体为：采用截留分子量为10000da的超滤管进行超滤，得到过滤液；再将过滤液采用截留分子量为3000da的超滤管进行超滤，得到分子量在3000da以下的富硒花生肽。
