一株清酒乳杆菌及其应用

    专利查询2026-09-26  12


    本发明涉及微生物,尤其涉及一株清酒乳杆菌及其应用。


    背景技术:

    1、

    2、微生物是引起农产品产后贮藏、运输、销售等环节发生腐烂的主要原因之一,控制腐败微生物生长是减少农产品腐烂损失最根本的途径。随着人们对绿色、安全、健康食品需求的增长,生物防腐成为防腐剂开发的发展趋势。乳酸菌细菌素是由乳酸菌产生的一类具有抑菌活性的多肽,进入人体后被消化道酶水解为氨基酸,具有安全、高效、无残留等优点,成为生物防腐剂或抗菌药物研发的关注焦点。

    3、乳酸链球菌素(nisin)已在全球50多个国家使用,在我国食品添加剂国家标准《《gb2760食品安全国家标准食品添加剂使用标准》中已允许nisin在乳、肉、米面制品、饮料、调味品等多种食品中使用。nisin也是目前唯一广泛使用的乳酸菌细菌素。但是,nisin只能杀死革兰氏阳性菌,对革兰氏阴性菌无效。然而,引起食品腐败的微生物中,革兰氏阴性菌占比很大。因此,急需开发能够杀死革兰氏阴性菌的乳酸菌细菌素。

    4、近年来,随着抗生素抗性的发展,已有的药物逐渐失效,甚至是无效。因此急需开发新的抗菌药物以应对病原菌感染。多肽类抗菌剂具有独特的作用机制使细菌对其很难产生耐药性,且与其他类型的抗生素不易产生交叉耐药,成为新药研发的焦点。

    5、万古霉素(vancomycin)和多粘菌素(colistin)都是多肽类抗生素。vancomycin被视为人类抗革兰氏阳性菌感染的“最后一道防线”。colistin被视为人类抗革兰氏阴性菌感染的“最后一道防线”。然而,vancomycin和colistin都已出现耐药菌。因此,需开发新的多肽类抗菌剂。

    6、2015年,顶刊《nature》报道了一个新的抗菌剂teixobactin,该抗菌剂为一种新的多肽类抗菌剂。2023年,顶刊《cell》报到了一个新的抗菌剂clovibactin,该抗菌剂也是一种新的多肽类抗菌剂。由此可见,多肽类抗菌剂已成为抗感染新药研发的必争之地。乳酸菌细菌素作为一种高安全性抗菌肽,是抗感染新药研发的最佳选择之一。

    7、尽管细菌素最开始是作为抗菌剂被人们关注到,然而近20年,越来越多的研究者发现某些细菌素也具有抗肿瘤活性或抗病毒的活性。但是,同时兼具抗菌、抗肿瘤、抗病毒三重功能的细菌素尚未报到和发现。

    8、因此,怎样提供一株清酒乳杆菌、细菌素及其应用,成为了本领域技术人员有待解决的技术问题。


    技术实现思路

    1、鉴于此,本发明的目的之一在于提供一株乳酸菌及其所产细菌素,该细菌素能够控制多种腐败微生物和致病微生物;目的之二在于提供该细菌素在控制食品腐烂损失和治疗病原菌感染的产品中的应用;目的之三在于提供该细菌素作为活性肽产品开发的应用,兼具抗菌、抗肿瘤、抗病毒功能。

    2、经研究,本发明提供如下技术方案:

    3、1、清酒乳杆菌(lactobacillus sakei)snl047,保藏编号为cgmcc no.27632。

    4、本发明的清酒乳杆菌snl047是从四川省南充市一个市民家庭自制腊肉上分离得到的,于2023年6月14日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称cgmcc,地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号),保藏编号为cgmcc no.27632,分类命名为清酒乳杆菌(lactobacillus sakei)。

    5、2、清酒乳杆菌snl047产生的细菌素kk-31,细菌素前体的氨基酸序列为

    6、3、清酒乳杆菌(lactobacillus sakei)snl047细菌素kk-31对食品腐败控制的应用。

    7、进一步地,优选为果胶杆菌(pectobacterium carotovorum)、枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis),细菌素对果胶杆菌的mic值为16μm,对枯草芽孢杆菌的mic值为8μm。

    8、4、清酒乳杆菌(lactobacillus sakei)snl047及其细菌素kk-31对病原菌感染控制的应用。

    9、进一步地,病原菌优选为大肠杆菌o157:h7(escherichia coli o157:h7)、沙门氏菌(salmonella)、铜绿假单胞菌(pseudomonas aeruginosa)、肺炎克雷伯菌(klebsiellapneumoniae)、鲍曼不动杆菌(acinetobacter baumannii)、阪崎克罗诺杆菌(cronobactersakazakii)中的一种或多种;其中,细菌素对大肠杆菌o157:h7的mic值为8-16μm,对colistin耐药大肠杆菌的mic值为16μm;对鼠伤寒沙门氏菌、肠炎沙门氏菌、多重耐药沙门氏菌的mic值为16μm;对铜绿假单胞菌的mic值为32μm;对肺炎克雷伯菌的mic值为32μm;对鲍曼不动杆菌的mic值为16μm;对阪崎克罗诺杆菌的mic值为64μm。

    10、5、细菌素kk-31对肿瘤细胞生长抑制的应用。

    11、进一步地,肿瘤细胞优选为人肺癌细胞a549 atcc ccl-185。

    12、6、细菌素kk-31对病毒生长抑制的应用。

    13、进一步地,病毒优选为猪伪狂犬病病毒。

    14、7、清酒乳杆菌(lactobacillus sakei)snl047及其细菌素kk-31在制备食品防腐保鲜产品中的应用。

    15、8、清酒乳杆菌(lactobacillus sakei)snl047及其细菌素kk-31在制备抗感染药物产品中的应用。

    16、9、清酒乳杆菌(lactobacillus sakei)snl047及其细菌素kk-31在制备抗肿瘤药物产品中的应用。

    17、10、清酒乳杆菌(lactobacillus sakei)snl047及其细菌素kk-31在制备抗病毒药物产品中的应用。

    18、本发明的有益效果是:

    19、本发明公开了保藏编号为cgmcc no.27632的清酒乳杆菌(lactobacillussakei),其菌体对果胶杆菌展现出较强的抑制能力,该菌所产细菌素kk-31对多种革兰氏阴性病原菌表现出强抑菌活性,能够减轻果胶杆菌引起的蔬菜腐烂损失,发病率和病斑直径显著下降;能够治疗由大肠杆菌o157:h7引起的人体皮肤病原菌感染,杀死病原菌,减少组织病变;同时具有抑制肿瘤细胞的活性、抗病毒活性;此外,细菌素kk-31毒性低,对大蜡螟的毒性与商业化细菌素nisin媲美。本发明不仅为食品腐败变质控制提供了良好的拮抗菌株和食品生物防腐剂,而且为人体/动物病原菌感染、肿瘤、病毒感染控制提供了良好的天然药物资源。



    技术特征:

    1.清酒乳杆菌(lactobacillus sakei)snl047,保藏编号为cgmcc no.27632。

    2.权利要求1所述清酒乳杆菌(lactobacillus sakei)snl047产生的细菌素kk-31。

    3.权利要求2所述细菌素kk-31,其特征在于,细菌素前体氨基酸序列为meriseykvlnnnvlagvqggkkkkggffwhyfgdpivsfgkgfigygklq v。

    4.权利要求1或2任一所述清酒乳杆菌(lactobacillus sakei)snl047及其细菌素kk-31对食品腐败控制的应用。

    5.权利要求2所述清酒乳杆菌(lactobacillus sakei)snl047细菌素kk-31对病原菌感染控制的应用。

    6.权利要求2所述细菌素kk-31对肿瘤细胞生长抑制的应用。

    7.权利要求2所述细菌素kk-31对病毒生长抑制的应用。

    8.权利要求4所述清酒乳杆菌(lactobacillus sakei)snl047及其细菌素kk-31在制备食品防腐剂产品中的应用。

    9.权利要求5-7任一所述清酒乳杆菌(lactobacillus sakei)snl047及其细菌素kk-31在制备药物产品中的应用。

    10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于,所述药物产品为抗感染药物产品、抗肿瘤药物产品、抗病毒药物产品中的一种或多种。


    技术总结
    本发明公开了保藏编号为CGMCC No.27632的清酒乳杆菌(Lactobacillus sakei),其菌体对果胶杆菌展现出较强的抑制能力,该菌所产细菌素KK‑31对多种革兰氏阴性病原菌表现出强抑菌活性,能够减轻果胶杆菌引起的蔬菜腐烂损失,发病率和病斑直径显著下降;能够治疗由大肠杆菌O157:H7引起的人体皮肤病原菌感染,杀死病原菌,减少组织病变;同时具有抑制肿瘤细胞的活性、抗病毒活性;此外,细菌素KK‑31毒性低,对大蜡螟的毒性与商业化细菌素nisin媲美。本发明不仅为食品腐败变质控制提供了良好的拮抗菌株和食品生物防腐剂,而且为人体/动物病原菌感染、肿瘤、病毒感染控制提供了良好的天然药物资源。

    技术研发人员:易兰花,陈声,曾平,刘凡一,曾凯芳,阳晨,唐冀韬,叶超,赵倩,曾敏,代宇,何丽囡
    受保护的技术使用者:西南大学
    技术研发日:
    技术公布日:2024/11/26
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