本发明涉及免疫分析，尤其涉及一种玉米赤霉烯酮(z)半抗原、抗原、抗体及制备方法和光激化学发光定量检测试剂盒。
背景技术：
1、玉米赤霉烯酮(z)属于真菌霉素，是由霉变产生的，它是真菌产生的次生代谢产物，从玉米、小麦、花生、到水果、调味料、中药材、饲料、牛奶，真菌毒素在我们的生产生活中，几乎无处不在。玉米赤霉烯酮(z)对育种的家畜和家禽危害很大，常常可以导致一个育种基地一年内恢复不到原有的水平，而且造成大面积的品质下降。可以说，粮油产品中真菌毒素污染问题已成为我国粮食安全和食品安全的重要隐患，严重危害人民健康和经济发展。
2、现行粮食安全快检产品按性质分为定性和定量检测两种，定性产品主要为胶体金试纸条，定量产品主要包括elisa试剂盒、荧光定量试纸条、pcr检测试剂盒、常规化学发光试剂盒等。定性产品只能做定性分析，且产品受不同粮食基质(颜色深浅)干扰较大，定性检测结果对粮食安全监管意义相对较小；而elisa试剂盒、pcr检测试剂盒、常规化学发光试剂盒等定量检测产品相对操作复杂、检测时间长、仪器、耗材使用成本相对较高、且对操作人员要求相对较高；荧光定量试纸条类似胶体金定性检测试纸条操作简单、快速，但因为免疫层析技术原理，故检测结果平行性较差、误差较大；现行主要使用的荧光定量检测试纸条产品配套检测设备主要为单通道，故检测效率低、对于大批量样品检测场景会影响检测效率；光激化学发光技术是一种新型的第四代化学发光技术，由于其是一种均相的反应平台，在检测过程中无需分离系统，具有免洗、背景低，灵敏度高，重复性好且操作简单耗时短的优点，并设计多通道同时检测分析设备提升样品检测效率。
3、但是，目前玉米赤霉烯酮(z)的elisa试剂盒和光激化学发光快速定量检测试剂盒普遍存在抗体检测灵敏度不足、效价低等问题。
技术实现思路
1、有鉴于此，本发明提供了一种玉米赤霉烯酮(z)半抗原、抗原、抗体及制备方法和光激化学发光定量检测试剂盒。本发明提供的玉米赤霉烯酮(z)半抗原和载体蛋白偶联后所得抗原免疫原性高，经宿主动物免疫后，能够产生效价高、灵敏度高的抗体，有利于提高免疫分析法检测玉米赤霉烯酮(z)的准确性。
2、为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
3、一种玉米赤霉烯酮(z)半抗原，具有式i所示结构：
4、
5、式i中：0≤n2≤20。
6、本发明提供了上述方案所述玉米赤霉烯酮(z)半抗原的制备方法，包括以下步骤：
7、将玉米赤霉烯酮(z)、环状羧酸酐和催化剂混合进行傅克酰基化反应，得到具有式i所述结构玉米赤霉烯酮(z)半抗原；所述环状羧酸酐为直链烷基二酸的酸酐，所述直链烷基二酸含有n1个碳原子，n1为2～22。
8、优选的，所述傅克酰基化反应的温度为80～85℃，反应时间为2～3h；所述玉米赤霉烯酮(z)、催化剂和戊二酸酐的摩尔比为1:2～2.5:1～1.2。
9、本发明还提供一种玉米赤霉烯酮(z)抗原，包括上述方案所述的玉米赤霉烯酮(z)半抗原，以及与所述玉米赤霉烯酮(z)半抗原偶联的载体蛋白。
10、优选的，所述载体蛋白和玉米赤霉烯酮(z)半抗原偶联的方式为酰胺键偶联。
11、本发明还提供一种玉米赤霉烯酮(z)抗原的制备方法，包括以下步骤：
12、将上述技术方案所述的玉米赤霉烯酮(z)半抗原、偶联活化剂和极性溶剂混合进行活化，得到活化的玉米赤霉烯酮(z)半抗原溶液；
13、将所述活化的玉米赤霉烯酮(z)半抗原溶液和载体蛋白的缓冲溶液混合进行偶联反应，得到所述玉米赤霉烯酮(z)抗原。
14、本发明还提供一种玉米赤霉烯酮(z)抗体，由上述技术方案所述的玉米赤霉烯酮(z)抗原或上述技术方案所述制备方法制备的玉米赤霉烯酮(z)抗原免疫宿主动物得到。
15、本发明还提供一种检测玉米赤霉烯酮(z)的试纸或试剂盒，含有上述技术方案所述的玉米赤霉烯酮(z)抗体。
16、优选的，所述试剂盒为光激化学发光定量检测试剂盒；所述光激化学发光快速定量检测试剂盒中的试剂包括化学发光检测试剂；所述化学发光检测试剂包括标记有玉米赤霉烯酮(z)抗体的受氧微球、标记有玉米赤霉烯酮(z)抗原的生物素和标记有链霉亲和素的供氧微球。
17、本发明还提供上述技术方案所述玉米赤霉烯酮(z)抗体或上述技术方案所述的试纸或试剂盒在非诊断目的检测玉米赤霉烯酮(z)中的应用。
18、本发明提供了一种玉米赤霉烯酮(z)半抗原，结构式如式i所示。抗体的品质取决于半抗原的结构特征，因此对于半抗原的设计至关重要，本发明在玉米赤霉烯酮(z)分子苯环上两个羟基的中间位置引入带有n2+2个碳原子碳链的活性基团，n2+2个碳原子的间隔臂能使其分子在偶联了载体蛋白后，充分暴露在蛋白之外，增强了抗原的免疫原性，经宿主动物免疫后，能够产生效价高、灵敏度高的抗体，从而提高玉米赤霉烯酮(z)分析检测的准确性。
19、本发明还提供了上述方案所述玉米赤霉烯酮(z)半抗原的制备方法，本发明通过经过傅克酰基化反应，在玉米赤霉烯酮(z)的分子上苯环两个羟基的中间位置引入带有n2+2个碳原子碳链的活性基团，本发明所述制备方法一步即可生成玉米赤霉烯酮(z)半抗原，反应条件温和，操作简单，后处理容易。
20、本发明还提供了玉米赤霉烯酮(z)抗原，由上述方案所述的玉米赤霉烯酮(z)半抗原与载体蛋白偶联得到。本发明提供的玉米赤霉烯酮(z)半抗原与载体蛋白偶联后，所得抗原免疫原性强。实施例结果表明，本发明的玉米赤霉烯酮(z)抗原经小鼠注射免疫后，产生的抗体效价为1：5000，半抑制浓度(ic50)小于10ppb/ml；将本发明所得玉米赤霉烯酮(z)抗原和抗体应用于玉米赤霉烯酮(z)光激化学发光快速定量检测中时，检测限、假阴性率、假阳性率、仪器方法符合率四个维度均合格，且检测步骤简单，具有良好的实用价值和工业价值。
1.一种玉米赤霉烯酮(z)半抗原，其特征在于，具有式i所示结构：
2.权利要求1所述玉米赤霉烯酮(z)半抗原的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述傅克酰基化反应的温度为80～85℃，反应时间为2～3h；
4.一种玉米赤霉烯酮(z)抗原，其特征在于，包括权利要求1所述的玉米赤霉烯酮(z)半抗原，以及与所述玉米赤霉烯酮(z)半抗原偶联的载体蛋白。
5.根据权利要求4所述的玉米赤霉烯酮(z)抗原，其特征在于，所述偶联为酰胺键偶联。
6.权利要求4～5任意一项所述玉米赤霉烯酮(z)抗原的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
7.一种玉米赤霉烯酮(z)抗体，其特征在于，由权利要求4～5任意一项所述的玉米赤霉烯酮(z)抗原或权利要求6所述制备方法制备的玉米赤霉烯酮(z)抗原免疫宿主动物得到。
8.一种检测玉米赤霉烯酮(z)的试剂盒，其特征在于，含有权利要求7所述的玉米赤霉烯酮(z)抗体。
9.根据权利要求8所述试纸或试剂盒，其特征在于，所述试剂盒为光激化学发光定量检测试剂盒；所述光激化学发光快速定量检测试剂盒中的试剂包括化学发光检测试剂；所述化学发光检测试剂包括标记有玉米赤霉烯酮(z)抗体的受氧微球、标记有玉米赤霉烯酮(z)抗原的生物素和标记有链霉亲和素的供氧微球。
10.权利要求7所述玉米赤霉烯酮(z)抗体或权利要求8～9任意一项所述的试纸或试剂盒在非诊断目的检测玉米赤霉烯酮(z)中的应用。
