本发明属于生物学，尤其涉及一种干细胞外泌体在制备肌腱炎治疗制剂中的应用。
背景技术：
1、肌腱炎通常是指由于肌肉纤维过度使用，反复强烈牵拉而引起肌腱胶原纤维退行性病变，除了累及肌腱本身，还可以累及腱鞘。肌腱损伤是常见的一种运动损伤性疾病，与运动相关的最常见的慢性疾病是跟腱病、髌腱病、股四头肌和腘绳肌腱病、肩袖肌腱病、“网球肘”外上髁炎等。主要临床表现为肌腱疼痛、功能受损，运动能力下降，严重影响到了患者的生活质量。临床上治疗肌腱炎常使用非甾体抗炎药物缓解疼痛。严重的疼痛，可以局部注射类固醇激素，可以控制炎症、减轻疼痛。然而不可反复多次注射类固醇，因为多次注射类固醇可以减弱肌腱的强度，导致肌腱断裂。部分患者、尤其是产生粘连时；普通药物治疗方式无效，可考虑手术治疗。术纵行切开狭窄腱鞘，切除一小条腱鞘，从而根除疼痛来源。但是手术治疗的缺点是创伤大，痛苦大，恢复期长。
2、绝大多数研究表明炎症在肌腱病的发生、发展和肌腱重塑中至关重要。有研究报道指出，干细胞外泌体在免疫调控、炎症反应中发挥重要作用。作为细胞间通讯的关键信使，外泌体将生物活性分子传递给受体细胞，从而参与多种病理生理过程。脐带间充质干细胞外泌体有希望在肌腱炎治疗领域发挥有效作用，但是常规培养干细胞外泌体的分泌量较低、肌腱炎治疗活性偏低等问题仍有待解决。因此，如何提高干细胞分泌量和诱导干细胞产生针对肌腱炎治疗的外泌体是干细胞外泌体在肌腱炎治疗制剂中应用的关键。
技术实现思路
1、本发明的目的在于提供一种干细胞外泌体在制备肌腱炎治疗制剂中的应用，从而利用脐带间充质干细胞外泌体更好的实现肌腱炎治疗效果。
2、为实现上述目的，本发明提供了如下技术方案：
3、首先，本发明提供了一种干细胞外泌体在制备肌腱炎治疗制剂中的应用，所述肌腱炎治疗制剂为脐带间充质干细胞在滑液支原体裂解物刺激下产生的外泌体。
4、进一步地，所述干细胞外泌体的制备方法包括如下步骤：
5、1）分离培养脐带间充质干细胞；
6、（2）制备滑液支原体裂解物；
7、（3）脐带间充质干细胞传代到细胞培养瓶中，传代次数不超过5代，细胞传代密度为1×106/ml，二氧化碳培养箱内培养24h，待细胞密度达到80%以上；
8、（4）细胞瓶中加入滑液支原体裂解物，继续培养24h，离心分离细胞培养上清，将外泌体提取试剂和细胞培养上清液按照1∶1的比例混合，静置16小时后，12000rpm离心1小时收集沉淀物，用原培养液1/10体积pbs溶解外泌体。
9、进一步地，所述滑液支原体裂解物在脐带间充质干细胞培养基中的添加剂量为100μg/ml。
10、进一步地，所述滑液支原体裂解物的制备方法包括如下步骤：
11、（1）取实验室冻存的滑液支原体，按1%的比例接种改良frey氏液体培养基，37℃、5% co2 培养箱静置培养24 ~48小时，观察培养基颜色由红色。收获培养物12000rpm/min离心30分钟，弃去9/10的上清液，用原体积1/10的上清液重悬菌体沉淀。
12、（2）重悬的菌液超声波破碎仪破碎，12000rpm/min离心10分钟，收集上清液。
13、（3）破碎的菌液用0.22μm的滤器过滤即为滑液支原体裂解物，测定蛋白浓度，4℃保存备用。
14、其次，本发明提供了一种用于提高脐带间充质干细胞外泌体产量的生物制剂，所述生物制剂为滑液支原体裂解物。
15、进一步地，所述生物制剂在脐带间充质干细胞培养基中的添加剂量为100μg/ml。
16、进一步地，所述生物制剂的制备方法包括如下步骤：
17、（1）取实验室冻存的滑液支原体，按1%的比例接种改良frey氏液体培养基，37℃、5% co2 培养箱静置培养24 ~48小时，观察培养基颜色由红色。收获培养物12000rpm/min离心30分钟，弃去9/10的上清液，用原体积1/10的上清液重悬菌体沉淀。
18、（2）重悬的菌液超声波破碎仪破碎，12000rpm/min离心10分钟，收集上清液。
19、（3）破碎的菌液用0.22μm的滤器过滤即为滑液支原体裂解物，测定蛋白浓度，4℃保存备用。
20、本发明的有益效果在于：
21、本发明通过培养滑液支原体，制备滑液支原体裂解物，用滑液支原体裂解物刺激脐带间充质干细胞制备外泌体。与常规培养的脐带间充质干细胞外泌体相比，使用滑液支原体裂解物刺激可以显著提高脐带间充质干细胞外泌体的分泌量。将外泌体用于肌腱炎治疗时，注射相同剂量的外泌体，滑液支原体裂解物培养外泌体组大鼠手术腿恢复活动性能的时间均值比常规外泌体组提前了28.79%。可见滑液支原体裂解物培养外泌体比常规外泌体具有更好的肌腱炎治疗效果。
1.一种干细胞外泌体在制备肌腱炎治疗制剂中的应用，其特征在于，所述肌腱炎治疗制剂为脐带间充质干细胞在滑液支原体裂解物刺激下产生的外泌体。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述干细胞外泌体的制备方法包括如下步骤：
3.根据权利要求2所述的滑液支原体裂解物，其特征在于，所述滑液支原体裂解物在脐带间充质干细胞培养基中的添加剂量为100μg/ml。
4.根据权利要求3所述的滑液支原体裂解物，其特征在于，所述滑液支原体裂解物的制备方法包括如下步骤：
5.一种用于提高脐带间充质干细胞外泌体产量的生物制剂，其特征在于，所述生物制剂为滑液支原体裂解物。
6.根据权利要求5所述的生物制剂，其特征在于，所述生物制剂在脐带间充质干细胞培养基中的添加剂量为100μg/ml。
7.根据权利要求6所述的生物制剂，其特征在于，所述生物制剂的制备方法包括如下步骤：
