本发明涉及中成药，更具体的说是涉及丹膝颗粒在制备防治缺血性脑卒中药物中的应用。
背景技术：
1、脑卒中是一种以半身不遂、肌肤感觉异常、口舌歪斜、言语困难等症状为主要表现的疾病。这种疾病在全球范围内具有高发病率、高病残率和高病死率的特点。在中国，脑卒中是引发死亡及长期身体与认知功能障碍的重要疾病。尽管年龄标准化发病率和死亡率有所下降，但我国脑卒中疾病负担依然很严重。缺血性脑卒中又称脑梗死，占脑卒中的大部分。临床上常常采用包括溶栓、取栓，血管形成、其他改善脑血循环药物等。
2、丹膝颗粒，是丹参、牛膝、天麻、牡丹皮、赤芍、川芎、生地黄、淫羊藿、桑寄生、栀子、决明子、火麻仁共十二种药材精制而成的中药方剂。该方剂被纳入了2020年版的《中国药典》中。
3、然而，针对丹膝颗粒在治疗缺血性脑卒中方面的作用原理，目前的研究尚不充分，相关信息还比较稀缺。基于此，有必要利用现代分析手段探索丹膝颗粒治疗脑卒中的作用机制，从多角度多维度去发掘机制通路。为丹膝颗粒防治缺血性脑卒中提供科学依据，也为其进一步开发提供参考。
4、综上，探究丹膝颗粒在抗脑卒中药物中的用途及作用机制是本领域技术人员亟需解决的问题。
技术实现思路
1、有鉴于此，本发明提供了丹膝颗粒在制备防治缺血性脑卒中药物中的应用。
2、本发明采用longa提出的可逆性大脑中动脉闭塞线栓法加以改良，造模成功后给予丹膝颗粒药物治疗14天，利用神经功能评分、ttc染色、血清中il-1β、tnf-α和精氨酸含量等常规经典指标来检测大鼠缺血性脑卒中程度，以此评价丹膝颗粒治疗缺血性脑卒中的药效。
3、本发明采用longa提出的可逆性大脑中动脉闭塞线栓法加以改良，造模成功后给予丹膝颗粒药物治疗14天后，收集大鼠血清样本和脑组织样本，利用非靶向代谢组学技术对sham组和mcao组之间、mcao组和丹膝颗粒治疗组之间的血清和脑组织的差异代谢物进行分析，以此获得丹膝颗粒在防治缺血性脑卒中的机制。
4、本发明采用longa提出的可逆性大脑中动脉闭塞线栓法加以改良，造模成功后给予丹膝颗粒药物治疗14天后，收集大鼠肠道内容物，利用16s高通量测序对丹膝颗粒，sham组和mcao组鼠肠道内容物进行分析，以此从菌群角度探究丹膝颗粒防治缺血性脑卒中的作用。
5、为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
6、丹膝颗粒在制备防治缺血性脑卒中药物中的应用。
7、进一步的，用于降低血清中il-6、tnf-α、精氨酸含量。
8、进一步的，用于调节脑组织代谢物、血清代谢物及肠道菌群。
9、进一步的，所述脑组织代谢物为l-天冬氨酸。
10、进一步的，所述血清代谢物为l-精氨酸、鸟氨酸。
11、进一步的，在门水平上，所述肠道菌群为厚壁菌门、拟杆菌门和变形菌门。
12、进一步的，在属水平上，所述肠道菌群为乳酸菌属和ht002属。
13、进一步的，所述丹膝颗粒包括如下质量份数的组分：丹参500份、牛膝400份、天麻100份、牡丹皮334份、赤芍400份、川芎167份、生地黄400份、淫羊藿300份、桑寄生400份、栀子200份、决明子200份和火麻仁200份。
14、经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本发明取得的有益效果为：
15、(1)本发明通过sd大鼠造模成功并再灌注24h后，给予了丹膝颗粒和尼莫地平治疗14天。结果发现经过14天的给药治疗后，丹膝颗粒给药组和尼莫地平组均改善了大鼠的神经功能评分并且减轻了mcao大鼠脑组织的梗死面积，通过he染色结果发现，丹膝颗粒改善脑组织神经细胞形态变化，通过测定各组血清中il-1β、tnf-α、精氨酸的含量水平变化，发现脑卒中发生过程中，和sham组相比，各组il-1β、tnf-α、精氨酸三者的含量都存在一个上升趋势，丹膝颗粒治疗后，三者含量均有所下降，特别是精氨酸水平几乎降至正常大鼠水平。说明丹膝颗粒在治疗缺血性脑卒中具有良好的药效。
16、(2)基于代谢组学研究，我们选取sham组、mcao组和dxkl组高剂量组(以下均简称为dxkl组)大鼠的脑组织和血清样本进行代谢差异物和代谢通路富集分析。脑组织代谢结果表明在mcao-sham中有12种代谢物发生变化，其中7个化合物上调，mcao-dxkl中有38种代谢差异物，其中22个化合物上调，16个下调。将mcao-sham和mcao-dxkl交集只获得丹膝颗粒治疗mcao大鼠的一种差异代谢物为l-天冬氨酸。结合l-天冬氨酸所在的通路，进一步推测丹膝颗粒治疗缺血性脑卒中的作用机制可能与d-氨基酸代谢、半胱氨酸和蛋氨酸代谢、甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢过程有关。血清代谢组学结果发现：sham-mcao有84种代谢物变化，mcao-dxkl有184种代谢物变化，在sham-mcao和mcao-dxkl组共表达39种代谢物，与sham-mcao组相比，mcao-dxkl组有21个代谢产物上调，3个代谢产物下调。通路富集结果显示丹膝颗粒影响mcao大鼠的5条代谢途径有精氨酸生物合成、缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸生物合成、氨基酰基trna生物合成、甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢、精氨酸和脯氨酸代谢。
17、(3)基于16s高通量测序mcao组、sham组、dxkl组(高剂量组)大鼠的肠道内容物进行分析：根据avs分布venn图可知丹膝颗粒可以改变肠道菌群结构。进一步进行α多样性及β多样性分析，dxkl干预后，大鼠肠道菌群的丰富度下降；大鼠肠道菌群多样性影响不大。mcao组与sham组大部分呈重叠靠拢趋势，无明显差异；dxkl给药干预后，dxkl组与mcao组、sham组有明显区别。从门、属水平来看，与sham组相比，经丹膝颗粒治疗后厚壁菌门/拟杆菌门比例发生显著下调。与sham组和mcao组相比，dxkl组变形菌门比例呈显著性上升。从属水平来看，丹膝颗粒干预后dxkl组的lactobacillus比例和ht002丰度显著降低至5.03％，从而引起菌群变化，改善缺血性脑卒中。
1.丹膝颗粒在制备防治缺血性脑卒中药物中的应用。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，用于降低血清中il-6、tnf-α、精氨酸含量。
3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，用于调节脑组织代谢物、血清代谢物及肠道菌群。
4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述脑组织代谢物为l-天冬氨酸。
5.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述血清代谢物为l-精氨酸、鸟氨酸。
6.如权利要求3所述的应用，其特征在于，在门水平上，所述肠道菌群为厚壁菌门、拟杆菌门和变形菌门。
7.如权利要求3所述的应用，其特征在于，在属水平上，所述肠道菌群为乳酸菌属和ht002属。
8.如权利要求1～7任一所述的应用，其特征在于，所述丹膝颗粒包括如下质量份数的组分：丹参500份、牛膝400份、天麻100份、牡丹皮334份、赤芍400份、川芎167份、生地黄400份、淫羊藿300份、桑寄生400份、栀子200份、决明子200份和火麻仁200份。
