本发明属于中医药，涉及一种多穗石柯对缺血再灌注肝脏的保护作用。
背景技术：
1、多穗石柯(lithocarpus polystachyrus rehd)，又名甜茶(sweet tea)、多穗柯、野金柴或甘茶，属于壳斗科石柯属的常绿乔木。多穗石柯具有甘甜的味道和平和的性质，其主要功效包括清热解毒、化痰、祛风、降压等，主要应用于湿热泻痢、肺热咳嗽、痈疽疮疡、皮肤瘙痒等疾病。2017年，它已被批准为中国新食品原料。现代研究发现多穗石柯提取物具有保护d-氨基半乳糖、对乙酰氨基酚及四氯化碳诱导的肝损伤及改善肝组织病理学病变。然而，多穗石柯对肝脏缺血再灌注患者肝脏的保护作用尚未见报道。肝脏缺血再灌注损伤是在肝脏恢复血液灌注或供氧时引起的，缺血缺氧损伤会加重肝损伤。肝脏缺血再灌注损伤涉及复杂的生理过程，如代谢紊乱、氧化应激和炎症反应。由于肝缺血再灌注在肝外科实践中难以避免，且现有的防治方法不尽如人意，肝缺血再灌注的机制和治疗研究成为肝外科的热点之一。
2、因此本发明有必要通过药效指标、肝脏病理切片及分子生物学等技术探讨和确定多穗石柯对肝脏缺血再灌注小鼠的肝脏保护作用，为多穗石柯开发利用及其药效物质基础研究提供一定的理论指导。
技术实现思路
1、本发明的目的是针对现有的技术存在的上述问题，提供一种多穗石柯对缺血再灌注肝脏的保护作用，本发明所要解决的技术问题是证实和明确多穗石柯对肝脏缺血再灌注患者肝损伤的保护作用。
2、步骤1：多穗石柯提取物的制备
3、将多穗石柯叶粉碎后，过200目筛，放入圆底烧瓶中，加入20倍体积的蒸馏水，静置1小时，然后进行两次回流提取，每次持续2小时，趁热过滤，并将滤液合并，接下来进行醇沉和浓缩步骤：在将提取液进行减压浓缩之后，加入高浓度的乙醇，使乙醇浓度达到65％(v/v％)，然后室温静置一夜。最后，去除底部的浑浊液，取出醇沉上清液进行减压浓缩，并储存备用。
4、步骤2：采用无损伤微血管夹阻断肝脏左、中、尾叶的肝动脉和门静脉及胆管血管制备肝脏缺血再灌注小鼠模型，给予多穗石柯提取物治疗，检测肝功能、氧化应激、肝脏病理学观察等指标；
5、步骤2中，动物模型的制备、分组及给药：选取20±2g重量的雄性c57小鼠40只，动物在室温为20～24℃、相对湿度为50～70％、自由摄食饮水，适应性喂养一周；按体重将所有小鼠随机分为假手术组(sham)、模型组(hiri)组、多穗石柯提取物+假手术组(lape+sham)、多穗石柯提取物+手术组(lape+hiri)组，每组10只，多穗石柯提取物组给予相应剂量的提取物，空白对照组和模型组灌胃给予相同体积的纯水溶液，连续7天；
6、步骤2中，肝功能的检测：给药7后进行肝脏缺血实验，造模16h后，取血及肝脏，采用试剂盒检测肝脏的谷丙转氨酶(alt)和谷草转氨酶(ast)。
7、步骤2中，氧化应激的检测：采用生化试剂盒及elisa试剂盒进行氧化应激指标及铁死亡相关指标的检测；
8、步骤2中，肝脏病理学观察：剥离肝脏，生理盐水清洗以消除血液残留与污物，然后利用过滤纸吸收掉组织上的液体和水分，取一部分肝脏，用4％多聚甲醛固定，进行组织病理学的观察。
9、步骤3：采用蛋白免疫印迹法(western blot)检测各组小鼠肝脏铁死亡及氧化应激相关指标。
10、本发明首次利用肝脏缺血再灌注模型结合结合分子生物学探讨多穗石柯提取物对肝脏缺血再灌注患者肝脏的保护功能。
1.多穗石柯对缺血再灌注肝脏的保护作用，其特征在于，多穗石柯提取物用于缓解缺血再灌注肝脏的损伤，多穗石柯提取物用于保护缺血再灌注肝脏。
2.根据权利要求1所述多穗石柯对缺血再灌注肝脏的保护作用，其特征在于，多穗石柯提取物包括含多穗石柯或多穗石柯提取物的中药材、含多穗石柯或多穗石柯提取物的保健品。
3.根据权利要求1所述多穗石柯对缺血再灌注肝脏的保护作用，其特征在于，口服的方式摄入多穗石柯对缺血再灌注肝脏的保护作用的有效成分。
