本发明涉及生物工程,具体涉及一种虾白斑综合征病毒vp28重组蛋白及其制备方法与应用。
背景技术:
1、白斑病是由白斑综合症病毒(wssv)引起的一种严重的病毒性疾病,其典型症状是病虾头胸甲部位可见大量的0.5-3mm大小不等的白色斑点,wssv宿主范围较为广泛,研究发现,包括对虾、螯虾在内的大约98种甲壳类动物均可成为其宿主,该病毒发病快,致死率高,传播速度快,虾类感染白斑综合征病毒后,3到10天内死亡率100%,在世界范围内给对虾养殖业造成了巨大的经济损失,目前已成为全球范围内限制对虾养殖业发展的主要因素之一。
2、wssv病毒粒子呈长杆状,为双链dna病毒。其病毒粒子的结构从外至内共有三部分,包括三层囊膜结构,桥连结构和核衣壳结构,迄今为止,通过基因组和蛋白质组学方法已经发现了超过39种结构蛋白。其中,vp28在wssv囊膜蛋白中含量大约60%,是wssv的主要囊膜蛋白,且被认为是全身性感染的主要因素。迄今缺少有效的策略防控该病毒,近些年发现,将该病毒囊膜蛋白导入虾体内,能起到保护宿主的作用,囊膜蛋白vp28成为防御wssv的关键因子。
技术实现思路
1、本发明的目的在于提供瑞一种虾白斑综合征病毒vp28重组蛋白及其制备方法与应用,该vp28重组蛋白为在野生型vp28蛋白(氨基酸序列为seq id no:3)的基础上优化设计得到,vp28重组蛋白可通过异源表达获取,在虾白斑病的防治方面具有良好的应用前景。
2、为此,第一方面,本发明提供一种vp28重组蛋白,其氨基酸序列如seq id no:1所示。
3、本发明的第二方面提供一种基因,其编码本发明第一方面所述的vp28重组蛋白。
4、进一步,所述基因的核苷酸序列为seq id no:2。
5、本发明的第三方面提供一种表达载体,所述表达载体包含本发明第二方面所述的基因。
6、本发明的四方面提供一种宿主细胞,所述宿主细胞表达本发明第一方面所述的vp28重组蛋白,和/或包含本发明第二方面所述的基因或第三方面所述的表达载体。
7、进一步,所述宿主细胞为原核细胞。
8、进一步,所述宿主细胞为大肠杆菌。
9、本发明的第五方面提供所述vp28重组蛋白的制备方法,包括:在允许表达所述vp28重组蛋白的条件下培养本发明第四方面所述的宿主细胞,并且从所得培养物中纯化所述vp28重组蛋白。
10、本发明的第六方面,提供所述vp28重组蛋白在制备预防和/或治疗虾白斑病产品方面的应用。
11、进一步,所述产品为饲料添加剂。
12、进一步,所述产品中,所述vp28重组蛋白的用量为0.5~2%(w/w)。
13、与现有技术相比,本发明的技术方案具有以下有益效果:
14、本发明制备的原核表达载体重组菌成功表达虾白斑综合征病毒vp28重组蛋白。大量研究表明vp28是对虾白斑综合征病毒的主要囊膜蛋白,可独立与宿主细胞表面发生结合,可以推断这个蛋白在感染对虾的初级阶段起了重要作用。本发明提供的vp28重组蛋白,可起到一定预防虾白斑综合征病毒感染的作用,具有良好的应用前景。
1.一种vp28重组蛋白,其特征在于,其氨基酸序列如seq id no:1所示。
2.一种基因,其特征在于,其编码权利要求1所述的vp28重组蛋白。
3.如权利要求2所述的基因,其特征在于,所述基因的核苷酸序列为seq id no:2。
4.一种表达载体,其特征在于,所述表达载体包含权利要求2或3所述的基因。
5.一种宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞表达权利要求1所述的vp28重组蛋白,和/或包含权利要求2或3所述的基因或权利要求4所述的表达载体。
6.如权利要求5所述的宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞为原核细胞。
7.如权利要求5所述的宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞为大肠杆菌。
8.一种vp28重组蛋白的制备方法,其特征在于,包括:在允许表达权利要求1所述vp28重组蛋白的条件下培养权利要求5-7任一项所述的宿主细胞,并且从所得培养物中纯化所述vp28重组蛋白。
9.权利要求1所述的vp28重组蛋白在制备预防和/或治疗虾白斑病产品方面的应用。
10.如权利要求9所述的应用,其特征在于,所述产品为饲料添加剂。
