本发明属于植物生物培育，具体涉及一种羊踯躅种子的育苗方法及其应用。
背景技术：
1、羊踯躅属杜鹃花科杜鹃花属植物，是中国杜鹃花科羊踯躅亚属中仅有的1个原生种。羊踯躅作为一种具有独特植物学特征和药用价值的植物，在药用、园艺等方面都具有重要意义。在临床应用领域，羊踯躅常用于治疗类风湿性关节炎以及跌打损伤；在医药工业领域，羊踯躅常用作麻醉药、镇痛药和农药；在园艺领域，羊踯躅的花朵色泽鲜艳，形态优美，是重要的观赏花卉之一。
2、然而，由于羊踯躅种子在自然条件下繁殖困难，并且近些年来野生羊踯躅的生境持续受到破坏、人类过度采挖等原因，羊踯躅的种群数量在近年来急剧减少。部分省份的野外甚至已经很难见到野生羊踯躅的踪影。据调查，野生羊踯躅的濒危状况有日益加剧的趋势。这种不仅影响了羊踯躅的生态功能，还对其作为中药材和观赏植物的经济价值构成了威胁。因此，研发羊踯躅实生苗的繁殖技术具有十分重要的意义。
技术实现思路
1、本发明的目的是解决现有技术的不足，提供一种羊踯躅种子的育苗方法，具体采用以下的技术方案：
2、本发明的第一方面，提供了一种羊踯躅种子的育苗方法，包括以下步骤：
3、s1：将经过预处理后的羊踯躅种子置于2%的次氯酸钠溶液中浸泡，冲洗，然后置于10%的双氧水中浸泡，浸泡结束后采用无菌漏斗过滤保留羊踯躅种子，并用无菌水冲洗2-5遍，得到无菌且已打破休眠的羊踯躅种子；
4、s2：将s1的得到的羊踯躅种子置于无菌营养土配方基质中进行接种培养；
5、s3：将s2接种培养好的羊踯躅种子置于温度为25±2℃、相对湿度为60%-70%、光照强度为2000 lx-2500 lx、光照时间为14h/d的条件下进行培养，得到羊踯躅无菌实生苗；
6、羊踯躅在药用、园艺等方面都具有重要的价值，临床研究表明羊踯躅中的二萜类成分能够有效治疗类风湿性关节炎，具有广泛的应用前景。然而由于各种原因，野生的羊踯躅资源日益减少，极大地限制了羊踯躅的应用。本发明公开了一种能够培育出大量高品质、无菌的羊踯躅植株的方法，为进行药用植物资源研究工作奠定基础、为工业生产提供原材料。
7、所述营养土配方基质中包括积比为3：1的营养土和蛭石或营养土和珍珠岩。
8、作为进一步优选的实施方式，上述预处理包括以下步骤：
9、将羊踯躅种子在-4℃条件下处理1 d，然后置于无菌水浸泡1 h-2 h，再置于75%乙醇中进行浸泡30 s，最后采用无菌水冲洗2次，得到预处理后的羊踯躅种子。
10、作为进一步优选的实施方式，置于2%的次氯酸钠溶液中浸泡的时间为3 min，用于表面消毒。
11、作为进一步优选的实施方式，置于10%的双氧水中浸泡的时间为6 min，用于进一步的消毒以及打破休眠。
12、作为进一步优选的实施方式，上述营养土配方基质中包括积比为3：1的营养土和蛭石。
13、作为进一步优选的实施方式，上述接种培养的容器为培养皿或三角瓶。
14、本发明的第二方面，还提供了上述的育苗方法得到的羊踯躅无菌实生苗子叶或下胚轴在构建羊踯躅转基因体系中的应用。
15、作为进一步优选的实施方式，上述子叶或下胚轴为发芽15 d-25 d的羊踯躅无菌实生苗子叶或下胚轴。
16、本发明的第三方面，还提供了上述的育苗方法得到的羊踯躅无菌实生苗在回归引种栽培中的应用，该回归引种栽培包括以下步骤：
17、将权上述的育苗方法经过45 d的培育且生长状态良好的濒危羊踯躅实生苗揭盖2-4 d后，移栽至营养土中，在相对湿度为60%-70%，温度为25±2℃的条件下驯化1-2周，后续用于回归引种栽培。
18、本发明的有益效果为：
19、（1）本发明先采用2%次氯酸钠对羊踯躅种子进行表面消毒，然后采用10%的双氧水打破种子休眠该方法简单易行，成本低，相对于现有技术具有操作简单、绿色环保、提高发芽率以及幼苗健壮等优点。
20、（2）本发明公开了一种能够培育出大量高品质、无菌的羊踯躅植株的方法，为进行药用植物资源研究工作奠定基础、为工业生产提供原材料。
1.一种羊踯躅种子的育苗方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的育苗方法，其特征在于，所述预处理包括以下步骤：
3. 根据权利要求1所述的育苗方法，其特征在于，置于2%的次氯酸钠溶液中浸泡的时间为3 min。
4. 根据权利要求1所述的育苗方法，其特征在于，置于10%的双氧水中浸泡的时间为6min。
5.根据权利要求1所述的育苗方法，其特征在于，所述营养土配方基质中包括积比为3：1的营养土和蛭石。
6.根据权利要求1所述的育苗方法，其特征在于，所述接种培养的容器为培养皿或三角瓶。
7.权利要求1-6任一项所述的育苗方法得到的羊踯躅无菌实生苗子叶或下胚轴在构建羊踯躅转基因体系中的应用。
8. 根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述子叶或下胚轴为发芽15 d-25 d的羊踯躅无菌实生苗子叶或下胚轴。
9.权利要求1-6任一项所述的育苗方法得到的羊踯躅无菌实生苗在回归引种栽培中的应用，其特征在于，所述回归引种栽培包括以下步骤：
