本发明涉及一种方法,该方法包括使能够将底物转化为具有式(i)的化合物、优选地香草醛的微生物连续生长的步骤(a)。
背景技术:
1、香草醛可以通过本领域技术人员已知的各种方法获得,值得注意地通过以下两种途径:
2、-基于生物技术工艺的“天然”途径,该途径具体包括培养能够将发酵底物生物转化成香草醛的微生物。这样的其中发酵底物为阿魏酸的方法尤其从专利申请ep 0885968中已知。专利us 5017388描述了一种方法,其中发酵底物为丁香酚和/或异丁香酚。这些方法的结果是制备被称为“天然香草醛”的香草醛;
3、-“合成”途径,其包括以愈创木酚起始但不涉及微生物的常规化学反应。该方法导致制备出被称为合成香草醛的香草醛。
4、最后,香草醛也可以经由“生物基”途径制备,其中香草醛衍生自木质素。特别地,可以提及us2745796、de 1132113以及azadbakht等人的international journal ofbiology and biotechnology[国际生物与生物技术杂志],2004,第1卷,第4期,第535-537页的标题为“preparation of lignin from wood dust as vanillin source andcomparison of different extraction methods[由木粉制备木质素作为香草醛来源以及不同提取方法的比较]”的文章,或制备自天然来源的材料。可以特别提及文献wo 2019/020773。
5、如上所述,“天然”途径的方法包括培养能够将底物转化为香草醛的微生物。这一步骤是使微生物生长以获得生物质的阶段,该生物质将用作用于将底物生物转化为香草醛的阶段的生物催化剂。
6、在工业上,这一生长期是耗时且棘手的。实际上,通常需要接种容纳在冷冻管中的少量微生物,并将其转移到体积略大的第一发酵罐中以使微生物生长。使生物质生长并将其转移到较大反应器中的这一步骤可以根据需要重复多次。该生长步骤的总持续时间可能是相当长的,例如大约72h。此外,这一生长步骤必须在灭菌培养基中进行。需要对一个或多个发酵罐和该一个或多个发酵罐的所有入口和出口进行灭菌的初始步骤,并且该步骤必须在特定条件下进行。因此,一方面,从一个发酵罐转移到另一个发酵罐存在污染风险,并且另一方面,实施这种方法是复杂的。
7、本发明涉及一种用于使微生物生长的有效的工业方法,其中降低了污染风险并且提高了生产率。
技术实现思路
1、本发明首先涉及一种方法,该方法包括使能够将底物转化为具有式(i)的化合物、优选地香草醛的微生物连续生长的步骤(a)。
2、本发明还涉及一种用于产生具有式(i)的化合物、优选地香草醛的方法,该方法的特征在于其包括使能够将底物转化为具有式(i)的化合物、优选地香草醛的微生物连续生长的步骤(a)。
1.一种连续方法,该方法包括使能够将底物转化为具有式(i)的化合物、优选地香草醛的微生物生长的步骤(a),其中该具有式(i)的化合物是
2.如权利要求1所述的连续方法,其特征在于生长过程在生长培养基中进行。
3.如权利要求2所述的连续方法,其特征在于连续添加该生长培养基。
4.如权利要求1至3中任一项所述的连续方法,其特征在于控制该生长培养基中碳源的浓度并且根据能够将底物转化为具有式(i)的化合物、优选地香草醛的该微生物的需要调节该生长培养基中碳源的浓度。
5.如权利要求1至4中任一项所述的连续方法,其特征在于步骤(a)之前是培养该微生物的步骤(a0)。
6.如权利要求1至5中任一项所述的连续方法,其特征在于该底物选自由以下组成的组:葡萄糖、阿魏酸、丁香酚、异丁香酚、香豆酸、咖啡酸、l-酪氨酸、香草酸和4-乙烯基愈创木酚,优选地选自葡萄糖、阿魏酸和丁香酚。
7.一种用于产生具有式(i)的化合物、优选地香草醛的方法,该方法的特征在于其包括如权利要求1至6中任一项所述的使能够将底物转化为具有式(i)的化合物、优选地香草醛的微生物连续生长的步骤(a)。
8.如权利要求7所述的用于产生具有式(i)的化合物、优选地香草醛的方法,该方法的特征在于其包括生物转化步骤(b)。
9.如权利要求7至8中任一项所述的用于产生具有式(i)的化合物、优选地香草醛的方法,该方法的特征在于步骤(a)和(b)是连续的。
10.如权利要求7至8中任一项所述的用于产生具有式(i)的化合物、优选地香草醛的方法,该方法的特征在于步骤(a)和(b)是同时的。
